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利用FAD2分子标记构建花生荚果大小RIL群体
1
作者 胡畅丽 李鑫 +7 位作者 李晶晶 纪红昌 唐艳艳 邹晓霞 姜德锋 郭宝太 王晶珊 乔利仙 《分子植物育种》 北大核心 2025年第20期6751-6756,共6页
遗传群体是作物遗传图谱构建、新基因挖掘以及种质资源利用的基础。本研究为花生荚果大小基因定位构建重组近交系(recombinant inbred line,RIL)遗传群体,首先利用A hFAD2基因型为aaBB的大果花生品种‘鲁花11’和基因型为aabb的小果花... 遗传群体是作物遗传图谱构建、新基因挖掘以及种质资源利用的基础。本研究为花生荚果大小基因定位构建重组近交系(recombinant inbred line,RIL)遗传群体,首先利用A hFAD2基因型为aaBB的大果花生品种‘鲁花11’和基因型为aabb的小果花生品系BC54进行杂交获得F_(1),利用KASP标记检测F_(1)基因型筛选真杂种aaBb,然后单粒播种杂种F_(1),收获F_(2)株系。测量每个F_(2)株系荚果长度,选留荚果长度存在分离表现的株系。对于荚果长度无明显分离的株系,取F_(2)各单株叶片等量混合后提取DNA,利用KASP标记检测FAD2的基因型,保留出现FAD2b位点的杂合株系、淘汰基因型为aaBB的纯合株系。经二次筛选的真杂种后代通过连续自交选育出包含520个家系的RIL群体。本研究利用非目标性状FAD2分子标记进行F_(1)杂种鉴定,有效节约时间和成本,成功构建RIL群体,为花生荚果大小基因定位和新品种选育提供了定位群体及基因资源。 展开更多
关键词 花生 RIL群体 fad2标记 KASP 荚果大小
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麻醉和手术对5×FAD小鼠海马内阿尔茨海默病相关蛋白表达影响及性别差异
2
作者 张莹林 黄勇 +1 位作者 张俪 梁超 《中国临床医学》 2025年第3期493-499,共7页
目的探究麻醉和手术对5×FAD小鼠海马内阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)相关蛋白表达的影响及其性别差异。方法将5×FAD小鼠与C57BL/6J野生型(wild-type,WT)小鼠进行合笼繁殖得到子代小鼠并进行基因鉴定。将4月龄子代5&#... 目的探究麻醉和手术对5×FAD小鼠海马内阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)相关蛋白表达的影响及其性别差异。方法将5×FAD小鼠与C57BL/6J野生型(wild-type,WT)小鼠进行合笼繁殖得到子代小鼠并进行基因鉴定。将4月龄子代5×FAD小鼠和同窝同龄(littermate,LM)WT小鼠按照性别分别随机分为4组:5×FAD对照组、5×FAD麻醉和手术处理组、LM对照组、LM麻醉和手术处理组,共8组,每组8只。麻醉和手术处理组小鼠在1.4%异氟醚麻醉下进行开腹手术,对照组不行麻醉和手术。于术后24 h取小鼠海马组织,采用蛋白质印记检测β-catenin、糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3 beta,GSK3β)及p-GSK3β蛋白水平。结果雌性5×FAD鼠经麻醉和手术处理后,海马组织中β-catenin、p-GSK3β含量及p-GSK3β/GSK3β比值较对照组和雄性5×FAD鼠显著降低(P<0.05);但麻醉和手术处理对雄性5×FAD鼠海马内相关蛋白表达差异无统计学意义。结论麻醉和手术对AD小鼠的影响存在性别差异,其可能通过海马内β-catenin/GSK3β信号通路影响雌性AD患者。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 麻醉 手术 5×fad转基因鼠 性别差异 β-catenin/GSK3β
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甘蓝型油菜FAD2基因调控序列的克隆及瞬时表达分析 被引量：1
3
作者 王茂华 刘绵学 +2 位作者 李德款 杨毅 李旭锋 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第5期96-101,共6页
