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血管内皮生长因子和其受体Flt-1在青春期大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上的表达研究 被引量：16
1
作者 艾庆燕 田宏 +6 位作者 张洁 马莉 苗乃周 霍涌玮 王丽蓉 邱曙东 张秋养 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2008年第10期871-875,共5页
目的:通过对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1在大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上表达的研究,探讨其在雄性生殖系统中的作用。方法:免疫组化SP法和免疫荧光法检测20只青春期SD大鼠睾丸、附睾及精子上VEGF和Flt-1蛋白的表达情况。结果:V... 目的:通过对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1在大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上表达的研究,探讨其在雄性生殖系统中的作用。方法:免疫组化SP法和免疫荧光法检测20只青春期SD大鼠睾丸、附睾及精子上VEGF和Flt-1蛋白的表达情况。结果:VEGF和Flt-1在大鼠睾丸和附睾组织及精子上均有特征性表达。睾丸内VEGF蛋白表达于生精细胞、精子细胞发育中的顶体、Sertoli和Leydig细胞胞质内;Flt-1只见于精子细胞发育中的顶体及Leydig细胞胞质中。附睾中VEGF表达于各段上皮主细胞胞质内,而Flt-1表达于头、尾段上皮主细胞胞质内,体部免疫染色阴性;两者在附睾上皮亮细胞、晕细胞和基细胞中均为阴性表达。免疫荧光染色显示,VEGF和Flt-1共同定位于附睾内精子头部的顶体,尾部的颈、中和主段。结论:VEGF和Flt-1蛋白在大鼠睾丸、附睾及精子中的特异性表达提示,他们可由不同生精上皮细胞、间质细胞和附睾主细胞产生,可能以自分泌或旁分泌的形式单独或共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞或Leydig细胞,直接或间接地影响精子的发生、发育和成熟过程,并与精子的活动和受精能力有关。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 类fms酪氨酸激酶 睾丸 附睾 精子 免疫组化 免疫荧光
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桃红四物汤对肝纤维化小鼠病理性血管生成相关因子VEGF、KDR与Flt-1表达的影响 被引量：20
2
作者 史萌萌 奚胜艳 +6 位作者 王彦晖 程尧 彭樱 王欣榕 康志军 李晗婧 李茜 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期487-491,共5页
目的:从整体水平研究复方桃红四物汤对四氯化碳所致肝纤维化模型小鼠肝组织血管内皮生长因子(VEGF)、含激酶插入区受体(KDR)及Flt-1蛋白与mRNA表达的影响。方法:昆明小鼠60只,随机分组为空白组,模型组,秋水仙碱组,桃红四物汤高、中、低(... 目的:从整体水平研究复方桃红四物汤对四氯化碳所致肝纤维化模型小鼠肝组织血管内皮生长因子(VEGF)、含激酶插入区受体(KDR)及Flt-1蛋白与mRNA表达的影响。方法:昆明小鼠60只,随机分组为空白组,模型组,秋水仙碱组,桃红四物汤高、中、低(17.00、8.50、4.25g/kg)剂量组,采用左侧腹股沟处皮下注射四氯化碳花生油溶液建立小鼠肝纤维化模型,给药6周后,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肝组织VEGF蛋白含量;蛋白印迹法(Western blot)测定小鼠肝脏KDR、Flt-1蛋白的表达;逆转录PCR(RT-PCR)法测定小鼠肝脏VEGF、KDR及Flt-1 mRNA表达。结果:桃红四物汤治疗后,桃红四物汤高、中剂量组肝组织VEGF蛋白表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组肝组织KDR与Flt-1蛋白表达较模型组显著降低(P<0.05);而桃红四物汤高、中剂量组肝组织VEGF、KDR与Flt-1 mRNA表达较模型组、秋水仙碱组明显减少(P<0.01),并且呈现一定的量效正相关。结论:桃红四物汤能够降低肝纤维化病理血管生成相关因子的表达,减缓病理性的微血管生成可能是其改善肝纤维化的机制之一。 展开更多
关键词 桃红四物汤 血管内皮生长因子 含激酶插入区受体 flt-1 肝纤维化
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Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量：13
3
作者 陈中皓 王学志 +2 位作者 徐铭 杨华 黄忠华 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期290-293,共4页
