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沉默circFADS2通过miR-152-3p/SLC7A11信号轴诱导结直肠癌细胞铁死亡
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作者 蒋良君 卢先州 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1000-1008,共9页
目的探讨沉默circFADS2对结直肠癌(CRC)细胞铁死亡的影响及其机制。方法以人结肠腺癌细胞系SW480作为研究对象,分别将circFADS2 siRNA干扰质粒(si-circFADS2)及其阴性对照si-NC、miR-152-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC、miR-152... 目的探讨沉默circFADS2对结直肠癌(CRC)细胞铁死亡的影响及其机制。方法以人结肠腺癌细胞系SW480作为研究对象,分别将circFADS2 siRNA干扰质粒(si-circFADS2)及其阴性对照si-NC、miR-152-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC、miR-152-3p mimics及其阴性对照mimics NC、SLC7A11过表达质粒(oe-SLC7A11)及其阴性对照vector转染至SW480细胞中,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;化学法检测细胞中亚铁离子(Fe^(2+))、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性水平;二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测细胞中miR-152-3p和SLC7A11 mRNA表达水平;Western blot检测细胞中铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-152-3p与circFADS2之间的海绵吸附关系,以及miR-152-3p与SLC7A11之间的靶向调控关系。结果与blank组比较,si-circFADS2组细胞增殖活性降低,细胞中Fe^(2+)、MDA和ROS水平升高,SOD和GSH水平降低;同时,细胞中miR-152-3p表达水平升高,SLC7A11和GPX4蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与si-circFADS2组比较,si-circFADS2+inhibitor组细胞增殖活性升高,细胞中Fe^(2+)、MDA和ROS水平降低,SOD和GSH水平升高;同时,细胞中miR-152-3p表达水平降低,SLC7A11和GPX4蛋白表达水平升高(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,SLC7A11是miR-152-3p的下游靶基因。结论沉默circFADS2可诱导CRC细胞铁死亡,其机制可能是通过靶向调控miR-152-3p/SLC7A11信号轴实现的。 展开更多
关键词 circfads2 结直肠癌 SW480细胞 铁死亡 miR-152-3p 溶质载体家族7成员11
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光唇鱼fads2基因克隆及其在不同温度对比下的表达 被引量:2
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作者 殷春燕 卫贞竹 +1 位作者 王悦 赵波 《浙江海洋大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第4期288-295,共8页
为探究光唇鱼不饱和脂肪酸合成关键酶脂肪酸去饱和酶2(fads2)对鱼类不饱和脂肪酸合成的调控,首先对fads2基因克隆,得到克隆基因序列后对fads2基因的结构进行了生物信息学分析,并且在不同温度梯度下饲养光唇鱼,使用实时荧光定量(qRT-PCR... 为探究光唇鱼不饱和脂肪酸合成关键酶脂肪酸去饱和酶2(fads2)对鱼类不饱和脂肪酸合成的调控,首先对fads2基因克隆,得到克隆基因序列后对fads2基因的结构进行了生物信息学分析,并且在不同温度梯度下饲养光唇鱼,使用实时荧光定量(qRT-PCR)测定不同温度下fads2基因的表达量差异,对比不同温度下fads2基因的表达量。生物信息学分析该基因为亲水性蛋白,结构稳定,含有与脂肪酸合成有关的Cyt-b5结构域。从fads2的定量表达结果来看,在28℃条件下fads2表达量显著上调(P<0.05),研究表明,fads2基因的表达量与温度有关。研究结果有助于深入了解光唇鱼fads2基因的结构和功能,为进一步的研究鱼类脂质代谢提供理论基础,从而选育出高不饱和脂肪酸合成较高的优良光唇鱼品种。 展开更多
关键词 不饱和脂肪酸 脂肪酸去饱和酶2 克隆 温度表达
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皖西白鹅育肥期肌肉脂肪酸组成及肝PPARα、FADS2和ME1基因表达规律的研究 被引量:12
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作者 陈兴勇 赵宁 +1 位作者 张燕 耿照玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1912-1919,共8页