油酸去饱和酶FAD2(fatty acid desaturase2)是广泛存在于植物中的一种能催化油酸脱氢生成亚油酸的还原酶。根据GenBank上已知的甘蓝型油菜FAD2基因设计引物,以甘蓝型油菜(Brassica napusL.)叶片总DNA为模板,进行TAIL-PCR扩增,获得约1.4k... 油酸去饱和酶FAD2(fatty acid desaturase2)是广泛存在于植物中的一种能催化油酸脱氢生成亚油酸的还原酶。根据GenBank上已知的甘蓝型油菜FAD2基因设计引物,以甘蓝型油菜(Brassica napusL.)叶片总DNA为模板,进行TAIL-PCR扩增,获得约1.4kb片段并测序。序列比对结果说明该片段为已知的FAD2基因编码区上游序列。将该片段进行不同长度的5′端缺失,并用缺失后的序列替换pBI221-LUC质粒上的CaMV35S启动子,构建了甘蓝型油菜瞬时表达载体,进行油菜原生质体瞬时表达的初步研究,结果表明该序列5′端-669bp至-1019bp对报告基因表达水平有较大的影响。结合启动子预测分析结果,此片段中可能存在的赤霉素应答元件、光调控元件等顺式作用元件对FAD2基因的表达调控具有重要作用。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 油酸去饱和酶基因fad2 fad2启动子 原生质体瞬时表达
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GT和GATA转录因子对甘蓝型油菜BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子功能的调控 被引量：2
4
作者 刘芳 肖钢 官春云 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第24期4603-4614,共12页
【目的】脂肪酸去饱和酶2基因(FAD2)是控制油菜中油酸含量的重要基因,通过研究GATA和GT转录因子与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子的互作关系及其转录调控机制,为高油酸油菜育种提供分子理论基础。【方法】通过缺失启动子片段及生物信息学分... 【目的】脂肪酸去饱和酶2基因(FAD2)是控制油菜中油酸含量的重要基因,通过研究GATA和GT转录因子与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子的互作关系及其转录调控机制,为高油酸油菜育种提供分子理论基础。【方法】通过缺失启动子片段及生物信息学分析,预测BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子区潜在顺式作用元件;从PlantTFDB转录因子数据库中筛选候选转录因子,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转录因子的表达规律,并与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2表达规律对比,进一步筛选候选转录因子;利用酵母单杂交验证转录因子与启动子序列的互作情况;将转录因子与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子序列共转入拟南芥,通过Western blot检测报告基因GFP的蛋白表达情况,分析转录因子对于启动子功能的影响。【结果】单独敲除BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子中的GT或GATA顺式作用元件后,GFP蛋白丰度均下降,表明GT和GATA顺式作用元件在调节基因转录中起重要作用。酵母单杂交结果显示,GATA家族转录因子(Bna010243-1、Bna026124-1和Bna026124-2)和GT家族转录因子(Bna010915和Bna013749)可以与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子相互作用。Western blot结果显示,当GATA家族转录因子与含有GATA元件的启动子片段共转化拟南芥时,GFP蛋白含量明显高于无转录因子时,当敲除GATA元件时,GFP蛋白含量无明显变化;当GT家族转录因子与含有GT元件的启动子片段共转化拟南芥时,GFP蛋白含量有明显变化,当敲除GT元件时,GFP蛋白含量无明显变化。【结论】GATA家族的转录因子Bna010243-1、Bna026124-1和Bna026124-2可以与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子中GATA元件相互作用,增强基因的表达水平。GT家族的转录因子Bna010915可以与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子中的GT元件发生互作,正向调节基因表达;Bna013749通过与BnA5.FAD2和BnC5.FAD2启动子中的GT元件发生互作,负向调节基因表达。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 GATA转录因子 GT转录因子 BnA5.fad2启动子 BnC5.fad2启动子
