荧光探针Fluo-3/AM和FuraRed测量单细胞中比率钙 被引量：6

1

作者 马晓冬 朱晓亮 +5 位作者 赵清 张瑾 张飒 雷国华 黄行许 鲍永耀 《中国医学物理学杂志》 CSCD 1999年第3期180-182,共3页

应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜（laserscanningconfocalmicroscope，LSCM简称共焦显微镜）和钙离子指示剂Fluo－3／AM、FuraRed荧光探剂双标记技术，测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃，Fluo－3／AM浓度10μmol／L，... 应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜（laserscanningconfocalmicroscope，LSCM简称共焦显微镜）和钙离子指示剂Fluo－3／AM、FuraRed荧光探剂双标记技术，测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃，Fluo－3／AM浓度10μmol／L，FuraRed浓度10μmol／L的条件下，昆明小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获良好的标记效果。用比率探针测量细胞内Ca^2＋的动态变化，使Ca^2＋的定性定量测定不受染料浓度、细胞大小、照射光强度以及一定程度的光漂白和染料泄漏等因素的影响，提供了一种准确定性定量细胞内Ca^2＋的实时、动态、原位变化的新方法。 展开更多

关键词 激光扫描 共聚焦显微镜 比率钙 荧光探针

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采用Fluo-3 AM-ester探针研究桃不同组织的Ca^2＋信号分布 被引量：2

2

作者 鲁振华 王志强 +3 位作者 彭斌 牛良 崔国朝 刘淑娥 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期915-917,I0001,共4页

钙作为植物最重要的矿质元素之一,在植物生理和生化活动中起重要作用。采用激光扫描共聚焦显微镜,以Fluo-3 AM-ester为荧光探针研究了桃果肉和叶柄组织中Ca2+的分布,结果表明Fluo-3 AM-ester可作为荧光探针对桃不同组织中游离的Ca2+信... 钙作为植物最重要的矿质元素之一,在植物生理和生化活动中起重要作用。采用激光扫描共聚焦显微镜,以Fluo-3 AM-ester为荧光探针研究了桃果肉和叶柄组织中Ca2+的分布,结果表明Fluo-3 AM-ester可作为荧光探针对桃不同组织中游离的Ca2+信号强度和分布特征进行分析。不同的物镜观察(10×和20×)下,Ca2+荧光信号相对强度差异不大;在叶柄中Ca2+荧光信号主要分布于维管束,在果实中多分布于细胞壁;但叶柄中荧光信号分布明显高于果肉组织,这与钙在不同组织中的功能有关。 展开更多

关键词 桃 Ca2+信号 激光扫描共聚焦显微镜 fluo-3AM-ester

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激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM检测细胞内游离钙 被引量：3

3

作者 霍霞 鲍永耀 +2 位作者 黄辉 黄行许 朴英杰 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期35-37,共3页

利用细胞培养技术，Ｃａ２＋敏感荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ标记细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）的变化。结果显示细菌脂多糖（ＬＰＳ）可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ升高... 利用细胞培养技术，Ｃａ２＋敏感荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ标记细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）的变化。结果显示细菌脂多糖（ＬＰＳ）可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ升高，ＬＰＳ的作用可被维拉帕米部分抑制。本实验表明激光扫描共聚焦显微镜结合Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ能准确迅速地检测单个或多个贴壁粘附细胞胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ的动态变化，并同步观察细胞的形态及其荧光分布情况。 展开更多

关键词 激光扫描 共聚焦显微镜 钙 巨噬细胞 显微镜

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激光扫描共聚焦显微镜检测Fluo-3 AM负载大鼠心肌微血管内皮细胞最佳浓度和时间的探讨

