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尖孢镰刀菌亚麻专化型FolSwe1基因功能分析
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作者 冯欣茹 侯占铭 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第4期376-387,共12页
本文旨在对尖孢镰刀菌亚麻专化型FolSwe1基因进行功能分析。利用同源比对,通过PCR对FolSwe1基因及其侧翼序列进行扩增和测序,使用Split-Marker技术构建该基因缺失突变盒,使用聚乙二醇(PEG)介导转化野生型原生质体,获得了FolSwe1基因缺... 本文旨在对尖孢镰刀菌亚麻专化型FolSwe1基因进行功能分析。利用同源比对,通过PCR对FolSwe1基因及其侧翼序列进行扩增和测序,使用Split-Marker技术构建该基因缺失突变盒,使用聚乙二醇(PEG)介导转化野生型原生质体,获得了FolSwe1基因缺失突变株,对突变体表型和致病力进行测定。构建荧光载体pZESH1(pZWH1+EGFP+FolSwe1)对FolSwe1蛋白进行亚细胞定位。结果显示,FolSwe1基因编码区为3219 bp,含有一个内含子,长度为54 bp,所测序列包括编码区上游1704 bp,编码区下游为1694 bp。表型观察发现,敲除突变体的菌丝比野生型短小且密实,菌落生长速度较慢,特别显著的变化是缺失突变体不再产生孢子,致病力也明显下降。亚细胞定位显示FolSwe1蛋白在培养时间较长菌丝的细胞膜中有荧光信号。综上所述,FolSwe1基因主要调控尖孢镰刀菌亚麻专化型的孢子发生、菌丝营养生长和对亚麻的致病性。 展开更多
关键词 尖孢镰刀菌亚麻专化型 folswe1基因 Split-Marker技术 基因敲除
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