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促进组织工程血管移植物早期阶段形成的无血清培养基
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作者 陈颖 孙盱衡 +3 位作者 刘青 肖聪 蒋虹婧 林展翼 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第20期5093-5102,共10页
背景:在组织工程领域,利用平滑肌细胞进行三维培养来构建血管移植物具有重要意义。然而,当前广泛采用的含胎牛血清培养基存在道德、安全以及成分复杂性等潜在问题,可能影响实验结果,不利于血管移植物的临床应用。目的:选定一种成分明确... 背景:在组织工程领域,利用平滑肌细胞进行三维培养来构建血管移植物具有重要意义。然而,当前广泛采用的含胎牛血清培养基存在道德、安全以及成分复杂性等潜在问题,可能影响实验结果,不利于血管移植物的临床应用。目的:选定一种成分明确的无血清培养基替代传统含血清培养基用于平滑肌细胞培养,评估无血清培养基用于构建组织工程血管的可行性。方法:采用组织块培养法分离培养牛胸主动脉平滑肌细胞,取第3-8代细胞用于后续实验。配制无血清培养基:含5 mg/mL牛血清白蛋白、50μg/mL L-抗坏血酸、0.4μg/mL胎球蛋白、15 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子、15 ng/mL血小板源性生长因子BB和10μg/mL胰岛素-5.5μg/mL转铁蛋白-67ng/mL亚硒酸钠的DMEMF12培养基。①二维培养:将血管平滑肌细胞分4组培养,分别加入无血清培养基与含体积分数0%,5%,10%胎牛血清的DMEM F12培养基,观察细胞形态,通过CCK-8、EdU、CytoCube细胞计数仪、流式细胞仪检测细胞增殖情况,羟脯氨酸定量法检测总胶原蛋白含量,免疫荧光染色与qRT-PCR检测平滑肌细胞收缩表型标志物钙调蛋白1、α-平滑肌肌动蛋白表达,免疫印迹检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达,划痕实验检测细胞迁移。②三维培养:将血管平滑肌细胞接种于聚乙醇酸支架上分4组培养,分别加入无血清培养基与含体积分数0%,5%,10%胎牛血清的DMEM F12培养基,扫描电镜分析组织外部形态,苏木精-伊红与Masson染色观察组织形态,免疫荧光染色检测组织Ⅰ型/Ⅲ型胶原表达,羟脯氨酸定量法检测总胶原蛋白含量。结果与结论:①二维培养:倒置显微镜下可见0%血清培养组细胞密度最低、细胞体积较大,对比5%,10%血清培养组,无血清培养组细胞呈现更细长的梭形,细胞排列更规则。CCK-8、EdU、CytoCube细胞计数仪、流式细胞仪检测显示,无血清培养组细胞增殖少于10%血清培养组,多于0%,5%血清培养组。5%,10%血清培养组与无血清培养组钙调蛋白1、α-平滑肌肌动蛋白表达均低于0%血清培养组,细胞迁移能力强于0%血清培养组。无血清培养组总胶原蛋白含量高于其他3组。10%血清培养组、无血清培养组Ⅲ型胶原表达高于0%,5%血清培养组。②三维培养:扫描电镜下可见各组平滑肌细胞聚乙醇酸支架上形成了组织工程血管支架的早期组织,其中无血清培养基组组织中细胞外基质沉积最多。无血清培养基组组织中总胶原蛋白含量与Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达显著高于其他3组。苏木精-伊红与Masson染色显示,除0%血清培养组外,其余3组均可见组织工程血管支架的形成。③结果表明,无血清培养基可促进体外血管平滑肌细胞的增殖、促进组织工程血管移植物的形成。 展开更多
关键词 组织工程血管移植物 血管平滑肌细胞 无血清培养基 胶原蛋白 增殖 胎牛血清 生物材料
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多发性骨髓瘤患者免疫状态及外周血RDW-SD、sFLCR、sBCMA水平变化与预后的关系 被引量:1
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作者 沈娟 王勇 +1 位作者 王秋萍 凌晨 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第8期1161-1166,共6页
目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者免疫状态及检测外周血红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、血清游离轻链κ/λ比值(sFLCR)、可溶性B细胞成熟抗原(sBCMA)水平变化与预后的关系,为该病的病情判断和预后评估提供参考。方法选取医院2019年7月至202... 目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者免疫状态及检测外周血红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、血清游离轻链κ/λ比值(sFLCR)、可溶性B细胞成熟抗原(sBCMA)水平变化与预后的关系,为该病的病情判断和预后评估提供参考。方法选取医院2019年7月至2021年7月收治的MM患者182例作为观察组,所选患者均随访3年,随访期间失访6例,最终纳入176例进行研究,将最终纳入的176例患者根据预后情况分为预后不良组(53例)和预后良好组(123例),另外随机选取于我院同期接受健康体检的健康志愿者50名作为对照组。比较观察组和对照组免疫状态,分析MM患者预后不良的单因素,予以Cox回归分析MM患者预后不良的危险因素,将预后良好组纳入阴性,预后不良组纳入阳性,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血RDW-SD、血清sFLCR、sBCMA单独及联合检测对MM患者预后不良的预测价值,获取曲线下面积(AUC),最佳截断值的确定依据约登指数最大的原则,联合检测的预测价值分析通过拟合方程进行。结果观察组外周血辅助性T细胞17(Th17)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)水平高于对照组(P<0.05),外周血调节性T细胞(Treg)水平低于对照组(P<0.05)。