4

作者 冯波 董虹 +3 位作者 张涛 胡格 房克凤 穆祥 《中国农学通报》 CSCD 2013年第17期80-84,共5页

为了探讨Ca2+荧光探针Fluo-3 AM对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM分别稀释成1、2、3、4、5μM/L,每一浓度的探针分别装载细胞5、10、15、20min,应用... 为了探讨Ca2+荧光探针Fluo-3 AM对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM分别稀释成1、2、3、4、5μM/L,每一浓度的探针分别装载细胞5、10、15、20min,应用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内荧光信号的强度、位置、装载探针后细胞的形态来观察装载效果。结果表明:1～3μM/L的Fluo-3 AM负载5～20min均不出现荧光信号;4μM/L的Fluo-3 AM负载5～10min时即出现荧光信号;5μM/L的Fluo-3 AM孵育细胞15min后出现清晰且分布均匀的荧光信号。Fluo-3 AM对贴壁生长的RMMECs负载效果主要受探针浓度和负载时间的影响。 展开更多

关键词 激光扫描共聚焦显微镜 fluo-3AM 大鼠 心肌微血管内皮细胞 钙离子

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用Fluo3-AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca^(2+)浓度及药物对患者胞内Ca^(2+)浓度的影响 被引量：6

5

作者 章立 李新荣 +1 位作者 徐蘅 张鉴棠 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期451-455,共5页

用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 +浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 +的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 +浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 +的刺激表... 用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 +浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 +的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 +浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 +的刺激表明 ,病人对外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内 Ca2 +浓度升高 ,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道 ,也能促使钙从钙池中释放。上述研究也表明 Fluo- 3是有效的研究胞内 Ca2 +变化的荧光探针。 2型糖尿病的发生可能与 Ca2 +浓度升高有关 。 展开更多

关键词 细胞内游离钙 糖尿病 淋巴细胞 NIDDM

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2,3,7,8-TCDD对培养乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度影响的研究 被引量：3

6

作者 孙黎黎 常青 +2 位作者 梁志清 余资江 糜建红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第20期2048-2050,共3页

目的测定培养SD大鼠乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i,观察2,3,7,8四氯二苯并二噁英(2,3,7,8tetrachlorodibenzopdioxin,以下略为TCDD)对心肌细胞[Ca2+]i的影响。方法将实验动物分为0.05、0.5、5、10μg/kg4个染毒组,采用Fluo3/AM... 目的测定培养SD大鼠乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i,观察2,3,7,8四氯二苯并二噁英(2,3,7,8tetrachlorodibenzopdioxin,以下略为TCDD)对心肌细胞[Ca2+]i的影响。方法将实验动物分为0.05、0.5、5、10μg/kg4个染毒组,采用Fluo3/AM同时加入PluronicF127作为细胞内游离钙离子的荧光探针,负载培养的心肌细胞,应用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)技术检测空白组及染毒组乳鼠心肌细胞[Ca2+]i。结果静息时,心肌细胞[Ca2+]i为(77.68±12.00)nmol/L。染毒组心肌细胞的[Ca2+]i显示不同程度的升高,且呈剂量依赖性。结论应用Fluo3/AM和PluronicF127结合CLSM技术可以精确的反映细胞内游离钙离子浓度,TCDD可能通过某种机制增加心肌细胞[Ca2+]i,从而对乳鼠心脏功能产生一定损伤。 展开更多

关键词 TCDD 心肌细胞 钙离子 fluo-3/AM

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大鼠胃壁细胞GnRH受体的定位及GnRH类似物对壁细胞内钙的影响 被引量：1

7

作者 陈蕾 黄威权 +2 位作者 孙绪德 吕宝真 蒲若蕾 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期79-84,共6页