旨在探明皖西白鹅育肥期肌肉脂肪酸组成及肝脂肪酸合成相关基因的表达规律。本研究选取同批出雏的70日龄时体重相近的皖西白鹅60只,分为3个重复,每个重复20只,育肥至100日龄。育肥期每10d(70~100日龄)从各重复取5只屠宰,分离胸肌、腿肌... 旨在探明皖西白鹅育肥期肌肉脂肪酸组成及肝脂肪酸合成相关基因的表达规律。本研究选取同批出雏的70日龄时体重相近的皖西白鹅60只,分为3个重复,每个重复20只,育肥至100日龄。育肥期每10d(70~100日龄)从各重复取5只屠宰,分离胸肌、腿肌和肝。气相色谱法检测肌肉脂肪酸组成,RT-PCR分析肝PPARα、FADS2和ME1基因相对表达量。结果表明:1)胸肌饱和脂肪酸含量高于腿肌(P<0.000 1),单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸含量均低于腿肌(P=0.044,P=0.017);C16∶1和C18∶2含量随育肥时间增加,C18∶0含量随育肥时间下降。2)PPARα在育肥20d高表达,育肥30d低表达(P<0.000 1);FADS2育肥10d时表达量最高(P=0.009);ME1育肥30d表达量最低(P=0.010)。3)PPARα表达量上升伴随C16∶1、C18∶3、UFA/SFA含量上升,同时SFA含量下降;FADS2表达量上升伴随C16∶1、C18∶1、C18∶3、MUFA和UFA/SFA含量上升,SFA、PUFA含量下降。ME1基因的表达量上升则C16∶1、C18∶1、C18∶3、MUFA和UFA/SFA上升,同时C18∶0、C20∶3和SFA含量下降。皖西白鹅PPARα、FADS2和ME1基因相对表达量均和脂肪酸组成显著相关,可作为脂肪酸性状选育的候选基因。 展开更多
关键词 皖西白鹅 脂肪酸组成 PPARΑ fads2 ME1
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中国荷斯坦牛FADS2基因c.908 C>T突变对泌乳性能和乳中脂肪酸组成的影响 被引量:2
4
作者 王梦琦 朱小瑞 +5 位作者 邢世宇 王文强 刘贤慧 张慧敏 杨章平 毛永江 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第3期1-6,共6页
【目的】探讨中国荷斯坦牛脂肪酸脱氢酶2(FADS2)基因编码区c.908C>T突变对泌乳性能和乳中脂肪酸组成的影响。【方法】以江苏某大型奶牛场865头中国荷斯坦牛为材料,用飞行时间质谱法对FADS2基因编码区c.908C>T突变位点进行检测,并... 【目的】探讨中国荷斯坦牛脂肪酸脱氢酶2(FADS2)基因编码区c.908C>T突变对泌乳性能和乳中脂肪酸组成的影响。【方法】以江苏某大型奶牛场865头中国荷斯坦牛为材料,用飞行时间质谱法对FADS2基因编码区c.908C>T突变位点进行检测,并用最小二乘模型分析该位点对泌乳性状和乳中脂肪酸组成的影响。【结果】FADS2基因c.908C>T位点有3种基因型:CC、CT和TT,优势基因型为CT型,C基因为优势等位基因。关联分析发现,该位点对日产奶量、体细胞评分(SCS)及乳脂、乳糖、总固体含量5个性状的影响均达到显著水平(P<0.05),对乳蛋白和乳中尿素氮含量的影响不显著(P>0.05)。多重比较表明:CC型个体日产奶量及乳糖、总固体含量均显著低于TT型个体,而SCS显著高于CT和TT型个体;该位点突变对乳中C14:1、C16:0、C16:1、C18:0、C18:3等5种脂肪酸含量和C14、C16和C18不饱和指数的影响均达到极显著水平(P<0.01),TT基因型个体乳中C16:1含量、C16和C18不饱和指数极显著高于CC和CT型个体(P<0.01)。【结论】FADS2基因编码区c.908C>T突变对中国荷斯坦牛泌乳性能和乳中脂肪酸组成有重要影响,TT基因型具有较高的日产奶量、总固体和C16:1含量及C16和C18不饱和指数。 展开更多
关键词 fads2基因 单核苷酸多态性 泌乳性能 脂肪酸组成 中国荷斯坦牛
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FADS2基因 c.1571 A>G 突变对中国荷斯坦牛泌乳性状的影响
5
作者 王梦琦 倪炜 +6 位作者 唐程 郭佳禾 张强 梁艳 张慧敏 李明勋 毛永江 《安徽农业科学》 CAS 2019年第10期92-93,115,共3页
[目的]探索FADS2基因c.1571A>G多态性对中国荷斯坦牛泌乳性状的影响。[方法]对866头中国荷斯坦牛FADS2基因c.1571A>G位点进行多态性分析,采用最小二乘法分析其对泌乳性状的影响。[结果]FADS2c.1571A>G对日产奶量、乳蛋白率、... [目的]探索FADS2基因c.1571A>G多态性对中国荷斯坦牛泌乳性状的影响。[方法]对866头中国荷斯坦牛FADS2基因c.1571A>G位点进行多态性分析,采用最小二乘法分析其对泌乳性状的影响。[结果]FADS2c.1571A>G对日产奶量、乳蛋白率、乳脂率、总固形物以及尿素氮含量等泌乳性状有显著影响(P<0.05)。GG基因型个体具有较高的日产奶量,而AA型个体的乳脂率、乳蛋白率及总固形物含量显著高于其他基因型个体。FADS2c.1571A>G突变对体细胞评分(SCS)无显著影响(P>0.05)。[结论]FADS2可作为优化中国荷斯坦牛泌乳性能的潜在分子标记。 展开更多
关键词 fads2 c.1571A>G 体细胞评分 泌乳性状
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中国荷斯坦牛FADS2基因3′端SNP突变对乳中脂肪酸组成的影响 被引量:7
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作者 徐晨希 王梦琦 +7 位作者 朱小瑞 张玉锋 夏海磊 刘贤慧 王小龙 张慧敏 杨章平 毛永江 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2194-2202,共9页