预后不良组外周血RDW-SD及血清sBCMA水平高于预后良好组(P<0.05),血清sFLCR水平低于预后良好组(P<0.05)。Cox回归分析显示,外周血RDW-SD水平(HR=1.091,95%CI:1.027~1.159)、血清sFLCR水平(HR=1.095,95%CI:1.035~1.159)、血清s BCMA水平(HR=1.088,95%CI:1.016~1.165)均是MM患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC分析显示,外周血RDW-SD、血清sFLCR、sBCMA联合检测预测MM患者预后不良的AUC值为0.880,高于三者单一检测(0.805、0.786、0.780,P<0.05),敏感度、特异度分别为94.34%、68.29%。结论MM患者存在免疫状态异常现象,且患者发生预后不良与外周血RDW-SD及血清sBCMA水平和血清sFLCR水平有关,外周血RDW-SD、血清sFLCR、sBCMA联合检测预测MM患者预后不良更具优势。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 免疫状态 红细胞分布宽度标准差 血清游离轻链κ/λ比值 可溶性B细胞成熟抗原 预后
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血清FT3水平对冠心病患者PCI术后临床结局的预测价值 被引量:1
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作者 闫拓 单春方 +3 位作者 吴婷婷 姜智慧 郑颖颖 谢翔 《中国动脉硬化杂志》 2025年第1期45-50,共6页
[目的]探讨血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平对冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后长期预后的预测价值。[方法]所有研究对象均来自一项前瞻性队列研究(PRACTICE研究),该研究选取新疆医科大学第一附属医院自2016年12月—2021年1... [目的]探讨血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平对冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后长期预后的预测价值。[方法]所有研究对象均来自一项前瞻性队列研究(PRACTICE研究),该研究选取新疆医科大学第一附属医院自2016年12月—2021年10月收治的15250例冠心病PCI术后患者作为研究对象,收集临床资料、FT3及肌酐等相关指标,所有研究对象均接受定期随访,首要随访终点为全因死亡和心源性死亡,次要终点为主要不良心血管事件(MACE)和主要不良心脑血管事件(MACCE)。按照纳入排除标准,最终有3109名患者纳入本次研究。根据FT3基线值将患者分为FT3正常组(FT3:3.65~6.8 pmol/L,1446例)和低FT3组(FT3<3.65 pmol/L,1663例)。生存分析采用Kaplan-Meier分析,生存率比较采用Log-rank检验。应用多因素Cox回归分析评估两组患者随访结局的危险因素。[结果]与FT3正常组相比,低FT3组全因死亡、心源性死亡均明显增加(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,低FT3组全因死亡和心源性死亡的累计风险增加(均P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,与FT3正常组相比,低FT3组全因死亡风险增加了1.639倍(HR=2.639,95%CI:1.385~5.348,P=0.007),而心源性死亡在多因素调整后未发现统计学差异(P=0.125)。[结论]血清FT3水平降低对冠心病患者PCI术后全因死亡具有重要的预测价值。 展开更多
关键词 血清游离三碘甲状腺原氨酸 冠心病 经皮冠状动脉介入治疗 预测价值
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细胞培养肉的生物工程学基础与技术进展
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作者 张月 王洁 +3 位作者 丁世杰 李春保 徐幸莲 周光宏 《中国食品学报》 北大核心 2025年第5期77-85,共9页
细胞培养肉技术作为通过培养动物细胞获取可食用肉类的新兴技术,近十年虽取得显著研究进展,但仍面临成本高昂,生产规模有限,产品品质低下等问题,制约了其进一步发展。本文综述细胞培养肉的生物工程学基础与最新研究进展,并针对关键技术... 细胞培养肉技术作为通过培养动物细胞获取可食用肉类的新兴技术,近十年虽取得显著研究进展,但仍面临成本高昂,生产规模有限,产品品质低下等问题,制约了其进一步发展。本文综述细胞培养肉的生物工程学基础与最新研究进展,并针对关键技术挑战进行分析,提出如下潜在突破途径与未来研究方向:1)简化与标准化分离流程、优化分选策略提高种子细胞获取效率,加速高性能优质细胞株开发,降低细胞培养肉生产成本。2)基于白蛋白、生长因子等成分开发无血清培养基,利用生物合成手段降低关键成分的生产成本,实现低成本无血清培养基研发。3)依据种子细胞生长特性筛选适宜生物反应器,悬浮驯化种子细胞突破贴壁依赖特性,建立细胞规模化悬浮培养体系,推进细胞规模化放大生产。4)优选组织构建材料并探究材料复配策略,利用三维结构设计调控细胞成肌分化,实现细胞培养肉产品品质的显著提升。本文针对细胞培养肉低成本、规模化、高品质生产的生物工程学基础与关键技术挑战进行分析,以期为细胞培养肉未来发展提供参考。 展开更多
关键词 细胞培养肉 种子细胞 无血清培养基 规模化放大 组织化构建
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胎儿新生儿ABO溶血病致高胆红素血症的临床特征及蓝光治疗影响因素分析
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作者 王晗 罗强军 +2 位作者 柴翠翠 林婧 刘春霞 《中国输血杂志》 2025年第9期1205-1211,共7页
