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铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
1
作者
刘伟
朱修良
李清海
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期179-184,共6页
旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GF...
旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性。DNA测序结果表明,p Lenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功。包装慢病毒感染RMSC细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功。Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带。细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长。成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响。
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关键词
Fth1
磁共振报告基因
慢病毒载体
大鼠骨髓间充质干细胞
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职称材料
题名
铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
1
作者
刘伟
朱修良
李清海
机构
浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所
浙江大学医学院附属第二医院放射科
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期179-184,共6页
基金
浙江省自然科学基金项目(LY15H180004)
浙江省公益项目(2015C32020)
文摘
旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性。DNA测序结果表明,p Lenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功。包装慢病毒感染RMSC细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功。Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带。细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长。成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响。
关键词
Fth1
磁共振报告基因
慢病毒载体
大鼠骨髓间充质干细胞
Keywords
fthl
MRI reporter
lentivirus vector
rat bone mesenehymal stem cell
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
刘伟
朱修良
李清海
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
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