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应用Ca^(2+)荧光探针fluo-3和fluo-4测定H_2O_2诱导的A549细胞凋亡过程中的[Ca^(2+)]_i变化 被引量:7
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作者 张四洋 李春艳 +2 位作者 高建 邱雪杉 崔泽实 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期197-202,共6页
背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡... 背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用,实时测定胞浆Ca2+浓度([Ca2+]i),探讨[Ca2+]i与细胞凋亡的关系,并比较两种Ca2+探针在荧光强度及[Ca2+]i测定值方面的差异。方法采用Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4负载细胞,1 h后用不同浓度的H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果在相同的探针浓度、负载时间和相同的图像采集参数的条件下,选定细胞内fluo-4平均荧光强度高于fluo-3。50 mM H2O2刺激后,A549细胞胞浆内[Ca2+]i迅速升高,通过公式计算发现采用fluo-3探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是112.2 nM-1,069.6 nM,采用fluo-4探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是7.6nM-505.4 nM。同时发现经H2O2刺激后,凋亡细胞百分比明显增加(P<0.01)。结论 H2O2促进A549细胞内Ca2+释放,诱导细胞凋亡。Ca2+探针fluo-4可能更适合于监测含量较低的细胞中[Ca2+]i变化。 展开更多
关键词 fluo-3 fluo-4 CA^2+ H2O2 细胞凋亡
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Ca^(2+)荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3测定H_2O_2刺激的A549细胞中Ca^(2+)浓度变化 被引量:2
2
作者 张四洋 周末 +3 位作者 高建 于淼 邱雪杉 崔泽实 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第7期1497-1501,共5页
目的:本研究旨在观察Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3在H2O2刺激的A549细胞中的应用,实时测定细胞质Ca2+浓度([Ca2+]i),并比较两种Ca2+探针在荧光曲线及[Ca2+]i测定值等方面的差异。方法:采用Ca2+荧光蛋白探针Cameleon YC... 目的:本研究旨在观察Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3在H2O2刺激的A549细胞中的应用,实时测定细胞质Ca2+浓度([Ca2+]i),并比较两种Ca2+探针在荧光曲线及[Ca2+]i测定值等方面的差异。方法:采用Ca2+荧光蛋白探针Cameleon YC3.6转染A549细胞,24h后用50mmol/L H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用Ca2+荧光染料探针fluo-3负载细胞,1h后用50mmol/L H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果:采用Cameleon探针转染的细胞中,反映[Ca2+]i变化的R值曲线迅速升高后逐渐降至刺激前水平,通过公式计算发现[Ca2+]i变化范围是33.1-596.1 nmol/L。采用fluo-3探针负载的细胞中,反映[Ca2+]i变化的荧光强度F值曲线逐渐升高至稳定,通过公式计算得到[Ca2+]i变化范围是131.8-695.6 nmol/L。同时发现经H2O2刺激后,凋亡细胞百分比显著增加(P<0.01)。结论:Ca2+荧光蛋白探针Cameleon YC3.6和荧光染料探针fluo-3均检测到H2O2诱导的细胞内[Ca2+]i变化,Cameleon YC3.6可能更灵敏地反映快速变化的钙信号。 展开更多
关键词 CAMELEON YC3 6 fluo-3 H2O2 CA2+ 细胞凋亡
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采用Fluo-3 AM-ester探针研究桃不同组织的Ca^2+信号分布 被引量:2
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作者 鲁振华 王志强 +3 位作者 彭斌 牛良 崔国朝 刘淑娥 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期915-917,I0001,共4页