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大豆fad3c基因沉默载体的构建
5
作者 杜景红 刘丽君 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期28-32,共5页
构建大豆fad3c基因的沉默载体,旨在为培育生物安全的高油酸低亚麻酸转基因大豆奠定基础。从高蛋白大豆黑农35中克隆大豆种子特异表达启动子GY1;从高油大豆黑农37中克隆fad2-1b基因内含子1;从5个转基因受体大豆中克隆fad3c基因片段,作为... 构建大豆fad3c基因的沉默载体,旨在为培育生物安全的高油酸低亚麻酸转基因大豆奠定基础。从高蛋白大豆黑农35中克隆大豆种子特异表达启动子GY1;从高油大豆黑农37中克隆fad2-1b基因内含子1;从5个转基因受体大豆中克隆fad3c基因片段,作为正向臂和反向臂。构建筛选标记基因为bar,启动子为GY1,内含子为fad2-1b基因内含子1的双T-DNA载体。将双T-DNA载体转化大肠杆菌DH5α,酶切和序列分析鉴定表明扩增得到的重组质粒正确,命名为pDT-GFAD3I。 展开更多
关键词 大豆fad2-1b fad3c RNAI 载体构建
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椭球体头部高超声速飞行器FADS技术实验研究
6
作者 王傲 顾蕴松 +2 位作者 赵冬凯 王维新 关兴太 《实验流体力学》 北大核心 2025年第4期62-74,共13页
相较于以探针、风标为代表的传统大气数据系统,嵌入式大气数据传感(FADS)系统在热防护、隐身性及测量精度方面更能满足高超声速飞行器任务需求。针对头部为椭球体的升力体构型高超声速飞行器,在风洞缩比实验模型头部布置11个测压孔,综... 相较于以探针、风标为代表的传统大气数据系统,嵌入式大气数据传感(FADS)系统在热防护、隐身性及测量精度方面更能满足高超声速飞行器任务需求。针对头部为椭球体的升力体构型高超声速飞行器,在风洞缩比实验模型头部布置11个测压孔,综合考虑迎角及侧滑角角度敏感性、马赫数解算精度和多冗余度等影响因素,分析选取了角度和马赫数解算时的测压孔配置方案。结合三点法与拟合算法的优势,建立了高超声速条件下的椭球体头部飞行器嵌入式大气数据传感系统解算方法,并对椭球体头部和激波带来的气流角放大效应进行修正。Ma=6的风洞实验结果表明:高超声速FADS系统解算方法的角度解算不确定度优于0.41°、准度优于0.38°,马赫数解算不确定度优于1.1%、准度优于0.52%。 展开更多
关键词 嵌入式大气数据传感 椭球体头部高超声速飞行器 气流角放大效应 解算方法 高超声速风洞实验
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油茶FAD2基因全长cDNA的克隆和序列分析 被引量：39
7
作者 谭晓风 陈鸿鹏 +6 位作者 张党权 曾艳玲 李魏 蒋瑶 谢禄山 胡孝义 胡芳名 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期70-75,共6页
FAD2基因控制油酸转化为亚油酸,是油茶油脂合成代谢的关键酶基因。在构建的油茶EST文库基础上,采用5′RACE和交错延伸PCR技术获得了油茶FAD2基因的全长cDNA克隆。该基因序列长1682bp,开放阅读框为1149bp,编码382个氨基酸,并且具有FAD2... FAD2基因控制油酸转化为亚油酸,是油茶油脂合成代谢的关键酶基因。在构建的油茶EST文库基础上,采用5′RACE和交错延伸PCR技术获得了油茶FAD2基因的全长cDNA克隆。该基因序列长1682bp,开放阅读框为1149bp,编码382个氨基酸,并且具有FAD2特有的保守序列和相关特征。经过比对分析,发现油茶的FAD2基因与其他植物的FAD2基因具有较高的相似性。 展开更多
