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Forskolin体外诱导Balb/c小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化 被引量：7
1
作者 邓蔓菁 金岩 +4 位作者 史俊南 聂鑫 吕红兵 刘源 赵宇 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2002年第12期639-641,I001,共4页
目的 :探讨forskolin诱导小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞的分化过程。方法 :取妊娠 12 .5d胎鼠第 3代下颌外胚间充质细胞 ,分别在含 5、2 5、5 0 μmol/Lforskolin的DMEM/F12 培养基中培养。相差显微镜下观察细胞的形态变化 ,免... 目的 :探讨forskolin诱导小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞的分化过程。方法 :取妊娠 12 .5d胎鼠第 3代下颌外胚间充质细胞 ,分别在含 5、2 5、5 0 μmol/Lforskolin的DMEM/F12 培养基中培养。相差显微镜下观察细胞的形态变化 ,免疫组化鉴定细胞性质。结果 :培养 2d ,细胞形态及排列发生明显变化 ,呈两突的长梭形 ;胞体中有空泡样改变 ,随时间的增加而明显。变化以 2 5 μmol/L组较明显。免疫组化鉴定 :抗神经胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)及S - 10 0染色阳性 ;NSE及NF染色阴性。结论 :forskolin可诱导外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化。 展开更多
关键词 小鼠 下颌 外胚间充质细胞 神经胶质细胞 诱导分化 forskolin
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Forskolin对小鼠体外T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响 被引量：3
2
作者 宋兵 曾耀英 +4 位作者 黄秀艳 李林 滕菲 杨志 姚满林 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1008-1012,共5页
目的:研究Forskolin对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色... 目的:研究Forskolin对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞早期活化标志CD69的表达水平;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色技术结合流式细胞术和CELLQuest、Mod FitLT软件,分析T细胞增殖情况;用碘化丙锭(PI)染色技术分析细胞周期分布。结果:加入终浓度为10-7、10-6、10-5M的Forskolin,孵育8 h后,CD3+T细胞CD69的表达水平和平均荧光强度(MFI)与Con A组相比都有显著的降低,且呈梯度依赖性;对Con A刺激的小鼠CD3+T细胞的增殖指数(PI)也有梯度性抑制;对细胞周期的影响表现为:随着Forskolin浓度升高,处于G0/G1期的细胞增加,S期细胞减少,G2/M期的细胞也有少量减少。结论:Forskolin能有效抑制小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖,阻滞细胞从G0/G1期进入S、G2/M期。由此推断Forskolin在某种程度上是一种潜在的免疫抑制剂。 展开更多
关键词 forskolin 活化 增殖 周期 流式细胞术
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Forskolin和促性腺激素对猪卵母细胞体外成熟的影响 被引量：8
3
作者 傅国栋 张似青 夏国良 《上海农业学报》 CSCD 2002年第1期84-87,共4页
利用已建立的猪卵母细胞体外无血清培养模型 ,研究了猪卵丘 卵母细胞复合体(CEO)在模拟生理环境的培养条件下Forskolin和促性腺激素对猪卵母细胞成熟的作用。在观察卵母细胞减数分裂恢复 (GVBD )后的实验结果表明 :(1)cAMP产生的激动剂... 利用已建立的猪卵母细胞体外无血清培养模型 ,研究了猪卵丘 卵母细胞复合体(CEO)在模拟生理环境的培养条件下Forskolin和促性腺激素对猪卵母细胞成熟的作用。在观察卵母细胞减数分裂恢复 (GVBD )后的实验结果表明 :(1)cAMP产生的激动剂Forskolin(3μmol·L- 1)处理CEO 2 0h可以显著协同HX抑制卵母细胞成熟 ;处理 4 0h后 ,Forskolin(3μmol·L- 1)的抑制作用被卵丘细胞分泌的某种物质克服 ;(2 )Forskolin(3μmol·L- 1)短期 (30 ,6 0 ,12 0 ,2 4 0min)处理后可以诱导卵丘细胞分泌某种促进卵母细胞成熟的物质。 (3)FSH (5 0～ 2 0 0U/L)能够诱导卵丘细胞分泌某种物质促进卵母细胞成熟 ;(4) 5 0U/L的FSH预处理CEO结果与Forskolin结果相同 。 展开更多
