小窝蛋白通过NCOA4-FTH1途径调控铁稳态减缓MAFLD肝细胞衰老

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作者 孙予权 许翰林 +6 位作者 耿倩倩 王勇 李玉 吴帅 王星雨 郭宁 胡成穆 《中国比较医学杂志》 北大核心 2026年第3期1-18,共18页

目的探究小窝蛋白(CAV1)在代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)疾病进展中的影响及其可能的作用机制。方法基于人类数据库GSE126848,发现CAV1在正常、肥胖及非酒精性脂肪肝(NAFLD)3类人群中的表达差异。通过16周高脂饮食(HFD)建立CAV1敲除型(CAV1... 目的探究小窝蛋白(CAV1)在代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)疾病进展中的影响及其可能的作用机制。方法基于人类数据库GSE126848,发现CAV1在正常、肥胖及非酒精性脂肪肝(NAFLD)3类人群中的表达差异。通过16周高脂饮食(HFD)建立CAV1敲除型(CAV1 KO)的MAFLD小鼠模型,使用白蛋白(ALB)与CAV1荧光共定位确定CAV1在肝脏表达的位置。检测原代肝细胞中CAV1 mRNA和蛋白水平;应用HE染色、油红O染色、尼罗红染色评估脂质沉积与炎症;透射电镜观察线粒体损伤;免疫组化测定细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(P21)、二氢乙锭(DHE)及铁染色评估衰老和铁代谢变化。此外,构建肝细胞衰老模型并分为空白对照组(Control)、棕榈酸组(PA)、棕榈酸+CAV1沉默对照组(PA+Con-siRNA)、棕榈酸+CAV1沉默组(PA+CAV1-siRNA)、棕榈酸+CAV1过表达对照组(PA+Con-GV107)、棕榈酸+CAV1过表达组(PA+CAV1-GV146)、棕榈酸+CAV1沉默+去铁胺组(PA+CAV1-siRNA+DFO),分析脂质沉积、衰老指标及Fe^(2+)水平。采用Western blot、RT-qPCR及线粒体膜电位检测(JC-1)等技术,进一步验证CAV1对肝细胞衰老及线粒体功能的影响。结果体内实验显示,与野生型+高脂饮食相比,敲除型+高脂饮食加剧了脂质沉积、炎症及肝脏衰老,具体表现为脂质染色增强,组蛋白H2A变体X(γ-H2AX)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子2A(P16)、P21衰老标志物水平升高(均P<0.01),氧化应激标志物谷胱甘肽(GSH)下降(P<0.05)、超氧化物歧化酶(SOD)下降(P<0.01),活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)水平升高(P<0.001),线粒体皱缩及线粒体膜密度增加。铁代谢检测发现CAV1 KO导致Fe^(3+)减少(P<0.01)、Fe^(2+)堆积增加(P<0.001),并与核受体共激活因子4-铁蛋白重链1(NCOA4-FTH1)通路相关。与敲除型+高脂饮食+CSD-对照组(KO+HFD+CSD-CON)相比,补充CSD(CAV1结构域多肽)能显著改善Fe^(3+)减少及Fe^(2+)堆积的现象(均P<0.01)。在体外实验中,与棕榈酸+CAV1沉默对照组相比,棕榈酸+CAV1沉默组加速脂质积累、线粒体损伤和细胞衰老,并伴随线粒体活性氧(mtROS)水平的升高及Fe^(2+)堆积,并且NCOA4表达上调(P<0.001),而FTH1表达下调(P<0.05)。而CAV1过表达呈现相反效应(P<0.05,P<0.01)。免疫荧光结果显示CAV1沉默加速了NCOA4与FTH1的结合,而CAV1过表达呈现相反效应。与棕榈酸+CAV1沉默组相比,加入去铁胺(DFO)处理可缓解CAV1沉默引发的mtROS升高及衰老加重(均P<0.001),因此,CAV1可能通过调控NCOA4-FTH1通路,参与肝脏衰老的调控过程。结论CAV1可以减缓MAFLD肝细胞衰老,可能是通过NCOA4-FTH1途径调控铁稳态来实现。 展开更多

关键词 代谢相关脂肪性肝病 肝细胞衰老 铁稳态 NCOA4-fth1通路 小窝蛋白 氧化应激 线粒体损伤

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补阳还五汤通过NCOA4/FTH1通路抑制铁死亡改善缺血性脑血管病大鼠的脑组织损伤

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作者 邢毛毛 宋翠平 +2 位作者 孟艺哲 张宏媛 王朋 《河北医学》 2026年第3期408-415,共8页