关键词 油茶 EST文库 fad2基因 RACE 交错延伸PCR 基因克隆
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饲料LNA/LA比对鲤幼鱼生长性能,肝脏脂肪酸组成及Δ6 fad,elovl5 mRNA表达的影响 被引量：7
8
作者 谢帝芝 于若梦 +4 位作者 陈芳 卢荣华 杨丽萍 孟晓林 聂国兴 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期757-765,共9页
为了探讨饲料LNA/LA比对鲤幼鱼生长性能和LC-PUFA合成代谢的影响,本研究以鱼油和混合植物油(花生油和紫苏籽油)为脂肪源配制5组等氮等脂饲料。对照组(D1)以鱼油为唯一脂肪源,其他5组实验饲料以花生油和紫苏籽油为脂肪源,且LNA/LA比分别... 为了探讨饲料LNA/LA比对鲤幼鱼生长性能和LC-PUFA合成代谢的影响,本研究以鱼油和混合植物油(花生油和紫苏籽油)为脂肪源配制5组等氮等脂饲料。对照组(D1)以鱼油为唯一脂肪源,其他5组实验饲料以花生油和紫苏籽油为脂肪源,且LNA/LA比分别为0.02(D2)、0.46(D3)、1.09(D4)和1.53(D5)。8周养殖实验后,分析各处理组鱼体的生长性能指标、肝脏脂肪酸组成,肝脏Δ6 fad-a/b和elovl5-a/b基因表达水平。结果显示,与对照组相比,植物油饲料对鱼体增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和饲料系数(FCR)无显著影响,但显著影响了鱼体肝脏LC-PUFA水平,提高了肝脏Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA表达水平。在各植物油组之间,饲料LNA/LA比显著影响了鱼体WGR和SGR指标,其中D2和D4组鱼体生长表现较好;随着饲料中LNA/LA比的升高,鱼体肝脏LC-PUFA水平,以及Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA表达水平也随之增加,其中D4组鱼体肝脏Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA表达量最高,且其LC-PUFA含量显著高于D2和D3组。由此可见,植物油饲料尽管不影响鲤正常生长,但影响了鱼体肝组织LC-PUFA含量。然而,饲料中添加适宜的LNA/LA比(1.09∶1)可促进鲤肝脏Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA的表达,最大限度地提高鱼体内源LC-PUFA合成量,从而有效地降低植物油饲料对鱼体组织LC-PUFA含量的负面影响。 展开更多
关键词 鲤 LNA/LA LC-PUFA Δ6 fad elovl5
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文冠果FAD2的序列与功能分析 被引量：15
9
作者 赵娜 张媛 +2 位作者 李秋琦 李茹芳 郭惠红 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期87-93,共7页
脂肪酸脱饱和酶2(fatty acid desaturase 2,FAD2)基因是油脂合成代谢的关键酶基因,其编码的蛋白催化油酸(18∶1)进一步脱饱和形成亚油酸(18∶2)。本研究以富含油酸和亚油酸2种优质不饱和脂肪酸的文冠果种胚为试材,采用简并引物策略结合R... 脂肪酸脱饱和酶2(fatty acid desaturase 2,FAD2)基因是油脂合成代谢的关键酶基因,其编码的蛋白催化油酸(18∶1)进一步脱饱和形成亚油酸(18∶2)。本研究以富含油酸和亚油酸2种优质不饱和脂肪酸的文冠果种胚为试材,采用简并引物策略结合RACE技术,克隆了文冠果FAD2的c DNA序列。序列分析表明,文冠果FAD2除具有植物FAD2特有的3个组氨酸区和N端的芳香族氨基酸区外,还具有3个N—糖基化位点和多个磷酸化位点。通过农杆菌介导,将文冠果FAD2转入拟南芥fad2突变体中进行表达分析。气相结果表明,拟南芥fad2突变体缺失亚油酸,而转入文冠果FAD2的拟南芥fad2突变体的种子油中产生了亚油酸,这表明所克隆的文冠果FAD2基因编码的酶具有催化油酸(18∶1)脱饱和成为亚油酸(18∶2)的活性。 展开更多
关键词 文冠果 种子油 fad2 序列分析 互补实验 功能分析