目的　观察促性腺激素释放激素 (gonadotropin releasinghormone,GnRH)受体在培养的大鼠胃粘膜壁细胞中的定位 ,并探讨GnRH类似物阿拉瑞林 (alarelin)对壁细胞内游离钙动员的机制。　方法　采用免疫组织化学和原位杂交技术 ;应用Ca2 + ... 目的　观察促性腺激素释放激素 (gonadotropin releasinghormone,GnRH)受体在培养的大鼠胃粘膜壁细胞中的定位 ,并探讨GnRH类似物阿拉瑞林 (alarelin)对壁细胞内游离钙动员的机制。　方法　采用免疫组织化学和原位杂交技术 ;应用Ca2 + 指示剂Fluo 3 AM作为细胞内钙离子的荧光探针 ,对负载培养的胃壁细胞 ,应用激光共聚焦显微镜技术检测单个细胞内钙荧光强度的变化。　结果　大鼠胃壁细胞呈GnRH受体免疫反应阳性 ,阳性物质位于细胞质 ,细胞核为阴性 ;同样壁细胞内可检测到GnRH受体mRNA杂交信号 ,阳性物质位于细胞质 ,细胞核为阴性 ;胞内Ca2 + 浓度变化为 :1 在Hank液中 ,GnRH类似物浓度为 10 - 8、10 - 7、10 - 6 mol L时 ,胃壁细胞内Ca2 + 浓度逐渐升高 ,其峰高 (峰值减去静息值 )分别为 7 1± 1 4、12 1± 1 7、16 8± 2 2。其达峰时间也逐渐增快 ,分别为 34 2± 6 4s、18 9± 1 2s、10 4± 2 3s。相邻两组间其峰高及达峰时间均存在显著性差异 (P <0 0 5 ) ,且呈明显剂量依赖性。 2 在D Hank液 (去除外钙 )中 ,阿拉瑞林可轻度短暂升高胞内Ca2 + ;用内罗啶孵育后再加入阿拉瑞林也可轻度短暂升高胞内Ca2 + ,二者无显著性差异。 3 当用拉西地平孵育后再加入阿拉瑞林 ,可明显抑制胞内Ca2 + 的增加? 展开更多

关键词 GNRH类似物 GNRH受体 胃壁细胞 钙 fluo-3-am 免疫组织化学 原位杂交 激光共聚焦显微镜

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脑热清对小鼠的腹腔巨噬细胞内游离钙及活性氧的作用

8

作者 岳晓莉 王芳 +2 位作者 李萍 张颖 蒋玉凤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1642-1642,共1页

目的:实时监测脑热清口服液(NRQ)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧(ROS)及游离钙([Ca2+]i)的作用.方法:取小鼠腹腔巨噬细胞,原代培养24小时,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内ROS及[Ca2+]i,并用EDTA和维拉帕米螯... 目的:实时监测脑热清口服液(NRQ)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧(ROS)及游离钙([Ca2+]i)的作用.方法:取小鼠腹腔巨噬细胞,原代培养24小时,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内ROS及[Ca2+]i,并用EDTA和维拉帕米螯合细胞外钙,阻断细胞膜钙离子通道,通过激光共聚焦显微系统动态观察NRQ的作用. 展开更多

关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 细胞内游离钙 细胞内活性氧 脑热清口服液 fluo-3-am [CA^2+]I 细胞内ROS 二氯荧光素 钙离子通道

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清开灵对小鼠腹腔巨噬细胞内游离钙及活性氧的作用

9

作者 王芳 岳晓莉 +2 位作者 李萍 张颖 蒋玉凤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1637-1637,共1页

目的:动态观察清开灵(QKL)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧及游离钙的作用.方法:原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内活性氧及游离钙,通过激光共聚焦系统动态观察QKL的作用.

关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 细胞内游离钙 细胞内活性氧 清开灵 fluo-3-am 动态观察 二氯荧光素 激光共聚焦 原代培养

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GnRH类似物阿拉瑞林对培养的胃平滑肌细胞内钙离子浓度变化的影响 被引量：3

10

作者 陈蕾 黄威权 +2 位作者 刘丽宏 吕葆真 蒲若蕾 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z1期112-114,共4页