目的 回顾性分析474例高胆红素血症新生儿的临床资料,探讨ABO胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn, ABO-HDFN)所致高胆红素血症的临床特征及蓝光治疗影响因素。方法 本研究纳入2019年1月至2023年1月期间在兰... 目的 回顾性分析474例高胆红素血症新生儿的临床资料,探讨ABO胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn, ABO-HDFN)所致高胆红素血症的临床特征及蓝光治疗影响因素。方法 本研究纳入2019年1月至2023年1月期间在兰州大学第一医院接受治疗的474例高胆红素血症新生儿作为研究对象。所有患儿均接受血型鉴定及新生儿溶血三项试验。收集并分析其基线临床资料。根据溶血三项试验结果,将患儿分为溶血性黄疸组和非溶血性黄疸组。对2组患儿的血红蛋白水平、住院时间及蓝光治疗持续时间等临床指标进行比较分析。同时,采用多元线性回归模型探讨影响蓝光治疗时间的相关临床因素。结果 474例高胆红素血症新生儿中,354例确诊为ABO-HDFN(溶血病组),120例未发生ABO-HDFN(非溶血病组)。A型新生儿中ABO-HDFN发生率(55.93%,198/354)高于B型新生儿(44.07%,156/354),差异有统计学意义(P<0.05)。此外,二胎及以上新生儿ABO-HDFN发生率(81.56%,146/179)高于首胎新生儿(70.51%,208/295),差异有统计学意义(P<0.05)。溶血病组患儿的血红蛋白水平(170.67±21.86)g/L低于非溶血病组(178.99±22.05)g/L(P<0.001),红细胞计数(4.66±0.63)×10^(12)/L低于非溶血病组(4.89±0.59)×10^(12)/L(P<0.05),红细胞压积(50.05±6.56)%低于非溶血病组(52.61±6.75)%(P<0.05)。溶血病组患儿的住院天数[6(5,9)d]、蓝光治疗时间[62(38,84.25)h]及黄疸发病次数[9(7,13)次]均高于非溶血病组[住院天数6(4,8)d、蓝光治疗时间53(34.25,64.77)h、黄疸发病次数8(6,12)次],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。回归分析显示,游离抗体试验阳性及胎次(二胎及以上)是蓝光治疗时间延长的独立危险因素(P<0.05)。结论 ABO血型不合是新生儿溶血病的主要病因,应对母亲为O型、新生儿为A型者,加强对该人群胆红素水平的动态监测。多次妊娠增加了同种免疫性溶血风险,临床应针对二胎及以上新生儿缩短胆红素监测间隔,并在必要时开展产前干预措施。同时,应重视血红蛋白水平、红细胞计数等指标的变化对溶血性贫血及胆红素升高的预警作用。 展开更多
关键词 胎儿新生儿溶血病 直接抗人球蛋白试验 血清游离抗体试验 红细胞释放试验 高胆红素血症 蓝光治疗 免疫性溶血
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含血清及无血清培养对间充质干细胞生物特征的影响
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作者 娄云云 丁凯 +2 位作者 慈小燕 李虹 闫凤英 《药物评价研究》 北大核心 2025年第6期1507-1516,共10页
目的研究含胎牛血清(FBS)培养基、无血清培养基(SFM)对不同扩增代次间充质干细胞(MSCs)生物特征的影响。方法制备人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)并进行表面标志物及三系分化鉴定;用含10%FBS的DMEM/F-12完全培养基及SFM(1~4)连续培养制备... 目的研究含胎牛血清(FBS)培养基、无血清培养基(SFM)对不同扩增代次间充质干细胞(MSCs)生物特征的影响。方法制备人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)并进行表面标志物及三系分化鉴定;用含10%FBS的DMEM/F-12完全培养基及SFM(1~4)连续培养制备的MSCs,取P3/P5/P10/P15代次,显微镜下观察形态,用细胞计数仪进行细胞直径分析;计数并绘制生长曲线;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测端粒酶逆转录酶(TERT)、p53、p21、p16、p53上调凋亡调控因子(PUMA)mRNA表达;进行软琼脂成克隆能力分析、核型分析。结果制备的MSCs经鉴定均符合要求;在含血清培养条件下,MSCs生长状态、大小和增殖能力相对稳定;SFM培养下,MSCs生长状态、大小和增殖能力差别较大,前期增殖速度快,细胞形态更小更细长,后期增殖速度明显降低;端粒酶检测结果显示,在含血清培养下MSCs中TERT的mRNA表达相对稳定,与同代次FBS培养条件比较,P3、P5代中各SFM培养条件下TERT的表达量均显著升高(P<0.01、0.001);P10代中SFM-3、SFM-4,P15代中SFM-4培养条件下TERT的表达量均显著升高(P<0.05、0.01);软琼脂克隆检测结果显示,血清/SFM-2/3/4培养的不同代次MSCs均无阳性克隆形成,SFM-1培养的P5代MSCs在每孔300、600个铺板条件下,有阳性克隆形成;与含血清培养条件相比,无血清培养下,p53、p21、p16、PUMA在P10代均发生显著性增高(P<0.001);但各条件MSCs的核型中均未发现染色体异常或畸变,表明核型均是稳定的。结论传统含血清培养的MSCs生长更稳定,安全性高,提示细胞研发机构的MSCs如果涉及无血清培养,要做好工艺稳定性、安全性及有效性验证,以保证细胞质量。 展开更多
关键词 间充质干细胞 血清培养 无血清培养 生物特征 安全性
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细胞培育肉研究现状、存在问题及发展对策浅析
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作者 孙孟君 熊昌武 +4 位作者 陈颖雷 廖慧琳 万莹铚 刘晓雯 王栎清 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第4期401-408,共8页