关键词 猪 卵母细胞 forskolin 促性腺激素 体外成熟 减数分裂恢复
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Forskolin抑制大鼠胃窦环行平滑肌自发性收缩运动 被引量：3
4
作者 姜京植 孙倩 +4 位作者 许东元 张默函 朴丽花 蔡英兰 金政 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期224-228,共5页
本文旨在探讨环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)对胃窦环行平滑肌功能的调节作用。分离大鼠胃窦环形肌条,用多道生理记录仪观察腺苷酸环化酶(adenylyl cyclase,AC)直接激活剂Forskolin对胃平滑肌自发性收缩活动的影响,并... 本文旨在探讨环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)对胃窦环行平滑肌功能的调节作用。分离大鼠胃窦环形肌条,用多道生理记录仪观察腺苷酸环化酶(adenylyl cyclase,AC)直接激活剂Forskolin对胃平滑肌自发性收缩活动的影响,并用ELISA法测定灌流液中cAMP生成量的变化。结果显示,Forskolin浓度依赖性地抑制胃窦环形肌条自发性收缩活动,降低肌条的收缩振幅和频率,使收缩运动基线明显下移。Forskolin浓度依赖性地提高灌流液中的cAMP含量,且灌流液中cAMP含量与肌条收缩振幅呈显著负相关。Forskolin对大鼠胃窦环行肌自发性收缩活动的抑制作用可被cAMP依赖性的蛋白激酶(cAMP-dependent protein kinase,PKA)抑制剂H-89所阻断。以上结果提示,Forskolin可通过增加cAMP含量激活PKA途径,从而抑制大鼠胃窦环行平滑肌的自发性收缩活动。 展开更多
关键词 forskolin CAMP 胃平滑肌 自发性收缩活动
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Forskolin对人WISH细胞水通道蛋白8表达及分布的影响 被引量：6
5
作者 路炜 漆洪波 黄锦 《中国医药生物技术》 CSCD 2007年第5期336-340,共5页
目的探究调控人羊膜上皮细胞水通道蛋白8(AQP8)表达的信号转导通路方法以腺苷酸环化酶激动剂Forskolin处理体外培养的人羊膜上皮细胞株WISH细胞,将WISH细胞随机分为不同浓度Forskolin作用24h组和单一浓度Forskolin作用不同时间组。前者... 目的探究调控人羊膜上皮细胞水通道蛋白8(AQP8)表达的信号转导通路方法以腺苷酸环化酶激动剂Forskolin处理体外培养的人羊膜上皮细胞株WISH细胞,将WISH细胞随机分为不同浓度Forskolin作用24h组和单一浓度Forskolin作用不同时间组。前者培养基中分别加入Forskolin0(对照组)、5、10、20、40、100、200μmol/L,培养24h;后者培养基中加入Forskolin100μmol/L后分别培养4、8、16、24、48h。采用蛋白质印迹技术检测各组细胞AQP8蛋白表达水平;RT-PCR技术检测Forskolin处理不同时间组细胞AQP8mRNA表达水平;免疫荧光细胞化学方法检测Forskolin100μmol/L作用24h组细胞AQP8蛋白的分布。结果对照组WISH细胞AQP8蛋白表达水平为0.027±0.003,AQP8mRNA表达水平为0.026±0.003。不同浓度Forskolin处理组中,除了5μmol/L组外,其余各组AQP8蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05),高峰值出现在100μmol/L组(0.157±0.006)。Forskolin处理不同时间的各组WISH细胞,其AQP8mRNA和蛋白的表达水平均高于对照组(P<0.05),AQP8mRNA表达水平在16h组达峰值(0.087±0.007),AQP8蛋白表达水平在24h组达峰值(0.158±0.007)。免疫荧光细胞化学染色显示,Forskolin100μmol/L作用24h组细胞膜上的黄绿色免疫荧光信号较对照组明显增强。结论Forskolin可上调WISH细胞AQP8mRNA及蛋白表达水平,使细胞膜上AQP8蛋白的分布增加,提示细胞内cAMP-蛋白激酶A信号转导途径的激活在人羊膜上皮细胞AQP8表达的调控中发挥重要作用。 展开更多
关键词 离子通道 水孔蛋白质类 基因表达 羊膜 羊水 forskolin
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Forskolin激活cAMP信号通路调控小鼠心肌成纤维细胞结缔组织生长因子的表达 被引量：2
6
作者 刘波 黄晓帆 +2 位作者 李冬寒 王生伟 杜心灵 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-9,共9页
