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具有序列相似性的家族162成员A抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用
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作者 周川孟 关佩莹 +5 位作者 吴茹诗 朱杰宁 方俊涛 刘宇鹏 方咸宏 单志新 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2026年第2期238-250,共13页
【目的】探讨线粒体内膜蛋白具有序列相似性的家族162成员A(Fam162a)在心肌纤维化中的表达及其对于心肌成纤维细胞纤维化表型的调控作用。【方法】利用心力衰竭(HF)患者的心肌样本、主动脉缩窄手术(TAC)诱导心肌重构的小鼠心肌组织,检测... 【目的】探讨线粒体内膜蛋白具有序列相似性的家族162成员A(Fam162a)在心肌纤维化中的表达及其对于心肌成纤维细胞纤维化表型的调控作用。【方法】利用心力衰竭(HF)患者的心肌样本、主动脉缩窄手术(TAC)诱导心肌重构的小鼠心肌组织,检测Fam162a蛋白表达水平。分离培养新生小鼠原代心肌成纤维细胞(mCFs),建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌纤维化细胞模型,检测Fam162a蛋白表达水平。利用重组腺病毒介导在mCFs中过表达Fam162a,利用小干扰RNA(siRNA)进行mCFs中Fam162a的敲降。采用Western blot检测纤维化相关蛋白(包括COL1A1、COL3A1、α-SMA)表达,EdU染色实验评估细胞增殖能力,划痕和Transwell实验评估细胞的迁移能力,免疫荧光实验检测线粒体膜电位(TMRE)变化,分别检测mCFs内总活性氧(ROS)和活细胞线粒体内ROS水平,检测ATP水平反映细胞整体能量代谢情况。【结果】Western blot结果显示在HF患者、TAC小鼠心肌及AngⅡ处理的mCFs中COL1A1、COL3A1和α-SMA表达显著上升,而Fam162a表达显著下降(均P<0.05)。利用腺病毒介导过表达Fam162a可显著抑制AngⅡ诱导的mCFs中纤维化相关基因表达、抑制mCFs增殖和迁移能力,而通过siRNA敲降Fam162a可加剧Ang II诱导的mCFs纤维化表型。进一步研究发现,在加入线粒体氧化呼吸链阻滞剂鱼藤酮(Rotenone)后,过表达Fam162a抑制AngⅡ诱导的mCFs纤维化表型的作用被抑制,并且伴随出现线粒体膜电位下降、ROS大量产生而ATP生成不足。【结论】Fam162a通过维持线粒体膜电位,促进ATP生成,降低ROS产生和Smad3信号活化发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用。 展开更多
关键词 具有序列相似性的家族162成员 心肌纤维化 心肌成纤维细胞 线粒体功能 氧化磷酸化
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