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miR-802通过Fzd5-Creb1-Sox9信号轴调控小鼠胰腺祖细胞增殖及分化
1
作者 马东慎 嵇阳 +3 位作者 郑雨欣 王春影 向臣希 张方方 《山西医科大学学报》 2025年第6期655-662,共8页
目的探讨miR-802在小鼠胰腺祖细胞(PPCs)干性维持及增殖调控中的具体作用及其潜在机制。方法采用基于基质胶和甲基纤维素的三维半固体培养体系,从小鼠胰腺导管组织中筛选并培养PPCs,并通过慢病毒介导的miR-802过表达和敲减策略,系统研... 目的探讨miR-802在小鼠胰腺祖细胞(PPCs)干性维持及增殖调控中的具体作用及其潜在机制。方法采用基于基质胶和甲基纤维素的三维半固体培养体系,从小鼠胰腺导管组织中筛选并培养PPCs,并通过慢病毒介导的miR-802过表达和敲减策略,系统研究其生物学效应。通过免疫荧光检测PPCs干性基因Pdx1及增殖标志Ki67的表达水平,采用流式细胞术分析CD133阳性细胞比例,并运用荧光定量PCR检测干性、增殖及内分泌分化相关基因(Pdx1、Ki67、CD133、Ins1、Ins2、Ngn3、NeuroD1)的表达情况。此外,采用Western blot检测Fzd5、磷酸化Creb1(p-Creb1)、Creb1及Sox9蛋白的表达水平。结果敲减miR-802可显著促进PPCs的单克隆集落形成能力(P<0.01),增加集落直径(P<0.05),并提升细胞增殖能力(P<0.001),同时上调干性基因Pdx1和CD133的表达水平(P<0.001),并下调内分泌分化基因Ngn3和NeuroD1的表达水平(P<0.05)。相反,过表达miR-802则显著抑制单克隆集落形成能力(P<0.01),减小集落直径(P<0.05),抑制细胞增殖能力(P<0.01),抑制干性基因Pdx1和CD133表达(P<0.01),并促进内分泌分化基因Ins1、Ins2、Ngn3和NeuroD的表达(P<0.01)。此外,在miR-802敲除小鼠胰腺组织中,CD133/Ki67双阳性细胞比例明显增加(P<0.001)。进一步研究表明,敲减miR-802可上调Fzd5表达(P<0.05),促进Creb1磷酸化水平(P<0.01),并促进Sox9表达(P<0.001);过表达miR-802则下调Fzd5表达(P<0.001),抑制Creb1磷酸化水平(P<0.001),并抑制Sox9表达(P<0.001)。结论miR-802可通过调控Fzd5-Creb1-Sox9信号轴,促进PPCs增殖和干性基因表达并抑制内分泌分化基因表达,从而调控PPCs的增殖及分化平衡。 展开更多
关键词 miR-802 胰腺祖细胞 细胞干性 fzd5 SOX9 Creb1
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FZD5在小鼠前列腺癌骨转移中的作用机制研究 被引量：3
2
作者 张晓 莫启旺 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期128-132,共5页
目的:探讨FZD5基因在前列腺癌骨转移中的作用机制,寻找前列腺癌骨转移的新的治疗方法。方法:检测前列腺癌PC3细胞内FZD5基因表达水平。将siRNA转染入PC3细胞后使FZD5基因沉默,继而观察PC3细胞迁移、增殖的变化。在此基础上通过小鼠胫骨... 目的:探讨FZD5基因在前列腺癌骨转移中的作用机制,寻找前列腺癌骨转移的新的治疗方法。方法:检测前列腺癌PC3细胞内FZD5基因表达水平。将siRNA转染入PC3细胞后使FZD5基因沉默,继而观察PC3细胞迁移、增殖的变化。在此基础上通过小鼠胫骨注射建立前列腺癌骨转移模型,之后每周在胫骨腔内注射对照siRNA或FZD5基因沉默siRNA,于0、1和3周拍X平片观察肿瘤骨破坏,在3周后取材,行HE染色观察肿瘤骨破坏情况。结果:将FZD5基因沉默siRNA转染入前列腺癌PC3细胞后,细胞内FZD5基因表达量下降约70%。基因沉默组细胞增殖显著低于对照组(P<0.05)。FZD5基因沉默48 h后,细胞迁移能力较对照组下降了30%(P<0.05)。小鼠模型胫骨腔内注射对照siRNA或沉默siRNA 3周时,对照组和实验组均可见溶骨性破坏,但FZD5基因沉默组破坏相对较少,仍可见部分残留骨小梁。结论:通过抑制FZD5基因,可减少前列腺癌细胞的迁移和增殖,可能辅助减少前列腺癌患者的骨转移及骨破坏,从而提高患者的生存率及生活质量。其从分子生物学的角度为前列腺癌的发病机制以及治疗方法提供了新的思路。 展开更多
关键词 fzd5 前列腺癌 骨转移 骨破坏 小鼠 PC3细胞
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Wnt11及其受体Fzd5在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓内的表达变化
3
作者 史才兴 李晓琎 +2 位作者 袁丽丽 程葆华 徐旭东 《解剖学研究》 CAS 2017年第5期367-370,427-428,共6页
