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ABO Blood Groups and Their Relationship with Coagulation Factor VIII in Healthy Adults
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作者 Afrina Binte Azad Qazi Shamima Akhter +6 位作者 Mohammad Aminul Islam Farzana Yeasmin Mukta Lily Afroz Khushbun Nahar Layla Tahmina Akter Shamanta Islam A. Z. M. Adnan 《Journal of Biosciences and Medicines》 2021年第9期49-58,共10页
<strong>Background: </strong>ABO blood group distribution defers with racial and geographic variations. They are related to diseases like cardiovascular diseases, cerebral thromboembolism. ABO blood group ... <strong>Background: </strong>ABO blood group distribution defers with racial and geographic variations. They are related to diseases like cardiovascular diseases, cerebral thromboembolism. ABO blood group system may influence coagulation factor VIII which may increase the future risk of thrombosis. <strong>Aim:</strong> To assess the relation of ABO blood group with coagulation factor VIII in healthy adults.<strong> Material and Methods: </strong>A prospective type of analytical cross-sectional study was conducted in the Department of Physiology, Dhaka Medical College, Dhaka from July 2019 to June 2020. After obtaining ethical clearance, a total of 190 healthy adults were selected from different areas of Dhaka city based on inclusion and exclusion criteria, with ages ranging from 18 - 45 years. The subjects were interviewed and detailed history regarding personal, family, medical and drug were taken. Prior to sample collection, informed written consent was taken from the participants. Individuals of blood group A were selected as group A, blood group B as group B, blood group AB as group AB and blood group O as group O. Coagulation factor VIII was measured in the Department of Hematology and BMT Unit, Dhaka Medical College Hospital, Dhaka. Blood grouping was done in the Department of Physiology, Dhaka Medical College, Dhaka. <strong>Statistical Analysis:</strong> For statistical analysis, ONE way ANOVA followed by Bonferroni test were considered using SPSS 25.0 version. <strong>Results: </strong>In this study, blood group B was most common (33.2%). Coagulation factor VIII was significantly higher (p < 0.001) in blood group A (105.76% ± 11.82%), B (112.00% ± 15.02%), AB (109.80% ± 11.93%) than blood group O (82.00% ± 12.86%). No significant difference was observed among A, B and AB blood groups regarding coagulation factor VIII. <strong>Conclusions:</strong> It can be concluded that blood group A, B, AB individuals may have more chance of thrombosis due to significantly higher coagulation factor VIII than blood group O individuals. 展开更多
关键词 ABO Blood Group Coagulation factor viii Healthy Adults
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The expression of vascular endothelial growth factor and Factor VIII related anti-gen in the border zone after intracer ebral hemorrhage in rats 被引量:3
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作者 揣兰香 张微微 戴卫平 《中国临床康复》 CSCD 2003年第7期1186-1186,共1页