细胞培育肉来源可溯、成分可控,优点良多,已经成为弥补肉制品行业资源缺口的优良选择,但也存在生产成本高、大规模生产困难等问题,亟待解决。该文对细胞培育肉发展的意义、研究现状进行系统总结,深入分析了存在的问题及发展对策,并对其... 细胞培育肉来源可溯、成分可控,优点良多,已经成为弥补肉制品行业资源缺口的优良选择,但也存在生产成本高、大规模生产困难等问题,亟待解决。该文对细胞培育肉发展的意义、研究现状进行系统总结,深入分析了存在的问题及发展对策,并对其未来进行展望。以期为我国未来细胞培育肉的发展提供参考思路。 展开更多
关键词 人造肉 细胞培育肉 无血清培养基 细胞支架 3D生物打印
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Effect of Insulin-Transferrin-Selenium on Goat Oocytes Maturation and Embryo Development 被引量:9
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作者 刘凤军 张玉玲 +2 位作者 杨自军 王国华 张涌 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第3期107-110,共4页
[Objective] The research aimed to enhance culture efficiencies of oocyte and embryo of goat in vitro and to explore serum-free culture system in vitro.[Method] At present,the conventional solutions of oocyte maturatio... [Objective] The research aimed to enhance culture efficiencies of oocyte and embryo of goat in vitro and to explore serum-free culture system in vitro.[Method] At present,the conventional solutions of oocyte maturation and embryo development in vitro were always added into 1% ITS(Insulin-transferrin-selenium) or using 1% ITS to replace FBS in 2 kinds culture solutions for conducting in vitro cultures of goat oocyte and parthenogenetic embryo.The influences of ITS on their developments were detected.[Result] ITS in maturation liquid of oocytes could not increase oocytes maturation rate but significantly increased blastocyst rate (58.06% vs. 48.19%)of parthenogenetic embryo.If FBS in maturation liquid of oocytes was replaced by ITS, the maturation rate, cleavage rate and blastocyst rate were basically unchanged.Adding ITS into embryo medium could increase blastocyst rate (68.30% vs. 56.82%)of parthenogenetic embryo of goat.If FBS in embryo medium was replaced by ITS,the cleavage rate didn’t change basically,while the blastocyst rate in ITS was obviously lower than that in FBS group(42.33% vs.56.82%).[Conclusion] ITS could promote maturation of oocyte in vitro and early embryonic development, in addition,ITS could replace serum in maturation medium of oocyte as serum-free culture system for conducting relevant researches. 展开更多
关键词 Insulin-transferrin-selenium free-serum culture OOCYTE Embryo PARTHENOGENESIS Goat
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肾衰Ⅱ号颗粒治疗慢性肾脏病3~4期脾肾气虚、湿热瘀阻证患者临床疗效及对游离脂肪酸水平的影响
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作者 丁晓璐 蔡峥 王琛 《中国中医药信息杂志》 2025年第4期152-156,共5页
目的观察肾衰Ⅱ号颗粒治疗慢性肾脏病(CKD)3~4期脾肾气虚、湿热瘀阻证患者的临床疗效及对游离脂肪酸(FFA)水平的影响。方法采用随机双盲的临床试验设计将84例患者分为对照组和治疗组各42例。2组均予西医一体化治疗,对照组加安慰剂颗粒,... 目的观察肾衰Ⅱ号颗粒治疗慢性肾脏病(CKD)3~4期脾肾气虚、湿热瘀阻证患者的临床疗效及对游离脂肪酸(FFA)水平的影响。方法采用随机双盲的临床试验设计将84例患者分为对照组和治疗组各42例。2组均予西医一体化治疗,对照组加安慰剂颗粒,治疗组加肾衰Ⅱ号颗粒,每次1袋,每日2次,温水冲服;2组疗程均为3个月。观察2组患者临床疗效及中医证候疗效,于治疗前后检测2组患者肾功能指标[血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(eGFR)、24 h尿蛋白定量(24 hUP)]、脂代谢指标[血清FFA、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、脂蛋白(a)(Lp(a))、载脂蛋白(Apo)A1、ApoB]水平,并监测2组安全性指标。