目的研究胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平提高对小鼠心肌成纤维细胞(MCFs)表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其信号通路。方法采用出生1周内C57BL乳鼠心脏分离培养原代MCFs,第3代MCFs使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin干预培养后检测细胞CTG... 目的研究胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平提高对小鼠心肌成纤维细胞(MCFs)表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其信号通路。方法采用出生1周内C57BL乳鼠心脏分离培养原代MCFs,第3代MCFs使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin干预培养后检测细胞CTGF、蛋白激酶A(PKA)、p44/42丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)及磷酸化p44/42 MAPK表达情况。分别给予磷酸化p44/42 MAPK抑制剂PD98509及PKA抑制剂Rp-cAMPS阻断相关信号节点,检测细胞内PKA、p44/42 MAPK、磷酸化p44/42 MAPK以及CTGF表达变化。结果 Forskolin干预培养MCFs细胞后,胞内cAMP水平提高,细胞活力下降,PKA表达上升,p44/42 MAPK总蛋白无明显改变,p44/42 MAPK磷酸化水平下降,CTGF mRNA及蛋白表达下降;给予PD98509抑制p44/42 MAPK磷酸化后,PKA表达上升,CTGF mRNA及蛋白表达下调;Rp-cAMPS抑制PKA活化后,p44/42 MAPK磷酸化水平升高,CTGF mRNA及蛋白表达上调。结论Forskolin可以通过提高MCFs胞内cAMP水平抑制CTGF的表达,其作用信号通路为高水平cAMP上调PKA表达,降低下游p44/42 MAPK磷酸化水平,抑制CTGF的表达。 展开更多
关键词 forskolin 环磷酸腺苷 结缔组织生长因子 心肌成纤维细胞 心肌纤维化
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Forskolin对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响 被引量：2
7
作者 宋兵 曾耀英 +4 位作者 黄秀艳 李林 滕菲 杨志 姚满林 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期19-24,共6页
通过研究Forskolin对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠体外CD3+T淋巴细胞活化、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α及增殖的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育... 通过研究Forskolin对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠体外CD3+T淋巴细胞活化、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α及增殖的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞中期、晚期活化标志CD25、CD71的表达水平;LuminexTM100检测晚期活化淋巴细胞培养上清中5种细胞因子的变化;羧基荧光素已酰已酸(CFDA-SE)染色技术结合流式细胞术和CELLQuest、ModFitLT软件,分析CD3+T细胞增殖情况。结果显示,终浓度为10-7、10-6、10-5mol/L的Forskolin均能降低CD3+T细胞中CD25、CD71的表达水平和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI),还能抑制IL-10、IL-2、TNF-α的产生和淋巴细胞的增殖,但能促进IFN-γ的产生,对IL-4的影响却不大。表明Forskolin在一定浓度范围内通过改变T淋巴细胞细胞因子的表达水平,进而抑制T淋巴细胞的活化和增殖,发挥免疫抑制作用。 展开更多
关键词 forskolin 活化 细胞因子 增殖
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CFTR激动剂forskolin对脑缺血再灌注诱导的神经元凋亡的影响 被引量：3
8
作者 朱耀斌 张雅娉 +5 位作者 李志强 丁楠 伊寒露 沈磊 赵宇东 叶赞凯 《中华实用诊断与治疗杂志》 2020年第4期339-342,共4页