目的:基于NCOA4/FTH1信号通路介导的铁死亡,探究补阳还五汤改善缺血性脑血管病大鼠脑组织损伤的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组(n=14)、模型组(n=17)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1组(n=15)、补阳还五汤组(n=15)、补阳还五汤+... 目的:基于NCOA4/FTH1信号通路介导的铁死亡,探究补阳还五汤改善缺血性脑血管病大鼠脑组织损伤的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组(n=14)、模型组(n=17)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1组(n=15)、补阳还五汤组(n=15)、补阳还五汤+铁死亡诱导剂Erastin组(n=15)。通过线栓法构建缺血性脑血管病大鼠模型。Longa法评估各组大鼠神经功能,TTC染色检测脑梗死体积,HE染色检测脑组织的病理学损伤,试剂盒检测各组大鼠脑缺血半暗带组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、Fe^(2+)水平,免疫组织化学染色实验检测脑缺血半暗带组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达,RT-qPCR及Western blot检测脑缺血半暗带组织中核受体辅激活因子4(NCOA4)、铁蛋白重链1(FTH1)mRNA及蛋白的表达。结果:相对于假手术组,模型组大鼠的神经功能评分升高(P<0.05),脑梗死体积增加(P<0.05),缺血半暗带区脑组织中的细胞受到损伤,脑缺血半暗带组织中MDA、Fe^(2+)、NCOA4升高(P<0.05),脑缺血半暗带组织中GSH、GPX4、FTH1降低(P<0.05)。相对于模型组,铁死亡抑制剂组、补阳还五汤组大鼠的神经功能评分降低(P<0.05),脑梗死体积减低(P<0.05),缺血半暗带区脑组织的损伤减轻,脑缺血半暗带组织中MDA、Fe^(2+)、NCOA4降低(P<0.05),脑缺血半暗带组织中GSH、GPX4、FTH1升高(P<0.05)。Erastin能一定程度上消除补阳还五汤对缺血性脑血管病大鼠的作用(P<0.05)。结论:补阳还五汤能够通过减轻脑梗死及缺血半暗带区脑组织的病理学改变来改善缺血性脑血管病大鼠的脑组织损伤,其机制可能是通过抑制NCOA4的表达、促进FTH1的表达来调控NCOA4/FTH1信号通路,进而抑制铁死亡来实现。 展开更多

关键词 缺血性脑血管病 补阳还五汤 NCOA4/fth1信号通路 铁死亡

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天麻素通过激活GPX4/SLC7A11/FTH1信号抑制铁死亡减轻新生小鼠缺氧缺血性脑损伤

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作者 郭涛 陈柏霖 +6 位作者 石金沙 匡显锋 余腾跃 魏嵩 刘雄 肖蓉 李娟娟 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2071-2081,共11页

目的探讨天麻素(GAS)通过调控GPX4/SLC7A11/FTH1信号通路抑制神经元铁死亡的机制,并评估其在新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的治疗效果。方法选取24只出生后9~11 d的C57BL/6J新生小鼠,采用右侧颈总动脉结扎缺血,并置于92%N2和8%O2的... 目的探讨天麻素(GAS)通过调控GPX4/SLC7A11/FTH1信号通路抑制神经元铁死亡的机制,并评估其在新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的治疗效果。方法选取24只出生后9~11 d的C57BL/6J新生小鼠,采用右侧颈总动脉结扎缺血,并置于92%N2和8%O2的环境中缺氧1 h,以建立HIBD模型。将小鼠随机分为假手术组(Sham)、缺氧缺血模型组(HIBD)、天麻素低剂量组(HIBD+GAS-L,100 mg/kg)和天麻素高剂量组(HIBD+GAS-H,200 mg/kg),6只/组。持续腹腔给药3 d后,选取小鼠脑皮层缺血半暗带组织,通过HE染色、Nissl染色、Zea-Longa法评分检测其病理损伤,评估亚铁离子、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、二氢乙啶(DHE)的水平和铁死亡相关蛋白GPX4、SLC7A11和FTH1的表达,并电镜检测铁死亡的形态学特征变化。体外实验选用HT22神经细胞,添加天麻素及GPX4的抑制剂RSL3干预1 h,并进行缺氧缺糖2 h,分为对照组(Control)、氧糖剥夺组(OGD)、天麻素治疗组(OGD+GAS,0.5 mmol/L)、RSL3干预组(OGD+RSL3,10μmol/L)、天麻素和RSL3联合组(OGD+GAS+RSL3)。通过Western blotting和免疫荧光双标染色检测铁死亡相关蛋白的表达变化,同时评价FerroOrange、DCFH-DA、BODIPY-C11、MDA、GSH、JC-1和细胞活性指标。结果天麻素低剂量和高剂量组均表现出改善HIBD病理损伤及神经行为学评分的效果(P<0.05),铁离子、脂质过氧化物及ROS的水平降低,抗氧化能力得到恢复(P<0.05),电镜观察到线粒体的脊得到恢复。Western blotting和免疫荧光显示,天麻素的这种神经保护作用是通过激活GPX4、SLC7A11和FTH1信号的表达水平而实现的。此外,细胞模型得到了类似的结果,并且当GPX4信号被RSL3靶向抑制后,天麻素对Fe2+、ROS、BODIPY-C11和MDA的抑制作用被RSL3抵消(P<0.05),同时,天麻素对GSH、细胞活力和线粒体膜电位水平的增强效果被RSL3减弱(P<0.05)。结论天麻素通过上调GPX4/SLC7A11/FTH1信号通路,抑制神经元的铁死亡,从而在新生小鼠HIBD中发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 天麻素 缺氧缺血性脑损伤 氧糖剥夺 铁死亡 GPX4/SLC7A11/fth1 神经元

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基于NCOA4/FTH1通路介导的铁自噬探讨电针对血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响 被引量：2

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作者 孙玮 陈英华 +9 位作者 吴彤 赵红旭 王浩宇 秦瑞琦 苏晓庆 李俊峰 宋元毓 苗悦 李欣然 韩玉生 《中国针灸》 北大核心 2025年第9期1271-1280,共10页