钙作为植物最重要的矿质元素之一,在植物生理和生化活动中起重要作用。采用激光扫描共聚焦显微镜,以Fluo-3 AM-ester为荧光探针研究了桃果肉和叶柄组织中Ca2+的分布,结果表明Fluo-3 AM-ester可作为荧光探针对桃不同组织中游离的Ca2+信... 钙作为植物最重要的矿质元素之一,在植物生理和生化活动中起重要作用。采用激光扫描共聚焦显微镜,以Fluo-3 AM-ester为荧光探针研究了桃果肉和叶柄组织中Ca2+的分布,结果表明Fluo-3 AM-ester可作为荧光探针对桃不同组织中游离的Ca2+信号强度和分布特征进行分析。不同的物镜观察(10×和20×)下,Ca2+荧光信号相对强度差异不大;在叶柄中Ca2+荧光信号主要分布于维管束,在果实中多分布于细胞壁;但叶柄中荧光信号分布明显高于果肉组织,这与钙在不同组织中的功能有关。 展开更多
关键词 Ca2+信号 激光扫描共聚焦显微镜 fluo-3AM-ester
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利用荧光探针Fluo-4检测胸腺细胞内钙离子浓度变化 被引量:5
4
作者 于力方 廖杰 张国庆 《标记免疫分析与临床》 CAS 2005年第3期161-163,共3页
利用荧光显微数码成像系统测量荧光探针Fluo-4荧光强度的改变,建立动态检测细胞内钙离子浓度的方法。用荧光探针Fluo-4/AM标记原代培养小鼠胸腺细胞,以KCL刺激胸腺细胞去极化,并打开细胞膜上电压依赖性钙通道,细胞内荧光强度会发生改变... 利用荧光显微数码成像系统测量荧光探针Fluo-4荧光强度的改变,建立动态检测细胞内钙离子浓度的方法。用荧光探针Fluo-4/AM标记原代培养小鼠胸腺细胞,以KCL刺激胸腺细胞去极化,并打开细胞膜上电压依赖性钙通道,细胞内荧光强度会发生改变。利用荧光显微数码成像系统动态监测Fluo-4荧光强度的改变可分析计算钙离子浓度。本方法灵敏度高,能实时监测细胞内钙离子浓度的变化。 展开更多
关键词 荧光探针fluo-4 荧光显微镜 钙离子
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激光扫描共聚焦显微镜检测Fluo-3 AM负载大鼠心肌微血管内皮细胞最佳浓度和时间的探讨
5
作者 冯波 董虹 +3 位作者 张涛 胡格 房克凤 穆祥 《中国农学通报》 CSCD 2013年第17期80-84,共5页
为了探讨Ca2+荧光探针Fluo-3 AM对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM分别稀释成1、2、3、4、5μM/L,每一浓度的探针分别装载细胞5、10、15、20min,应用... 为了探讨Ca2+荧光探针Fluo-3 AM对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM分别稀释成1、2、3、4、5μM/L,每一浓度的探针分别装载细胞5、10、15、20min,应用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内荧光信号的强度、位置、装载探针后细胞的形态来观察装载效果。结果表明:1~3μM/L的Fluo-3 AM负载5~20min均不出现荧光信号;4μM/L的Fluo-3 AM负载5~10min时即出现荧光信号;5μM/L的Fluo-3 AM孵育细胞15min后出现清晰且分布均匀的荧光信号。Fluo-3 AM对贴壁生长的RMMECs负载效果主要受探针浓度和负载时间的影响。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 fluo-3AM 大鼠 心肌微血管内皮细胞 钙离子
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荧光探针Fluo-3/AM和FuraRed测量单细胞中比率钙 被引量:6
6
作者 马晓冬 朱晓亮 +5 位作者 赵清 张瑾 张飒 雷国华 黄行许 鲍永耀 《中国医学物理学杂志》 CSCD 1999年第3期180-182,共3页
应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM简称共焦显微镜)和钙离子指示剂Fluo-3/AM、FuraRed荧光探剂双标记技术,测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃,Fluo-3/AM浓度10μmol/L,... 应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM简称共焦显微镜)和钙离子指示剂Fluo-3/AM、FuraRed荧光探剂双标记技术,测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃,Fluo-3/AM浓度10μmol/L,FuraRed浓度10μmol/L的条件下,昆明小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获良好的标记效果。用比率探针测量细胞内Ca^2+的动态变化,使Ca^2+的定性定量测定不受染料浓度、细胞大小、照射光强度以及一定程度的光漂白和染料泄漏等因素的影响,提供了一种准确定性定量细胞内Ca^2+的实时、动态、原位变化的新方法。 展开更多
关键词 激光扫描 共聚焦显微镜 比率钙 荧光探针
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Fluo-3检测细胞内钙离子的条件优化 被引量:2
7
作者 尹琪 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期927-928,共2页