AIM:To observe the expression of vascula r endothelial growth factor(VEGF)and Factor VIII related antigen(FVIII-R Ag )in rats brain tissue in the bor-der zone of the hematoma,and explore the relationship between the e... AIM:To observe the expression of vascula r endothelial growth factor(VEGF)and Factor VIII related antigen(FVIII-R Ag )in rats brain tissue in the bor-der zone of the hematoma,and explore the relationship between the expres-sion of VEGF and the brain angionesis after intracerebral hmorrhage(ICH).METHODS:Rat of model of ICH was induced by inje ction of collagenase physiological saline into the right caudate nucleus.The immunohistoch emical methods were performed by using diff erent antisera of VEGF and FVIII-R Ag in serial sections of rats brain at 12h,1d,3d and 7d after ICH respec-tively.RESULTS:T he amount of VEGF positive cells was markedly in-creased,and reached the highest at 7th day in the border zone after ICG(P<0.01),but there were no significant diffe rence among the mean value of A of cells at different time points(P>0.05).Compared with the controls,both the FVIII-R Ag positive endothelial cells and the A of cells were signific antly different in experimental ICH goups after 1day.CONCLUSION:The up-regulated expression of VEGF might i nduce proliferation of endothelial cell and angiogenesis in the border zone a fter ICH in rats. 展开更多
关键词 脑血管疾病 VEGF 内皮细胞 抗原 大鼠 血管内皮生长因子 脑出血 第Ⅷ因子
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Pharmacokinetic Studies of Factor VIII in Chinese Boys with Severe Hemophilia A: A Single-Center Study 被引量:15
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作者 Zhen-Ping Chen Pei-jing Li +9 位作者 Gang Li Ling Tang Ying-Zi Zhen Xin-Yi Wu Xiao-Ling Cheng Koon Hung Luke Victor S Blanchette Man-Chiu Poon Qiu-Lan Ding Run-Hui Wu 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2018年第15期1780-1785,共6页
Background: Although much attention has been paid to the pharmacokinetics (PKs) of different factor VIII (FVIlI) concentrates in persons with hemophilia A (HA), limited information is available in young boys wi... Background: Although much attention has been paid to the pharmacokinetics (PKs) of different factor VIII (FVIlI) concentrates in persons with hemophilia A (HA), limited information is available in young boys with severe HA. In this study, we aimed to assess the PK parameters of FVIII products in boys with severe HA in China. Methods: A total of 36 boys (plasma-derived [pd]-FVIII, n= 15; recombinant [r] FVIII, n = 21) were enrolled between January 2015 and May 2016 in Beijing Children's Hospital. PK characteristics of FVIII products were studied according to a reduced 4-sampling time point design (1 h, 9 h, 24 h, and 48 h postinfusion). Results: The mean FVIII half-life (t1/2) was 10.99 ± 3.45 h (range 5.52-20.02 h), the mean in vivo recovery (IVR) was 2.01 ± 0.42 IU/dl per IU/kg (range 1.24-3.02 IU/dl per IU/kg) and mean clearance (CL) of FVIII is 4.34 ± 1.58 ml·kg^-1·h ^-1 (range 2.29-7.90 ml·kg^-1·h·^-1). We also analyzed the influence of several parameters that potentially modulate FVIII PK. The age was closely associated with FVIII half-life (R^2 = 0.32, P 〈 0.01 ). The t1/2 of FVIII increased by 0.59 h per year. Besides age, yon Willebrand factor antigen (VWF:Ag) also was associated with FVIII half-life (R^2 = 0.52, P 〈 0.01). Patients with blood Group O had a shorter FVIII halt-life than patients with non-O blood group (9.40 ± 0.68 h vs. 12.3 ± 0.79 h, t = 2.70, P = 0.01). The FVIII IVR correlated with age (R^2 =0.21, P 〈 0.01) and VWF:Ag level (R^2 = 0.28, P 〈 0.01 ). CL rates were taster in young patients and in those with low-VWF:Ag levels. CL rates of FVIII are higher in blood Group O versus non-blood Group O persons (5.02 ± 0.38 vs. 4.00 ± 0.32 ml·kg^-1·h^-1 , t = 2.53, P = 0.02). Conclusions: Chinese boys with severe HA have similar PK values to other ethnic groups and large differences in FVIII PK between individual patients. Age, blood group, and VWF:Ag levels are important determining factors for FVlll CL. 展开更多
