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结核分枝杆菌金属响应调节蛋白FurB(Zur)的研究进展
1
作者 梁彤 孙照刚 《临床肺科杂志》 2025年第7期1112-1116,共5页
结核病危害严重,其致病机制的研究得到广泛重视。金属响应调节蛋白作为转录因子能够调控许多基因的表达,从而深入影响结核分枝杆菌(Mtb)的多种生物学功能。本文首先简要介绍了Mtb中存在的金属响应调节蛋白种类及其功能,然后以锌离子响... 结核病危害严重,其致病机制的研究得到广泛重视。金属响应调节蛋白作为转录因子能够调控许多基因的表达,从而深入影响结核分枝杆菌(Mtb)的多种生物学功能。本文首先简要介绍了Mtb中存在的金属响应调节蛋白种类及其功能,然后以锌离子响应调节蛋白FurB(Zur)为例,重点介绍了其参与调控的多个方面的功能,包括调控其他金属离子的吸收、ESX-3蛋白分泌系统、氧化应激反应和核糖体蛋白重塑。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 金属响应调节蛋白 锌离子 furb
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结核分枝杆菌furB基因的克隆、表达和纯化 被引量：1
2
作者 姜泓 薛莹 +5 位作者 高雪 师长宏 柏银兰 张海 李元 徐志凯 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第18期1641-1644,共4页
目的 :从H37Rv基因组中扩增furB并高效表达和纯化 .方法 :用PCR技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增furB序列 ,将其与pGEM T Easy载体连接转化E .coliDH5α ,构建重组克隆载体pGEM T Easy/furB ,测序正确后将目的基因片断克隆入pQE 80... 目的 :从H37Rv基因组中扩增furB并高效表达和纯化 .方法 :用PCR技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增furB序列 ,将其与pGEM T Easy载体连接转化E .coliDH5α ,构建重组克隆载体pGEM T Easy/furB ,测序正确后将目的基因片断克隆入pQE 80L原核表达载体并转化E .coliDH5α ,IPTG诱导目的蛋白表达 .经Westernblot鉴定目的基因与 (His) 6融合表达 ,将已表达的蛋白质通过Ni2 + NTA亲和色谱柱进行纯化 .结果 :PCR得到结核分枝杆菌furB ,测序结果与Genbank中报道的完全一致 .SDS PAGE显示 ,在Mr为 15 .0× 10 3 处有相应的蛋白质表达条带 ,Westernblot鉴定为 (His) 6融合表达蛋白 .经Ni2 + NTA亲和色谱柱进行纯化后可得到纯化的蛋白 .结论 :成功克隆了铁调节蛋白基因furB序列 ,并在E .coliDH5α高效表达 ,亲和层析后获得了纯化目的蛋白 . 展开更多
关键词 furb 表达 纯化 结核分枝杆菌
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结核分枝杆菌FurB基因真核表达质粒的构建及表达
3
作者 姜泓 高雪 +3 位作者 张海 李元 徐志凯 薛莹 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期958-960,共3页
目的构建结核分枝杆菌铁调控基因furB真核表达载体。方法以BamHⅠ和HindIII双酶切pQE-80L-furB获得furB基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定后以阳离子聚合物转染COS-7细胞,分别以RT-PCR方法检测mRNA表达和间接免疫荧... 目的构建结核分枝杆菌铁调控基因furB真核表达载体。方法以BamHⅠ和HindIII双酶切pQE-80L-furB获得furB基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定后以阳离子聚合物转染COS-7细胞,分别以RT-PCR方法检测mRNA表达和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果构建了重组质粒pcDNA3.1(-)-furB,RT-PCR结果证明furB可在COS-7细胞中转录,用间接免疫荧光检测,显示COS-7细胞内有FurB蛋白的表达。结论成功构建了结核分枝杆菌furB基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-furB,furB基因可以在COS-7细胞中表达。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 furb 真核表达
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结核分枝杆菌FurB蛋白的表达及其单克隆抗体的制备
4
作者 姜泓 高雪 +3 位作者 张海 李元 徐志凯 薛莹 《生物技术通讯》 CAS 2007年第1期41-43,共3页
目的：制备针对结核分枝杆菌FurB蛋白的单克隆抗体（mAb）并分析其特性。方法：利用E.coli DH5α表达含有6×His的融合蛋白FurB；采用小鼠腹股沟皮下包埋硝酸纤维素膜的方法免疫小鼠，然后进行细胞融合、克隆化制备抗FurB mAb，用EL... 目的：制备针对结核分枝杆菌FurB蛋白的单克隆抗体（mAb）并分析其特性。方法：利用E.coli DH5α表达含有6×His的融合蛋白FurB；采用小鼠腹股沟皮下包埋硝酸纤维素膜的方法免疫小鼠，然后进行细胞融合、克隆化制备抗FurB mAb，用ELISA法初步鉴定其特异性位点和相对亲和力。结果：获得了高表达的融合蛋白，经SDS-PAGE分析，在相对分子质量15.0×10^3处有特异的目的蛋白条带。用该融合蛋白免疫小鼠后，获得了抗FurB mAb。结论：所获得的抗FurB mAb效价高、特异性强，为进一步研究FurB在结核分枝杆菌铁调控和致病过程中的作用提供了有效工具。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 furb蛋白 单克隆抗体
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抗MTB FurB单克隆抗体制备及特性分析
5
作者 姜泓 高雪 +3 位作者 李元 张海 徐志凯 薛莹 《热带病与寄生虫学》 2007年第1期5-7,共3页
目的制备针对结核分支杆菌FurB蛋白的单克隆抗体(mAb)并分析其特性。方法利用纯化的FurB蛋白,采用腹股沟皮下包埋硝酸纤维素膜和腹腔内注射FurB的方法免疫小鼠,然后进行细胞融合、克隆化制备抗FurB mAb,用Western-blot鉴定其特异性,用EL... 目的制备针对结核分支杆菌FurB蛋白的单克隆抗体(mAb)并分析其特性。方法利用纯化的FurB蛋白,采用腹股沟皮下包埋硝酸纤维素膜和腹腔内注射FurB的方法免疫小鼠,然后进行细胞融合、克隆化制备抗FurB mAb,用Western-blot鉴定其特异性,用ELISA法初步分析其特异性位点和相对亲和力。结果获得3株抗FurB mAb,分别为DD12、BH1和DH8,经Western-blot分析都可与FurB蛋白特异性结合。三株mAb中DH8效价最高达到10-10,相对亲和力,BH1>DH8>DD12,3株mAb的抗原表位相近。结论获得的抗FurB mAb效价高、特异性强,可以作为进一步研究FurB功能和作用的有效工具。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 furb 单克隆抗体 特性
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结核分枝杆菌FurB(Zur)研究进展
6
作者 王奇 《辽宁师专学报（自然科学版）》 2008年第4期31-34,共4页
在结核分枝杆菌中存在与铁的代谢相关的基因.铁是多种酶的辅因子,在结核分枝杆菌的生长过程中发挥了重要作用.Fur是结核分枝杆菌中存在的铁依赖调节因子,包括FurA和FurB两种类似蛋白,其中FurB被认为还具有锌依赖性.对近年来FurB的相关... 在结核分枝杆菌中存在与铁的代谢相关的基因.铁是多种酶的辅因子,在结核分枝杆菌的生长过程中发挥了重要作用.Fur是结核分枝杆菌中存在的铁依赖调节因子,包括FurA和FurB两种类似蛋白,其中FurB被认为还具有锌依赖性.对近年来FurB的相关研究进展情况进行综述. 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 furb 锌依赖性
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