【目的】FADS2是多不饱和脂肪酸合成中关键的限速酶之一,可催化食物中亚油酸(LNA,C18:2n6)合成γ-亚麻酸(GLA,C18:3n6)、二十碳五烯酸(EPA,C20:5n3)、二十二碳六烯酸(DHA,C22:6n3)等长链脂肪酸。试验旨在探讨中国荷斯坦牛FA... 【目的】FADS2是多不饱和脂肪酸合成中关键的限速酶之一,可催化食物中亚油酸(LNA,C18:2n6)合成γ-亚麻酸(GLA,C18:3n6)、二十碳五烯酸(EPA,C20:5n3)、二十二碳六烯酸(DHA,C22:6n3)等长链脂肪酸。试验旨在探讨中国荷斯坦牛FADS2基因3′端非编码区SNP突变对乳中脂肪酸含量的影响。【方法】随机选择20头无亲缘关系的中国荷斯坦牛样本,用直接测序列法检测FADS2基因3′端非编码区SNP突变位点。再以江苏某大型奶牛场551头中国荷斯坦牛为材料,用飞行时间质谱法对前期发现的2个SNP位点进行检测,同时利用最小二乘模型分析了SNP突变及其单倍型对乳中脂肪酸含量及其不饱和指数的影响。【结果】中国荷斯坦牛FADS2基因3′端非编码区存在3个SNP突变位点:c.1571 A〉G、c.2743 A〉G、c.2776 A〉G。c.1571 A〉G位点GG型为优势基因型,基因型频率为0.800,G为优势等位基因,基因频率为0.887。c.2776 A〉G位点AA为优势基因型,基因型频率为0.673,A为优势等位基因,基因频率为0.819。χ^2检验表明:c.2776 A〉G位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P〉0.05),而c.1571 A〉G位点基因型分布均偏离Hardy-Weinberg平衡(P〈0.05)。FADS2基因c.1571 A〉G位点与c.2776 A〉G位点间连锁不平衡系数r2为0.028,未达到显著水平(P〉0.05)。c.1571A〉G位点与c.2776 A〉G位点有3种单倍型,GA、GG和AA频率分别为0.705、0.181和0.114。多因素方差分析表明:FADS2-1571对C14:1含量、C14和C18不饱和指数的影响达到极显著水平(P〈0.01),对C18:0、SFA和MUFA含量的影响达到显著水平(P〈0.05)。GG型个体乳中C14:1含量、C14和C18不饱和指数显著高于AG型(P〈0.05)。FADS2-2776位点对C16:1含量、C16和C20不饱和指数的影响达到极显著水平(P〈0.01),对C14:1含量的影响达到显著水平(P〈0.05),GG型个体乳中C16:1含量、C16和C20不饱和指数显著高于AG型和AA型(P〈0.05)。同时,FDAS2-1571-2776单倍型对C16:1含量和C20不饱和指数的影响达到显著水平(P〈0.05),单倍型GG型个体乳中C16:1含量和C20不饱和指数显著高于GA型和AA型(P〈0.05)。【结论】FADS2基因3′端非编码区SNP突变对中国荷斯坦牛乳中脂肪酸组成有重要影响。在进一步验证其功能情况下,可作为影响中国荷斯坦奶牛乳脂肪酸组成的主效基因加以利用。 展开更多
关键词 中国荷斯坦牛 fads2 SNPS 脂肪酸组成
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水牛FADS2基因的电子克隆及序列分析 被引量:4
7
作者 马小娅 庞春英 +5 位作者 梁莎莎 陆杏蓉 朱鹏 段安琴 梁贤威 邓廷贤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期2829-2836,共8页
试验旨在利用电子克隆法对水牛Δ6脂肪酸脱氢酶(Δ6-fatty acid desaturases,FADS2)基因进行克隆和生物信息学分析,为探究FADS2基因对水牛泌乳性能的作用机制奠定基础。以奶牛FADS2基因序列(Gen Bank登录号:NM_001083444.1)为探针设计引... 试验旨在利用电子克隆法对水牛Δ6脂肪酸脱氢酶(Δ6-fatty acid desaturases,FADS2)基因进行克隆和生物信息学分析,为探究FADS2基因对水牛泌乳性能的作用机制奠定基础。以奶牛FADS2基因序列(Gen Bank登录号:NM_001083444.1)为探针设计引物,利用电子克隆法克隆水牛FADS2基因,并通过RT-PCR验证,对FADS2基因的序列特征进行生物信息学分析。测序结果表明,水牛FADS2基因序列全长为36 600 bp,由12个外显子和11个内含子组成,包含一个长1 335 bp的开放阅读框,可编码444个氨基酸。序列同源性分析显示,水牛FADS2基因编码序列与牦牛、黄牛、人、猪、家兔、虎鲸和褐家鼠序列的同源性分别为98.88%、98.88%、89.66%、90.79%、90.85%、92.35%和87.11%。蛋白质预测分析表明,水牛FADS2蛋白分子质量为52.51 ku,理论等电点(p I)为8.75,呈弱碱性,属于亲水性蛋白,无信号肽。系统进化树分析结果表明,FADS2基因在不同物种及进化的过程中具有高度保守性,其中水牛与牦牛、黄牛亲缘关系较近,与褐家鼠亲缘关系较远。水牛FADS2基因的成功克隆为今后阐明水牛泌乳性能的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 水牛 fads2基因 电子克隆 生物信息学分析
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FADS2基因在奶牛乳腺细胞中的过表达和干扰研究 被引量:3
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作者 马小娅 庞春英 +4 位作者 邓廷贤 段安琴 陆杏蓉 梁莎莎 梁贤威 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期652-660,共9页
为了研究脂肪酸脱氢酶2(fatty acid desaturases 2,FADS2)基因在奶牛乳腺细胞脂肪酸代谢中的作用,本研究在奶牛乳腺上皮细胞中对FADS2基因进行过表达和干扰,研究FADS2基因表达对脂肪酸合成相关基因的调控及对奶牛乳腺上皮细胞中甘油三... 为了研究脂肪酸脱氢酶2(fatty acid desaturases 2,FADS2)基因在奶牛乳腺细胞脂肪酸代谢中的作用,本研究在奶牛乳腺上皮细胞中对FADS2基因进行过表达和干扰,研究FADS2基因表达对脂肪酸合成相关基因的调控及对奶牛乳腺上皮细胞中甘油三酯含量的影响。针对FADS2基因的CDS序列设计siRNA和过表达载体pcDNA3.1-FADS2-EGFP,转染奶牛乳腺细胞检测FADS2基因过表达和干扰对脂肪酸代谢相关基因表达的影响及细胞中甘油三酯含量的变化。结果显示,试验成功获得过表达载体pcDNA3.1-FADS2-EGFP和干扰片段,转染细胞后具有良好的过表达和干扰效果。FADS2基因过表达后,1-酰基甘油磷酸酰基转移酶(AGPAT1)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、3-磷酸甘油转移酶(GPAM)、脂肪酸延长链5(ELOVL5)、乙酰辅酶A酰基转移酶1(ACAA1)、脂肪酸脱氢酶1(FADS1)、二酰基甘油转酰基酶1(DGAT1)和过氧化物酶体增殖激活受体α(PPARα)基因显著下调(P<0.05),脂滴蛋白2(PLIN2)基因极显著上调(P<0.01)。FADS2基因干扰过后可引起AGPAT1、GPAM、ELOVL5、ACAA1、PLIN2和FADS1基因显著上调(P<0.05),脂肪酸合成胰岛素诱导基因1(INSIG1)极显著上调(P<0.01),DGAT1和PPARα基因显著下调(P<0.05)。甘油三酯检测结果显示,FADS2基因过表达和干扰均可降低奶牛乳腺上皮细胞中甘油三酯的含量。综上所述,在奶牛乳腺上皮细胞中,FADS2基因能调控脂质合成相关基因的表达,对乳腺脂质合成具有调控作用。 展开更多