关键词 BOYS factor viii Hemophilia A Phannacokinetics
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中国人动脉血栓性疾病与活化蛋白C裂解FV和FVIII基因位点突变的相关性研究 被引量:1
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作者 熊立凡 倪培华 +5 位作者 吴洁敏 胡翊群 应雅韵 康文英 王学锋 王鸿利 《微循环学杂志》 2004年第4期49-51,54,F004,共5页
目的 :检测脑血栓 (CT)和急性心肌梗死 (AMI)患者活化蛋白C(APC)抵抗 (APCR)及APC裂解凝血因子V (FV )和凝血因子VIII(FVIII)肽链的基因位点突变。方法 :用单链构象多态性分析 (SSCP)方法 ,检测 10 2例CT、46例AMI和 10 5例健康人的APC... 目的 :检测脑血栓 (CT)和急性心肌梗死 (AMI)患者活化蛋白C(APC)抵抗 (APCR)及APC裂解凝血因子V (FV )和凝血因子VIII(FVIII)肽链的基因位点突变。方法 :用单链构象多态性分析 (SSCP)方法 ,检测 10 2例CT、46例AMI和 10 5例健康人的APC裂解FV肽链 (Arg3 0 6、Arg 5 0 6、Arg 679和结合部位 1865~ 1875 )、裂解FVIII肽链 (Arg3 3 6、Arg 5 62和结合部位 2 0 0 5~ 2 0 18)的基因位点。结果 :对照组和患者组均未检出FV的突变基因。结论 :中国人动脉血栓性疾病患者无APC裂解FV和FVIII肽链的基因突变 。 展开更多
关键词 中国人 动脉血栓性疾病 活化蛋白C 裂解FV Fviii基因位点突变 相关性研究
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凝血因子Ⅷ替代治疗在血友病A合并上尿路结石微创手术中的应用
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作者 王金乐 谢炳寿 +4 位作者 朱淼勇 夏爱丹 黄瑛 林银凤 朱永林 《浙江临床医学》 2025年第1期106-108,共3页
目的 探讨凝血因子Ⅷ(FⅧ)围术期替代治疗血友病A(HA)合并上尿路结石患者微创手术的安全性和有效性。方法 回顾性分析2015年1月至2023年2月22例HA合并上尿路结石行微创手术患者的临床资料。收集患者临床资料(年龄、性别、体质量)、手术... 目的 探讨凝血因子Ⅷ(FⅧ)围术期替代治疗血友病A(HA)合并上尿路结石患者微创手术的安全性和有效性。方法 回顾性分析2015年1月至2023年2月22例HA合并上尿路结石行微创手术患者的临床资料。收集患者临床资料(年龄、性别、体质量)、手术方式、围术期FⅧ用量,术前及术后血红蛋白差值(△HB)、术前及术后FⅧ活性(FⅧ:C)、住院时间、术后并发症及抑制物形成情况等,计算术后结石清除率(SFR)。结果 19例患者行输尿管镜碎石术(URL),术前FⅧ:C为94%(79.5%,115.8%),术后0~2 d为65.5%(53.0%,72.5%),△HB为9(2.8,14)g/L;2例行URL联合经皮肾镜碎石取石术(PCNL),术前FⅧ:C分别为100%及113%,术后0~2 d为89%和110%,△HB为17 g/L及19 g/L;1例行PCNL,术前FⅧ:C为104%,术后0~2 d为94%,△HB为7 g/L。SFR达77.3%。结论 HA合并上尿路结石需行微创手术治疗的患者,予围术期FⅧ替代治疗,术前及术后监测FⅧ:C,术后血红蛋白基本稳定,均未出现需输血情况,取石成功率高,安全性较好。 展开更多
关键词 血友病A 凝血因子Ⅷ 上尿路结石 输尿管镜碎石术 经皮肾镜碎石取石术
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血浆相关因子对重组FVIII稳定循环及降解途径的影响 被引量:3
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作者 伍立恒 李德款 +4 位作者 连通 李成 林方昭 宋春雷 梁洪 《药物生物技术》 CAS 2023年第3期234-238,共5页
探究本研究中的重组人凝血因子VIII(rhFVIII)与血管性血友病因子(vWF)的结合力;FVIII激活后的活化FVIII(FVIIIa),经活化蛋白C(APC)介导降解的速率以及在FVIII抑制物存在条件下的生物活性变化,并与市售重组FVIII产品(ADVATE)与血源FVIII... 探究本研究中的重组人凝血因子VIII(rhFVIII)与血管性血友病因子(vWF)的结合力;FVIII激活后的活化FVIII(FVIIIa),经活化蛋白C(APC)介导降解的速率以及在FVIII抑制物存在条件下的生物活性变化,并与市售重组FVIII产品(ADVATE)与血源FVIII产品进行比较。将FVIII加至人vWF(无FVIII)中进行孵育,通过ELISA法检测FVIII与vWF的结合情况,计算出平衡解离常数进行比较;利用过量凝血酶激活获得FVIIIa,加入APC后通过检测剩余保留活性的FVIIIa计算出灭活速率;制备抑制物模拟血浆,检测不同抑制物浓度下FVIII的剩余活性,计算FVIIIa抑制率,并与ADVATE与血源FVIII进行比较。本研究的rhFVIII对APC介导降解的敏感性与ADVATE及血源FVIII产品相比没有统计学差异(P>0.05)。在vWF结合力方面,本研究rhFVIII与ADVATE没有统计学差异(P>0.05)。在含有抑制物血浆中,本研究rhFVIII的活性抑制率与ADVATE及血源FVIII产品均没有统计学差异(P>0.05)。证实了本研究rhFVIII可与vWF稳定结合,激活后的rhFVIIIa可经APC途径正常降解,为A型血友病患者的治疗提供了新的选择。 展开更多
关键词 血友病A 重组人凝血因子viii 活化蛋白C 血管性血友病因子 Fviii抑制物
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Milk fat globule epithelial growth factorⅧ(MFG-E8)sustains survival of cancer cells by prompting tumor angiogenesis and suppressing host immunities 被引量:1
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作者 Keke Nie Shichao Liu +3 位作者 Ling Zhang Zhongfa Zhang Xiao Zou Youxin Ji 《Oncology and Translational Medicine》 2017年第1期31-37,共7页