结果治疗组临床总有效率为83.33%(35/42),对照组为35.71%(15/42),2组比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗组中医证候疗效总有效率为88.10%(37/42),对照组为40.48%(17/42),2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与本组治疗前比较,治疗组治疗后SCr、BUN、24 hUP、FFA下降,eGFR上升(P<0.05,P<0.01);对照组治疗后SCr上升,eGFR下降(P<0.01)。2组治疗后比较,治疗组SCr、BUN、FFA低于对照组(P<0.01)。2组患者治疗前后TC、TG、LDL-C、HDL-C、Lp(a)、ApoA1、ApoB比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者安全性指标未见异常变化(P>0.05)。结论肾衰Ⅱ号颗粒联合西医一体化治疗具有改善CKD 3~4期脾肾气虚、湿热瘀阻证患者临床症状及肾功能相关指标,降低FFA,延缓CKD进展的作用。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 肾衰Ⅱ号颗粒 脂代谢 血清游离脂肪酸
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基于转录组数据探讨含血清和无血清培养条件对间充质干细胞生物特征的影响
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作者 王丽波 孙英辉 +2 位作者 慈小燕 刘荣 闫凤英 《药物评价研究》 北大核心 2025年第8期2204-2212,共9页
目的基于转录组学探讨含胎牛血清(FBS)培养基、无血清培养基(SFM)培养给间充质干细胞(MSCs)生物学活性带来的差异。方法从3例产妇脐带制备人脐带MSCs并进行表面标志物及三系分化鉴定;用含10%FBS的DMEM/F-12完全培养基及SFM连续培养MSCs,... 目的基于转录组学探讨含胎牛血清(FBS)培养基、无血清培养基(SFM)培养给间充质干细胞(MSCs)生物学活性带来的差异。方法从3例产妇脐带制备人脐带MSCs并进行表面标志物及三系分化鉴定;用含10%FBS的DMEM/F-12完全培养基及SFM连续培养MSCs,取P4代用转录组测序,开展全局转录组谱分析,进行细胞的基因表达差异分析,使用DAVID对差异表达的基因进行基因本体(GO)功能富集分析;使用R包clusterProfiler的GSEA函数进行基因集富集分析以探索通路的功能变化。提取3个批次的FBS组、SFM组的P4代MSCs mRNA,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法对转录组学的差异基因进行验证。结果制备的MSCs经鉴定均符合要求;转录组测序分析结果显示,不同培养条件显著改变MSCs转录组情况,FBS组高表达的代表性基因有趋化因子介导蛋白1(CXCL1)、白细胞介素1β(IL1B)、G蛋白耦联受体家族C5组成员A(GPRC5A)、CUB结构域含量蛋白1(CDCP1)、缓激肽B1受体(BDKRB1),SFM组高表达的代表性基因有24-脱氢胆固醇还原酶(DHCR24)、N-乙酰谷氨酸合成酶(NAGS)、早幼粒细胞白血病锌指蛋白(ZBTB16)、跨膜蛋白119(TMEM119)。SFM培养的MSCs高表达的基因显著富集在DNA复制、细胞增殖和代谢相关的生物过程,而传统血清培养的MSCs高表达的基因显著富集在细胞外基质矩阵、对细胞因子刺激的反应、对炎症反应及信号传导等具有生物功能性的生物过程。差异基因的qRT-PCR检测结果与转录组分析结果一致。结论MSCs的基因表达会因培养基是否含血清而变化,尽管SFM培养的MSCs展现了更强的增殖能力,但FBS培养基培养的MSCs更具有生物功能性。 展开更多
关键词 间充质干细胞 血清培养 无血清培养 生物特征 转录组测序 生物信息学
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无血清Vero细胞在摆床反应器中培养狂犬病毒的工艺研究
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作者 王英伟 黄馨莹 +5 位作者 郭岩 李彦辉 赵雪 马嬴 李贺 张嵘 《生物化工》 2025年第5期116-120,共5页
本研究应用摆床反应器搭配一次性载体反应袋实现了无血清Vero细胞的高密度培养,同时研究了接毒时的细胞密度、病毒感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)等参数对病毒收获液的狂犬病毒滴度和抗原含量的影响。结果发现,最适培养条件... 本研究应用摆床反应器搭配一次性载体反应袋实现了无血清Vero细胞的高密度培养,同时研究了接毒时的细胞密度、病毒感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)等参数对病毒收获液的狂犬病毒滴度和抗原含量的影响。结果发现,最适培养条件参数为在细胞密度培养为(6.0±0.3)×10^(6) cells/mL时,按照MOI值为0.01进行接毒,且重复性验证结果符合预期,同时其制备的原液与传统工艺相比,在抗原含量、效价上无统计学差异;宿主细胞DNA(Host Cell DNA,HCD)残留、宿主细胞蛋白(Host Cell Protein,HCP)残留、牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)残留显著优于传统工艺。 展开更多
关键词 狂犬病毒 VERO细胞 无血清培养 摆床反应器
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前列腺癌患者游离前列腺特异性抗原、血清铁蛋白及血尿酸水平与Gleason分级相关性
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作者 张皓诚 陶玫玫 +6 位作者 张炯 钱宇航 廖春梅 王鹏 郎根强 李琳 邓晓俊 《中华男科学杂志》 2025年第10期881-884,共4页