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花生FAD2基因RNAi载体转化及转基因籽粒脂肪酸分析 被引量：16
10
作者 黄冰艳 张新友 +5 位作者 苗利娟 严玫 海燕 易明林 徐静 陈占宽 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期290-293,共4页
在构建了以花生△12脂肪酸去饱和酶(FAD2)基因自身启动子驱动、有内含子间隔的该基因编码序列反向重复片段的RNA干扰载体的基础上,对上述干扰载体进行了农杆菌介导的花生胚小叶的遗传转化,以期特异调控花生籽粒中油酸、亚油酸含量。在2... 在构建了以花生△12脂肪酸去饱和酶(FAD2)基因自身启动子驱动、有内含子间隔的该基因编码序列反向重复片段的RNA干扰载体的基础上,对上述干扰载体进行了农杆菌介导的花生胚小叶的遗传转化,以期特异调控花生籽粒中油酸、亚油酸含量。在2个受体品种中获得105株抗性再生植株,用两对引物对其进行了PCR扩增,其中32株初步证实为转基因植株。采用近红外分析仪对转基因T1籽粒油酸和亚油酸含量的检测结果表明,转基因株系内油酸/亚油酸比值的变异高于对照,多数转基因株系油酸亚油酸比值平均数也显著高于对照。 展开更多
关键词 花生 fad2基因 RNA干扰 遗传转化 油酸 亚油酸
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SAD和FAD家族基因调控山核桃不饱和脂肪酸组分配比 被引量：7
11
作者 黄春颖 黄有军 +6 位作者 吴建峰 黄仁 栾雨濛 张深梅 王正加 张启香 黄坚钦 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期250-260,共11页
以山核桃胚为试材,测定5个山核桃油脂合成积累关键时期(授粉后75、85、100、109和127 d)的油脂组分和油含量,并利用实时荧光定量PCR检测山核桃Δ9–硬脂酰–ACP脱氢酶(SAD)基因(CcSAD-1、CcSAD-2、CcSAD-3)和山核桃脂肪酸去饱和酶(FAD)... 以山核桃胚为试材,测定5个山核桃油脂合成积累关键时期(授粉后75、85、100、109和127 d)的油脂组分和油含量,并利用实时荧光定量PCR检测山核桃Δ9–硬脂酰–ACP脱氢酶(SAD)基因(CcSAD-1、CcSAD-2、CcSAD-3)和山核桃脂肪酸去饱和酶(FAD)基因(CcFAD2、CcFAD3-1、CcFAD3-2、CcFAD3-3、CcFAD6、CcFAD7、CcFAD8-1、CcFAD8-2、CcFAD8-3)的表达模式。结果表明:成熟的山核桃种仁含油率超过种仁干质量的70%,同时不饱和脂肪酸比例达到90%以上;山核桃5个时期的脂肪酸组分,主要由棕榈酸(C16︰0)、硬脂酸(C18︰0)、油酸(C18︰1)、亚油酸(C18︰2)以及亚麻酸(C18︰3)组成;随着山核桃SAD家族基因表达上升,山核桃油中的油酸含量上升并维持一定水平,其中CcSAD-3可能是影响油酸含量的主效基因;同时随着山核桃油酸含量上升,CcFADs基因表达上升,山核桃不饱和脂肪酸比例增加。 展开更多
关键词 山核桃 SAD fad 油脂合成
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甘蓝型油菜Fad2基因的RNA干扰及无筛选标记高油酸含量转基因油菜新种质的获得 被引量：28
12
作者 陈苇 李劲峰 +3 位作者 董云松 李根泽 寸守铣 王敬乔 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期665-671,共7页
利用已获得的油菜种子贮存蛋白——十字花科蛋白(cruciferin)基因的启动子和终止子,构建了无选择标记基因且同时具有正义及反义结构的油酰去饱和酶基因(Fad2)种子特异表达RNAi载体,并通过农杆菌介导的转化,获得了只含有油菜原有基因且F... 利用已获得的油菜种子贮存蛋白——十字花科蛋白(cruciferin)基因的启动子和终止子,构建了无选择标记基因且同时具有正义及反义结构的油酰去饱和酶基因(Fad2)种子特异表达RNAi载体,并通过农杆菌介导的转化,获得了只含有油菜原有基因且Fad2基因表达受抑制的转基因植株。RT-PCR分析结果表明,在油酸含量达到83.9%的转基因植株中未检测到在非转基因植株中普遍存在的Fad2基因转录mRNA——一种典型的RNA干扰现象。通过对植株生长发育状态的观察比较,该高油酸含量转基因株系并未表现出双突变体中由于Fad2基因的失活所引起的植株抗寒能力差、发育迟缓、花蕾死亡、结实率低等不利农艺学性状。 展开更多