Milk fat globule epithelial growth factor VIII(MFG-E8) is a novel adhesion protein mainly produced by macrophages and dendritic cells; it is expressed in most of the human tissues and functions to prompt cancer progre... Milk fat globule epithelial growth factor VIII(MFG-E8) is a novel adhesion protein mainly produced by macrophages and dendritic cells; it is expressed in most of the human tissues and functions to prompt cancer progression and survival. MFG-E8 contains a signal sequence for secretion, two epidermal growth factor(EGF)-like domains at the NH2 terminus and two discoidin domains with blood-clotting factor V/factor Ⅷ(C1 and C2) at the COOH terminus. The second EGF domain contains an arginine-glycine-aspartic(RGD) integrin-binding motif that engages α_vβ_5 integrins to facilitate cell adhesion and induce integrinmediated signal transduction. Integrin α_vβ_3 associates with VEGF receptor 2, engagement of integrins can promote angiogenesis, which plays key roles in growth, proliferation, and survival of cancer cells. VEGF stimulates the expression of α_vβ_3 and α_vβ_5 integrins on angiogenic vasculature, thereby potentiating effects of VEGF receptor engagement. Mice expressing a mutant form of α_vβ_3 integrin are unable to undergo tyrosine phosphorylation, confirming the important role that this integrin plays in pathological angiogenesis and providing important mechanistic insights. The C-terminus discoidin-like domains promote binding to membrane phospholipids, functioning close to VEGF like angiogenesis. MFG-E8 is an opsonin for apoptotic cells, and it acts as a bridging protein between apoptotic cells and phagocytes. It also influences cell immunities by altering CD4^+ and/or CD8^+ cells. Antibody or small peptide works with MFG-E8 at different functional sites or interacts with EGF-like domains and/or discoidin-like domains may play an important role in anti-angiogenesis or immune restoration. Altering the structures and/or functions of MFG-E8 and/or its domains is promising for development of novel anti-cancer strategies. 展开更多
关键词 milk fat globule epithelial growth factor Ⅷ(MFG-E8) CARCINOMA target therapy ANGIOGENESIS apoptosis
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一种分泌和活性改善的新型人凝血因子VIII变构体
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作者 缪静 刘泽隆 +2 位作者 屈慧鸽 迟晓艳 朱甫祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期708-714,共7页
甲型血友病基因治疗疗效受凝血因子VIII(FVIII)表达水平低下的制约。FVIII分泌低效,且活化产物的A2区易于自发脱落使其容易失活。犬属FVIII(cFVIII)的胞内Furin水解酶裂解位点变异,使其主要以单链多肽形式分泌,而人源FVIII(hFVIII)受Fu... 甲型血友病基因治疗疗效受凝血因子VIII(FVIII)表达水平低下的制约。FVIII分泌低效,且活化产物的A2区易于自发脱落使其容易失活。犬属FVIII(cFVIII)的胞内Furin水解酶裂解位点变异,使其主要以单链多肽形式分泌,而人源FVIII(hFVIII)受Furin水解,主要以重链(HC)和轻链(LC)非共价二聚体形式分泌,这种差异使cFVIII分泌性和比活性均高于hFVIII。我们前期的工作在人源B结构域缺失型FVIII(hBDD-FVIII)HC的A2与轻链LC的A3区引入链间二硫键表明,HC和LC二聚体的分泌性得到改善,活化产物稳定性和血浆凝血活性提高。本文构建一种新型hBDD-FVIII变构体F8C-RH,包含链间二硫键突变M226C/D1828C和Furin水解位点突变R1645H。培养的CHO和BHK细胞转基因表明,F8C-RH的分泌性和活性有明显改善。小鼠门静脉注射肝靶向转基因,血浆F8C-RH浓度和凝血活性均明显升高。为进一步腺相关病毒(AAV)载体转F8C-RH的甲型血友病基因治疗研究提供了依据。 展开更多
关键词 凝血因子viii 新型人BDD-Fviii变构体 分泌 活性
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早孕先兆流产患者血FVⅢ活性、PAI-1水平及其对保胎结局的影响 被引量:2
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作者 高承香 韩月欣 张凌云 《中国计划生育学杂志》 2024年第4期844-847,共4页