目的探讨囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)激动剂forskolin(FSK)对脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)诱导的神经元凋亡的影响。方法将48只小鼠随机分为对照组(假手术)、FSK... 目的探讨囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)激动剂forskolin(FSK)对脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)诱导的神经元凋亡的影响。方法将48只小鼠随机分为对照组(假手术)、FSK组(假手术+腹腔注射FSK)、IR组(建立IR模型)、FSK+IR组(建立IR模型+腹腔注射FSK),每组12只。采用HE染色观察小鼠海马和皮质组织细胞形态学变化,采用TUNEL染色观察小鼠海马组织神经元凋亡情况,采用比色法测定小鼠神经元caspase-3、caspase-8、caspase-9活性。结果对照组和FSK组小鼠海马及皮质神经元染色均匀,胞质透明,细胞核大而圆,核仁清晰;IR组小鼠海马及皮质神经元结构破坏,细胞核浓染、固缩,呈神经元凋亡改变;FSK+IR组海马和皮质神经元细胞核浓染、固缩较IR组轻。生物素化-dUTP TUNEL染色中细胞核中出现棕黄色颗粒的神经元为凋亡神经元,荧光四甲基罗丹明-dUTP TUNEL染色细胞核中出现粉红色荧光的神经元为凋亡神经元;IR组和FSK+IR组小鼠海马神经元凋亡数量[(57.64±12.68)、(26.49±6.37)个/视野]高于对照组[(5.61±1.14)个/视野]和FSK组[(5.72±1.24)个/视野](P<0.05)。IR组和FSK+IR组小鼠海马神经元caspase-3、caspase-8、caspase-9活性(2.86±0.55、1.97±0.62、2.38±0.64,1.84±0.37、1.32±0.41、1.41±0.53)高于对照组(1.14±0.17、0.84±0.15、0.95±0.21)和FSK组(1.23±0.22、0.81±0.13、0.97±0.20)(P<0.05),FSK+IR组小鼠海马神经元凋亡数量和caspase-3、caspase-8、caspase-9活性低于IR组(P<0.05),对照组小鼠海马神经元凋亡数量及caspase-3、caspase-8、caspase-9活性与FSK组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论激活CFTR氯离子通道可降低IR小鼠脑组织神经元细胞凋亡,对IR小鼠脑组织神经元细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 缺血再灌注 囊性纤维化跨膜传导调节因子 forskolin 脑 神经元 凋亡 小鼠
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Forskolin引起大鼠脂肪细胞内脂滴重塑(英文) 被引量：5
9
作者 刘梅芳 杜从阔 苏雪莹 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期379-387,共9页
脂肪组织是人体的主要能量储库,甘油三酯贮存在细胞内脂滴(lipid droplets, LDs)中,越来越多的研究表明脂滴是细胞内代谢活跃的细胞器。本研究旨在探讨forskolin长时间刺激脂肪分解过程中脂滴形态和脂滴表面perilipin家族蛋白的改变。以... 脂肪组织是人体的主要能量储库,甘油三酯贮存在细胞内脂滴(lipid droplets, LDs)中,越来越多的研究表明脂滴是细胞内代谢活跃的细胞器。本研究旨在探讨forskolin长时间刺激脂肪分解过程中脂滴形态和脂滴表面perilipin家族蛋白的改变。以Sprague-Dawley (SD)大鼠附睾脂肪垫来源的分化脂肪细胞为研究对象,给予1μmol/L forskolin慢性刺激24 h,采用比色方法测定培养基中甘油的浓度;采用尼罗红染色观察细胞内脂滴形态的变化;采用荧光定量PCR检测perilipin家族蛋白mRNA水平的改变;采用免疫印迹和免疫荧光染色观察蛋白水平以及蛋白的亚细胞定位。结果表明,1μmol/L forskolin孵育24 h可以持续刺激脂肪分解。伴随着脂肪分解的进行,细胞内脂滴形态逐渐发生改变,细胞内聚集存在的大脂滴逐渐减少,位于细胞周边的小脂滴逐渐增加,最终细胞内大脂滴全部消失,取而代之的是在细胞质中弥散存在的微小脂滴。在脂肪分解过程中,perilipin家族蛋白水平也发生明显变化。分化成熟的脂肪细胞几乎没有Plin2蛋白表达,而forskolin慢性刺激可以显著增加Plin2蛋白以及mRNA的水平,增加的Plin2蛋白特异性结合在脂滴表面。Forskolin慢性刺激对Plin3的mRNA水平无显著影响,但可以显著降低Plin1、Plin4和Plin5的mRNA水平。以上结果提示,在forskolin慢性持续刺激脂肪分解过程中,脂滴形态和perilipin家族蛋白均发生显著改变。 展开更多
关键词 forskolin 脂肪细胞 脂滴 perilipin家族蛋白
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Forskolin对成年金黄地鼠视网膜节细胞存活的影响 被引量：6
10
作者 梁玉香 李海标 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期45-48,共4页