目的 研究ＧｎＲＨ类似物（阿拉瑞林）诱导胃平滑肌细胞内钙动员的机制。方法 采用共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果 （１）在Ｈａｎｋｓ液中，ＧｎＲＨ类似物浓度为１０７、１０６、１０－５ｍｏｌ－Ｌ．－１时，胃平滑肌... 目的 研究ＧｎＲＨ类似物（阿拉瑞林）诱导胃平滑肌细胞内钙动员的机制。方法 采用共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果 （１）在Ｈａｎｋｓ液中，ＧｎＲＨ类似物浓度为１０７、１０６、１０－５ｍｏｌ－Ｌ．－１时，胃平滑肌细胞内Ｃａ２＋逐渐升高，其峰高（ｐｅａｋ－ｒｅｓｔｉｎｇ）分别为 ６．００ ± ０．５０、９．２３± ０．６２、１８．９７± ２．４２，其达峰时间分别为 ４２．３７± １．６５、５４．９３± ３．２２、１０５．６３ ± ３．９２ｓ，井呈时间和剂量依赖性；（２）当阿拉瑞林浓度为１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１时，胞内Ｃａ２＋略有升高，与１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１相比（Ｐ＜０．０１）；（３）在有外钙和无外钙时，阿拉瑞林对胞内Ｃａ２＋的升高亦有显著差异（Ｐ＜０．０１）；（４）在无外钙并加入内罗陡孵育后，ＧｎＲＨ引起的胞内 Ｃａ２＋轻度升高，但与 Ｄ－Ｈａｎｋｓ组相比无显著性差异（Ｐ＜０．０５）；（５）在 Ｈａｎｋｓ液中，用拉西地平孵育后，再加入阿拉瑞林，其胞内Ｃａ２＋仍可升高，井有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论Ｃａ２＋参与了ＧｎＲＨ类似物阿拉瑞林对胃平滑肌细胞作用的细胞内分子转导过程。细胞内Ｃａ２＋的增加既源于内钙的释放又源于外? 展开更多

关键词 GNRH类似物 胃平滑肌 钙 fluo-3-am 共聚焦显微 镜检查

全文增补中

低温处理对冬、春小麦细胞Ca^(2+)时空变化的影响 被引量：17

11

作者 刘炜 孙德兰 +4 位作者 王红 简令成 尚忠林 王学臣 赵可夫 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2001年第12期1218-1223,共6页

用Fluo 3/AM染色 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)方法 ,对静息态及连续降温条件下不同抗寒性小麦(TriticumaestivumL .)叶肉细胞原生质体 [Ca2 + ]cyt (thefreeCa2 + concentrationinthecytoplasm)的时空变化进行了比较。结果表明 ,... 用Fluo 3/AM染色 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)方法 ,对静息态及连续降温条件下不同抗寒性小麦(TriticumaestivumL .)叶肉细胞原生质体 [Ca2 + ]cyt (thefreeCa2 + concentrationinthecytoplasm)的时空变化进行了比较。结果表明 ,静息态下小麦原生质体整体荧光强度基本不变 ,暗示 [Ca2 + ]cyt能维持在一稳定水平 ;同时 ,不同品种小麦间也显示了 [Ca2 + ]cyt水平荧光强度的不同。温度由 15℃连续降至约 2℃时 ,抗寒冬小麦 [Ca2 + ]cyt出现升高后的回复 ,2℃之后逐渐升高 ;冷敏感春小麦则无此回复过程 ,而是一直升高到最大值。推测这一不同的动态变化最终决定了植物在低温下产生冷适应的不同能力。这进一步为“Ca2 + 是低温下生理信号的传导者” 展开更多

关键词 fluo-3/AM 小麦原生质体 静息态 CA^2+ 时空变化 钙

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小檗碱对豚鼠心室肌细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响 被引量：21

12

作者 董德利 孙建平 +4 位作者 罗大力 陈庆文 王枫 何树庄 杨宝峰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期128-130,共3页