目的:观察电针“四神聪”“风池”对血管性痴呆(VD)大鼠核受体共激活因子4(NCOA4)/铁蛋白重链1(FTH1)信号通路介导的海马神经元铁自噬的影响,探讨电针干预VD的可能机制。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组(12只)、假手术组(12只... 目的:观察电针“四神聪”“风池”对血管性痴呆(VD)大鼠核受体共激活因子4(NCOA4)/铁蛋白重链1(FTH1)信号通路介导的海马神经元铁自噬的影响,探讨电针干预VD的可能机制。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组(12只)、假手术组(12只)和造模组(36只),造模组大鼠采用改良的四血管阻断(4-VO)法制备VD模型,将造模成功的24只大鼠随机分为模型组和电针组,各12只。电针组于左右“四神聪”和双侧“风池”行电针干预,予连续波,频率2 Hz,电流1 mA,每次30 min,每天1次,持续21 d。于造模前、造模后和干预后行Morris水迷宫实验,于干预后行新物体认知实验,观察各组大鼠学习记忆能力。干预后,采用尼氏染色法观察大鼠海马组织神经元形态;普鲁士蓝染色法观察大鼠海马组织铁沉积情况;二氢乙啶(DHE)荧光法检测大鼠海马组织活性氧(ROS)水平;比色法、TBA法和WST-1法分别检测大鼠海马组织铁、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;免疫组化法检测大鼠海马组织NCOA4、FTH1和谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)阳性表达;Western blot法检测大鼠海马组织NCOA4、FTH1、GPX4蛋白表达和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)Ⅱ/Ⅰ值。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长、穿越平台次数减少(P<0.01),认知指数(RI)降低(P<0.01);海马神经元层次模糊,细胞结构排列不齐,尼氏小体数量减少(P<0.01);海马组织铁离子沉积面积百分比增加(P<0.01);海马组织ROS荧光强度、铁含量、MDA含量、NCOA4蛋白表达和LC3BⅡ/Ⅰ值升高(P<0.01),SOD含量和FTH1、GPX4蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增加(P<0.01),RI升高(P<0.01);海马神经元形态较规则,细胞结构排列较为整齐,尼氏小体数量增加(P<0.05);海马组织铁离子沉积面积百分比减少(P<0.01);海马组织ROS荧光强度、铁含量、MDA含量、NCOA4蛋白表达和LC3BⅡ/Ⅰ值降低(P<0.01,P<0.05),SOD含量和FTH1、GPX4蛋白表达升高(P<0.01)。结论:电针“四神聪”“风池”可改善VD大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与调控海马NCOA4/FTH1信号通路,抑制铁自噬,减轻氧化应激损伤有关。 展开更多

关键词 血管性痴呆 电针 铁自噬 核受体共激活因子4/铁蛋白重链1信号通路 氧化应激

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FTL和FTH1在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义

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作者 张茸 杨如琳 +2 位作者 裴越 姜婉晴 付莉 《中国实验诊断学》 2025年第4期378-381,共4页

目的探讨铁蛋白重链(FTH1)、铁蛋白轻链(FTL)在上皮性卵巢癌组织中的表达情况及意义。方法免疫组织化学方法检测31例上皮性卵巢癌、11例良性卵巢肿瘤、25例正常卵巢组织中FTH1和FTL蛋白的表达情况。结果上皮性卵巢癌组中FTL表达水平高... 目的探讨铁蛋白重链(FTH1)、铁蛋白轻链(FTL)在上皮性卵巢癌组织中的表达情况及意义。方法免疫组织化学方法检测31例上皮性卵巢癌、11例良性卵巢肿瘤、25例正常卵巢组织中FTH1和FTL蛋白的表达情况。结果上皮性卵巢癌组中FTL表达水平高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.05);上皮性卵巢癌组中FTH1的表达水平高于正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期上皮性卵巢癌中FTL和FTH1表达水平均高于Ⅰ~Ⅱ期上皮性卵巢癌,但差异无统计学意义(P>0.05);发生淋巴结转移的上皮性卵巢癌中FTL和FTH1的表达与无淋巴结转移的上皮性卵巢癌比较,差异均无统计学意义(P>0.05);上皮性卵巢癌组中FTL/FTH1比值高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上皮性卵巢癌中FTL、FTH1均呈高表达,提示FTL和FTH1可能与卵巢癌的发生有关。 展开更多

关键词 卵巢癌 铁死亡 铁蛋白重链 铁蛋白轻链

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FTH1在布鲁氏菌侵染宿主细胞中的作用

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作者 孙志华 杜军伟 +5 位作者 刘娟 许长萌 韩玉霞 关团 陈创夫 张辉 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第2期158-163,共6页