本研究应用荧光逆行示踪技术观察了Forskolin玻璃体内注射对视神经切断后视网膜节细胞存活的影响。结果表明：（1）正常视网膜节细胞平均密度为2113±120／mm2；（2）视神经切断5、7、14d后，视网膜节细胞平均密度分别下降至：1530&... 本研究应用荧光逆行示踪技术观察了Forskolin玻璃体内注射对视神经切断后视网膜节细胞存活的影响。结果表明：（1）正常视网膜节细胞平均密度为2113±120／mm2；（2）视神经切断5、7、14d后，视网膜节细胞平均密度分别下降至：1530±192／mm2、881±160／mm2和181±31／mm2；（3）给予DMSO／生理盐水的对照组在上述各时间组视网膜节细胞平均密度与单纯视神经切断组结果相似；（4）给予Forskolin的实验组在5、7、14d视网膜节细胞的平均密度分别为1863±131／mm2、1639±183／mm2和442±60／mm2，与视神经切断组和DMSO／生理盐水对照组相比，在各时间组均存在显著性差异（P＜0．05）。本研究提示．Forskolin有提高视神经切断后的视网膜节细胞存活的作用。 展开更多
关键词 forskolin 视神经切断 存活 视网膜节细胞
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Forskolin抗金黄地鼠视网膜节细胞凋亡作用与cAMP和JNK关系的研究 被引量：4
11
作者 梁玉香 李海标 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期230-234,T042,共6页
利用 Hoechst332 5 8荧光核染色和琼脂糖凝胶电泳、免疫印迹技术以及 Brown放射免疫法等实验手段 ,分别观察了forskolin对视网膜节细胞凋亡、视网膜细胞 phospho-JNK的表达以及 c AMP水平的影响。结果表明 :在近端切断金黄地鼠的视神经 ... 利用 Hoechst332 5 8荧光核染色和琼脂糖凝胶电泳、免疫印迹技术以及 Brown放射免疫法等实验手段 ,分别观察了forskolin对视网膜节细胞凋亡、视网膜细胞 phospho-JNK的表达以及 c AMP水平的影响。结果表明 :在近端切断金黄地鼠的视神经 ,视网膜 c AMP水平降低 ,phospho-JNK水平升高 ,视网膜节细胞发生凋亡 ;玻璃体内注射 forskolin可使 c AMP水平升高 ,phospho-JNK水平下降 ,凋亡的视网膜节细胞密度降低。提示 ,forskolin可能通过升高 c AMP水平而抑制 展开更多
关键词 forskolin JNK CAMP 细胞凋亡 视网膜节细胞 金黄地鼠 凋亡相关因子 神经元
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Forskolin对佛波醇酯类刺激的小鼠体外T淋巴细胞行为的影响 被引量：1
12
作者 宋兵 曾耀英 +4 位作者 黄秀艳 李林 杨志 滕菲 姚满林 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期177-182,186,共7页
目的分析Forskolin对佛波醇酯多克隆刺激剂(phorbol12,13-dibutyrate,PDB)联合离子霉素(ionomycin,Ion)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞体外增殖和周期的影响,在此基础上进一步研究Forskolin对单纯PDB刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞早期活化标志CD69... 目的分析Forskolin对佛波醇酯多克隆刺激剂(phorbol12,13-dibutyrate,PDB)联合离子霉素(ionomycin,Ion)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞体外增殖和周期的影响,在此基础上进一步研究Forskolin对单纯PDB刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞早期活化标志CD69分子和中期活化标志CD25分子的影响,从而阐明其作用机制。方法无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育48h后,运用羧基荧光素已酰已酸(CFDA-SE)染色技术和碘化丙锭(PI)染色技术结合流式细胞术、CELLQuest和ModFitLT软件,分别检测Forskolin对PDB+Ion刺激下小鼠CD3+T淋巴细胞增殖和周期的影响;与不同浓度的Forskolin孵育2h、10h,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术检测Forskolin对PDB诱导下的小鼠CD3+T淋巴细胞CD69分子和CD25分子表达的影响。结果Forskolin(10-7、10-6、10-5mol.L-1)均能明显抑制PDB+Ion刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞的增殖并将细胞阻滞在G0/G1期;同时也能明显抑制单纯PDB刺激下的CD3+T细胞早期和中期活化,且呈明显的量效关系。结论提示Forskolin在CD3+T细胞活化过程中信号转导的某个环节上有抑制作用,从而通过抑制T淋巴细胞的活化,发挥免疫抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。 展开更多