目的:探究凝血因子Ⅲ(FVⅢ)活性、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)对早孕先兆流产保胎结局的预测价值。方法:回顾性分析本院于2020年1月-2022年12月收治的345例早孕先兆流产患者临床资料,根据保胎结局分为保胎失败组124例、成功组221例,... 目的:探究凝血因子Ⅲ(FVⅢ)活性、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)对早孕先兆流产保胎结局的预测价值。方法:回顾性分析本院于2020年1月-2022年12月收治的345例早孕先兆流产患者临床资料,根据保胎结局分为保胎失败组124例、成功组221例,检测两组血FVⅢ活性、PAI-1水平,超声检测子宫内膜厚度(EST),血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)、雌二醇(E_(2))、孕酮(P),采用多因素logistic回归分析早孕先兆流产保胎成功影响因素。结果:失败组FVⅢ活性(168.31±25.84)%、PAI-1(54.39±6.05μg/l)均高于成功组(138.64±24.61)%、(49.31±5.87μg/l),EST(10.06±3.26 mm)、β-hCG(1763.86±706.77 U/L)、E_(2)(1051.16±369.57 poml/L)、P(32.96±15.72 noml/L)水平均低于成功组(12.55±1.91 mm、3299.46±1831.59 U/L、3571.36±1126.29 poml/L、64.38±17.24 noml/L)(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,FVⅢ活性升高,β-hCG、E_(2)、P水平降低为影响早孕先兆流产保胎成功的危险因素(P<0.05),而PAI-1为保胎成功非危险因素。结论:FVⅢ活性升高影响保胎成功,临床可予以参考,减少盲目保胎带来的风险。 展开更多
关键词 早孕 先兆流产 保胎 凝血因子Ⅲ 纤溶酶原激活物抑制剂-1 影响因素
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难治性肾病综合征患者血凝学的研究 被引量:29
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作者 魏连波 粟德林 +4 位作者 叶任高 刘素雁 马军 马志刚 高云飞 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 2000年第4期370-372,共3页
目的 探讨难治性肾病综合征(RNS)患者血凝学指标的变化。方法 31例RNS为实验组,另设31例正常对照。两组均检测第Ⅷ因子相关抗原(ⅧR:Ag)、纤维蛋白原(Fbg)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、纤溶酶原(Plg)、白陶土部分凝血活酶时间(APT... 目的 探讨难治性肾病综合征(RNS)患者血凝学指标的变化。方法 31例RNS为实验组,另设31例正常对照。两组均检测第Ⅷ因子相关抗原(ⅧR:Ag)、纤维蛋白原(Fbg)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、纤溶酶原(Plg)、白陶土部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及血小板聚集试验(PAgT)的变化。结果:ⅧR:Ag、Fbg、PAgT与正常组比较显著增高,AT-Ⅲ、Plg与正常组比较显著降低,APTT时间显著缩短,PT与正常对照组比较无显著性差异。ⅧR:Ag、AT-Ⅲ与尿素氮(BUN)、血浆白蛋白(A1b)呈正相关,Fbg、PAgT与A1b呈负相关。结论 RNS存在严重的高凝状态。 展开更多
关键词 肾病综合征 因子Ⅷ 纤维蛋白 血凝学
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von Willebrand因子和凝血因子Ⅷ 水平与急性脑梗死的临床转归 被引量:10
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作者 陈新悦 毕国荣 +1 位作者 李双 赵丹丹 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期22-28,共7页
目的探索急性脑梗死患者血浆FVIII(factor VIII,FVIII)和VWF(von Willebrand factor,VWF)水平的升高与疾病的严重性、预后、住院期间发生感染或神经功能损伤加重等事件的关系。方法在2014年12月至2015年3月期间就诊于中国医科大学... 目的探索急性脑梗死患者血浆FVIII(factor VIII,FVIII)和VWF(von Willebrand factor,VWF)水平的升高与疾病的严重性、预后、住院期间发生感染或神经功能损伤加重等事件的关系。方法在2014年12月至2015年3月期间就诊于中国医科大学附属盛京医院神经内科的住院患者中,筛选出急性脑梗死病例组90例,无急性脑梗死的对照组50例,测定血浆FVIII和VWF水平。按两因子水平是否升高将病例组分成4组:FVIII和VWF均不升高组(FVIII-/VWF-)、FVIII升高且VWF不升高组(FVIII↑/VWF-)、FVIII不升高且VWF升高组(FVIII-/VWF↑)和FVIII和VWF均升高组(FVIII↑/VWF↑)。比较各病例组和对照组的临床特点。结果病例组的VWF水平的中位数1521.88 U/L,明显高于对照组的中位数1281.77 U/L(P=0.023)。与FVIII-/VWF-组相比,FVIII↑/VWF↑组急性脑梗死的发病症状较重(入院NIHSS评分〉5分)(OR=3.643,95%CI:1.258-10.549,P=0.017),疾病预后较差(3个月m RS评分〉2分)(OR=7,95%CI:2.304-21.266,P=0.001),出院时m RS评分〉2分者所占比例高(OR=3.797,95%CI:1.346-10.713,P=0.012),住院期间更易发生神经功能损伤加重(OR=5.538,95%CI:1.099-27.908,P=0.038),且更易并发感染(OR=3.913,95%CI:1.115-13.729,P=0.033)。对各种混杂因素进行校正后,发现FVIII和VWF水平同时升高是急性脑梗死患者预后不良的独立预测因素(OR=4.495,95%CI:1.012-19.957,P=0.048)。结论急性脑梗死患者很可能存在FVIII或VWF水平升高,二者水平同时升高可能对疾病的严重性及临床转归有影响,并且很可能是预后不良的独立预测因素。 展开更多
关键词 脑梗死 预后 von Willebrand 因子 凝血因子viii
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内含肽介导F309SfVⅢ的连接和重链分泌的增强 被引量:5
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作者 朱甫祥 刘泽隆 +1 位作者 屈慧鸽 迟晓艳 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期526-532,共7页