为了探究布鲁氏菌侵染宿主巨噬细胞过程中铁蛋白(FTH1)生物学功能,本研究根据FTH1蛋白核苷酸序列,分别设计4条特异性小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)分子,亚克隆到RNAi-Ready pSIREN-RetroQ ZsGreen载体,并转染RAW264.7巨噬细胞... 为了探究布鲁氏菌侵染宿主巨噬细胞过程中铁蛋白(FTH1)生物学功能,本研究根据FTH1蛋白核苷酸序列,分别设计4条特异性小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)分子,亚克隆到RNAi-Ready pSIREN-RetroQ ZsGreen载体,并转染RAW264.7巨噬细胞,实时定量PCR筛选干扰效果最优的质粒;布鲁氏菌侵染干扰前、后的RAW264.7巨噬细胞,实时定量PCR检测布鲁氏菌基因16S rRNA和细胞凋亡相关基因的mRNA表达量。结果显示:获得了4条特异性siRNA分子,经测序正确,pSIREN-C siRNA质粒对FTH1干扰效果最高可达98%。干扰后布鲁氏菌侵染抑制率为84%,凋亡相关基因的mRNA表达量5个降低,3个上升。本研究表明:FTH1基因沉默后布鲁氏菌胞内的生存能力下降;布鲁氏菌侵染可以抑制细胞凋亡发生,FTH1基因沉默后细胞凋亡升高。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 fth1 巨噬细胞 凋亡

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FTH1基因多态性与湖羊和小尾寒羊产羔数的关联分析 被引量：4

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作者 王丽 李万宏 +2 位作者 李发弟 李熙成 乐祥鹏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1529-1534,共6页

为了解FTH1基因在2个绵羊品种中的遗传变异及其与产羔数的关系,本研究以具有详细产羔记录的湖羊(n=424)和小尾寒羊(n=432)为研究对象,采用DNA-pooling结合PCR-RFLP的方法进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)扫描,... 为了解FTH1基因在2个绵羊品种中的遗传变异及其与产羔数的关系,本研究以具有详细产羔记录的湖羊(n=424)和小尾寒羊(n=432)为研究对象,采用DNA-pooling结合PCR-RFLP的方法进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)扫描,同时分析SNP位点与绵羊产羔数的相关性。结果表明,在FTH1基因第一内含子上发现一个g.1635G>A的SNP位点,并在小尾寒羊和湖羊群体中均有AA、AG和GG三种基因型,其基因型频率分别为0.08、0.45、0.47和0.10、0.43、0.47,A和G等位基因频率分别为0.305、0.695和0.315、0.685,表明GG为优势基因型,G为优势等位基因;湖羊群体的基因He、Ho、Ne和PIC分别为0.431、0.569、1.759和0.338;在小尾寒羊中则分别为0.424、0.576、1.737和0.334。χ^2适合性检验表明,在此位点湖羊和小尾寒羊群体均不处于Hardy-Weinberg平衡状态(p<0.05)。与产羔数的关联分析发现,在湖羊群体中,GG基因型个体的产羔数显著高于AA基因型(p=0.029),而在小尾寒羊群体中各基因型个体的产羔数差异不显著。综上所述,FTH1基因可以作为提高湖羊产羔数的分子辅助标记。 展开更多

关键词 fth1基因 小尾寒羊 湖羊 产羔数

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骨髓间充质干细胞成神经分化中的FTH1基因表达 被引量：3

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作者 钟毅 蔡金华 +2 位作者 贺小娅 秦勇 廖一凡 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期2121-2127,共7页

目的明确骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化对细胞内铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1,FTH1)基因表达的影响,探讨FTH1报告基因成像检测定向分化细胞的可行性。方法以慢病毒为载体将FTH1基因转入MSCs中,利用全... 目的明确骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化对细胞内铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1,FTH1)基因表达的影响,探讨FTH1报告基因成像检测定向分化细胞的可行性。方法以慢病毒为载体将FTH1基因转入MSCs中,利用全反式维甲酸和神经细胞诱导液对其诱导分化,Western blot检测分化前后细胞内FTH1的表达,MRI观察细胞T2WI信号变化,普鲁士蓝染色和透射电镜检测细胞内FTH1表达所引起的聚铁效应。结果携带FTH1基因的MSCs(MSCs-FTH1)成功分化为神经元样细胞(Neurons-FTH1)。Western blot检测显示MSCs-FTH1及Neurons-FTH1细胞中FTH1均明显表达;在500μmol/L枸橼酸铁铵的培养条件下,两种细胞MRI检查均发现T2WI信号明显降低;普鲁士蓝染色和透射电镜证实细胞内较多铁颗粒聚集。结论 MSCs成神经分化对细胞内FTH1基因的表达无明显影响,基于FTH1的MRI报告基因成像可用于MSCs神经分化后的检测。 展开更多

关键词 间充质干细胞 神经诱导分化 fth1 磁共振成像

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磁共振报告基因FTH1慢病毒载体构建及其在人神经母细胞瘤细胞中的表达 被引量：3

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作者 贺小娅 蔡金华 +1 位作者 秦勇 高雅丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期2338-2342,共5页

目的构建携带人铁蛋白重链多肽1(fevritin heavy chaik 1,FTH1)基因的慢病毒载体,并检测其在人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)中的表达。方法以慢病毒为载体,将FTH1基因转入SK-N-SH细胞中。实验组(SK-N-SHFTH1)、空载组(SK-N-SH-GFP)和空白... 目的构建携带人铁蛋白重链多肽1(fevritin heavy chaik 1,FTH1)基因的慢病毒载体,并检测其在人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)中的表达。方法以慢病毒为载体,将FTH1基因转入SK-N-SH细胞中。实验组(SK-N-SHFTH1)、空载组(SK-N-SH-GFP)和空白组(SK-N-SH),均用含500μmol/L枸橼酸铁铵(FAC)的培养基培养并连续4次传代。CCK-8试剂检测细胞增殖活性;普鲁士蓝染色及透射电镜检测细胞聚铁效能;MR成像(MRI)观察T2WI信号变化;Western blot检测FTH1表达情况。结果 CCK-8试剂检测发现3组细胞未添加FAC培养时,其增殖能力无显著差异[实验组(0.99±0.03),空载组(0.99±0.02),空白组(0.98±0.05);P>0.05];然而,添加500μmol/L FAC后,其增殖能力[实验组(0.73±0.08),空载组(0.76±0.02),空白组(0.73±0.39)]均较前明显减低(P<0.05)。普鲁士蓝染色及透射电镜显示实验组细胞内聚集较多的铁颗粒;MR扫描显示在500μmol/L FAC培养条件下,实验组T2WI信号显著降低;Western blot结果显示实验组FTH1表达,且经4次传代后仍持续稳定表达。结论成功构建携带FTH1基因的慢病毒载体,并证明FTH1在SK-N-SH细胞中长期稳定表达及聚铁能力。 展开更多