目的探讨前列腺癌(PCa)患者游离前列腺特异性抗原(fPSA)、血清铁蛋白(SF)及血尿酸(SUA)水平与Gleason分级相关性。方法回顾性分析2023年1—12月在上海大学附属四一一医院诊治的61例行前列腺穿刺活检的患者临床资料,根据穿刺结果分为良... 目的探讨前列腺癌(PCa)患者游离前列腺特异性抗原(fPSA)、血清铁蛋白(SF)及血尿酸(SUA)水平与Gleason分级相关性。方法回顾性分析2023年1—12月在上海大学附属四一一医院诊治的61例行前列腺穿刺活检的患者临床资料,根据穿刺结果分为良性前列腺增生(BPH)组31例和PCa组30例。统计患者fPSA、SF、SUA及穿刺病例Gleason分级情况,采用Spearman分析患者fPSA、SF及SUA水平与Gleason分级相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析fPSA、SF及SUA水平对PCa的诊断效能。结果PCa组患者fPSA、SF及SUA水平明显高于BPH组(P均<0.05);不同Gleason分级的PCa患者fPSA、SF及SUA水平的比较,差异有统计学意义(P均<0.05);fPSA、SF及SUA水平联合诊断PCa的曲线下面积(AUC)为0.982,特异性为96.08%,敏感性为94.35%,诊断能力高于单项的fPSA、SF及SUA水平(P均<0.05);PCa患者SF及SUA水平与Gleason分级呈正相关(P<0.05),fPSA与Gleason分级无相关性(P>0.05)。结论PCa患者SF及SUA水平与Gleason分级呈正相关,可作为预测PCa患者Gleason分级的重要指标。 展开更多
关键词 前列腺癌 游离前列腺特异性抗原 血清铁蛋白 血尿酸 GLEASON分级
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kappa/lambda轻链比在评估 硼替佐米治疗 多发性骨髓瘤患者疗效中的作用
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作者 杨娟娟 李晓童 代素雅 《现代肿瘤医学》 2025年第2期255-262,共8页
目的:探讨kappa/lambda轻链比在评估硼替佐米治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者疗效中的作用。方法:选取2020年2月至2023年5月于本院进行治疗的150例MM患者为研究对象。患者均行硼替佐米化疗治疗。收集可能影响MM患者硼替佐米... 目的:探讨kappa/lambda轻链比在评估硼替佐米治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者疗效中的作用。方法:选取2020年2月至2023年5月于本院进行治疗的150例MM患者为研究对象。患者均行硼替佐米化疗治疗。收集可能影响MM患者硼替佐米化疗疗效的临床因素和遗传学因素。评估两组患者经治疗3个疗程后的疗效,依据疗效将患者分为缓解组(部分缓解例数+接近完全缓解例数+完全缓解例数)和未缓解组(疾病稳定例数+疾病进展例数)。检测两组患者治疗前及各疗程结束后的血清游离轻链(serum free light chain,sFLC)水平(包含κ轻链、λ轻链),且计算血清游离轻链比(ratio of serum free light chain,rFLC)水平(rFLC=κ/λ)。对影响MM患者硼替佐米治疗疗效的因素进行rFLC水平的分层分析。采用重复测量方差法分析比较两组MM患者rFLC水平的动态变化。采用Joint模型对rFLC水平与硼替佐米治疗的MM患者疗效关系进行分析,构建纵向波动多水平子模型(LME模型)和Cox生存子模型,通过关联系数将两者结合。采用限制性立方样条Logistic回归模型分析rFLC水平与MM患者接受硼替佐米治疗疗效的剂量效应关联。结果:两组患者的rFLC水平的时间效应、组间效应和交互效应均具有统计学差异(P<0.001)。与治疗前比较,两组患者治疗后的rFLC水平均明显降低(P<0.001)。多变量方差分析结果显示,未缓解组治疗后第1疗程、第2疗程及第3疗程的rFLC水平均高于缓解组(P<0.05)。Joint模型分析结果显示,rFLC水平每升高0.1,预后不良风险增加5%(P<0.01)。通过影响疗效的其他因素对rFLC水平的分层分析发现,R-ISS分期、骨髓浆细胞均会对治疗前rFLC水平产生明显的正向影响(P<0.05)。限制性立方样条法分析结果显示,rFLC水平与硼替佐米治疗未缓解概率呈明显正相关,尤其当rFLC水平为0.89时,随着其水平上升,硼替佐米治疗未缓解概率明显上升。结论:硼替佐米可有效改善MM患者血清sFLC-κ、sFLC-λ、rFLC水平。rFLC水平与硼替佐米治疗疗效关系密切。R-ISS分期、骨髓浆细胞均会对rFLC水平产生明显的正向影响。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 血清游离轻链 血清游离轻链比 硼替佐米 治疗疗效
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高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞制备及评价策略研究
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作者 汤杰 李佩霖 +7 位作者 张晓宇 李晓彤 虞富豪 田家仪 许润香 尹博丰 丁丽 朱恒 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第3期892-898,共7页
目的:制备一种高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)并对其干细胞特性进行评价。方法:采集健康产妇足月剖宫产的胎儿脐带组织,机械剥离华通氏胶;采用组织块贴壁培养法和酶消化培养法,联合含有人血小板裂解物的无动... 目的:制备一种高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)并对其干细胞特性进行评价。方法:采集健康产妇足月剖宫产的胎儿脐带组织,机械剥离华通氏胶;采用组织块贴壁培养法和酶消化培养法,联合含有人血小板裂解物的无动物血清培养体系获得hUC-MSC。通过流式细胞术检测两种方法获取的hUC-MSC的表型特征;通过CCK-8和成纤维细胞集落形成实验(CFU-F)检测两组细胞的增殖能力差异;通过成脂、成骨、成软骨的诱导分化,检测两组hUC-MSC多向分化潜能的差异;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组hUC-MSC造血支持因子SCF、IL-3、CXCL12、VCAM1和ANGPT1的mRNA表达差异。