研究小檗碱对豚鼠心肌细胞胞浆 [Ca2 + ]i 的影响 .用酶解法分离单个豚鼠心肌细胞 ,Fluo- 3/AM标记胞浆内游离钙离子 ,激光扫描共聚焦显微镜实时测定胞浆 [Ca2 + ]i变化 .结果 ,小檗碱 1 -1 0 0 μmol· L-1对正常台氏液中静息状态... 研究小檗碱对豚鼠心肌细胞胞浆 [Ca2 + ]i 的影响 .用酶解法分离单个豚鼠心肌细胞 ,Fluo- 3/AM标记胞浆内游离钙离子 ,激光扫描共聚焦显微镜实时测定胞浆 [Ca2 + ]i变化 .结果 ,小檗碱 1 -1 0 0 μmol· L-1对正常台氏液中静息状态细胞胞浆[Ca2 + ]i 无明显影响 ;小檗碱 1 μmol·L-1对 KCl30mmol·L-1引起的细胞外钙内流有抑制作用 ( P<0 .0 1 ) ,而小檗碱 1 0 0 μmol·L-1对细胞内钙库释放有强烈激动作用 ( P<0 .0 1 ) .结果提示在豚鼠心肌细胞上低浓度小檗碱即能抑制电压依赖性钙通道 ,而高浓度时又能激动细胞内钙库释放 . 展开更多

关键词 小檗碱 心肌细胞胞浆 钙离子

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小檗胺对ROCC介导的血管平滑肌细胞内游离钙的影响 被引量：14

13

作者 赵艳玲 李柏岩 +2 位作者 乔国芬 周虹 李文汉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期450-452,共3页

目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的... 目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的条件下 ,BA 30 μmol·L-1不影响静息[Ca2 +]i;但对去甲肾上腺素 (NE) 30mmol·L-1、5 羟色胺 (5 HT) 1μmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高有明显的抑制作用。在无胞外钙时 ,对咖啡因 40mmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高没有作用。结论　BA对ROCC激活后的外钙内流有明显的抑制作用 ,对内钙释放没有影响。 展开更多

关键词 小檗胺 血管平滑肌细胞 钙 ROCC

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氟哌啶醇季铵盐衍生物对血管平滑肌细胞钙离子的影响 被引量：32

14

作者 韦日生 石刚刚 张映娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期54-56,共3页

目的　研究氟哌啶醇季铵盐衍生物 (F2 )对大鼠胸主动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度的影响。方法　用Ca2 +荧光染料Fluo 3 AM负载细胞 ,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙的变化。结果　在含氯化钙 (1 2 6mmol·L-1)的细胞... 目的　研究氟哌啶醇季铵盐衍生物 (F2 )对大鼠胸主动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度的影响。方法　用Ca2 +荧光染料Fluo 3 AM负载细胞 ,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙的变化。结果　在含氯化钙 (1 2 6mmol·L-1)的细胞外液中 ,30mmol·L-1KCl使细胞内钙荧光强度迅速增强 ,4种浓度F2 (0 1、1、10、10 0 μmol·L-1)作用 3min时 ,使KCl诱导细胞内钙荧光强度分别降至 6 4%± 9% ,(n=16 ,P <0 0 5 )、16 %± 5 % ,(n =2 0 ,P <0 0 1)、0 6 %±0 8% ,(n =2 0 ,P <0 0 1)、0 1%± 0 3 % ,(n =15 ,P <0 0 1) ,呈量效依赖关系。结论　F2 展开更多

关键词 氟哌啶醇委铵盐 血管平滑肌细胞 激光扫描共聚焦显微镜 钙离子

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西红花苷对培养的牛内皮细胞内钙的调节作用 被引量：12

15

作者 绪广林 钱之玉 任萱 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期445-447,共3页

目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺（5-HT）、组胺（His）、过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含... 目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺（5-HT）、组胺（His）、过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含钙的Hank’s液中,5-经色胺、组胺、过氧化氢能明显升高静息状态的细胞内钙,增幅分别为280％、320％、285％。西红花苷1、10μmol/L对5-羟色胺、组胺、过氧化氢引起的钙增高有显著的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。0.1μmol/L西红花苷对细胞内钙升高无显著影响。结论 西红花苷抗动脉粥样硬化、高血压及炎症作用可能与其内皮细胞保护作用有关。 展开更多