凝血因子VⅢ(coagulation factor VⅢ,fVⅢ)是一种分泌性血浆蛋白,在凝血级联反应中发挥重要作用,由fVⅢ缺陷导致的甲型血友病是一种最常见的X-联锁隐性遗传性出血性疾病,基因治疗被认为是该病的理想治疗模式,但在运用最有希望的腺辅助... 凝血因子VⅢ(coagulation factor VⅢ,fVⅢ)是一种分泌性血浆蛋白,在凝血级联反应中发挥重要作用,由fVⅢ缺陷导致的甲型血友病是一种最常见的X-联锁隐性遗传性出血性疾病,基因治疗被认为是该病的理想治疗模式,但在运用最有希望的腺辅助病毒(adeno-associated virus,AAV)载体转fVⅢ基因时受到AAV的容量限制。本文旨在利用内含肽(intein)的蛋白质反式剪接,研究双载体真核细胞转具有促分泌作用的F309S突变体全长fVⅢ(F309SfVⅢ)基因。内含肽是一种包埋在蛋白质前体中的多肽序列,其在蛋白质成熟过程中通过蛋白质剪接作用被切除。将F309SfVⅢ的cDNA于B结构域的Ser1239密码子前断裂为重链(heavy chain,HC)和轻链(light chain,LC)两部分,分别与Ssp DnaB intein编码序列融合,插入到pcDNA3.1,构建一对质粒表达载体。共转染或分别单独转染293细胞,48h后用Western blot观察细胞内转基因的表达和F309SfVⅢ的剪接,用ELISA检测培养上清中分泌的F309SfVⅢ蛋白量以及HC含量,用Coatest法检测培养上清的fVⅢ生物活性。结果显示,共转染细胞有明显的完整F309SfVⅢ蛋白条带形成,细胞培养上清中的F309SfVⅢ蛋白浓度为(71±9)ng/mL,所产生的fVⅢ生物活性为(0.38±0.09)IU/mL,从单独转染后合并培养的细胞上清仍可检测到F309SfVⅢ蛋白和fVⅢ生物活性,分别为(25±6)ng/mL和(0.12±0.05)IU/mL,说明上清中的F309SfVⅢ蛋白由分泌前、后剪接两部分共同形成。共转染细胞培养液上清中的HC含量明显高于单独转染融合内含肽和HC的细胞培养液上清[(135±10)ng/mL vs(37±7)ng/mL,P<0.01)]。以上结果提示内含肽可作为一种技术手段用于双载体系统真核细胞F309SfVⅢ基因转移,并可改善F309SfVⅢ的分泌,为体内甲型血友病基因治疗研究中应用AAV载体、克服其容量限制转F309SfVⅢ基因提供了一种解决方案。 展开更多
关键词 凝血因子viii 分泌 内含肽 蛋白质反式剪接
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vWF促进intein剪接的BDD-FVⅢ的分泌和活性 被引量:3
13
作者 朱甫祥 杨树德 +3 位作者 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期595-600,共6页
vWF是由巨核细胞和血管内皮细胞合成的糖蛋白,其主要功能之一为凝血VIII因子(FVIII)的载体,防止后者被血浆酶降解。作者最近的工作证明intein可应用于双载体转移B结构域缺失型FVIII(BDD-FVIII)基因,通过翻译后的蛋白质反式剪接形成完整... vWF是由巨核细胞和血管内皮细胞合成的糖蛋白,其主要功能之一为凝血VIII因子(FVIII)的载体,防止后者被血浆酶降解。作者最近的工作证明intein可应用于双载体转移B结构域缺失型FVIII(BDD-FVIII)基因,通过翻译后的蛋白质反式剪接形成完整的功能性BDD-FVIII蛋白。为了研究vWF对于intein连接的BDD-FVIII分泌和活性的影响,通过intein融合的BDD-FVIII重、轻链基因和vWF基因共转染培养的293细胞,采用ELISA观察了分泌至培养上清液中的由intein剪接的全长BDD-FVIII抗原量,并用Coatest检测了由其产生的活性。结果显示,vWF基因共转染细胞上清液中,全长BDD-FVIII抗原量为(235±21)ng·mL-1,活性为(1.98±0.2)u·mL-1,明显高于未转染vWF的细胞[(110±18)ng·mL-1和(1.10±0.15)u·mL-1],也明显高于单独转染BDD-FVIII基因的对照细胞[(131±25)ng·mL-1和(1.22±0.18)u·mL-1],表明vWF基因共转染可显著改善双载体转BDD-FVIII基因后intein剪接的BDD-FVIII蛋白的分泌和生物活性。为基于蛋白质剪接的断裂BDD-FVIII基因转移的甲型血友病基因治疗研究中,应用vWF基因共转移以提高治疗的功效提供了依据。 展开更多
关键词 von WILLEBRAND因子 凝血viii因子 共转染 分泌 INTEIN 蛋白质反式剪接作用
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血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体的检测及其与因子ⅧC区的关系 被引量:2
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作者 张露璐 余自强 +3 位作者 万楚成 张威 章正华 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1211-1214,共4页
本研究应用快速而敏感的ELISA法检测血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体,并探讨其与因子ⅧC区的关系。收集140例血友病A患者样本,其中重型(FⅧ∶C<1%)84例,中型(FⅧ∶C 1-5%)34例,轻型(FⅧ∶C>5%)22例;患者均已经过因子Ⅷ替代治疗... 本研究应用快速而敏感的ELISA法检测血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体,并探讨其与因子ⅧC区的关系。收集140例血友病A患者样本,其中重型(FⅧ∶C<1%)84例,中型(FⅧ∶C 1-5%)34例,轻型(FⅧ∶C>5%)22例;患者均已经过因子Ⅷ替代治疗。正常对照样本80例。以本室制备的抗因子Ⅷ单克隆抗体包被酶标板,封闭后加入重组人凝血因子Ⅷ,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入HRP标记的羊抗人IgG,OPD显色,记录A490,以正常人血浆为对照,样本A490大于正常人对照3 SD定义为因子Ⅷ抗体阳性。以抗His抗体包被酶标板,封闭后加入本室制备的rFⅧ-C1C2区蛋白,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入HRP标记的羊抗人IgG,OPD显色,记录A490,以正常人血浆为对照,样本A490大于正常人对照3 SD定义阳性。结果表明,通过ELISA法检测,56例(40%)血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体阳性,其中46例(82.1%)因子Ⅷ同种抗体阳性的血浆样本中存在与因子ⅧC1C2结合的同种抗体。结论:因子ⅧC功能区是中国血友病A患者因子Ⅷ同种抗体的主要结合部位之一。 展开更多
关键词 血友病A 因子Ⅷ 同种抗体
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Nestin:A novel angiogenesis marker and possible target for tumor angiogenesis 被引量:16
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作者 Yoko Matsuda Masahito Hagio Toshiyuki Ishiwata 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2013年第1期42-48,共7页