关键词 油菜 fad2基因 RNA干扰 转基因 油酸
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甘蓝型油菜FAD2基因cDNA片段的克隆和序列分析 被引量：18
13
作者 熊兴华 官春云 +3 位作者 李栒 王学军 周小云 李家洋 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期97-99,共3页
为了提高油菜的油酸含量 ,继而培育高油酸油菜品种 ,从甘蓝型油菜成熟叶片中分离总 RNA,经反转录合成 c DNA第一条链 ,以此为模板进行多聚酶链式反应 ,产物为一长 6 5 4 bp的 DNA片段 .经克隆和序列测定表明 ,其核苷酸序列与 Gen Bank... 为了提高油菜的油酸含量 ,继而培育高油酸油菜品种 ,从甘蓝型油菜成熟叶片中分离总 RNA,经反转录合成 c DNA第一条链 ,以此为模板进行多聚酶链式反应 ,产物为一长 6 5 4 bp的 DNA片段 .经克隆和序列测定表明 ,其核苷酸序列与 Gen Bank中甘蓝型油菜 FAD2基因在比较区的同源性达 10 0 % . 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 fad2基因 cDAN片段 基因克隆 序列分析 PCR 品质改良 油菜脱氢酶
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六个甘蓝型油菜油酸脱氢酶(FAD2)假基因的克隆和分析 被引量：12
14
作者 肖钢 张振乾 +2 位作者 邬贤梦 谭太龙 官春云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期435-441,共7页
以甘蓝型油菜湘油15为材料,采用PCR方法克隆并分析了56个FAD2基因克隆和47个FAD2基因cDNA克隆,从中发现6个新的FAD2拷贝。它们与公布的甘蓝型油菜FAD2基因(AY577313)具有87.0%以上的同源性,没有内含子,在开放阅读框中存在1～12个终止密... 以甘蓝型油菜湘油15为材料,采用PCR方法克隆并分析了56个FAD2基因克隆和47个FAD2基因cDNA克隆,从中发现6个新的FAD2拷贝。它们与公布的甘蓝型油菜FAD2基因(AY577313)具有87.0%以上的同源性,没有内含子,在开放阅读框中存在1～12个终止密码子,其中有2个拷贝具有转录功能。将这6个FAD2拷贝在酿酒酵母中进行体内表达实验,通过气相色谱检测脂肪酸组成证明其不具备油酸脱氢酶功能,与对照相比,也没有改变酵母体内脂肪酸组成。由此推测这6个FAD2拷贝为假基因。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 油酸脱氢酶 fad2 基因表达 酿酒酵母
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甘蓝型油菜fad2基因片段的克隆和反义表达载体的构建 被引量：14
15
作者 熊兴华 官春云 +3 位作者 李栒 王学军 周小云 李家洋 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期1-4,共4页
从甘蓝型油菜湘油 15号基因组中分离总DNA ,以此为模板进行多聚酶链式反应 (PCR)。PCR产物与克隆载体 pGEM -TEasy连接 ,经NotI酶切后插入 pBluescriptIISK +。序列测定表明 ,PCR产物为 6 5 4bp的DNA片段 ,fad2基因片段只朝 pBluescript... 从甘蓝型油菜湘油 15号基因组中分离总DNA ,以此为模板进行多聚酶链式反应 (PCR)。PCR产物与克隆载体 pGEM -TEasy连接 ,经NotI酶切后插入 pBluescriptIISK +。序列测定表明 ,PCR产物为 6 5 4bp的DNA片段 ,fad2基因片段只朝 pBluescriptIISK +的T3-T7方向插入 ,经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI12 1相同的酶切位点 ,构建反义 fad2表达载体。 展开更多
关键词 fad2基因 反义表达载体 甘蓝型油菜 PCR 基因克隆
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隧道火灾安全的“FAD”综合评价模型及其工程应用 被引量：9
16