关键词 fth1 慢病毒载体 磁共振报告基因 人神经母细胞瘤细胞

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NSE启动子在骨髓间充质干细胞成神经分化中启动FTH1基因特异性表达及体外磁共振成像 被引量：2

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作者 廖一凡 蔡金华 +3 位作者 钟毅 贺小娅 秦勇 孙君 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期1171-1178,共8页

目的探讨神经元特异性烯醇化酶(neuron-specifc enolase,NSE)启动子控制的铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1,FTH1)报告基因在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的特异性表达及MRI显像的可行性... 目的探讨神经元特异性烯醇化酶(neuron-specifc enolase,NSE)启动子控制的铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1,FTH1)报告基因在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的特异性表达及MRI显像的可行性。方法以慢病毒为载体将含NSE启动子的FTH1基因转入MSCs中,对其成神经诱导分化,Western blot检测分化前后细胞内FTH1的表达,在0.5 mmol/L枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC)的培养条件下,细胞内FTH1基因表达所引起的聚铁效应通过普鲁士蓝染色及透射电镜检测;磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)观察细胞T_2WI信号变化。结果含NSE启动子的FTH1基因的MSCs(MSCs-NSE-FTH1)成功分化为神经元样细胞(Neurons-NSE-FTH1)。Western blot检测结果显示FTH1在Neurons-NSE-FTH1细胞内明显表达,而在MSCs-NSE-FTH1细胞内表达极低。普鲁士蓝染色和透射电镜观察证实Neurons-NSE-FTH1细胞内较多铁颗粒聚集。MRI检查发现Neurons-NSE-FTH1细胞T_2WI信号明显降低。结论 NSE启动子在MSCs成神经分化中能特异性启动FTH1基因表达,并引起MRI信号改变。 展开更多

关键词 NSE启动子 fth1报告基因 磁共振成像 干细胞 神经分化

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FTH1真核表达载体的构建与鉴定

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作者 董晓 何淑雅 +3 位作者 李斌元 王三虎 自映萍 马云 《中南医学科学杂志》 CAS 2011年第5期487-490,共4页

目的构建携带人铁蛋白重链多肽1(FTH1)基因的真核表达载体pCMV-Myc-FTH1,为研究FXR1P与FTH1体内相互作用奠定基础。方法以人胎脑cDNA文库为模板进行聚合酶链反应(PCR)特异扩增FTH1基因片段,将扩增片段经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆到同样... 目的构建携带人铁蛋白重链多肽1(FTH1)基因的真核表达载体pCMV-Myc-FTH1,为研究FXR1P与FTH1体内相互作用奠定基础。方法以人胎脑cDNA文库为模板进行聚合酶链反应(PCR)特异扩增FTH1基因片段,将扩增片段经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆到同样经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pCMV-Myc载体,酶切鉴定阳性克隆并进一步测序鉴定。结果成功构建了pCMV-Myc-FTH1重组真核表达载体。结论 pCMV-Myc-FT1重组真核表达载体的构建为进一步在细胞内鉴定FXR1P与FTH1相互作用奠定了基础,对研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理提供了依据。 展开更多

关键词 脆性X综合征 fth1 真核表达载体

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Fth1基因标记对骨髓间充质干细胞生物学特性及体外MRI表现的影响 被引量：1

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作者 薛杨 黄晓蕾 +3 位作者 蔡伶伶 王博成 詹青 赵江民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期841-845,共5页