关键词 forskolin CD69 CD25 增殖 周期 流式细胞术
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牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin影响嗅鞘细胞增殖的量效关系 被引量：3
13
作者 杨博宇 王锋 王玮 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第40期7447-7452,共6页
背景:生长因子参与调节嗅鞘细胞增殖、分化及代谢功能,因此有望通过应用其合理的序贯刺激形式,达到细胞数量地大量扩增。目的:观察牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin对嗅鞘细胞增殖的影响及剂量-效应关系。方法:采用原... 背景:生长因子参与调节嗅鞘细胞增殖、分化及代谢功能,因此有望通过应用其合理的序贯刺激形式,达到细胞数量地大量扩增。目的:观察牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin对嗅鞘细胞增殖的影响及剂量-效应关系。方法:采用原代培养技术,从新生大鼠的嗅球分离培养嗅鞘细胞,并用差速贴壁+化学药物+胰酶快速消化法纯化培养嗅鞘细胞,添加牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin 3种促增殖因子及其组合。MTT法检测各组嗅鞘细胞生长的情况。根据NGFRp75抗体的免疫细胞化学染色统计嗅鞘细胞的纯度和计算嗅鞘细胞的增殖率。结果与结论:在嗅鞘细胞原代培养和纯化后,添加牛垂体提取物具有促进嗅鞘细胞增殖的效应,但未见典型的剂量-效应关系;添加碱性成纤维细胞生长因子具有促进嗅鞘细胞增殖的效应,且呈现典型的剂量-效应关系;添加Forskolin并不具有促进嗅鞘细胞增殖的效应。说明合理应用不同质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子与Forskolin进行联合刺激,能有效促进细胞的增殖。结果表明序贯的使用合适浓度的生长因子组合,将是有效促进嗅鞘细胞增殖的合理策略,有助于解决脊髓损伤治疗中种子细胞来源不足这一问题。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 牛垂体提取物 碱性成纤维细胞生长因子 forskolin 细胞增殖 纯度
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Forskolin对成骨样细胞蛋白激酶C及三磷酸肌醇的影响 被引量：2
14
作者 李平风 谭薇琦 +1 位作者 张建民 杜国光 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第4期432-435,共4页
Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（ＦＳＫ）是一种植物二萜类化合物，为腺苷酸环化酶的特异激活剂，实验发现：ＦＳＫ和作为参照的诱导分化剂维甲酸（ＲＡ）单独或联合应用均可升高胞浆蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性，并降低膜ＰＫＣ活性，ＦＳＫ可使表... Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（ＦＳＫ）是一种植物二萜类化合物，为腺苷酸环化酶的特异激活剂，实验发现：ＦＳＫ和作为参照的诱导分化剂维甲酸（ＲＡ）单独或联合应用均可升高胞浆蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性，并降低膜ＰＫＣ活性，ＦＳＫ可使表皮生长因子（ＥＧＦ）诱导的细胞内三磷酸肌醇（ＩＰ３－１，４，５）水平降低至对照组的４４．４％至６７％；ＦＳＫ与ＲＡ合用可显著降低成骨样细胞特征蛋白碱性磷酸酶（ＡＫＰ）的活性。以上结果表明，ＦＳＫ对成骨样细胞内磷脂酰肌醇信息传递体系有深刻影响，可能与其调节细胞的增殖分化有关。 展开更多
关键词 成骨样细胞 forskolin 蛋白激酸C 三磷酸肌醇
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Forskolin抑制成骨肉瘤细胞增殖的作用 被引量：2
15
作者 白秀英 孟琨 +1 位作者 李平风 杜国光 《海南医学院学报》 CAS 1997年第4期145-147,共3页
Forskolin系天然植物中提取到的二萜类化合物，为腺苷酸环化酶的特异激活剂。实验发现它能下调成骨肉瘤细胞的EGF受体，抑制酪氨酸蛋白激酶活性，抑制转化生长因子α（TGFα）的基因表达，抑制3H－TdR参入DNA以及抑制细胞周期的S期，这... Forskolin系天然植物中提取到的二萜类化合物，为腺苷酸环化酶的特异激活剂。实验发现它能下调成骨肉瘤细胞的EGF受体，抑制酪氨酸蛋白激酶活性，抑制转化生长因子α（TGFα）的基因表达，抑制3H－TdR参入DNA以及抑制细胞周期的S期，这均支持Forskolin对成骨肉瘤细胞具有抑制增殖的作用。 展开更多