关键词 奶牛乳腺细胞 fads2基因 过表达 干扰 脂肪酸合成
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不同脂肪源饲料对斑马鱼elovl5、elovl2和fads2在高度不饱和脂肪酸合成中的作用影响 被引量:2
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作者 王玉梅 任天应 高坚 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期138-145,共8页
为探究延长酶5(elovl5)、延长酶2(elovl2)和去饱和酶2(fads2)基因在淡水鱼高度不饱和脂肪酸(HUFA)合成中的相互作用,利用CRISPR/Cas9技术,成功构建出斑马鱼elovl5^(-/-)(以下简称E5^(-/-)组)、elovl2^(-/-)×elovl5^(-/-)(以下简称E... 为探究延长酶5(elovl5)、延长酶2(elovl2)和去饱和酶2(fads2)基因在淡水鱼高度不饱和脂肪酸(HUFA)合成中的相互作用,利用CRISPR/Cas9技术,成功构建出斑马鱼elovl5^(-/-)(以下简称E5^(-/-)组)、elovl2^(-/-)×elovl5^(-/-)(以下简称E2^(-/-)×E5^(-/-)组)、elovl5^(-/-)×fads2^(-/-)(以下简称E5^(-/-)×F2^(-/-)组)、elovl2^(-/-)×elovl5^(-/-)×fads2^(-/-)(以下简称E2^(-/-)×E5^(-/-)×F2^(-/-)组)4种突变体模型,并对4种突变体进行大豆油饲料(SO)和亚麻芥油饲料(CO)的投喂试验,研究斑马鱼elovl5、elovl2和fads2在HUFA合成过程中对饲料不同脂肪源的响应。结果显示,在E5^(-/-)组和E2^(-/-)×E5^(-/-)组中,C18PUFA未出现明显累积,而E5^(-/-)×F2^(-/-)组和E2^(-/-)×E5^(-/-)×F2^(-/-)组中的C18:3n-3(ALA)和C18:2n-6(LNA)呈现显著的累积。elovl2、elovl5和fads2缺失后,肝脏elovl4a和elovl4b表达明显上升。不同脂肪源饲料投喂试验结果显示,SO饲料投喂后的E5^(-/-)组DHA含量与野生型(WT)无显著差异,E5^(-/-)×F2^(-/-)组较WT组DHA含量显著降低。然而,CO饲料投喂后的E5^(-/-)组DHA含量较WT组呈现显著升高,E5^(-/-)×F2^(-/-)组与WT无显著差异。fads2缺失斑马鱼去饱和作用受到显著影响,表明,fads2是HUFA合成过程中的必需酶。而elovl2和elovl5缺失的表型可能会被其他HUFA合成途径所弥补。以上结果表明,elovl2和elovl5在HUFA合成中存在基因间相互作用,fads2作为去饱和酶在HUFA合成中必不可少。 展开更多
关键词 elovl5 elovl2 fads2 HUFA 相互作用 斑马鱼 不同脂肪源饲料
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FADS1、FADS2基因多态性与中国汉族孤独症谱系障碍的关联研究 被引量:2
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作者 康晶 邹明扬 +5 位作者 马永娟 宋小欢 孙彩虹 郝艳秋 夏薇 武丽杰 《中国儿童保健杂志》 CAS 2017年第12期1196-1199,1214,共5页
目的分析参与多不饱和脂肪酸代谢的FADS1和FADS2基因单核苷酸多态性(SNPs)与中国汉族孤独症谱系障碍(ASD)患儿的相关性。方法采用病例对照的研究方法,收集病例和对照各243例,采集外周血并提取DNA。利用人类基因库数据和Haploview 4.2软... 目的分析参与多不饱和脂肪酸代谢的FADS1和FADS2基因单核苷酸多态性(SNPs)与中国汉族孤独症谱系障碍(ASD)患儿的相关性。方法采用病例对照的研究方法,收集病例和对照各243例,采集外周血并提取DNA。利用人类基因库数据和Haploview 4.2软件筛选FADS1和FADS2基因的标签SNPs,采用Sequenom Mass ARRAY系统对SNPs进行基因分型,采用Logistic回归分析标签SNPs与ASD发病风险之间的关联。结果病例组和对照组儿童FADS2基因的rs526126等位基因频率和基因型频率差异有统计学意义[G等位基因OR=0.54(0.41~0.72),G/G基因型OR=0.05(0.02~0.19),P均<0.001]。结论 FADS2基因可能与中国汉族儿童ASD发病风险存在关联性。 展开更多
关键词 孤独症谱系障碍 FADS1基因 fads2基因 多不饱和脂肪酸 单核苷酸多态性
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杜仲皮水提取物调节circFADS2靶向miR-491-5p干预类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长与凋亡 被引量:5