背景与目的:近年来的研究表明,多种生物学指标与结直肠癌发生、发展以及手术后的复发转移、预后有关。本研究旨在探讨人结直肠癌组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达与各临床病理参数及预后的关系及临床意义。方法... 背景与目的:近年来的研究表明,多种生物学指标与结直肠癌发生、发展以及手术后的复发转移、预后有关。本研究旨在探讨人结直肠癌组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达与各临床病理参数及预后的关系及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法,检测72例结直肠癌组织及其对照癌旁正常黏膜组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1表达的状况,分析其与临床病理参数及复发转移的关系。结果:在结直肠癌中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达率分别为62.5%(45/72)、66.7%(48/72)、55.5%(40/72)、61.1%(44/72)、79.2%(57/72),均显著高于对照癌旁正常黏膜组织(P<0.01)。Survivin表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及术后复发转移有关;MMP-2表达与淋巴结转移、TNM分期、术后复发转移有关;nm23-H1表达与淋巴结转移、TNM分期相关;VEGF表达与浸润深度、TNM分期及术后复发转移有关;而受体Flt-1表达与临床病理及预后因素均无关。结论:Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF与结直肠癌的发生、发展密切相关,联合检测多个相关基因的表达能更准确地判断结直肠癌的生物学特征及预后判断。 展开更多
关键词 结直肠癌 SURVIVIN MMP-2 NM23-H1 VEGF flt-1
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血管内皮生长因子及其Flt-1受体在白血病细胞中的表达 被引量：8
4
作者 张伶 陈辉 +3 位作者 李维 涂植光 冯文莉 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期678-681,共4页
目的　探讨人白血病细胞系血管内皮生长因子 (VEGF)及其Flt 1受体的表达 ,进一步阐明VEGF在白血病细胞异常增殖中的作用机制。方法　以人脐静脉血管内皮细胞系ECV3 0 4作为对照 ,采用RT PCR半定量技术和免疫组化检测体外培养的人白血病... 目的　探讨人白血病细胞系血管内皮生长因子 (VEGF)及其Flt 1受体的表达 ,进一步阐明VEGF在白血病细胞异常增殖中的作用机制。方法　以人脐静脉血管内皮细胞系ECV3 0 4作为对照 ,采用RT PCR半定量技术和免疫组化检测体外培养的人白血病细胞系K5 62和HL 60中VEGF及Flt 1的表达。采用MTT试验观察VEGF反义寡核苷酸 (VEGF AS)对白血病细胞体外增殖的影响。结果　K5 62和HL 60细胞同时表达VEGF和Flt 1mRNA和蛋白。VEGF AS能够抑制白血病细胞体外增殖。结论　在白血病细胞异常增殖中自分泌VEGF可能起着重要作用。 展开更多
关键词 VEGF flt-1受体 K562细胞 HL-60细胞
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补阳还五汤对早期糖尿病肾病患者血管内皮生长因子及其受体Flt-1的影响 被引量：36
5
作者 叶仁群 谢嘉嘉 +2 位作者 林国彬 曾纪斌 宋晓容 《中国中西医结合肾病杂志》 2009年第2期137-139,共3页
目的:探讨补阳还五汤对早期糖尿病肾病患者血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flt-1)的影响。方法:将60例早期糖尿病肾病患者随机分为治疗组和对照组,两组均用西药常规治疗,治疗组加服补阳还五汤。采用酶联免疫法检测各组血清VEGF及其受体... 目的:探讨补阳还五汤对早期糖尿病肾病患者血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flt-1)的影响。方法:将60例早期糖尿病肾病患者随机分为治疗组和对照组,两组均用西药常规治疗,治疗组加服补阳还五汤。采用酶联免疫法检测各组血清VEGF及其受体Flt-1水平。结果:治疗组血清VEGF及其受体Flt-1水平较治疗前明显下降(P<0.05),24 h尿蛋白量较治疗前明显下降(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。VEGF、Flt-1与尿蛋白呈正相关。结论:VEGF及其受体Flt-1在早期糖尿病肾病发病机制中起重要作用,补阳还五汤可降低早期糖尿病肾病患者血清VEGF及其受体Flt-1蛋白表达,是其保护肾功能的可能作用机制之一。 展开更多
关键词 补阳还五汤 早期糖尿病肾病 血管内皮生长因子 受体
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可溶性VEGF受体FLT-1克隆、表达及其对血管生成的抑制作用 被引量：4
6
作者 周彩存 谈立松 +1 位作者 唐亮 粟波 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第1期15-18,共4页