结果:流式细胞术检测结果表明,两种方法获得的hUC-MSC均高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD31、CD45、HLA-DR;CCK-8和CFU-F检测结果表明,组织块贴壁培养法获得的hUC-MSC的增殖能力更强;三系分化实验表明,两组hUC-MSC的多向分化潜能未有明显差异;RT-qPCR检测结果表明,组织块贴壁培养法获得的hUC-MSC造血支持因子SCF、IL-3、CXCL12、VCAM1、ANGPT1的mRNA表达水平更高。结论:在无动物血清培养体系下,成功制备了高表达造血支持因子的临床级别hUC-MSC。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 华通氏胶 无动物血清培养体系 造血支持能力
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口蹄疫病毒无血清悬浮培养生产工艺研究
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作者 施程洪 李彦荣 +6 位作者 陆礼琼 赵路路 杨建强 曾刚春 成建文 王继华 刘术新 《中国兽药杂志》 2025年第8期15-24,共10页
为提高口蹄疫抗原的病毒含量,减少口蹄疫疫苗副反应,提升生产效率,降低生产成本,对口蹄疫病毒无血清悬浮培养生产工艺进行了研究。将BHK-21细胞在生物反应器中进行无血清悬浮培养,设计了最佳培养pH、接种细胞密度、培养温度、溶氧含量... 为提高口蹄疫抗原的病毒含量,减少口蹄疫疫苗副反应,提升生产效率,降低生产成本,对口蹄疫病毒无血清悬浮培养生产工艺进行了研究。将BHK-21细胞在生物反应器中进行无血清悬浮培养,设计了最佳培养pH、接种细胞密度、培养温度、溶氧含量、接毒量、收获时间、成品免疫效果的试验方法,确定了生产工艺。结果表明,采用无血清悬浮培养工艺,按照接种细胞密度1.0×10^(6)/mL,培养pH为7.00~7.20,培养温度36.5~37.0℃,溶氧含量40%~50%进行BHK-21细胞培养,培养72h,细胞密度大于7×10^(6)/mL,沉降换液后,加入含2%口蹄疫种毒的病毒维持液进行培养后收获病毒液,口蹄疫抗原的病毒146S含量能达到18μg/mL以上,比传统低血清悬浮生产工艺提升了2倍以上,且制备的成品安全有效,免疫抗体阳性率为100%。本研究成功建立了适合口蹄疫病毒无血清悬浮培养的生产工艺,获得了更高效价的口蹄疫病毒,同时验证了无血清培养抗原的免疫效果,为高效价口蹄疫疫苗的生产和研究提供了新思路。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 146S 无血清 悬浮培养
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溶血三项联合血清胆红素检测对高胆红素血症新生儿溶血病的诊断价值
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作者 胡彩玲 《实用检验医师杂志》 2025年第1期52-55,共4页
目的研究溶血三项(直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验、抗体释放试验)联合血清胆红素检测对高胆红素血症新生儿溶血病(HDN)的诊断价值。方法采用回顾性研究方法,收集并分析2022年6月—2023年4月于梅州市妇幼保健院产科出生的100例... 目的研究溶血三项(直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验、抗体释放试验)联合血清胆红素检测对高胆红素血症新生儿溶血病(HDN)的诊断价值。方法采用回顾性研究方法,收集并分析2022年6月—2023年4月于梅州市妇幼保健院产科出生的100例新生儿的临床资料,根据母婴血型不同分为O-A/B血型不同组(55例)和O-O血型相同组(45例);比较两组血清胆红素水平、溶血三项阳性率和高胆红素血症HDN发生率。根据溶血三项结果不同将新生儿分为A组〔1例;直抗试验(+)、游离试验(+)、释放试验(+)〕、B组〔10例;直抗试验(+)、游离试验(-)、释放试验(+)〕、C组〔13例;直抗试验(-)、游离试验(+)、释放试验(+)〕、D组〔8例;直抗试验(-)、游离试验(-)、释放试验(+)〕、E组〔68例;直抗试验(-)、游离试验(-)、释放试验(-)〕;比较各组血清胆红素水平。根据血清胆红素水平将新生儿分为0~21μmol/L组(4例)、>21~35μmol/L组(49例)、>35~45μmol/L组(33例)、>45~55μmol/L组(10例)和>55μmol/L组(4例),比较各组高胆红素血症HDN发生率。采用诊断试验分析溶血三项联合血清胆红素检测对高胆红素血症HDN的诊断价值。结果新生儿高胆红素血症HDN发生率为32.00%(32/100)。O-A/B血型不同组血清胆红素水平显著高于O-O血型相同组(μmol/L:37.80±10.25比33.79±8.16,P<0.05)。O-A/B血型不同组的游离抗体试验和抗体释放试验阳性率、高胆红素血症HDN发生率均明显高于O-O血型相同组(游离试验阳性率:25.45%比2.22%;释放试验阳性率:32.73%比2.22%;高胆红素血症HDN发生率:45.45%比15.56%;均P<0.05〕。A组、B组、C组、D组血清胆红素水平均显著高于E组(μmol/L:39.3、47.46±12.05、45.31±10.28、34.62±7.82比22.57±4.38,均P<0.05),B组和C组血清胆红素水平比较差异无统计学意义,均显著高于D组(均P<0.05)。血清胆红素>55μmol/L组的高胆红素血症HDN发生率显著高于0~21μmol/L组、>21~35μmol/L组、>35~45μmol/L组、>45~55μmol/L组(100.0%比25.00%、24.49%、33.33%、40.00%,均P<0.05),其余各组高胆红素血症HDN发生率比较差异均无统计学意义。血清胆红素>55μmol/L时,诊断特异度和阳性预测值均为100.00%,敏感度为86.96%。结论溶血三项和血清胆红素检测联合应用对高胆红素血症HDN的诊断价值较高,值得在临床推广。 展开更多