Abnormal vasculature,termed tumor vessels,is a hallmark of solid tumors.The degree of angiogenesis is associated with tumor aggressiveness and clinical outcome.Therefore,exact quantification of tumor vessels is useful... Abnormal vasculature,termed tumor vessels,is a hallmark of solid tumors.The degree of angiogenesis is associated with tumor aggressiveness and clinical outcome.Therefore,exact quantification of tumor vessels is useful to evaluate prognosis.Furthermore,selective detection of newly formed tumor vessels within cancer tissues using specific markers raises the possibility of molecular targeted therapy via the inhibition of tumor angiogenesis.Nestin,an intermediate filament protein,is reportedly expressed in repair processes,various neoplasms,and proliferating vascular endothelial cells.Nestin expression is detected in endothelial cells of embryonic capillaries,capillaries of the corpus luteum,which replenishes itself by angiogenesis,and proliferating endothelial progenitor cells,but not in mature endothelial cells.Therefore,expression of nestin is relatively limited to proliferating vascular endothelial cells and endothelial progenitor cells.Nestin expression is also reported in blood vessels within glioblastoma,prostate cancer,colorectal cancer,and pancreatic cancer,and its expression is more specific for newly formed blood vessels than other endothelial cell markers.Nestin-positive blood vessels form smaller vessels with high proliferation activity in tumors.Knockdown of nestin in vascular endothelial cells suppresses endothelial cell growth and tumor formation ability of pancreatic cancers in vivo.Using nestin to more accurately evaluate microvessel density in cancer specimens may be a novel prognostic indicator.Furthermore,nestin-targeted therapy may suppress tumor proliferation via inhibition of angiogenesis in numerous malignancies,including pancreatic cancer.In this review article,we focus on nestin as a novel angiogenesis marker and possible therapeutic target via inhibition of tumor angiogenesis. 展开更多
关键词 NESTIN ANGIOGENESIS Molecular targeting therapy Gastrointestinal cancer Pancreatic cancer Microvessel density CD34 CD31 factor viii
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RNAi介导的Bip表达下调促进基于蛋白质剪接的双链共转基因细胞分泌FⅤⅢ凝血活性 被引量:2
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作者 朱甫祥 刘泽隆 +2 位作者 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期624-628,共5页
目的探讨用RNA干扰技术下调内质网蛋白伴侣免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)的表达,对基于蛋白质剪接的双链共转凝血因子ⅤⅢ(FⅤⅢ)基因HEK293细胞分泌剪接FⅤⅢ蛋白的量和活性的影响。方法以培养的HEK293细胞,用含蛋白内含子的B区缺失型F... 目的探讨用RNA干扰技术下调内质网蛋白伴侣免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)的表达,对基于蛋白质剪接的双链共转凝血因子ⅤⅢ(FⅤⅢ)基因HEK293细胞分泌剪接FⅤⅢ蛋白的量和活性的影响。方法以培养的HEK293细胞,用含蛋白内含子的B区缺失型FⅤⅢ(BDD-FⅤⅢ)的重链和轻链基因表达载体共转染经Bip-siRNA处理的细胞,免疫印迹法检测Bip的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长,用酶联免疫吸附(ELISA)和发色分析法分析转基因细胞分泌的剪接BDD-FⅤⅢ蛋白量和活性。结果 RNA干扰下调Bip表达作用明显,细胞生长不受影响;Bip下调的共转基因细胞分泌的剪接BDD-FⅤⅢ和重链量分别为(142±33)μg/L和(197±43)μg/L,明显高于对照细胞[分别为(89±23)μg/L和(120±27)μg/L];Bip下调的共转基因细胞分泌的FⅤⅢ凝血活性为(1 050±160)IU/L,明显高于对照细胞[640±170(IU/L)]。结论 Bip表达下调通过促进剪接BDD-FⅤⅢ的分泌可有效提高基于蛋白质剪接的双载体转BDD-FⅤⅢ基因功效,为进一步动物体内实验提供了依据。 展开更多
关键词 凝血因子VⅢ 免疫球蛋白重链结合蛋白 蛋白质剪接 双链转基因 免疫印迹法 酶联免疫吸附测定 发色分析法
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凝血纤溶系统相关因子与多囊卵巢综合征妇女先兆流产预后的关系 被引量:6
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作者 单育 王蔼明 +1 位作者 孙影 姜文 《生殖医学杂志》 CAS 2013年第5期334-339,共6页