目的 :克隆VEGF受体sFLT 1片段 1 3区 ,并使之在原核中进行表达以探讨其对内皮细胞增殖和血管生成方面的抑制作用。方法 :提取脐静脉血管内皮细胞总RNA ,克隆sFLT 1基因 1 3区 ,并使之在QIA表达系统进行表达 ;Ni2 + Sepharose6B亲和层... 目的 :克隆VEGF受体sFLT 1片段 1 3区 ,并使之在原核中进行表达以探讨其对内皮细胞增殖和血管生成方面的抑制作用。方法 :提取脐静脉血管内皮细胞总RNA ,克隆sFLT 1基因 1 3区 ,并使之在QIA表达系统进行表达 ;Ni2 + Sepharose6B亲和层析纯化、复性。应用MTT和鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型 ,探讨重组蛋白对血管生成的抑制作用。结果 :该表达系统能表达sFLT 1基因片段 ,表达量低。纯化后 ,经复性 ,sFLT 1具有与VEGF特异结合功能 ,1μg重组sFLT 1蛋白能抑制 10ngVEGF诱导的脐静脉内皮细胞增殖和 2 0ngVEGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。结论 :sFLT 1基因片段能在QIA表达系统中得到表达 ,复性后重组蛋白具有与VEGF结合和拮抗VEGF生物学活性的功能。 展开更多
关键词 可溶性VEGF受体 flt-1 克隆 血管内皮细胞生长因子 原核表达 血管新生 肿瘤
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人血管内皮生长因子受体Flt-1胞外区2-3loop在Pichia.pastoris酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究 被引量：5
7
作者 马骊 王小宁 +3 位作者 张智清 周小明 曾革非 陈爱君 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期61-65,共5页
目的 :研究人Flt 1胞外区 2 3loopcDNA在Pichia pastoris酵母中的表达 ,获得高效表达的具有生物学活性的重组Flt 1(2 3)。方法 :采用PCR扩增Flt 1(2 3)基因 ,经DNA序列分析后 ,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris... 目的 :研究人Flt 1胞外区 2 3loopcDNA在Pichia pastoris酵母中的表达 ,获得高效表达的具有生物学活性的重组Flt 1(2 3)。方法 :采用PCR扩增Flt 1(2 3)基因 ,经DNA序列分析后 ,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris酵母表达载体中 ,构建重组质粒pPIC9K Flt 1(2 3) ,转化酵母宿主菌GS115 ,筛选His+ Muts 表型转化子 ,摇瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。表达产物经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,测定其生物学活性。结果 :SDS PAGE分析显示 ,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中 ,诱导 4d的表达量达上清总蛋白的 6 0 %以上。ELISA及Westernblot实验表明 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,Flt 1(2 3)纯度达到 90 %以上。生物学活性检测证实其具有结合hVEGF1 6 5 的能力和抑制hVEGF1 6 5 对HUVEC的促增殖功能。结论 :获得了具有生物学活性的可溶性重组Flt 1受体胞外区 2 3loop小片段 ,为进一步的动物实验和临床应用打下了基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 flt-1 基因表达 PICHIA.PASTO
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艾灸头部组穴对VD大鼠脑内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mRNA表达的影响 被引量：8
8
作者 王频 杨骏 +2 位作者 张庆萍 石海平 马岚 《中国中医急症》 2013年第6期861-863,911,共4页
目的观察艾灸头部组穴治疗血管性痴呆(VD)大鼠皮层、海马内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mR-NA表达,研究艾灸调控VD脑内血管新生机制。方法选取Wistar雄性老年大鼠,四血管阻断法制备大鼠VD模型,电脑随机数字表法随机分为艾灸组、西药组、... 目的观察艾灸头部组穴治疗血管性痴呆(VD)大鼠皮层、海马内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mR-NA表达,研究艾灸调控VD脑内血管新生机制。方法选取Wistar雄性老年大鼠,四血管阻断法制备大鼠VD模型,电脑随机数字表法随机分为艾灸组、西药组、模型组,另设假手术组对照。艾灸组取百会、大椎、神庭穴艾灸治疗,西药组茴拉西坦灌胃共2个疗程。