作者 金浩 邵钢 +1 位作者 杨培中 金先龙 《防灾减灾工程学报》 CSCD 2006年第3期284-289,共6页
正确的隧道火灾的安全评估是有效地进行隧道火灾的预测、控制和防火设计的基础。隧道火灾发生的原因十分的复杂。由此,基于对影响隧道火灾的各个因素及因素之间的关系全面分析的基础上,建立了隧道火灾危险性的评价指标体系,为隧道使用... 正确的隧道火灾的安全评估是有效地进行隧道火灾的预测、控制和防火设计的基础。隧道火灾发生的原因十分的复杂。由此,基于对影响隧道火灾的各个因素及因素之间的关系全面分析的基础上,建立了隧道火灾危险性的评价指标体系,为隧道使用过程中的安全管理以及隧道火灾危险评价提供了切实可行的参考依据。将模糊数学、层次比较分析法、德尔菲专家法相结合,建立了隧道火灾安全的“FAD”综合评价模型。结合上海市外环隧道实例,将该模型在隧道火灾的安全评估中加以应用,验证了该模型的准确性,为隧道的“性能化”防火设计提供可靠的依据,可使隧道火灾的防治对策、安全管理更加科学、合理和有效。 展开更多
关键词 隧道火灾 安全评估 模糊数学 层次分析法 “fad”综合评价模型
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菊花脂肪酸脱饱和酶基因CmFAD7的克隆与表达分析 被引量：12
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作者 李永华 王翠丽 +1 位作者 李永 杨秋生 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期65-74,共10页
以秋菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)抗寒品种‘星光灿烂’为材料,利用RT-PCR和RACE方法从叶片中克隆了ω-3脂肪酸去饱和酶基因,命名为Cm FAD7,Gen Bank登录号为KC567246。该基因c DNA全长1 284 bp,编码428个氨基酸,相对分子量为48... 以秋菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)抗寒品种‘星光灿烂’为材料,利用RT-PCR和RACE方法从叶片中克隆了ω-3脂肪酸去饱和酶基因,命名为Cm FAD7,Gen Bank登录号为KC567246。该基因c DNA全长1 284 bp,编码428个氨基酸,相对分子量为48.98 k D,等电点为9.07,编码的氨基酸序列与高山还阳参同源性最高(84%)。该蛋白含有?12-FADs保守结构域和3个跨膜螺旋,N端含有一段叶绿体转运肽,属于膜脂肪酸去饱和酶超级家族。采用实时荧光定量PCR和气相色谱法研究低温胁迫下叶片和根系中Cm FAD7的表达量及脂肪酸含量变化,Cm FAD7在根系和叶片中均有表达,叶片中的表达量高于根系。根系中5℃时表达量最高,叶片中–4℃时最高,在–8℃时叶片和根系表达量均较低;随着处理温度的降低,叶片中C18:3含量呈逐渐上升趋势,根系中变化不明显。结果表明,菊花Cm FAD7与抗寒性有关,低温条件下不同器官的表达量有较大差异。 展开更多
关键词 菊花 不饱和脂肪酸 CM fad7 表达分析
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油茶FAD2基因的植物表达载体和RNA干扰载体构建及其功能分析 被引量：9
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作者 陈鸿鹏 谭晓风 +3 位作者 谢耀坚 吴志华 张党权 曾艳玲 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期347-354,共8页
茶油是从油茶种子中提取的食用植物油,富含油酸、亚油酸以及亚麻酸等多种人体必需的不饱和脂肪酸。在植物的不饱和脂肪酸生物合成途径中,脂肪酸脱饱和酶(Fatty Acid Desaturase,FAD)有多个家族成员,可以将单不饱和脂肪酸转化成多不饱和... 茶油是从油茶种子中提取的食用植物油,富含油酸、亚油酸以及亚麻酸等多种人体必需的不饱和脂肪酸。在植物的不饱和脂肪酸生物合成途径中,脂肪酸脱饱和酶(Fatty Acid Desaturase,FAD)有多个家族成员,可以将单不饱和脂肪酸转化成多不饱和脂肪酸,其中FAD2可以将油酸(18∶1Δ9)和棕榈油酸(16∶1Δ9)转化成亚麻酸(18∶2Δ9,11)和十六碳二烯酸(16∶2Δ9,11)。为了揭示油茶FAD2基因的功能,本研究在原有的基础上构建了这个基因的植物表达载体p BI121-Co FAD2以及RNA干扰载体p BI121-Co FAD2 RNAi,并分别对相应的拟南芥突变体和野生型植株进行了转基因研究。结果表明,同野生型相比,fad突变体中,18∶1和16∶1含量较高,18∶2和16∶2含量较低;突变体植株经过植物表达载体的转化后,脂肪酸组分得到了恢复;而野生型植株经过RNA干扰载体的转化后,18∶1和16∶1含量升高,18∶2和16∶2含量降低。由此说明,油茶FAD2基因在植物体内具有调控18∶1和16∶1转变成18∶2和16∶2的功能,对于茶油脂肪酸组分的构成起着关键的调控作用。 展开更多