关键词 西红花苷 fluo-3/AM 激光共聚焦扫描显微镜 内皮细胞 细胞内钙 心血管病

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雌激素对大鼠心肌细胞钙的调控作用研究 被引量：6

16

作者 高瞻 朱妙章 +5 位作者 周士胜 谢安 郭海涛 吕顺燕 裴建明 马新亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期272-274,共3页

目的　观察雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。方法　应用膜片钳全细胞记录方法观察L型钙通道电流 (ICa .L) ,共聚焦显微镜系统分析细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)的变化。结果　应用 10 μmol·L-1和 30 μmol·L-1的 17β Est... 目的　观察雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。方法　应用膜片钳全细胞记录方法观察L型钙通道电流 (ICa .L) ,共聚焦显微镜系统分析细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)的变化。结果　应用 10 μmol·L-1和 30 μmol·L-1的 17β Estradiol,分别使ICa .L 抑制到正常的 48 1%± 4 5 %and2 9 3%± 5 2 % (n =5 ,P <0 0 1)。 10 μmol·L-1的 17β Estradiol可升高静息的培养心肌细胞 [Ca2 + ]i,荧光强度 (FI)值由 5 4 2± 13 6增加到 86 5± 15 3(n =6 ,P <0 0 5 ) ;而对具有自发收缩的心肌细胞钙瞬变幅度有明显的抑制作用 ,由给药前的 18 5± 4 3减小到 11 4± 3 9(n =6 ,P <0 0 5 )。17β Estradiol可剂量依赖性地抑制ICa.L。结论　L型钙通道等多种机制参与雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。 展开更多

关键词 雌激素 心肌细胞钙 离子通道 共聚焦显微镜 细胞培养 钙转运

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西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响(英文) 被引量：9

17

作者 何书英 钱之玉 唐富天 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期778-781,共4页

目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10～8,1×10～7,1... 目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10～8,1×10～7,1×10～6mol·L-1)均能明显抑制1×10～2mol·L-1H2O2引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1％,57.1％和74.3％(P<0.01),无钙条件下分别为26.2％,32.1％和50.0％(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷(1×10-8,1×10～7,1×10-6mol·L-1)能抑制70 mmol·L-1 CHCl3导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8％,27.8％和50.0％(P<0.01)。结论 西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。 展开更多

关键词 西红花苷 激光共聚焦显微镜 平滑肌细胞 fluo-3/AM 钙离子

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5-羟色胺对培养胃底平滑肌细胞内游离钙动员的影响 被引量：10

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作者 刘丽宏 梅其炳 +3 位作者 陈蕾 贾敏 招明高 赵德化 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第10期891-893,共3页

目的　研究 5 - HT诱导胃底平滑肌细胞内钙动员的机制 .方法　采用 Ca2 +指示剂 Fluo- 3/ AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的胃底平滑肌细胞 ,共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化 .结果　基础状态下 SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (... 目的　研究 5 - HT诱导胃底平滑肌细胞内钙动员的机制 .方法　采用 Ca2 +指示剂 Fluo- 3/ AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的胃底平滑肌细胞 ,共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化 .结果　基础状态下 SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (FI)为 2 6 4± 15 ,5 - HT 10μmol· L- 1 使荧光强度的变化 ΔFI为 16 .5± 2 .6 ;细胞外无钙时 ,5 - HT升高[Ca2 + ]作用被减弱 ,但除去细胞外钙 ,并使用内罗啶 (ryan-odine)孵育后 ,5 - HT 不再引起荧光强度的变化 ;10μmol· L- 1 米安舍林 (mianserin)可部分拮抗 5 - HT升高[Ca2 + ]i 的作用 ,赛更定 (cyprohetadine)不能抑制 5 - HT升高的胞内钙 ;Mn92 0 2和拉西地平 (lacidipine)均能完全抑制 5 -HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 .结论　 5 - HT可通过促进外钙内流及钙池 (SR)释放使 [Ca2 + ]i 升高 ;在胃底平滑肌 5 - HT升高胞内钙部分通过 5 - HT2 受体 ,而不是通过 5 - HT1 C受体 ;5 -羟色胺通过 L型钙通道促外钙内流 ;二氢吡啶类钙拮抗剂能通过阻滞 L 型钙通道 ,而完全抑制 5 - 展开更多