神经行为学评分并结合跳台仪检测治疗前、第2疗程后学习记忆成绩;RT-PCR检测各组大鼠皮层、海马内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mRNA的表达水平。结果经2个疗程治疗后,动物跳台实验的潜伏期、错误次数,以及神经行为学评分,艾灸组、西药组与模型组均有非常显著差异,表明艾灸、西药在提高VD大鼠潜伏期,降低VD大鼠错误次数以及对神经行为学评分影响均有明显疗效,且艾灸组明显优于西药组。与模型组相比,艾灸组皮层内VEGF及其受体Flt-1 mRNA的表达有明显差异,海马内VEGF及其受体Flk-1 mRNA的表达有显著差异;而西药组仅显示海马内VEGF或皮层Flt-1表达上调,没有观察到同一脑区VEGF及其受体同步明显表达。结论艾灸在改善VD大鼠学习记忆成绩、神经行为学评分的同时,通过调控VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mRNA的表达水平,促进了要害部位的血管生成,并最终激发了脑内神经的损伤修复机制。 展开更多
关键词 血管性痴呆 艾灸 血管生成 VEGF flt-1 FLK-1
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Kai-1、Flt-4和Tiam-1在预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移中的价值 被引量：8
9
作者 韦荣干 黄振录 +2 位作者 周祥祯 丁志敏 莫祥兰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第10期1741-1743,共3页
目的:探讨Kai-1、Flt-4(fms样酪氨酸激酶4)和Tiam-1(T淋巴瘤侵袭转移基因)在甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移中的作用,寻找预测甲状腺乳头状癌淋巴结转移的分子标志物。方法:用免疫组织化学方法检测102例甲状腺乳头状癌Kai-1、Flt-4和Tia... 目的:探讨Kai-1、Flt-4(fms样酪氨酸激酶4)和Tiam-1(T淋巴瘤侵袭转移基因)在甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移中的作用,寻找预测甲状腺乳头状癌淋巴结转移的分子标志物。方法:用免疫组织化学方法检测102例甲状腺乳头状癌Kai-1、Flt-4和Tiam-1表达情况,比较它们在甲状腺乳头状癌伴颈部淋巴结转移组和无转移组间的表达差异;对52例无淋巴结转移患者进行随访,了解术后颈部淋巴结转移发生率,评估Kai-1、Flt-4和Tiam-1在预测甲状腺乳头状癌伴淋巴结转移的价值。结果:甲状腺乳头状癌Kai-1、Flt-4和Tiam-1阳性率分别为61%、49%和84%,表达率均与颈部淋巴结转移有关(均P<0.01);Kai-1、Flt-4和Tiam-1表达呈正相关性;Kai-1、Flt-4和Tiam-1在预测甲状腺乳头状癌淋巴结转移的敏感度分别为90%、66%和94%,特异度分别为67%、67%和25%,准确度分别为78%、67%和49%;Kai-1在术后发生淋巴结转移组的表达率显著高于术后无淋巴结转移者。结论:Kai-1、Flt-4和Tiam-1表达异常可能与甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移有关,检测Kai-1和Flt-4表达情况有助于预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移。 展开更多
关键词 癌 乳头状 淋巴结转移 KAI-1 flt-4 TIAM-1
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当归对大鼠缺血性脑损伤后Flt-1、Flk-1mRNA表达的影响 被引量：4
10
作者 郑婵娟 廖维靖 +2 位作者 范明 杨万同 蒙兰青 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期385-389,共5页
目的:研究大鼠缺血性脑损伤后不同时间点Flt-1、Flk-1mRNA的表达及当归对其表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为缺血损伤组和当归治疗组。采用线栓法制作大鼠短暂性大脑中动脉阻断(MCAO)与再灌模型,治疗组腹腔注射当归注射液(剂量... 目的:研究大鼠缺血性脑损伤后不同时间点Flt-1、Flk-1mRNA的表达及当归对其表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为缺血损伤组和当归治疗组。采用线栓法制作大鼠短暂性大脑中动脉阻断(MCAO)与再灌模型,治疗组腹腔注射当归注射液(剂量5g/kg)。36只大鼠(每组各18只)在脑缺血/再灌后1d、3d、7d神经行为学评分完成后被处死,取大脑行氯化三苯四唑(TTC)染色以测脑梗死比;另取72只大鼠(每组各36只)在脑缺血/再灌后3h、6h、12h、1d、3d、7d分别被处死,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测缺血侧Flt-1、Flk-1mRNA的表达。结果:在同时间点神经功能缺损评分比较,缺血损伤组明显高于当归治疗组(P<0.05);在同时间点当归治疗组梗塞比明显小于缺血损伤组(P<0.01)。RT-PCR检测表明,缺血损伤组Flt-1、Flk-1mRNA在缺血/再灌后3h即开始表达增强,于3d达高峰,后逐渐降低;当归治疗组Flt-1、Flk-1mRNA表达比缺血损伤组明显增加,于3d达到高峰后缓慢降低至第7d仍保持较高水平。缺血损伤组和当归治疗组中Flt-1mRNA与Flk-1mRNA的表达呈正相关性,相关系数为r=0.957(P<0.01)。结论:当归可增强缺血性脑损伤后Flt-1、Flk-1mRNA表达。Flt-1、Flk-1mRNA的表达紧密相关。 展开更多