目的:优化用于检测细胞内钙离子的Fluo-3浓度条件和羧苯磺胺浓度条件,以得到最适的检测用浓度组合。方法:应用析因实验设计方法,选择32种不同的Fluo-3和羧苯磺胺浓度组合孵育CHO-K1细胞,通过FlexStation检测平台检测细胞内的钙离子浓度... 目的:优化用于检测细胞内钙离子的Fluo-3浓度条件和羧苯磺胺浓度条件,以得到最适的检测用浓度组合。方法:应用析因实验设计方法,选择32种不同的Fluo-3和羧苯磺胺浓度组合孵育CHO-K1细胞,通过FlexStation检测平台检测细胞内的钙离子浓度。结果与结论:检测信号随着Fluo-3浓度的升高而增强,同时随着羧苯磺胺浓度的升高而减弱。4μmol/L的Fluo-3和1mmol/L的羧苯磺胺浓度组合是最适用的检测条件。 展开更多
关键词 fluo-3 羧苯磺胺 钙离子
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激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM检测细胞内游离钙 被引量:3
8
作者 霍霞 鲍永耀 +2 位作者 黄辉 黄行许 朴英杰 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期35-37,共3页
利用细胞培养技术,Ca2+敏感荧光探针Fluo-3/AM标记细胞,激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度(〔Ca2+〕i)的变化。结果显示细菌脂多糖(LPS)可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ca2+〕i升高... 利用细胞培养技术,Ca2+敏感荧光探针Fluo-3/AM标记细胞,激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度(〔Ca2+〕i)的变化。结果显示细菌脂多糖(LPS)可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ca2+〕i升高,LPS的作用可被维拉帕米部分抑制。本实验表明激光扫描共聚焦显微镜结合Fluo-3/AM能准确迅速地检测单个或多个贴壁粘附细胞胞内〔Ca2+〕i的动态变化,并同步观察细胞的形态及其荧光分布情况。 展开更多
关键词 激光扫描 共聚焦显微镜 巨噬细胞 显微镜
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Enhancement of Frster energy transfer from thermally activated delayed fluorophores layer to ultrathin phosphor layer for high color stability in non-doped hybrid white organic light-emitting devices 被引量:1
9
作者 王子君 赵娟 +2 位作者 周畅 祁一歌 于军胜 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第4期404-410,共7页
Fluorescence/phosphorescence hybrid white organic light-emitting devices(WOLEDs) based on double emitting layers(EMLs) with high color stability are fabricated.The simplified EMLs consist of a non-doped blue therm... Fluorescence/phosphorescence hybrid white organic light-emitting devices(WOLEDs) based on double emitting layers(EMLs) with high color stability are fabricated.The simplified EMLs consist of a non-doped blue thermally activated delayed fluorescence(TADF) layer using 9,9-dimethyl-9,10-dihydroacridine-diphenylsulfone(DMAC-DPS) and an ultrathin non-doped yellow phosphorescence layer employing bis[2-(4-tertbutylphenyl)benzothiazolato-N,C2']iridium(acetylacetonate)((tbt)_2Ir(acac)).Two kinds of materials of 4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline(Bphen) and 1,3,5-tris(2-Nphenylbenzimidazolyl) benzene(TPBi) are selected as the electron transporting layer(ETL),and the thickness of yellow EML is adjusted to optimize device performance.The device based on a 0.3-nm-thick yellow EML and Bphen exhibits high color stability with a slight Commission International de l'Eclairage(CIE) coordinates variation of(0.017,0.009) at a luminance ranging from 52 cd/m^2 to 6998 cd/m^2.The TPBi-based device yields a high efficiency with