目的观察铁蛋白报告基因Fth1标记对骨髓间充质干细胞(MSCs)生物学特性及体外MRI表现的影响。方法原代分离培养大鼠MSCs,取第4代MSCs,用构建的携带铁蛋白重链基因Fth1的慢病毒载体进行感染,并在培养液内加入1mol/L柠檬酸铁进行培养。采... 目的观察铁蛋白报告基因Fth1标记对骨髓间充质干细胞(MSCs)生物学特性及体外MRI表现的影响。方法原代分离培养大鼠MSCs,取第4代MSCs,用构建的携带铁蛋白重链基因Fth1的慢病毒载体进行感染,并在培养液内加入1mol/L柠檬酸铁进行培养。采用普鲁士蓝染色检测MSCs的摄铁能力,锥虫蓝染色活细胞计数检测MSCs的细胞存活率,CCK-8方法测定MSCs的增殖活性。应用MRI的FSE T2WI和SWAN序列观察Fth1标记的MSCs和未标记MSCs MRI信号的差异。结果 Fth1基因可成功转染MSCs,转染MSCs的普鲁士蓝染色标记效率为87%。未加含铁培养液的Fth1标记MSCs细胞存活率为(92.17±1.91)%,细胞增殖活性D值为1.094±0.068,与未标记MSCs比较差异均无统计学意义[细胞存活率为(94.23±2.42)%,细胞增殖活性D值为1.027±0.122;P>0.05);加入含铁培养液培养3d后的Fth1标记MSCs细胞存活率为(77.47±4.10)%,细胞增殖活性D值为0.493±0.024,与未加含铁培养液的Fth1标记MSCs及未标记MSCs比较差异均有统计学意义(P<0.05)。MRI扫描FSE T2WI和SWAN序列显示,加入含铁培养液培养5d后Fth1标记MSCs信号强度为656.6±18.2,与未加含铁培养液的Fth1标记MSCs及未标记MSCs比较差异均有统计学意义(分别为807.3±17.1和847.1±10.5,P<0.05),而未加含铁培养液的Fth1标记MSCs与未标记MSCs比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Fth1报告基因可成功转染MSCs,转染后的MSCs可高效表达并摄取铁;细胞活力及增殖活性在不含铁的培养液中不受影响,但在铁浓度1mol/L含铁培养液中受到一定影响;经含铁培养液培养5d后,MRI可体外检测Fth1标记MSCs,其FSE T2WI和SWAN序列呈低信号改变。 展开更多

关键词 铁蛋白报告基因 骨髓间充质干细胞 生物学特性 磁共振成像

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铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

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作者 刘伟 朱修良 李清海 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期179-184,共6页

旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GF... 旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性。DNA测序结果表明,p Lenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功。包装慢病毒感染RMSC细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功。Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带。细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长。成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响。 展开更多

关键词 fth1 磁共振报告基因 慢病毒载体 大鼠骨髓间充质干细胞

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基于lncRNA H19/miR-19b3p/FTH1轴探讨归芪益元膏联合顺铂对Lewis肺癌小鼠的干预效应及机制 被引量：4

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作者 薛春霞 梁建庆 +6 位作者 张媛媛 靳银霞 李尚 章溥 杨楠 李金田 李娟 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第8期90-96,共7页

目的基于lncRNAH19/miR-19b3p/FTH1轴探讨归芪益元膏联合顺铂对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及机制。方法60只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机取10只作为空白组,其余50只皮下接种Lewis肺癌细胞复制肺癌小鼠模型。将成模小鼠随机分为模型组、顺铂... 目的基于lncRNAH19/miR-19b3p/FTH1轴探讨归芪益元膏联合顺铂对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及机制。方法60只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机取10只作为空白组,其余50只皮下接种Lewis肺癌细胞复制肺癌小鼠模型。将成模小鼠随机分为模型组、顺铂组和中药低、中、高剂量联合顺铂组,每组10只,顺铂组予顺铂5 mg/kg腹腔注射,中药低、中、高剂量联合顺铂组予归芪益元膏1.75、3.5、7.0 g/kg灌胃联合顺铂5mg/kg腹腔注射,空白组和模型组予等体积生理盐水灌胃,连续14d。观察小鼠一般状况,测量小鼠瘤质量并计算抑瘤率、脾脏指数和胸腺指数,HE染色观察肿瘤组织病理形态,检测肿瘤组织丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H2O_(2))、亚铁离子(Fe^(2+))含量,免疫组化和Western blot检测肿瘤组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白表达,实时荧光定量PCR检测肿瘤组织lncRNAH19、miR-19b3p mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、脾脏指数和胸腺指数均降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组小鼠一般状况不同程度改善,瘤质量减少(P<0.05),脾脏指数及胸腺指数升高(P<0.05),肿瘤细胞溶解、破裂、数量减少,肿瘤组织MDA、H2O_(2)、Fe^(2+)含量升高(P<0.05),GSH含量降低(P<0.05),Nrf2、GPX4、FTH1、SLC7A11蛋白表达降低(P<0.05),lncRNAH19mRNA表达降低(P<0.05),miR-19b3pmRNA表达升高(P<0.05);与顺铂组比较,中药高剂量联合顺铂组小鼠瘤质量减少(P<0.05),体质量、脾脏指数和胸腺指数升高(P<0.05),肿瘤组织MDA、H2O_(2)、Fe^(2+)含量升高(P<0.05),GSH含量降低(P<0.05),Nrf2、FTH1、SLC7A11、GPX4蛋白表达降低(P<0.05),lncRNAH19 mRNA表达降低(P<0.05),miR-19b3p mRNA表达升高(P<0.05)。结论归芪益元膏联合顺铂对Lewis肺癌小鼠具有明显抑瘤作用,其作用机制可能与调节lncRNAH19/miR-19b3p/FTH1轴相关铁死亡分子表达有关。 展开更多

关键词 肺癌 归芪益元膏 顺铂 小鼠 lncRNAH19/miR-19b3p/fth1轴

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FTH1激活RAF/MEK/ERK通路促进肝细胞癌生长

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作者 汪圆松 李卫玲 +7 位作者 乔嘉璐 刘金咪 王海萍 侯晓莹 彭倩 孙宾莲 胡康洪 刘钰晨 《生物技术》 CAS 2024年第4期467-474,共8页