关键词 缺血性脑损伤 flt-1 FLK-1 当归注射液
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血管内皮生长因子及受体Flt-1在膀胱癌中的表达及意义 被引量：6
11
作者 李道兵 罗旭 +1 位作者 李春鸣 刘华庆 《贵州医药》 CAS 2004年第9期779-782,共4页
目的探讨血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体Flt 1在膀胱癌血管生成中的作用及与膀胱癌分化程度的关系。方法采用免疫组化S P法对 4 0例膀胱癌及 5例正常膀胱组织中VEGF、Flt 1蛋白进行检测。结果VEGF及其受体Flt 1主要分布在膀胱癌组织... 目的探讨血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体Flt 1在膀胱癌血管生成中的作用及与膀胱癌分化程度的关系。方法采用免疫组化S P法对 4 0例膀胱癌及 5例正常膀胱组织中VEGF、Flt 1蛋白进行检测。结果VEGF及其受体Flt 1主要分布在膀胱癌组织血管内皮细胞和癌细胞胞质内 ,VEGF及Flt 1在G3(低分化 )膀胱癌血管内皮细胞和癌细胞中的表达高于G2 (中分化 )和G1(高分化 )并且明显高于正常组织 (P <0 0 1)。结论VEGF和其受体Flt 1与膀胱肿瘤的分级和分期密切相关 ,可以作为判断膀胱癌生长和浸润的指标之一。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 受体flt-1 膀胱癌 基因表达 VEGF 肿瘤 免疫组化
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VEGF受体flt-1和KDR在骨髓间充质干细胞中的表达及意义 被引量：5
12
作者 张秀英 李一雷 +1 位作者 任淑萍 李玉林 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期487-490,F002,共5页
目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)受体flt1和KDR在成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的表达情况,探讨MSCs分化为血管内皮细胞的可能性。方法:采用Percoll(1.073g·mL-1)分离液分离骨髓单个核细胞,体外培养MSCs,流式细胞术分析鉴定MSCs的纯... 目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)受体flt1和KDR在成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的表达情况,探讨MSCs分化为血管内皮细胞的可能性。方法:采用Percoll(1.073g·mL-1)分离液分离骨髓单个核细胞,体外培养MSCs,流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度,在激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)下观察flt1和KDR的表达,RTPCR检测VEGF作用下flt1及KDR表达改变情况。结果:经Percoll分离、体外培养扩增的MSCs,细胞纯度可达95%左右;flt1和KDR定位于MSCs的胞膜及胞浆;经VEGF处理的MSCs和flt1mRNA的表达较对照组增强,KDRmRNA的表达无明显改变。结论:培养的MSCs在体外稳定扩增,具有VEGF受体,传导VEGF的刺激,在适宜的环境和诱导因子的作用下,MSCs有望分化为血管内皮细胞。 展开更多
关键词 造血干细胞 间充质干细胞 fit-1 KDR显微镜检查 共焦 内皮生长因子 逆转录聚合酶链反应
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电针对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑皮质胎盘生长因子及其受体Flt-1 mRNA和蛋白表达的影响及其促进脑内血管再生的作用 被引量：8
13
作者 武磊 罗勇 张珊珊 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期589-593,共5页