a maximum external quantum efficiency(EQE),current efficiency,and power efficiency of 10%,21.1 cd/A,and 21.3 lm/W,respectively.The ultrathin yellow EML suppresses hole trapping and short-radius Dexter energy transfer,so that Forster energy transfer(FRET)from DMAC-DPS to(tbt)_2Ir(acac) is dominant,which is beneficial to keep the color stable.The employment of TPBi with higher triplet excited state effectively alleviates the triplet exciton quenching by ETL to improve device efficiency. 展开更多
关键词 white organic light-emitting devices non-doped emitting layers thermally activated delayed fluo-rescence color stability
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用Fluo3-AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca^(2+)浓度及药物对患者胞内Ca^(2+)浓度的影响 被引量:6
10
作者 章立 李新荣 +1 位作者 徐蘅 张鉴棠 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期451-455,共5页
用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 +浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 +的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 +浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 +的刺激表... 用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 +浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 +的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 +浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 +的刺激表明 ,病人对外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内 Ca2 +浓度升高 ,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道 ,也能促使钙从钙池中释放。上述研究也表明 Fluo- 3是有效的研究胞内 Ca2 +变化的荧光探针。 2型糖尿病的发生可能与 Ca2 +浓度升高有关 。 展开更多
关键词 细胞内游离钙 糖尿病 淋巴细胞 NIDDM
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利用约束随机森林和贝叶斯优化算法的小麦条锈病遥感监测 被引量:1
11
作者 薛一阳 竞霞 +2 位作者 叶启星 杜凯奇 李冰玉 《遥感技术与应用》 北大核心 2025年第1期69-76,共8页
为了改善小样本数据的过拟合问题,提高小麦条锈病遥感监测模型的泛化能力和预测精度,以2018年河北省中国农业科学院实验站获取的冠层日光诱导叶绿素荧光(Solar-Induced Chlorophyll Fluorescence,SIF)为数据源,利用代价复杂性剪枝(Cost-... 为了改善小样本数据的过拟合问题,提高小麦条锈病遥感监测模型的泛化能力和预测精度,以2018年河北省中国农业科学院实验站获取的冠层日光诱导叶绿素荧光(Solar-Induced Chlorophyll Fluorescence,SIF)为数据源,利用代价复杂性剪枝(Cost-Complexity Pruning,CCP)算法对随机森林回归(Random Forest Regression,RFR)方法进行剪枝约束,并结合贝叶斯优化(Bayesian Optimiazation,BO)算法对随机森林回归进行超参数选取,构建了基于约束随机森林回归(Constrained Random Forest,CO-RFR)算法小麦条锈病严重度预测模型,并将其与分类回归树(Classification And Regression Tree,CART)算法、传统RFR算法以及多元线性回归(Multiple Linear Regression,MLR)方法构建的小麦条锈病遥感监测模型精度进行比较。结果表明:①CORFR模型的估测精度最高,更适合于小样本数据下的小麦条锈病遥感监测。其中,在验证数据集中CO-RFR模型预测病情严重度(Severity Level,SL)和实测SL间的平均RMSE比RFR、CART和MLR模型分别减少了43%、50%和40%,平均R^(2)分别提高了56%、47%和40%。②增加约束条件能够有效改善模型的过拟合现象,提高模型的泛化能力。其中,RFR模型训练集预测SL值和实测SL值间的平均RMSE较验证集减少了62%,表明模型训练集精度远高于验证集,模型出现过拟合,而CO-RFR模型训练集预测SL值和实测SL值间的平均RMSE较验证集减少了8%,表明模型拟合效果较好,过拟合现象得到明显改善。该研究对提高小样本数据下的小麦条锈病病情严重度的遥感预测精度具有重要意义,同时亦为其它作物的胁迫监测提供了应用参考。 展开更多