关键词 油茶 fad2基因 载体构建 功能分析
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皖西白鹅育肥期肌肉脂肪酸组成及肝PPARα、FADS2和ME1基因表达规律的研究 被引量：12
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作者 陈兴勇 赵宁 +1 位作者 张燕 耿照玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1912-1919,共8页
旨在探明皖西白鹅育肥期肌肉脂肪酸组成及肝脂肪酸合成相关基因的表达规律。本研究选取同批出雏的70日龄时体重相近的皖西白鹅60只,分为3个重复,每个重复20只,育肥至100日龄。育肥期每10d(70~100日龄)从各重复取5只屠宰,分离胸肌、腿肌... 旨在探明皖西白鹅育肥期肌肉脂肪酸组成及肝脂肪酸合成相关基因的表达规律。本研究选取同批出雏的70日龄时体重相近的皖西白鹅60只,分为3个重复,每个重复20只,育肥至100日龄。育肥期每10d(70~100日龄)从各重复取5只屠宰,分离胸肌、腿肌和肝。气相色谱法检测肌肉脂肪酸组成,RT-PCR分析肝PPARα、FADS2和ME1基因相对表达量。结果表明:1)胸肌饱和脂肪酸含量高于腿肌(P<0.000 1),单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸含量均低于腿肌(P=0.044,P=0.017);C16∶1和C18∶2含量随育肥时间增加,C18∶0含量随育肥时间下降。2)PPARα在育肥20d高表达,育肥30d低表达(P<0.000 1);FADS2育肥10d时表达量最高(P=0.009);ME1育肥30d表达量最低(P=0.010)。3)PPARα表达量上升伴随C16∶1、C18∶3、UFA/SFA含量上升,同时SFA含量下降;FADS2表达量上升伴随C16∶1、C18∶1、C18∶3、MUFA和UFA/SFA含量上升,SFA、PUFA含量下降。ME1基因的表达量上升则C16∶1、C18∶1、C18∶3、MUFA和UFA/SFA上升,同时C18∶0、C20∶3和SFA含量下降。皖西白鹅PPARα、FADS2和ME1基因相对表达量均和脂肪酸组成显著相关,可作为脂肪酸性状选育的候选基因。 展开更多
关键词 皖西白鹅 脂肪酸组成 PPARΑ fadS2 ME1
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基于FAD的管道轴向裂纹失效分析 被引量：6
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作者 骆正山 刘华敏 +1 位作者 王宏超 郜阳 《消防科学与技术》 CAS 北大核心 2013年第1期1-4,共4页
基于传统的FAD(failure assessment diagram)方法,运用BS 7910和API 579两个标准对陆上油气管道失效压力进行预测并与试验值进行比较,发现基于上述两个标准的管道失效预测值与实际相比偏小,导致现役管道运营、维护成本的增加,造成不必... 基于传统的FAD(failure assessment diagram)方法,运用BS 7910和API 579两个标准对陆上油气管道失效压力进行预测并与试验值进行比较,发现基于上述两个标准的管道失效预测值与实际相比偏小,导致现役管道运营、维护成本的增加,造成不必要的浪费。为消除或降低这种负面影响,在保证管道运行安全前提下,经过实验,提出修正的FAD方法,结果表明,修正后的FAD方法对油气管道的失效分析结果与实际吻合得更好。 展开更多
关键词 fad方法 油气管道 轴向裂纹 失效压力 风险管理
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