关键词 血清素 平滑肌细胞内 游离钙 显微镜检查 共焦

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用激光扫描共聚焦显微镜观察仙人掌提取物镇痛作用对小鼠脑细胞内钙离子的影响 被引量：5

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作者 韦国锋 程金生 +3 位作者 徐群清 黄祖良 莫少泽 何有成 《应用激光》 CSCD 北大核心 2006年第6期460-461,448,共3页

根据荧光探针FLUO—3/AM能与活细胞内[C_a^(2+)]特异性结合后发出荧光的特性,将20只小白鼠随机分成给药组和对照组,给药组动物腹腔注射仙人掌(Opuntia Ailleii Haw)提取物使其产生镇痛作用,用FLUO—3/AM荧光探针对两组动物的脑细胞进行... 根据荧光探针FLUO—3/AM能与活细胞内[C_a^(2+)]特异性结合后发出荧光的特性,将20只小白鼠随机分成给药组和对照组,给药组动物腹腔注射仙人掌(Opuntia Ailleii Haw)提取物使其产生镇痛作用,用FLUO—3/AM荧光探针对两组动物的脑细胞进行染色,利用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术分别对两组小鼠的脑细胞内[C_a^(2+)]的变化进行了观察研究,并用图像分析技术进行处理,进一步探讨仙人掌提取物镇痛作用的机制,实验结果表明：仙人掌提取物镇痛作用时,小鼠脑细胞内[C_a^(2+)]的平均荧光像素明显低于对照组(p＜0．001)。这说明仙人掌提取物能够降低小鼠脑细胞内[C_a^(2+)],证实了仙人掌提取物的镇痛机理与钙离子有关。 展开更多

关键词 激光扫描共聚焦显微镜 仙人掌提取物 镇痛作用 fluo-3/AM 脑细胞 钙离子

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大鼠胃底平滑肌细胞5-HT受体的信号转导通路的研究 被引量：3

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作者 刘丽宏 梅其炳 +2 位作者 张峰 李晨 赵德化 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期412-415,共4页

目的　以 5 HT引起胞内Ca2 + 变化为指标 ,研究大鼠胃底平滑肌细胞 5 HT受体的信号转导机制。方法　采用Ca2 + 指示剂Fluo - 3/AM负载培养的胃底平滑肌细胞 (SF SMC) ,共聚焦显微术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果　基础状态下SFSMC... 目的　以 5 HT引起胞内Ca2 + 变化为指标 ,研究大鼠胃底平滑肌细胞 5 HT受体的信号转导机制。方法　采用Ca2 + 指示剂Fluo - 3/AM负载培养的胃底平滑肌细胞 (SF SMC) ,共聚焦显微术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果　基础状态下SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (fluorescenceintensi ty ,FI)为 2 6 4± 1 5 ,5 HT 10 μmol·L-1使荧光强度缓慢升高 ;这一作用与细胞外钙内流和内钙释放有关 ;10 μmol·L-1米安舍林 (mianserin)可部分拮抗 5 HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 ,钙拮抗剂拉西地平 (lacidipine)、G蛋白拮抗剂NEM均能完全抑制 5 HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 ;5 HT引起 [Ca2 + ]i的升高被PLC抑制剂部分地取消 ;PKC激动剂拮抗了 5 HT引起的钙动员 ,而PKC特异性抑制剂D 鞘氨醇取消了这一抑制作用。结论　 5 HT部分通过激动了胃底平滑肌细胞的G 蛋白偶联的 5 HT2B受体引起细胞去极化 ,从而激发L型钙通道使外Ca2 + 内流 ,并促进SR上的ryanodine受体的开放 ,引起 [Ca2 + ]i 升高。而这一升高 [Ca2 + ]i 展开更多

关键词 大鼠 胃底平滑肌细胞 5-HT 受体 信号转导通路 研究

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