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作者 郑国洪 孙斌 +1 位作者 王晶晶 杨正明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2044-2049,共6页
目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和... 目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和2.7 g/L)处理RA-FLS,CCK-8法检测细胞活力,选取最适WEEC浓度进行后续实验。细胞分别转染pcDNA-circFADS2和/或anti-miR-491-5p,探讨WEEC对RA-FLS生长与凋亡的影响及分子机制:用CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测cleaved caspase-3的蛋白水平;RT-qPCR检测环状RNA-FADS2(circular RNA-FADS2,circFADS2)和miR-491-5p的表达水平;双萤光素酶基因报告实验检测circ-FADS2和miR-491-5p的靶向关系。结果:不同浓度WEEC处理后,RA-FLS的活力降低,凋亡率升高,cleaved cas-pase-3蛋白水平升高,circFADS2表达水平降低,miR-491-5p表达水平升高(P<0.05)。过表达circFADS2或抑制miR-491-5p表达后,WEEC处理的细胞活力升高,凋亡率及cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。circFADS2靶向调控miR-491-5p,过表达miR-491-5p逆转了circFADS2质粒对WEEC处理的RA-FLS活力与凋亡的影响。结论:杜仲皮水提取物通过调节circFADS2/miR-491-5p抑制类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长并促进其凋亡。 展开更多
关键词 杜仲皮水提取物 环状RNA-fads2 微小RNA-491-5p 类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞 细胞活力 细胞凋亡
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FADS1/FADS2基因多态性与冠心病发病的关联性分析 被引量:6
12
作者 孙琳 廖羽 +4 位作者 叶琳 曹洪倩 陈玉喜 秦玲 谢林 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期115-118,共4页
目的:探讨多不饱和脂肪酸代谢限速酶基因FADS1和FADS2单核苷酸多态性与冠心病的关系,阐明FADS1/FADS2在冠心病发生中的作用机制。方法:在我国北方汉族人群中选择237例冠心病患者和224例健康体检者作为研究对象,采用问卷调查表收集基本信... 目的:探讨多不饱和脂肪酸代谢限速酶基因FADS1和FADS2单核苷酸多态性与冠心病的关系,阐明FADS1/FADS2在冠心病发生中的作用机制。方法:在我国北方汉族人群中选择237例冠心病患者和224例健康体检者作为研究对象,采用问卷调查表收集基本信息,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测FADS1基因的rs174556位点和FADS2基因的rs174617位点,采用遗传学软件UNPHASED3.012和统计学软件SPSS 13.0分析2位点的联合作用及等位基因和基因型频数分布。结果:病例组和对照组的各位点基因型频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。病例组和对照组rs174556位点的等位基因和基因型频数分布差异有统计学意义,病例组次等位基因T及基因型TT的携带者频数显著高于对照组(P=0.009,P=0.038)。rs174556-rs174617基因型系统与冠心病的发生无关联(P>0.05)结论:在中国北方汉族人群中FADS1基因的rs174556位点基因多态性可能与冠心病发病有关联。 展开更多
关键词 冠心病 F ADS1基因 F ADS2基因 基因多态性
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FADS2基因rs174575多态性与乳汁多不饱和脂肪酸水平的关系研究 被引量:1
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作者 丁珍 李响 +3 位作者 吴义霞 陈雪妍 崔璨璨 谢林 《中国妇幼保健》 CAS 2015年第20期3464-3466,共3页
目的 探讨Δ6去饱和酶基因(FADS2)rs174575位点基因多态性对乳汁多不饱和脂肪酸(PUFA)水平的影响。方法 采用3天24 h膳食回顾调查乳母膳食PUFA摄入情况;于乳母产后22-25天收取成熟乳20 ml,气相色谱仪检测乳汁8种PUFA水平,试剂盒提... 目的 探讨Δ6去饱和酶基因(FADS2)rs174575位点基因多态性对乳汁多不饱和脂肪酸(PUFA)水平的影响。方法 采用3天24 h膳食回顾调查乳母膳食PUFA摄入情况;于乳母产后22-25天收取成熟乳20 ml,气相色谱仪检测乳汁8种PUFA水平,试剂盒提取乳汁基因组DNA,并运用Sequenom mass array平台检测FADS2基因rs174575位点基因多态性。结果rs174575位点主等位基因C频率为90.2%,次等位基因G频率为9.8%;主等位基因纯合子CC携带者乳汁a-亚麻酸(ALA)低于G等位基因携带者ALA水平;而主等位基因纯合子CC携带者n-6与n-3系PUFA比值大于G等位基因携带者比值。结论 FADS2 rs174575基因多态性与乳母乳汁ALA水平及n-6/n-3比值水平相关联。 展开更多
关键词 △6去饱和酶基因 基因多态性 脂肪酸 膳食
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黄斑蓝子鱼Δ6Δ5 Fads2蛋白重组表达和多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 陈翠英 程宇 +5 位作者 王懿 范春兰 钟文杰 陈创思 李远友 王树启 《汕头大学学报(自然科学版)》 2022年第3期50-57,共8页