目的观察电针对SD大鼠局灶脑缺血再灌注后大脑皮质胎盘生长因子及其受体Flt-1 mRNA和蛋白表达的影响,探讨电针促进局灶脑缺血再灌注后脑内血管再生的可能机制。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为正常对... 目的观察电针对SD大鼠局灶脑缺血再灌注后大脑皮质胎盘生长因子及其受体Flt-1 mRNA和蛋白表达的影响,探讨电针促进局灶脑缺血再灌注后脑内血管再生的可能机制。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、电针组,将模型组和电针组分为局灶脑缺血2 h再灌注1、3和7天三个亚组。取双侧"合谷"穴为电针刺激穴位。采用免疫组织化学法检测胎盘生长因子及其受体Flt-1蛋白在缺血区大脑皮质的分布及其表达;逆转录聚合酶链反应检测缺血区大脑皮质胎盘生长因子mRNA和Flt-1mRNA的表达;免疫印迹法定量检测缺血区侧大脑皮质胎盘生长因子蛋白的表达。结果与正常对照组比较,模型组和电针组各时间点缺血区大脑皮质胎盘生长因子mRNA和蛋白及Flt-1 mRNA和蛋白的表达增加(P<0.05);电针组各时间点缺血区大脑皮质胎盘生长因子mRNA和蛋白及Flt-1 mRNA和蛋白的表达比模型组增加更为明显(P<0.05)。结论电针上调了局灶脑缺血再灌注大鼠缺血区大脑皮质的胎盘生长因子和Flt-1的表达,胎盘生长因子/Flt-1可能促进脑缺血后脑内血管再生。 展开更多
关键词 电针刺激 脑缺血再灌注 胎盘生长因子 flt-1 血管再生
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电针对急性脑梗死大鼠VEGF/Flt-1基因及其蛋白表达的影响 被引量：3
14
作者 李晶 马英 +2 位作者 何娇君 崔景军 杜元灏 《天津中医药》 CAS 2014年第7期425-429,共5页
[目的]以大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠为研究对象,通过观察血管内皮生长因子及其受体(VEGF/Flt-1)基因及其蛋白表达的变化以探讨电针对急性脑梗死大鼠血管新生的干预机制。[方法]将120只Wistar大鼠随机分为3组,即空白组、模型组、电针组,... [目的]以大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠为研究对象,通过观察血管内皮生长因子及其受体(VEGF/Flt-1)基因及其蛋白表达的变化以探讨电针对急性脑梗死大鼠血管新生的干预机制。[方法]将120只Wistar大鼠随机分为3组,即空白组、模型组、电针组,模型组和电针组按术后3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、12 d各分为7个时相组,每时相各8只。各组造模后,电针组依时相进行电针人中穴的治疗。各组大鼠依时间段处死后,进行实时荧光定量聚合酶连反应(PCR)及免疫组化的检测。[结果]电针组VEGF/Flt-1的mRNA及蛋白表达均较模型组有显著上调。[结论]电针对急性脑缺血大鼠VEGF/Flt-1的表达有良性调整作用,可促进缺血半暗带的血管新生。 展开更多
关键词 脑梗死 血管内皮生长因子 flt-1 血管新生 人中穴
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电针对脑梗死患者血清VEGF/Flt-1、BDNF表达以及临床效果的影响 被引量：6
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作者 刘洁 张建刚 马登飞 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第3期231-234,共4页
目的探讨电针对脑梗死患者血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管内皮生长因子受体1/fms样酪氨酸激酶1(VEGF receptor-1/fms-like tyrosine kinase-1,Flt-1)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotr... 目的探讨电针对脑梗死患者血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管内皮生长因子受体1/fms样酪氨酸激酶1(VEGF receptor-1/fms-like tyrosine kinase-1,Flt-1)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达以及临床效果的影响。方法收集医院诊治的急性脑梗死患者160例为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组(80例)与研究组(80例),对照组给予右旋糖酐常规治疗,研究组给予电针治疗。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测VEGF mRNA、Flt-1 mRNA的表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清BDNF的水平;比较两组患者的临床治疗效果、神经功能缺损评分与ADL评分;采用ELISA法检测血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;检测患者脑血流动力学指标:颈总动脉的平均血流量(Qm)、平均血流速度(Vm)、外周阻力(Rv)、动态阻力(DR)。结果与对照组比较,研究组患者好转率、总有效率显著升高(P<0.05),无变化发生率与恶化率显著降低(P<0.05);治疗后,两组神经功能缺损评分显著降低(P<0.05),ADL评分显著升高(P<0.05),且对照组与研究组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,与对照组比较,研究组患者血清VEGF mRNA、BDNF的表达水平显著升高(P<0.05),Flt-1 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05),IL-1β、IL-6、hs-CRP、TNF-α水平显著降低(P<0.05),Qm、Vm水平显著升高(P<0.05),Rv、DR水平显著降低(P<0.05)。结论电针治疗能有效提高急性脑梗死患者血清VEGF、BDNF的表达水平及降低Flt-1的表达水平,可改善患者神经功能及脑血流动力学。 展开更多