关键词 过拟合 约束随机森林 贝叶斯优化 日光诱导叶绿素荧光 小麦条锈病 模型精度
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九节龙皂甙对Hela细胞生长的抑制作用 被引量:16
12
作者 梁克明 谢艳华 +2 位作者 石梅 王四旺 王晓娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期725-728,共4页
目的 观察九节龙皂甙 (Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法 九节龙皂甙 6 2 5mg·L-1处理Hela细胞 0~ 72h ,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela细胞凋亡DNA的梯形带 ;应用特异性Ca... 目的 观察九节龙皂甙 (Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法 九节龙皂甙 6 2 5mg·L-1处理Hela细胞 0~ 72h ,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela细胞凋亡DNA的梯形带 ;应用特异性Ca2 + 荧光探测剂Fluo 3 /AM在LSCM条件下检测不同时期细胞内Ca2 + 分布情况。结果 光镜下体外培养的Hela细胞在九节龙皂甙作用 2 4h开始出现细胞质皱缩和细胞核凝缩等凋亡的形态学特征。 60、72h均检测出DNA梯形带等凋亡的生物化学特征。诱导Hela细胞48、60、72h内Ca2 + 严重超载且维持在较高浓度水平。结论 九节龙皂甙对体外培养的Hela细胞具有明显的抑制作用且诱导Hela细胞凋亡发生 ;细胞凋亡时细胞内 [Ca2 + 展开更多
关键词 细胞凋亡 胞内钙 fluo-3 中药 植物药 子宫颈癌 九节龙皂甙 HELA细胞生长 抑制作用
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低温处理对冬、春小麦细胞Ca^(2+)时空变化的影响 被引量:17
13
作者 刘炜 孙德兰 +4 位作者 王红 简令成 尚忠林 王学臣 赵可夫 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2001年第12期1218-1223,共6页
用Fluo 3/AM染色 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)方法 ,对静息态及连续降温条件下不同抗寒性小麦(TriticumaestivumL .)叶肉细胞原生质体 [Ca2 + ]cyt (thefreeCa2 + concentrationinthecytoplasm)的时空变化进行了比较。结果表明 ,... 用Fluo 3/AM染色 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)方法 ,对静息态及连续降温条件下不同抗寒性小麦(TriticumaestivumL .)叶肉细胞原生质体 [Ca2 + ]cyt (thefreeCa2 + concentrationinthecytoplasm)的时空变化进行了比较。结果表明 ,静息态下小麦原生质体整体荧光强度基本不变 ,暗示 [Ca2 + ]cyt能维持在一稳定水平 ;同时 ,不同品种小麦间也显示了 [Ca2 + ]cyt水平荧光强度的不同。温度由 15℃连续降至约 2℃时 ,抗寒冬小麦 [Ca2 + ]cyt出现升高后的回复 ,2℃之后逐渐升高 ;冷敏感春小麦则无此回复过程 ,而是一直升高到最大值。推测这一不同的动态变化最终决定了植物在低温下产生冷适应的不同能力。这进一步为“Ca2 + 是低温下生理信号的传导者” 展开更多
关键词 fluo-3/AM 小麦原生质体 静息态 CA^2+ 时空变化
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广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对H_2O_2所致大鼠心肌细胞钙超载的影响 被引量:2
14
作者 苏延旭 周燕 +5 位作者 宋慧 李映新 焦杨 李雪华 徐星新 舒雨雁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期69-72,共4页
目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对H2O2诱导的原代培养大鼠乳鼠心肌细胞内钙超载的拮抗作用。方法采取SD大鼠乳鼠心肌细胞原代培养,将心肌细胞分正常对照组:不加任何处理;钙超载模型组:检测时加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2;药物处理组... 目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对H2O2诱导的原代培养大鼠乳鼠心肌细胞内钙超载的拮抗作用。方法采取SD大鼠乳鼠心肌细胞原代培养,将心肌细胞分正常对照组:不加任何处理;钙超载模型组:检测时加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2;药物处理组:预先分别给以不同剂量的Natrin孵育24 h,检测时加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2。