黄斑蓝子鱼(Siganus canaliculatus)是首个被发现具有长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)合成能力的海水鱼类,而脂肪酸去饱和酶(Fads2)是内源性合成LC-PUFA的关键限速酶.为深入研究鱼类Δ6Δ5 Fads2的生物学功能及其表达调控机制,本研究选取... 黄斑蓝子鱼(Siganus canaliculatus)是首个被发现具有长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)合成能力的海水鱼类,而脂肪酸去饱和酶(Fads2)是内源性合成LC-PUFA的关键限速酶.为深入研究鱼类Δ6Δ5 Fads2的生物学功能及其表达调控机制,本研究选取黄斑蓝子鱼Δ6Δ5 fads2基因的编码区序列长255 bp,通过限制性内切酶EcoR I和BamH I双酶切,将其插入质粒pGEX-6p-1,获得Δ6Δ5 fads2基因的重组表达载体,经IPTG诱导表达获得大量重组表达蛋白.以纯化后的Δ6Δ5 Fads2重组蛋白为抗原注射免疫KM小鼠后提取血清,并进行Western blot鉴定产生多克隆抗体的特异性.结果表明,本研究成功构建了pGEX-6p-1-Δ6Δ5 Fads2原核表达载体,表达纯化后获得大小约35.4 ku的Δ6Δ5 Fads2重组表达蛋白,利用KM小鼠得到的多克隆抗体特异性好,其效价约为1∶3.2×104.该抗体可为深入研究鱼类Δ6Δ5 Fads2的生物学功能及其表达调控机制提供基础条件,从而有助于研发提高鱼体内源性LC-PUFA合成能力的方法,降低养殖鱼类饲料中鱼油添加比例,促进养殖业的健康发展. 展开更多
关键词 黄斑蓝子鱼 Δ6Δ5 fads2 诱导表达与纯化 多克隆抗体 Western blot
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FADS2对鸡前脂肪细胞脂肪酸代谢相关基因表达的影响 被引量:1
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作者 欧小倩 王莹 +3 位作者 何程实 李春晖 刘国庆 杨少华 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第9期1269-1275,共7页
脂肪酸的含量及比例对改善鸡肉品质和风味起着重要作用,因此探究调控脂肪酸代谢的关键基因和作用机制能够为改善鸡肉品质提供新的科学依据。基于前期RNA-seq结果,确定脂肪酸脱氢酶2(FADS2)为影响鸡不饱和脂肪酸比率的关键基因。文章构建... 脂肪酸的含量及比例对改善鸡肉品质和风味起着重要作用,因此探究调控脂肪酸代谢的关键基因和作用机制能够为改善鸡肉品质提供新的科学依据。基于前期RNA-seq结果,确定脂肪酸脱氢酶2(FADS2)为影响鸡不饱和脂肪酸比率的关键基因。文章构建FADS2基因RNA干扰慢病毒表达载体,转染鸡前脂肪细胞并鉴定干扰效率,筛选出有效干扰片段并进行正式试验,通过设置阴性对照组,转录组测序检测相关基因表达。结果表明,190个基因显著差异性表达,其中65个基因下调,125个基因上调。通过比较基因组学和基因功能分析,鉴定出STAT1、LY86、FABP5、OGFR、ACTA1、SLC5A6、NCOA7、KLF2、KLF4、ACSL5和FABP3基因可能是FADS2基因影响脂肪酸代谢的相关下游基因,为深入研究脂肪酸代谢过程提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 fads2基因 鸡前脂肪细胞 转录组测序 差异表达基因 下游基因
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FADS2基因rs174575和rs2845574单核苷酸多态性与妊娠妇女血脂与血压的相关性研究
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作者 郭钰雯 白怀 +4 位作者 关林波 刘兴会 范平 吴玉洁 李遂焰 《中华医学遗传学杂志》 2025年第6期675-683,共9页
目的探讨多不饱和脂肪酸去饱和酶2(FADS2)基因rs174575和rs2845574单核苷酸多态性(SNP)与妊娠糖尿病(GDM)患者血脂水平间的关系。方法选取2013年1月1日至2021年12月31日于四川大学华西第二医院就诊的1 514例孕妇为研究对象, 其中GDM患者... 目的探讨多不饱和脂肪酸去饱和酶2(FADS2)基因rs174575和rs2845574单核苷酸多态性(SNP)与妊娠糖尿病(GDM)患者血脂水平间的关系。方法选取2013年1月1日至2021年12月31日于四川大学华西第二医院就诊的1 514例孕妇为研究对象, 其中GDM患者583例(GDM组), 正常妊娠妇女931例(对照组)。应用Sanger测序法对所有孕妇FADS2基因rs174575和rs2845574多态性进行检测;用酶法、化学发光法、免疫透射比浊法分别检测所有孕妇的血脂、血浆胰岛素(INS)、载脂蛋白A1(apoA1)与载脂蛋白B(apoB)水平。对GDM组与对照组孕妇FADS2基因rs174575和rs2845574多态性与临床指标的相关性进行分析。本研究已获得四川大学华西第二医院医学伦理委员会的审查(批准号:2020-036)。结果①GDM组和对照组FADS2基因rs174575 C/G和rs2845574 C/T位点均以CC基因型为主;两位点基因型和等位基因频率在组间无统计学差异(P>0.05)。②在GDM组中, rs174575位点GG基因型携带者血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于CC基因型携带者(P<0.05), 动脉粥样硬化指数(AI)高于CC和CG基因型携带者(P<0.05;P<0.05);rs2845574位点TT基因型携带者AI高于CT基因型携带者(P<0.05)。在对照组中, rs174575位点GG基因型携带者舒张压(DBP)水平低于CC基因型携带者(P<0.05)。③根据体质量指数(BMI)划分肥胖与非肥胖亚组, rs174575位点与GDM肥胖亚组AI水平、对照非肥胖亚组甘油三酯(TG)水平及对照肥胖亚组DBP水平均存在关联(P<0.05;P<0.05;P<0.05)结论 FADS2基因rs174575和rs2845574位点多态性与GDM患者HDL-C与AI水平有关联, rs174575位点与正常孕妇DBP水平有关联, 且AI与DBP水平变化均具有BMI依赖特性。 展开更多