关键词 forskolin 细胞增殖 成骨肉瘤细胞
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H-89和wortmannin对forskolin和IBMX促进受损视网膜节细胞再生作用的影响 被引量：1
16
作者 梁玉香 李海标 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期45-48,共4页
目的　探讨forskolin和IBMX促进受损视网膜节细胞 (RGCs)再生的作用机制。　方法　采用荧光逆行示踪标记术和自体坐骨神经移植术 ,研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H 89或 /和PI3 K特异抑制剂wortmannin玻璃体内注射对forskolin和IBMX促进成年... 目的　探讨forskolin和IBMX促进受损视网膜节细胞 (RGCs)再生的作用机制。　方法　采用荧光逆行示踪标记术和自体坐骨神经移植术 ,研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H 89或 /和PI3 K特异抑制剂wortmannin玻璃体内注射对forskolin和IBMX促进成年金黄地鼠受损RGCs再生的影响。结果　H 89和wortmannin均可部分抑制forskolin和IBMX对受损RGCs的促再生作用 ,wortmannin的抑制作用更大 ;两药联合应用 ,可完全抑制forskolin和IB MX对受损RGCs的促再生作用。　结论　forskolin和IBMX可能是通过PKA CREB和PI3 K 展开更多
关键词 再生 H-89 WORTMANNIN forskolin IBMX 视网膜节细胞 金黄地鼠
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Forskolin对1，25－二羟维生素D_3受体mRNA表达的调节及其生物学意义 被引量：3
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作者 宋亮年 孙琳琳 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第6期513-517,共5页
目的：研究腺苷酸环化酶激活剂ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（Ｆ）对１，２５－二羟维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及其可能的生物学意义。方法：以人原始巨核白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ）为模型，Ｖ... 目的：研究腺苷酸环化酶激活剂ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（Ｆ）对１，２５－二羟维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及其可能的生物学意义。方法：以人原始巨核白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ）为模型，ＶＤＲｍＲＮＡ的检测采用定量逆转录－聚合酶链反应；细胞增殖实验采用悬浮培养系统及甲基纤维素培养系统。结果：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的表达具有向上调节作用，且有明显的时间依赖性特点；Ｆ本身虽然对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖及分化过程无明显影响，但却可以显著地加强１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对该细胞系的作用，具体表现在：当Ｆ同时存在时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖过程和克隆形成率的抑制作用更为明显，对ＨＩＭｅｇ细胞分化过程的诱导作用亦更为显著；同时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞周期分布的影响也更加突出。结论：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ具有向上调节作用，并伴有１，２５（ＯＨ）２Ｄ３生物学效应的提高，说明下对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的向上调节作用具有生物学意义。 展开更多
关键词 二羟维生素D3 受体 白血病 MRNA forskolin
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Forskolin加强糖皮质激素对人骨肉瘤细胞系增殖分化的调节作用 被引量：2
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作者 宋亮年 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期17-20,共4页