关键词 电针 急性脑梗死 VEGF BDNF flt-1
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补阳还五汤对脑出血大鼠脑内Flt-1和Flk-1蛋白表达的影响 被引量：3
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作者 刘宜峰 邢之华 +2 位作者 唐涛 阳鹤鹏 陈柏林 《中国康复》 2008年第2期78-80,共3页
目的:探讨补阳还五汤对脑出血大鼠脑内血管内皮生长因子受体VEGFR-1(Flt-1)和VEGFR-2(Flk-1)蛋白表达的影响。方法:SD大鼠90只,分为3组各30只,模型组及补阳还五汤组(中药组)采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,假手术组(对照组)作为正常... 目的:探讨补阳还五汤对脑出血大鼠脑内血管内皮生长因子受体VEGFR-1(Flt-1)和VEGFR-2(Flk-1)蛋白表达的影响。方法:SD大鼠90只,分为3组各30只,模型组及补阳还五汤组(中药组)采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,假手术组(对照组)作为正常对照。术后中药组用补阳还五汤灌胃。3组均采用Westernblot法分析脑内Flt-1和Flk-1蛋白表达。结果:对照组未见Flt-1和Flk-1蛋白表达;模型组造模后1dFlt-1和Flk-1开始表达,持续增高至21d;中药组补阳还五汤干预后7、14及21d时Flt-1和Flk-1蛋白表达均高于模型组(P<0.01),Flt-1于21d达高峰,Flk-1于14d达高峰(均P<0.01)。结论:补阳还五汤能增强脑出血大鼠脑Flt-1和Flk-1蛋白表达,以促进脑组织修复。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑出血 flt-1 FLK-1
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卵巢恶性肿瘤组织中血管内皮生长因子及其受体Flt-1表达的意义 被引量：2
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作者 王丽梅 辛楠 +2 位作者 刘晓燕 王心 尚丽新 《华西医学》 CAS 2010年第6期1097-1099,共3页
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及受体Flt-1蛋白表达与卵巢恶性肿瘤临床病理和预后的关系。方法 2000年1月2004年6月,以SABC免疫组织化学方法检测48例卵巢恶性肿瘤组织中VEGF及其受体Flt-1蛋白的表达。结果 VEGF和Flt-1蛋白表达与卵巢... 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及受体Flt-1蛋白表达与卵巢恶性肿瘤临床病理和预后的关系。方法 2000年1月2004年6月,以SABC免疫组织化学方法检测48例卵巢恶性肿瘤组织中VEGF及其受体Flt-1蛋白的表达。结果 VEGF和Flt-1蛋白表达与卵巢恶性肿瘤的病理学类型、分化级别及临床分期无明显相关性(P>0.05)。有淋巴结转移者VEGF和Flt-1蛋白的表达阳性率均明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。VEGF和Flt-1共同表达者平均总生存期为27.88个月,明显短于没有共同表达者的36.04个月(95%CI为33.42～38.65,P=0.0223)。结论 VEGF和Flt-1蛋白表达与卵巢恶性肿瘤的淋巴结转移相关,可作为预测肿瘤转移及预后的指标。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 flt-1受体 卵巢恶性肿瘤 转移 总生存期
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Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的可溶性表达、纯化及活性测定 被引量：1
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作者 谢印良 谷岳 +6 位作者 黄蕊 李雪霞 杜雪 王金宏 熊冬生 杨纯正 许元富 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期580-586,共7页