关键词 多不饱和脂肪酸去饱和酶2 妊娠糖尿病 fads2基因 单核苷酸多态性 孕妇
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利用FAD2分子标记构建花生荚果大小RIL群体
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作者 胡畅丽 李鑫 +7 位作者 李晶晶 纪红昌 唐艳艳 邹晓霞 姜德锋 郭宝太 王晶珊 乔利仙 《分子植物育种》 北大核心 2025年第20期6751-6756,共6页
遗传群体是作物遗传图谱构建、新基因挖掘以及种质资源利用的基础。本研究为花生荚果大小基因定位构建重组近交系(recombinant inbred line,RIL)遗传群体,首先利用A hFAD2基因型为aaBB的大果花生品种‘鲁花11’和基因型为aabb的小果花... 遗传群体是作物遗传图谱构建、新基因挖掘以及种质资源利用的基础。本研究为花生荚果大小基因定位构建重组近交系(recombinant inbred line,RIL)遗传群体,首先利用A hFAD2基因型为aaBB的大果花生品种‘鲁花11’和基因型为aabb的小果花生品系BC54进行杂交获得F_(1),利用KASP标记检测F_(1)基因型筛选真杂种aaBb,然后单粒播种杂种F_(1),收获F_(2)株系。测量每个F_(2)株系荚果长度,选留荚果长度存在分离表现的株系。对于荚果长度无明显分离的株系,取F_(2)各单株叶片等量混合后提取DNA,利用KASP标记检测FAD2的基因型,保留出现FAD2b位点的杂合株系、淘汰基因型为aaBB的纯合株系。经二次筛选的真杂种后代通过连续自交选育出包含520个家系的RIL群体。本研究利用非目标性状FAD2分子标记进行F_(1)杂种鉴定,有效节约时间和成本,成功构建RIL群体,为花生荚果大小基因定位和新品种选育提供了定位群体及基因资源。 展开更多
关键词 花生 RIL群体 FAD2标记 KASP 荚果大小
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Construction of a high-density genetic map to explore the genetic regulation of erucic acid, oleic acid, and linolenic acid contents in Brassica juncea
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作者 Wei Yan Jinze Zhang +5 位作者 Yingfen Jiang Kunjiang Yu Qian Wang Xu Yang Lijing Xiao Entang Tian 《Journal of Integrative Agriculture》 2025年第6期2171-2189,共19页
Rapeseed mustard(Brassica juncea L.) is the third most important oilseed crop in the world, but the geneticmechanism underlying its massive phenotypic variation remains largely unexplored. In this study, specific leng... Rapeseed mustard(Brassica juncea L.) is the third most important oilseed crop in the world, but the geneticmechanism underlying its massive phenotypic variation remains largely unexplored. In this study, specific length amplified fragment sequencing(SLAF-Seq) was used to resequence a population comprising 197 F8recombinantinbred lines(RILs) derived from a cross between vegetable-type Qichi881 and oilseed-type YufengZC of B. juncea. In total, 438,895 high-quality SLAFs were discovered, 47,644 of which were polymorphic, and 3,887 of the polymorphic markers met the requirements for genetic map construction. The final map included 3,887 markers on 18 linkage groups and was 1,830.23 centiMorgan(cM) in length, with an average distance of 0.47 cM between adjacent markers. Using the newly constructed high-density genetic map, a total of 53 QTLs for erucicacid(EA), oleic acid(OA), and linolenic acid(LNA) were detected and integrated into eight consensus QTLswith two for each of these traits. For each