[目的]应用生物信息学和分子生物学手段研究铁蛋白重链1(Ferritin heavy chain 1,FTH1)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)中的功能和分子机制。[方法]通过TCGA(The Cancer Genome Atlas)、TIMER(Tumor Immune Estimation Resou... [目的]应用生物信息学和分子生物学手段研究铁蛋白重链1(Ferritin heavy chain 1,FTH1)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)中的功能和分子机制。[方法]通过TCGA(The Cancer Genome Atlas)、TIMER(Tumor Immune Estimation Resource)、TNMplot和GEPIA2(Gene Expression Omnibus)等公开数据库的数据进行分析FTH1在肝癌中的表达量和预后生存期,同时应用分子生物学实验在肝癌细胞系中分析FTH1的作用机制。[结果]在肝癌组织中FTH1的表达量高于正常(P<0.01),同时FTH1高表达的HCC患者预后更差(P<0.01)。蛋白免疫印迹分析和荧光定量PCR细胞实验表明,与正常肝细胞L02相比,肝癌细胞系HepG2和Huh7中FTH1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.01)。MTT和细胞克隆形成实验结果表明FTH1敲低的HepG2和Huh7细胞增殖能力降低40%~50%。进一步蛋白免疫印迹结果显示FTH1敲低的细胞中RAF、MEK和ERK的磷酸化水平明显降低(P<0.05)。[结论] FTH1可通过激活RAF/MEK/ERK信号通路促进HCC细胞的生长。 展开更多

关键词 肝细胞癌 fth1 增殖 预后生存 RAF/MEK/ERK信号通路

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FTH1、SLC2A4基因多态性与妊娠糖尿病相关性研究 被引量：2

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作者 程琰 刘俊秀 +1 位作者 张庆英 程海东 《中国优生与遗传杂志》 2021年第8期1056-1059,共4页

目的探讨孕妇铁蛋白(FTH1)和溶质转运家族2成员4(SLC2A4)基因单核苷酸多态性(SNP)与妊娠糖尿病(GDM)遗传易感性的关系。方法收集在我院定期产检的GDM组孕妇(206例)和对照组孕妇(197例)的临床资料及实验室指标。应用高通量测序技术检测... 目的探讨孕妇铁蛋白(FTH1)和溶质转运家族2成员4(SLC2A4)基因单核苷酸多态性(SNP)与妊娠糖尿病(GDM)遗传易感性的关系。方法收集在我院定期产检的GDM组孕妇(206例)和对照组孕妇(197例)的临床资料及实验室指标。应用高通量测序技术检测两组孕妇FTH1基因的11个SNP及SLC2A4基因的10个SNP的分布情况。结果GDM组孕妇的孕前BMI,妊娠10~15周时空腹血糖、糖化血红蛋白、铁蛋白、血红蛋白水平均高于正常对照组孕妇(P<0.05)。FTH1基因的11个SNP位点和SLC2A4基因的9个SNP位点,在GDM组与正常对照组间基因型一致均未发现突变位点。SLC2A4基因rs5435位点存在CC、CT、TT三种基因型分布,两组孕妇该位点基因型、等位基因频率的分布,差异无统计学意义(P>0.05)。两组孕妇孕10~15周铁蛋白水平在rs5435位点的各基因型之间差异无统计学意义(P>0.05)。妊娠达24~28周时,TT型孕妇空腹血糖和糖化血红蛋白水平均高于CC型孕妇,差异有统计学意义(P<0.05)。在GDM组中CC型孕妇妊娠10~15周血红蛋白浓度高于CT型孕妇(P<0.05)。结论在本研究人群中未发现FTH1基因多态性与铁蛋白水平、GDM发病的相关性。但rs5435的CC基因型与GDM组孕妇高血红蛋白浓度有关,TT基因型与妊娠24~28周空腹血糖和糖化血红蛋白水平增高有关。 展开更多

关键词 妊娠糖尿病 单核苷酸多态性 铁蛋白基因 溶质转运家族2成员4基因

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基于TCGA数据库分析FTH1在头颈部鳞状细胞癌中的表达和临床意义 被引量：2

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作者 刘长健 王健 刘绍严 《实用肿瘤杂志》 CAS 2023年第1期33-37,共5页

目的探究重链多肽亚基由铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain polypeptide 1,FTH1)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的表达和临床意义。方法基于癌症基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据... 目的探究重链多肽亚基由铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain polypeptide 1,FTH1)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的表达和临床意义。方法基于癌症基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析FTH1在HNSCC组织和癌旁组织中的差异表达情况,并分析其表达与肿瘤分期的关系和对总生存的影响。采用Cox比例风险模型评估影响HNSCC患者预后的因素。使用GSEA软件预测FTH1可能参与调控的信号通路。结果FTH1在HNSCC中高表达,且与肿瘤分期有关(均P<0.05)。FTH1高表达的HNSCC患者总生存率降低(P<0.05)。单因素Cox分析结果显示,高表达的FTH1和肿瘤分期均是影响HNSCC患者的预后因素(均P<0.05)。多因素Cox分析结果显示,肿瘤分期和性别均是影响HNSCC患者的预后因素(均P<0.05)。FTH1的通路富集分析显示,FTH1的高表达样本显著富集到溶酶体、谷胱甘肽代谢、磷酸戊糖途径及癌症通路等基因集。结论FTH1可作为HNSCC的临床预后标志物。 展开更多