本研究旨在克隆和表达人血管内皮生长因子受体-1胞外Ⅲ区蛋白,并测定其生物学活性。应用RT-PCR法从人脐静脉内皮细胞中克隆Flt-1胞外Ⅲ区基因片段,经测序鉴定后再克隆到原核表达载体pAYZ中,构建出的表达载体pAYZflt-1Ⅲ转化大肠杆菌16C9... 本研究旨在克隆和表达人血管内皮生长因子受体-1胞外Ⅲ区蛋白,并测定其生物学活性。应用RT-PCR法从人脐静脉内皮细胞中克隆Flt-1胞外Ⅲ区基因片段,经测序鉴定后再克隆到原核表达载体pAYZ中,构建出的表达载体pAYZflt-1Ⅲ转化大肠杆菌16C9后,用低磷培养基诱导表达目的蛋白;采用E-tag亲和层析柱纯化目的蛋白;用SDS-PAGE、Western blotting和BCA法对其进行定性、定量检测鉴定;用ELISA、损伤愈合试验和Transwell法检测靶蛋白生物学活性。克隆的Flt-1胞外Ⅲ区基因经测序鉴定正确。所构建的pAflt-1Ⅲ表达载体经低磷培养基诱导后高表达出可溶性Flt-1胞外Ⅲ区蛋白,产量约为1.1mg/L;ELISA结果显示该蛋白可以结合VEGF165,并表现为剂量依赖性,其与配体结合的解离常数Kd为1.180pmol/L。损伤愈合试验和Transwell结果显示该蛋白可以抑制VEGF165(50ng/ml)和bFGF(100ng/mL)诱导的脐静脉内皮细胞的迁移,并呈剂量依赖性。这将为今后开展人flt-1基因Ⅲ区的功能研究及其单抗研制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子受体-1 血管新生 血管内皮生长因子165 克隆 单抗
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FLT-1启动子在血管内皮细胞中特异生物活性的检测及其意义 被引量：1
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作者 诸葛福媛 吕智美 +2 位作者 郑宏庭 章涛 邓华聪 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期7-11,共5页
目的:构建带有组织特异性FLT-1启动子的真核表达载体,检测其在转染的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中对荧光素酶报告基因表达的驱动能力。方法:采用PCR扩增FLT-1启动子,插入到pGL3-Basic-luc载体中,构建携带FLT-1启动子的真核表达载体pGL3-FL... 目的:构建带有组织特异性FLT-1启动子的真核表达载体,检测其在转染的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中对荧光素酶报告基因表达的驱动能力。方法:采用PCR扩增FLT-1启动子,插入到pGL3-Basic-luc载体中,构建携带FLT-1启动子的真核表达载体pGL3-FLT-Basic-luc,经脂质体法转染HUVEC、HepG2、NIH3T3和HEK293细胞,于转染48h后采用双荧光报告系统检测荧光素酶表达活性。结果:酶切及测序证实构建的pGL3-FLT-Basic-luc载体中含有序列正确的FLT-1基因启动子,双荧光报告系统检测显示,转染的HUVEC细胞其荧光素酶活性明显高于HEK293细胞(P<0.01),而转染的HepG2和NIH3T3细胞中未检测出荧光素酶表达。结论:克隆的FLT-1启动子具有较高的血管内皮特异性转录活性,可作为血管疾病靶向基因治疗的启动子来源。 展开更多
关键词 启动子 flt-1 载体构建 人脐静脉内皮细胞 基因治疗 血管疾病
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FLT-1启动子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定 被引量：2
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作者 诸葛福媛 吕智美 +1 位作者 郑宏庭 邓华聪 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第4期10-12,共3页
目的:为探索FLT-1启动子靶向调控活性分析,克隆FLT-1启动子基因序列,构建并鉴定FLT-1启动子调控的荧光素酶报告基因重组体pGL3-FLT-Basic-luc。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增FLT-1启动子序列,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-... 目的:为探索FLT-1启动子靶向调控活性分析,克隆FLT-1启动子基因序列,构建并鉴定FLT-1启动子调控的荧光素酶报告基因重组体pGL3-FLT-Basic-luc。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增FLT-1启动子序列,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic-luc中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3-FLT-Basic-luc,通过限性内切酶酶切、PCR及测序进行鉴定。结果:通过酶切鉴定及基因测定证明,所克隆的基因产物与预期结果一致,序列无碱基突变。结论:成功构建了含有FLT-1启动子基因序列的荧光素酶报告基因真核表达载体,为下一步分析该启动子活性及血管疾病的基因治疗奠定基础。 展开更多
关键词 启动子 FIT-1 荧光素酶基因表达载体 基因治疗
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