以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,动态检测细胞内[Ca2+]i变化。结果动态监测15 min发现,与正常对照组比较,模型组细胞内平均荧光峰值增加49.37%,高于正常对照组(P<0.01)。而高、中、低药物浓度组平均峰荧光值比正常对照组分别增加27.52%、12.71%、5.15%。与模型组比较,药物组细胞内平均峰荧光强度值均降低(P<0.01)。结论广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对心肌细胞钙离子通道有较好的阻断作用,能减轻H2O2诱导的心肌细胞内[Ca2+]i超载,且药物组随着药物浓度的逐渐升高,细胞内钙荧光强度逐渐下降,并呈现剂量依赖性。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒蛋白Natrin 心肌细胞 钙超载 H2O2 激光共聚焦 fluo 3 AM
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G004抗实验性血栓形成作用及机制 被引量:7
15
作者 张文平 巫冠中 刘国卿 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第2期162-167,共6页
目的 :研究新型磺酰脲类化合物G0 0 4的抗血栓作用及机制。方法 :考察G0 0 4对体外大鼠主动脉血管收缩、人血小板聚集、小鼠尾静脉出血时间、实验性血栓形成以及对人脐静脉内皮细胞(ECV30 4 )分泌PGI2 和TXA2 的影响 ,并应用Fluo3 AM测... 目的 :研究新型磺酰脲类化合物G0 0 4的抗血栓作用及机制。方法 :考察G0 0 4对体外大鼠主动脉血管收缩、人血小板聚集、小鼠尾静脉出血时间、实验性血栓形成以及对人脐静脉内皮细胞(ECV30 4 )分泌PGI2 和TXA2 的影响 ,并应用Fluo3 AM测定G0 0 4对ECV30 4 [Ca2 + ]i 的影响。结果 :G0 0 4不能拮抗去甲肾上腺素、氯化钾诱导的体外缩血管作用 ,但显著抑制花生四烯酸 (AA)、二磷酸腺苷 (ADP)诱导的体外人血小板聚集 ,延长小鼠尾静脉出血时间 ,对小鼠胶原 -肾上腺素诱发体内血栓有明显的保护作用 ,明显延长电刺激导致的大鼠颈动脉血栓形成时间 ,促进ECV30 4分泌PGI2 ,抑制TXA2 的合成并呈现浓度依赖性 ,对高 [K+ ]引起的钙内流无抑制作用。结论 :G0 0 4具有显著的抗体内血栓作用 ,其机制可能与抑制血小板聚集、降低内皮细胞分泌TXA2 、刺激PGI2 释放有关。 展开更多
关键词 G004 血小板聚集 血栓 PGI2 TXA2 fluo3/AM
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西红花苷对培养的牛内皮细胞内钙的调节作用 被引量:12
16
作者 绪广林 钱之玉 任萱 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期445-447,共3页
目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺(5-HT)、组胺(His)、过氧化氢(H2O2)所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含... 目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺(5-HT)、组胺(His)、过氧化氢(H2O2)所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含钙的Hank’s液中,5-经色胺、组胺、过氧化氢能明显升高静息状态的细胞内钙,增幅分别为280%、320%、285%。西红花苷1、10μmol/L对5-羟色胺、组胺、过氧化氢引起的钙增高有显著的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。0.1μmol/L西红花苷对细胞内钙升高无显著影响。结论 西红花苷抗动脉粥样硬化、高血压及炎症作用可能与其内皮细胞保护作用有关。 展开更多
关键词 西红花苷 fluo-3/AM 激光共聚焦扫描显微镜 内皮细胞 细胞内钙 心血管病
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荧光指示剂孵育法测定小麦叶肉细胞原生质体胞质游离Ca^(2+)的变化 被引量:5
17
作者 刘刚 刘娜 +4 位作者 侯春燕 韩胜芳 张洁 赵军峰 王冬梅 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期25-28,共4页
研究以孵育法将Ca2+荧光探针Fluo-3AM载入小麦叶肉细胞原生质体胞质中,并结合激光共聚焦扫描显微技术,建立了测定原生质体胞质游离Ca2+动态变化的试验方法。
关键词 fluo-3AM 胞质游离Ca^2+ 原生质体 激光共聚焦扫描显微镜
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慢性非细菌性前列腺炎SD大鼠前列腺平滑肌细胞内钙离子浓度的变化 被引量:6
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作者 李林 梁朝朝 +3 位作者 张贤生 郝宗耀 樊松 古源 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期224-228,共5页