关键词 高胆红素血症 新生儿溶血症 直接抗人球蛋白试验 血清游离抗体试验 抗体释放试验 血清胆红素
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新型人脐带间充质干细胞冷冻保存液的深低温冷冻质量研究
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作者 谭子扬 韦棋 +1 位作者 孙长麒 钟桂强 《中国医药生物技术》 2025年第4期406-412,共7页
目的开发一种无动物源成分且低浓度二甲基亚砜的人脐带间充质干细胞自配冷冻保存液,研究其安全性及稳定性等特性。方法经过前期预实验配比一种无动物源成分且低浓度二甲基亚砜的自配冷冻保存液配方。用3份不同个体来源的人脐带间充质干... 目的开发一种无动物源成分且低浓度二甲基亚砜的人脐带间充质干细胞自配冷冻保存液,研究其安全性及稳定性等特性。方法经过前期预实验配比一种无动物源成分且低浓度二甲基亚砜的自配冷冻保存液配方。用3份不同个体来源的人脐带间充质干细胞,分别采用传统程序降温(程序降温盒法和程序降温仪法)的冷冻保存液、两种非程序降温冷冻保存液(Stem-Cell Banker、自配冷冻保存液)降温后置于–150℃以下的气相液氮罐储存。24 h后对细胞进行复苏,通过对细胞进行安全性(细菌及真菌检测、支原体及细菌内毒素、核型分析、异常毒性检测),有效性(分化潜能、免疫调节功能分析)及其细胞特性(细胞形态、活率、细胞表面标志物检测)考察分析其冻存质量。结果细胞活率、无菌检测和支原体及异常毒性检测均符合标准,无异常。流式检测各组细胞表面标志物CD73+、CD90+、CD105+表达无显著性变化;CD34-、CD45-低表达,均无显著性变化;成骨、成脂、成软骨的分化潜能不受降温方式的影响;G显带技术确认各组染色体核型为正常人体二倍体核型;对Th1/2/17细胞增殖有抑制作用,对Treg细胞增殖具有促进作用。结论自配冷冻保存液具有配方明确、可批量配制、批次间差异小、安全性好、设备适用性广泛、人员操作更加便捷与稳定可靠等优点,具有临床使用的潜能。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 冷冻保存液 程序降温 无血清 二甲基亚砜
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多层螺旋CT联合κ型血清游离轻链、癌胚抗原、细胞角蛋白19片段诊断肺癌的价值
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作者 王为苗 《中外医药研究》 2025年第18期142-144,共3页
目的:探讨多层螺旋CT(MSCT)联合κ型血清游离轻链(κFLC)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)检测诊断肺癌的效能。方法:纳入2022年1月—2024年12月无锡市惠山区人民医院收治的120例肺部病变患者为研究对象(良性病变32例,设... 目的:探讨多层螺旋CT(MSCT)联合κ型血清游离轻链(κFLC)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)检测诊断肺癌的效能。方法:纳入2022年1月—2024年12月无锡市惠山区人民医院收治的120例肺部病变患者为研究对象(良性病变32例,设为良性病变组;肺癌患者88例,设为肺癌组)。测定并比较两组血清κFLC、CEA、CYFRA21-1水平。患者均行MSCT扫描,以病理检查结果为“金标准”,比较血清κFLC、CEA、CYFRA21-1、MSCT及其联合检查对肺癌的诊断效能。结果:肺癌组血清κFLC、CEA、CYFRA21-1水平高于良性病变组(P<0.05)。联合检查准确度、灵敏度较κFLC高(P<0.05),联合检查的特异度较κFLC低(P=0.023);联合检查灵敏度较CEA高(P<0.001),特异度较CEA低(P=0.003);联合检查灵敏度较CYFRA21-1高(P<0.001),特异度较CYFRA21-1低(P<0.001);联合检查灵敏度较MSCT高(P=0.004),特异度较MSCT低(P<0.001)。结论:血清κFLC、CEA、CYFRA21-1联合MSCT检查诊断肺癌的灵敏度较高。 展开更多
关键词 多层螺旋CT κ型血清游离轻链 癌胚抗原 细胞角蛋白19片段 肺癌 诊断
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化学成分明确的脂肪源性间充质干细胞无血清培养方法的实验研究
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作者 汪兆艳 王倩 +1 位作者 栾佐 屈素清 《中国美容医学》 2025年第12期6-10,共5页
目的:建立一种化学成分明确的、无异源、具有高效扩增能力的人源脂肪源性间充质干细胞体外扩增的无血清培养体系。方法:人源脂肪源性间充质干细胞分别用含胎牛血清的培养基(C组)和两组化学成分明确的无血清培养基(A组、B组)连续培养三代... 目的:建立一种化学成分明确的、无异源、具有高效扩增能力的人源脂肪源性间充质干细胞体外扩增的无血清培养体系。方法:人源脂肪源性间充质干细胞分别用含胎牛血清的培养基(C组)和两组化学成分明确的无血清培养基(A组、B组)连续培养三代,对比不同培养基培养的脂肪源性间充质干细胞形态、细胞增殖及三系分化能力,通过流式细胞术检测三组培养基培养的第3代脂肪源性间充质干细胞表面标记物CD29、CD73、CD90、CD105、CD34、CD45和HLA-DR的表达情况。结果:与含胎牛血清的C组培养基比较,无血清培养基A组和B组培养的脂肪源性间充质干细胞形态更为细长、为典型的纤维状,细胞增殖能力更强,其中无血清培养基B组优于无血清培养基A组;流式检测结果显示,A、B两组无血清培养基培养的间充质干细胞与C组胎牛血清培养基培养的间充质干细胞都能够分化为成脂、成骨和成软骨细胞且高表达间充质干细胞特异性表面标志物CD29、CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45和HLA-DR。结论:无血清培养基B组为最优的脂肪源性间充质干细胞培养基。 展开更多
关键词 脂肪源性间充质干细胞(ADSCs) 无血清培养基 细胞增殖 细胞分化 成脂分化 成骨分化 成软骨分化
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