目的探讨凝血纤溶系统相关因子与多囊卵巢综合征(polycysticovary syndrome,PCOS)妇女先兆流产后出现的不同妊娠结局的关系以及与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)、血脂、体重指数(BMI)的相关性。方法收集PCOS正常早孕妇女30例,PCOS... 目的探讨凝血纤溶系统相关因子与多囊卵巢综合征(polycysticovary syndrome,PCOS)妇女先兆流产后出现的不同妊娠结局的关系以及与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)、血脂、体重指数(BMI)的相关性。方法收集PCOS正常早孕妇女30例,PCOS先兆流产经治疗后继续妊娠28例,保胎失败(难免流产)32例。检测凝血因子VIII(FVIII)活性、凝血因子X(FX)活性、纤溶酶原活化剂抑制物(PAI-1)和组织型纤溶酶原活化剂(t-PA)水平,以及IR、血脂与BMI。结果与正常早孕组相比,继续妊娠组FVIII活性、FX活性升高,差异有统计学意义(P<0.05);难免流产组中FVIII活性、FX活性、PAI-1和t-PA水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与继续妊娠组相比,PAI-1水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,难免流产组中PAI-1水平与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、低密度脂蛋白(LDL)、BMI呈正相关。回归方程的决定系数R^2=0.79。结论难免流产组中,PAI-1水平有明显的升高。PCOS妊娠患者可以通过PAI-1水平,以及HOMA-IR、BMI、血脂测定来预测先兆流产的预后。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 先兆流产 凝血因子Ⅷ 凝血因子X 纤溶酶原活化剂抑制物 组织型纤溶酶原活化剂
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正常妊娠及妊高征孕妇凝血功能检测的临床意义 被引量:18
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作者 王明山 叶光勇 黄小芳 《浙江临床医学》 2001年第2期76-77,共2页
目的 研究抗凝血酶 -Ⅲ (AT-Ⅲ )、凝血因子Ⅷ活性 (Ⅷ :C)、纤维蛋白原 (FIB)、D -二聚体 (D -D)四项血凝指标在妊娠中的变化 ,探讨其在妊高征诊断和预防中的价值。方法 血浆抗凝血酶 -Ⅲ活性 (AT-Ⅲ :A)、凝血因子Ⅷ活性 (Ⅷ :C)、纤... 目的 研究抗凝血酶 -Ⅲ (AT-Ⅲ )、凝血因子Ⅷ活性 (Ⅷ :C)、纤维蛋白原 (FIB)、D -二聚体 (D -D)四项血凝指标在妊娠中的变化 ,探讨其在妊高征诊断和预防中的价值。方法 血浆抗凝血酶 -Ⅲ活性 (AT-Ⅲ :A)、凝血因子Ⅷ活性 (Ⅷ :C)、纤维蛋白原含量(FIB)、血浆D -二聚体 (D -D)测定共77例 (妊高征者21例 ,正常孕妇36例 ,正常非孕妇女20例 )。结果 妊高征者和正常孕妇AT -Ⅲ :AT-Ⅲ明显低于正常非孕妇女 (P<0.001或P<0.01) ,并妊高征者比正常孕妇降低更甚 (P<0.001) ;Ⅷ :C、FIB、D -D妊高征者和正常孕妇均明显高于正常非孕妇女 (P<0.001) ,并且妊高征者也明显高于正常孕妇 (P<0.001)。结论 展开更多
关键词 妊娠高血压综合征 正常妊娠 抗凝血酶-Ⅲ 凝血因子Ⅷ 纤维蛋白原 D-二聚体
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75例血友病A患者内含子22及1基因倒位情况分析 被引量:4
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作者 黄吉娥 张婧 +2 位作者 刘咏梅 杨芳 曾小菁 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第7期810-813,820,共5页
目的:观察血友病A(HA)患者凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子22倒位和内含子1倒位情况。方法:取75例HA患者静脉血,采用长距离PCR扩增技术(LD-PCR)检测内含子22和内含子1倒位情况,观察两种内含子倒位发生率,同时观察内含子22倒位在重型HA中的比... 目的:观察血友病A(HA)患者凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子22倒位和内含子1倒位情况。方法:取75例HA患者静脉血,采用长距离PCR扩增技术(LD-PCR)检测内含子22和内含子1倒位情况,观察两种内含子倒位发生率,同时观察内含子22倒位在重型HA中的比例,比较有家族史和无家族史HA患者内含子22倒位发生率。结果:检出22号内含子倒位患者27例,检出率36%(27/75),全部为HA重型患者,占重型血友病A患者的57.4%(27/47);27例中有21例有家族史,有家族史患者内含子22号倒位的发生率高于无家族史患者(P<0.05);检出内含子1倒位1例,占1.3%(1/75)。结论:FⅧ基因内含子22倒位患者患重型HA的几率较高,内含子22倒位检测在重型HA的基因诊断中具有重要意义。 展开更多
关键词 凝血因子Ⅷ 基因倒位 诊断
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引入糖基化位点和L303E/F309S突变促进intein介导的断裂凝血Ⅷ因子剪接 被引量:1
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作者 朱甫祥 刘泽隆 +2 位作者 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1361-1366,共6页
作者最近证明intein的蛋白质剪接技术可用于双载体转B区缺失型FVIII(BDD-FVIII)基因,在此基础上,本研究将具有促FVIII分泌作用的L303E/F309S双突变和B结构域糖基化位点引入BDD-FVIII重链,观察重链变体对intein剪接的BDD-FVIII蛋白分泌... 作者最近证明intein的蛋白质剪接技术可用于双载体转B区缺失型FVIII(BDD-FVIII)基因,在此基础上,本研究将具有促FVIII分泌作用的L303E/F309S双突变和B结构域糖基化位点引入BDD-FVIII重链,观察重链变体对intein剪接的BDD-FVIII蛋白分泌和活性的影响。用分别融合Ssp DnaB intein的重链变体(DMN6HCIntN)和轻链(IntCLC)基因共转染培养的293细胞,用ELISA分析分泌至培养上清液中的剪接BDD-FVIII蛋白量,并用发色法检测培养上清液的凝血生物活性。结果显示,DMN6HCIntN和IntCLC共转基因细胞上清液中剪接BDD-FVIII的浓度为(149±23)ng.mL-1,活性为(1.12±0.14)u.mL-1,明显高于intein融合的野生型重链(HCIntN)与轻链(IntCLC)共转基因细胞[(99±14)ng.mL?1和(0.77±0.13)u.mL?1],提示重链变体能明显促进剪接BDD-FVIII蛋白的分泌和活性;另外,还检测到不依赖细胞机制的BDD-FVIII剪接。本研究为进一步动物体内双AAV载体转BDD-FVIII基因研究提供了依据。 展开更多
关键词 凝血viii因子 重链变体 分泌 INTEIN 蛋白质剪接
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