目的:探讨SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎(CAP)炎症组与正常对照组前列腺平滑肌细胞(PSMCs)内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的差异及其在CAP中的意义。方法:利用SD大鼠前列腺蛋白提取液与弗氏完全佐剂(FCA)诱导出CAP模型,体外贴壁培养并纯化炎... 目的:探讨SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎(CAP)炎症组与正常对照组前列腺平滑肌细胞(PSMCs)内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的差异及其在CAP中的意义。方法:利用SD大鼠前列腺蛋白提取液与弗氏完全佐剂(FCA)诱导出CAP模型,体外贴壁培养并纯化炎症组与正常对照组PSMCs,细胞经钙离子荧光探针FLUO-3AM孵育后在激光共聚焦显微镜(LSCM)下连续动态扫描。结果:CAP组与对照组的PSMCs钙离子荧光强度分别为80.39±9.00和27.95±10.04,差异具有显著性(P<0.01)。结论:CAP SD大鼠PSMCs[Ca2+]i明显升高,其升高可能增强了PSMCs的收缩作用,从而引起CAP的一系列如对疼痛敏感性增强、下腹部疼痛不适的症状。 展开更多
关键词 前列腺炎 肌细胞 平滑肌 钙离子 fluo-3AM
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黄芪甲苷对心肌细胞L型钙电流及细胞内钙的影响 被引量:6
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作者 赵美眯 孙雪菲 +7 位作者 连雯雯 胡慧媛 王燕 曾本清 封瑞 高青华 赵金生 郝丽英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1373-1377,共5页
目的研究黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和细胞内钙的影响。方法分离单个豚鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术测定钙电流,并采用荧光显微镜CCD成像系统动态观察细胞内钙(intracellular calcium concentrat... 目的研究黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和细胞内钙的影响。方法分离单个豚鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术测定钙电流,并采用荧光显微镜CCD成像系统动态观察细胞内钙(intracellular calcium concentration,[Ca2+]i)变化。结果 1×10-6mol·L-1AS-IV可明显抑制I Ca-L,使最大电流峰值降低32.6%。AS-IV对60 mmol·L-1KCl诱导的[Ca2+]i升高有抑制作用,最大荧光密度变化值从1.17±0.30(n=6)降低到0.26±0.16(n=5,P<0.05)。AS-IV可直接促进钙池内钙释放,使[Ca2+]i从0.08±0.02(n=10)升高到0.23±0.07(n=8,P<0.05)。结论 AS-IV抑制L型钙通道,可减少细胞外钙内流;同时它促进内钙释放,对心肌细胞内钙稳态表现为双向调节作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 膜片钳技术 钙电流 细胞内钙 心肌细胞 fluo-3
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西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响(英文) 被引量:9
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作者 何书英 钱之玉 唐富天 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期778-781,共4页
目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10~8,1×10~7,1... 目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10~8,1×10~7,1×10~6mol·L-1)均能明显抑制1×10~2mol·L-1H2O2引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1%,57.1%和74.3%(P<0.01),无钙条件下分别为26.2%,32.1%和50.0%(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷(1×10-8,1×10~7,1×10-6mol·L-1)能抑制70 mmol·L-1 CHCl3导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8%,27.8%和50.0%(P<0.01)。结论 西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。 展开更多
关键词 西红花苷 激光共聚焦显微镜 平滑肌细胞 fluo-3/AM 钙离子
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