目的：建立共振瑞利散射法测定大黄素的含量。方法：在p H 7.3的B-R缓冲溶液中,铁（Ⅱ）与1,10-邻菲啰啉形成稳定的1∶3的配合物,再与大黄素（EMO）结合形成1∶2的离子缔合物。铁（Ⅱ）-1,10-邻菲啰啉溶液：称取0.278 0 g Fe SO4·7...目的：建立共振瑞利散射法测定大黄素的含量。方法：在p H 7.3的B-R缓冲溶液中,铁（Ⅱ）与1,10-邻菲啰啉形成稳定的1∶3的配合物,再与大黄素（EMO）结合形成1∶2的离子缔合物。铁（Ⅱ）-1,10-邻菲啰啉溶液：称取0.278 0 g Fe SO4·7H2O溶于70 m L水中,加入邻菲啰啉（1,10-phen）0.595 0 g,加入适量的抗坏血酸,稀释至100 m L,得到1×10^-2mol·L^-1的储备液,用时稀释成2.0×10^-3mol·L^-1的工作液。室温下,于10 m L比色管中依次加入p H 7.3的B-R缓冲溶液2 m L,适量的EMO标准溶液,以及2.0×10^-3mol·L^-1Fe（phen）2＋3溶液1.2 m L。每加一种试剂后混合均匀,用二次蒸馏水定容至刻度,摇匀,静置10 min后,在荧光分光光度计上以λex=λem方式进行同步扫描,记录共振瑞利散射（RRS）光谱,以λem=2λex和λem=1/2λex进行扫描,分别测量不同入射波长（λex）下的散射强度ISOS和IFDS,然后分别以ISOS和IFDS对应的波长作图,得到二级散射（SOS）光谱和倍频散射（FDS）光谱。分别在各自的最大散射波长处测量样品和试剂空白的散射强度IRRS,ISOS,IFDS及I0RRS,I0SOS,I0FDS,ΔI=I-I0。结果：体系的RRS、SOS和FDS显著增强并出现新的散射峰,相应的最大散射峰分别位于349、684和351 nm。EMO的质量浓度在0.8-10.4μg·m L-1时,与RRS、SOS和FDS的散射强度呈良好的线性关系,其检出限（3σ）依次分别为10.1、32.8、28.6 ng·m L^-1。血样和尿样（各3批）中测定EMO的回收率分别在94.9%-102.4%和99.4%-102.7%之间,RSD分别在1.5%-3.1%和1.1%-3.0%之间。将本法与紫外可见分光光度法比较,结果满意。结论：经方法学验证,体系的共振瑞利散射方法可用于尿样和血清中大黄素的测定。展开更多
文摘目的：建立共振瑞利散射法测定大黄素的含量。方法：在p H 7.3的B-R缓冲溶液中,铁（Ⅱ）与1,10-邻菲啰啉形成稳定的1∶3的配合物,再与大黄素（EMO）结合形成1∶2的离子缔合物。铁（Ⅱ）-1,10-邻菲啰啉溶液：称取0.278 0 g Fe SO4·7H2O溶于70 m L水中,加入邻菲啰啉（1,10-phen）0.595 0 g,加入适量的抗坏血酸,稀释至100 m L,得到1×10^-2mol·L^-1的储备液,用时稀释成2.0×10^-3mol·L^-1的工作液。室温下,于10 m L比色管中依次加入p H 7.3的B-R缓冲溶液2 m L,适量的EMO标准溶液,以及2.0×10^-3mol·L^-1Fe（phen）2＋3溶液1.2 m L。每加一种试剂后混合均匀,用二次蒸馏水定容至刻度,摇匀,静置10 min后,在荧光分光光度计上以λex=λem方式进行同步扫描,记录共振瑞利散射（RRS）光谱,以λem=2λex和λem=1/2λex进行扫描,分别测量不同入射波长（λex）下的散射强度ISOS和IFDS,然后分别以ISOS和IFDS对应的波长作图,得到二级散射（SOS）光谱和倍频散射（FDS）光谱。分别在各自的最大散射波长处测量样品和试剂空白的散射强度IRRS,ISOS,IFDS及I0RRS,I0SOS,I0FDS,ΔI=I-I0。结果：体系的RRS、SOS和FDS显著增强并出现新的散射峰,相应的最大散射峰分别位于349、684和351 nm。EMO的质量浓度在0.8-10.4μg·m L-1时,与RRS、SOS和FDS的散射强度呈良好的线性关系,其检出限（3σ）依次分别为10.1、32.8、28.6 ng·m L^-1。血样和尿样（各3批）中测定EMO的回收率分别在94.9%-102.4%和99.4%-102.7%之间,RSD分别在1.5%-3.1%和1.1%-3.0%之间。将本法与紫外可见分光光度法比较,结果满意。结论：经方法学验证,体系的共振瑞利散射方法可用于尿样和血清中大黄素的测定。