关键词 头颈部鳞状细胞癌 fth1 TCGA数据库 预后

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铁自噬及相关基因NCOA4、FTH1在口腔鳞癌中的研究进展 被引量：3

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作者 刘恒 段晓峰 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2023年第1期87-91,共5页

铁自噬(ferritinophagy)是一种与铁死亡关系密切的自噬类型,由核受体共激活因子4(nuclear receptor coativator4,NCOA4)介导铁蛋白在自噬溶酶体中降解,然后使铁蛋白结合的铁降解释放出游离铁,是铁代谢的重要途径。近年来,越来越多的研... 铁自噬(ferritinophagy)是一种与铁死亡关系密切的自噬类型,由核受体共激活因子4(nuclear receptor coativator4,NCOA4)介导铁蛋白在自噬溶酶体中降解,然后使铁蛋白结合的铁降解释放出游离铁,是铁代谢的重要途径。近年来,越来越多的研究表明,铁自噬和铁死亡在肿瘤发生发展中起着重要作用。但目前铁自噬在口腔鳞癌中的作用机制尚未完全阐明,对口腔鳞癌中铁自噬机制的深入研究,有望帮助寻找此类疾病治疗的新靶点。本文对铁自噬在口腔鳞癌中作用研究的最新进展作一综述。 展开更多

关键词 核受体共激活因子 铁蛋白重链 铁自噬 铁死亡 口腔鳞癌

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杨桃根活性成分DMDD对糖尿病小鼠心肌损伤的保护作用及其与NCOA4/FTH1/ATG8轴的相关性研究

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作者 陈永欣 李宇轩 +5 位作者 顾凯磊 尤佳俊 孙小涵 马静 周艳平 韦晓洁 《中国药房》 2026年第9期1141-1147,共7页

目的基于核受体共激活因子4/铁蛋白重链1/自噬相关蛋白8(NCOA4/FTH1/ATG8)轴探讨杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)对糖尿病小鼠心肌损伤的保护作用。方法将造模成功的糖尿病小鼠随机分为模型组和DMDD低... 目的基于核受体共激活因子4/铁蛋白重链1/自噬相关蛋白8(NCOA4/FTH1/ATG8)轴探讨杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)对糖尿病小鼠心肌损伤的保护作用。方法将造模成功的糖尿病小鼠随机分为模型组和DMDD低、中、高剂量组(12.5、25、50 mg/kg),另设不造模的对照组,每组6只。各组小鼠分别灌胃相应药液或生理盐水,每天1次,连续21 d。给药结束后,检测小鼠空腹血糖(FBG)、血清中乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平;观察心肌病理变化、纤维化程度及心肌细胞超微结构;检测心肌细胞死亡指数、NCOA4蛋白阳性指数;检测心肌组织中NCOA4、FTH1、ATG8、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平。结果与模型组比较,DMDD各剂量组小鼠心肌损伤明显缓解,心肌细胞超微结构亦有不同程度改善;小鼠FBG,血清中LDH、CK-MB水平,心肌细胞死亡指数、NCOA4蛋白阳性指数,心肌组织中NCOA4、FTH1、ATG8蛋白表达水平均显著降低(P<0.001),而SLC7A11、GPX4蛋白表达水平均显著升高(P<0.001)。结论DMDD可降低糖尿病小鼠血糖水平,减轻心肌组织病理损伤,并抑制细胞死亡,其机制与抑制NCOA4/FTH1/ATG8轴过度激活、减少铁自噬有关。 展开更多

关键词 杨桃根 DMDD NCOA4/fth1/ATG8轴 糖尿病心肌病 铁自噬

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Nrf2/HO-1/GPX4在牦牛脑组织的表达

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作者 车佳玲 张倩 +5 位作者 崔燕 何俊峰 潘阳阳 王萌 张志勇 漆琪 《核农学报》 北大核心 2026年第1期81-88,共8页

为研究Nrf2/HO-1/GPX4在牦牛(Bos grunniens)脑组织的表达,采集成年(3~5岁)牦牛脑组织不同部位,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(WB)、免疫组织化学(IHC)和免疫荧光(IF)技术检测Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1 mRNA及其蛋白在牦牛... 为研究Nrf2/HO-1/GPX4在牦牛(Bos grunniens)脑组织的表达,采集成年(3~5岁)牦牛脑组织不同部位,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(WB)、免疫组织化学(IHC)和免疫荧光(IF)技术检测Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1 mRNA及其蛋白在牦牛大脑、海马、丘脑、延髓和小脑的相对表达量及分布。实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和免疫组化光密度分析结果均显示,成年牦牛大脑皮质和海马中Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1 mRNA及其蛋白水平显著高于小脑、丘脑及延髓(P<0.05)。免疫组化和免疫荧光结果发现Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1阳性反应主要表达于神经元胞质,以上4种因子与神经元核抗原抗体NeuN在上述各脑组织神经元的胞质共定位。综上,Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1在成年牦牛大脑皮质和海马中高表达,推测上述因子可能通过抵抗低氧诱导的氧化应激,抑制铁死亡,从而保护大脑皮质和海马,促进牦牛脑组织适应低氧。Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1主要分布在脑组织的神经元胞质,说明它们可能主要在牦牛脑组织的神经元发挥保护作用。本研究结果为进一步研究牦牛脑组织的低氧适应机制提供了基础资料。 展开更多

关键词 牦牛 脑组织 Nrf2/HO-1/GPX4 fth1

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