of these three traits, two candidate genes were cloned and sequence analysis indicated colocalization with their respective consensus QTLs. The co-dominant allele-specific markers for Bju.FAD3.A03 and Bju.FAD3.B07 were developed and showed co-localization with their consensus QTLs andco-segregation with LNA content, further supporting the results of QTL mapping and bioinformatic analysis. Theexpression levels of the cloned homologous genes were also determined, and the genes were tightly correlatedwith the EA, OA and LNA contents of different lines. The results of this study will facilitate the improvement offatty acid traits and molecular breeding of B. juncea. Further uses of the high-density genetic map created in this study are also discussed. 展开更多
关键词 Brassica juncea high-density genetic map Bju.FAE1 Bju.FAD2 Bju.FAD3
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驴脂肪酸去饱和酶2基因克隆及组织表达规律的研究
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作者 黄飞 杜心怡 +2 位作者 刘桂芹 王长法 周苗苗 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期1204-1212,共9页
本研究克隆了驴脂肪酸去饱和酶2(FADS2)基因并进行了生物信息学分析,检测了其在驴不同组织中的表达。通过设计FADS2基因引物,PCR克隆得到其CDS序列,然后对FADS2基因编码产物进行生物信息学预测,同时使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测驴... 本研究克隆了驴脂肪酸去饱和酶2(FADS2)基因并进行了生物信息学分析,检测了其在驴不同组织中的表达。通过设计FADS2基因引物,PCR克隆得到其CDS序列,然后对FADS2基因编码产物进行生物信息学预测,同时使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测驴心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、脂肪、乳腺内FADS2基因相对表达量。结果显示:驴FADS2基因CDS长1335 bp,可编码444个氨基酸,FADS2蛋白分子质量为52.43 ku,等电点为8.29,不稳定指数为37.22,疏水性总平均值为-0.231,属于稳定碱性亲水蛋白;FADS2蛋白二级结构主要由α-螺旋(51.80%)和无规则卷曲(37.61%)构成。FADS2基因在所检测驴组织中均有表达,其中在脂肪和乳腺中相对表达量最高,其次为脾脏、肺脏、肾脏、心脏和肝脏,肌肉中相对表达量最低。结果提示,FADS2可能在驴脂肪和乳腺等组织不饱和脂肪酸的合成过程中发挥重要作用。本研究可为进一步探究驴脂肪和驴乳中高不饱和脂肪酸的合成机理提供基础。 展开更多
关键词 fads2 基因克隆 生物信息学分析 脂质代谢
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薏苡ClSAD、ClFAD2基因单倍型鉴定与相关脂肪酸关联分析 被引量:1
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作者 尚昆 付瑜华 +3 位作者 李秀诗 蒙秋伊 杨玲玲 朱加保 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1756-1766,共11页
薏苡仁油是薏苡仁主要功能性物质之一,脂肪酸是其重要组成部分。以中国9个省份的190份薏苡种质为材料,检测其种仁硬脂酸、油酸、亚油酸含量,分析ClSAD、ClFAD2基因序列多态性并鉴定单倍型,进行脂肪酸含量单倍型关联分析。结果表明,不同... 薏苡仁油是薏苡仁主要功能性物质之一,脂肪酸是其重要组成部分。以中国9个省份的190份薏苡种质为材料,检测其种仁硬脂酸、油酸、亚油酸含量,分析ClSAD、ClFAD2基因序列多态性并鉴定单倍型,进行脂肪酸含量单倍型关联分析。结果表明,不同薏苡种质种仁3种脂肪酸含量存在广泛变异,变异系数为15.84%~23.05%,遗传多样性指数为5.22~5.23,其中油酸含量最高,硬脂酸含量最低,各脂肪酸组分间呈极显著正相关。ClSAD和ClFAD2内部各有14个和3个SNP,分别鉴定到5个单倍型组合,ClSAD基因单倍型Hap3和ClFAD2基因单倍型Hap1分别与参考基因组一致。ClSAD基因单倍型Hap3与硬脂酸含量显著关联且具有负效应,利于硬脂酸向油酸转化。ClFAD2基因单倍型Hap1利于亚油酸的积累,而Hap2与亚油酸酸含量显著关联且具有负效应,不利于亚油酸的合成。在2个基因内部各鉴定到1个关键SNP位点,分别是形成SAD和FAD2酶活性差异的关键位点。研究结果将为高油薏苡优良品种的选育、分子标记开发和相关分子机制解析提供理论基础。 展开更多
关键词 薏苡 脂肪酸 单倍型 硬脂酸脱饱和酶SAD基因 油酸脱饱和酶FAD2基因
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