以人骨肉瘤细胞系（ＨＯＳ－８６０３）为模型，首先研究了腺苷酸环化酶激活剂Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和地塞米松（Ｄｅｘ）对该细胞系增殖分化过程的影响。结果发现，Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ本身无明显作用，但可加强Ｄｅｘ对ＨＯＳ－８６０３... 以人骨肉瘤细胞系（ＨＯＳ－８６０３）为模型，首先研究了腺苷酸环化酶激活剂Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和地塞米松（Ｄｅｘ）对该细胞系增殖分化过程的影响。结果发现，Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ本身无明显作用，但可加强Ｄｅｘ对ＨＯＳ－８６０３细胞克隆增殖的抑制作用，并促进Ｄｅｘ对碱性磷酸酶活性的诱导。为进一步阐明Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ加强Ｄｅｘ对ＨＯＳ－８６０３细胞增殖分化调节作用的机制，进一步研究了其对糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用。证明Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ可使ＧＲ最大结合容量明显升高，而且具有时间依赖性特点，但亲和力无明显改变。结果表明：Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ加强糖皮质激素对ＨＯＳ－８６０３增殖分化调节作用是通过增量调节ＧＲ实现的。 展开更多
关键词 forskolin 糖皮质激素 肉瘤 骨骼肿瘤 细胞增殖
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条件培养基、Forskolin与bFGF对嗅鞘细胞增殖效应的研究 被引量：1
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作者 张鹏 陆政峰 +2 位作者 范志海 李柳炳 沈忆新 《临床医学工程》 2011年第12期1859-1860,共2页
目的研究对比多种不同增殖剂及其联合剂扩增原代嗅鞘细胞的效应。方法将纯化的嗅鞘细胞按照随机化原则分为六组分别行增殖剂干预:①空白对照组;②有血清条件培养基组;③Forskolin组;④bFGF组;⑤Forskolin+bFGF组;⑥有血清条件培养基+For... 目的研究对比多种不同增殖剂及其联合剂扩增原代嗅鞘细胞的效应。方法将纯化的嗅鞘细胞按照随机化原则分为六组分别行增殖剂干预:①空白对照组;②有血清条件培养基组;③Forskolin组;④bFGF组;⑤Forskolin+bFGF组;⑥有血清条件培养基+Forskolin+bFGF干预组。每组干预3d后应用免疫染色和BrdU掺入法全面评估各增殖剂及其联合试剂对嗅鞘细胞生长增殖的影响效果。结果三种增殖剂较空白对照组都可促进嗅鞘细胞活性(P<0.05),且其联合试剂均可明显促进嗅鞘细胞增殖(P<0.001)。结论三种增殖剂对嗅鞘细胞均有增殖效应,且其联合作用可以大幅提升嗅鞘细胞的数量,其叠加效果明显。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 条件培养液 forskolin 碱性成纤维生长因子
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三种不同环糊精对Forskolin包合作用的研究 被引量：2
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作者 程洪亮 李京京 陆兵 《解放军药学学报》 CAS 2008年第2期124-126,共3页
目的通过不同环糊精对Forskolin(FSK)包合作用的研究,有效提高FSK在水中的溶解度。方法使用水溶液法分别用磺丁酯-β-环糊精(SE-β-CD)、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)和二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)制备FSK的环糊精包合物,测定比较了包合... 目的通过不同环糊精对Forskolin(FSK)包合作用的研究,有效提高FSK在水中的溶解度。方法使用水溶液法分别用磺丁酯-β-环糊精(SE-β-CD)、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)和二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)制备FSK的环糊精包合物,测定比较了包合前后的溶解度。采用相溶解图法、有机溶剂提取法和差热分析法对包合物进行了验证。结果3种环糊精与FSK均能形成包合物,并增加了FSK在水中的溶解度,增溶能力依次为DM-β-CD>HP-β-CD>SE-β-CD。结论3种环糊精对难溶性药物FSK均具有包合作用,但增溶能力不同。 展开更多
关键词 forskolin 环糊精 包合物 溶解度
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