目的检测Wnt11及其受体Fzd5在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,探讨Wnt11及其受体Fzd5在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠龄95 d、108d、122 d取材,部分鼠经4%多聚甲醛... 目的检测Wnt11及其受体Fzd5在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,探讨Wnt11及其受体Fzd5在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠龄95 d、108d、122 d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定、分离脊髓、冰冻切片,应用免疫荧光技术,检测脊髓中Wnt11及其受体Fzd5的表达变化;部分鼠取出脊髓、匀浆,应用RT-PCR技术检测不同时间点Wnt11及其受体Fzd5 mRNA的表达变化。结果免疫荧光结果显示,与同窝野生型鼠比较,95 d、108 d和122 d龄ALS转基因鼠脊髓中Wnt11阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,Wnt11标记的阳性细胞与GFAP和β-tubulinⅢ共表达,ALS转基因鼠Wnt11/GFAP双阳性细胞增多。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Wnt11 mRNA水平在95 d、108 d和122 d均升高。Wnt11受体Fzd5表达情况与Wnt11一致。结论 Wnt11和Fzd5在ALS转基因鼠脊髓中表达增多,表明Wnt11及其受体Fzd5表达升高与肌萎缩脊髓侧索硬化症密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩脊髓侧索硬化症 Wnt11 fzd5 WNT信号通路 转基因鼠
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Wnt7a及其受体Fzd5在大肠癌中的表达及意义 被引量：1
4
作者 孙丹 王淑坤 +4 位作者 苗玉娟 卢强 侯琛 宋妍 周风华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第19期4726-4729,共4页
目的探讨Wnt7a及其受体Frizzled(Fzd) 5在大肠癌中的表达及关系,揭示大肠癌发生发展的可能机制。方法收集大肠癌标本80例,以癌旁正常组织作为对照。qRT-PCR技术检测Wnt7a及其受体Fzd5在大肠癌及癌旁正常组织中mRNA水平的变化。Western... 目的探讨Wnt7a及其受体Frizzled(Fzd) 5在大肠癌中的表达及关系,揭示大肠癌发生发展的可能机制。方法收集大肠癌标本80例,以癌旁正常组织作为对照。qRT-PCR技术检测Wnt7a及其受体Fzd5在大肠癌及癌旁正常组织中mRNA水平的变化。Western印迹方法检测Wnt7a及其受体Fzd5在蛋白水平的变化,免疫组化检测Wnt7a及其受体Fzd5的表达变化及分布特点,同时观察Wnt7a及其受体Fzd5与大肠癌临床病理参数的关系。结果与癌旁正常组织比较,大肠癌组织中Wnt7a及其受体Fzd5在mRNA及蛋白水平均明显增高(P<0. 05);免疫组化及Western印迹结果显示,Wnt7a及其受体Fzd5均在细胞质表达,且大肠癌组织的表达强度明显高于癌旁正常组织(P<0. 05)。相关性分析表明,Wnt7a与受体Fzd5的表达均与大肠癌的体积、Duke分级及是否伴有淋巴结转移具有明显的相关性(P<0. 05),且Wnt7a与受体Fzd5两者之间呈正相关。结论 Wnt7a可能通过与受体Fzd5的结合激活Wnt信号,参与了大肠癌的发生与发展。 展开更多
关键词 Wnt7a fzd5 大肠癌
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FZD5在山羊妊娠早期的表达及激素调控 被引量：1
5
作者 邢园园 张云 +2 位作者 崔云凤 任杰 倪华 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期67-71,共5页
实验旨在研究雌性山羊早期妊娠和发情周期中 Frizzled-5(FZD5)蛋白在子宫中的表达,以及类固醇激素对 FZD5 的表达调控。选取发情周期、早期妊娠及雌激素(50 μg/mL)与孕酮(50 ng/mL)处理山羊的子宫组织,采用免疫组织化学染色、荧光定量 ... 实验旨在研究雌性山羊早期妊娠和发情周期中 Frizzled-5(FZD5)蛋白在子宫中的表达,以及类固醇激素对 FZD5 的表达调控。选取发情周期、早期妊娠及雌激素(50 μg/mL)与孕酮(50 ng/mL)处理山羊的子宫组织,采用免疫组织化学染色、荧光定量 PCR和 Western blot检测 FZD5在山羊子宫中的表达规律。结果表明:FZD5 蛋白在山羊妊娠早期的子宫腔上皮和腺上皮中表达;FZD5 mRNA 和蛋白在胚胎与子宫的黏附前(D6)和黏附中(D16)表达较高,在黏附后(D19)和胎盘形成早期(D25)呈下降趋势;孕酮处理导致FZD5表达降低,表明山羊子宫中孕酮下调 FZD5的表达。研究提示FZD5可能在山羊胚胎着床过程中发挥作用。 展开更多
关键词 fzd5 山羊 子宫 类固醇激素
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miR-99a对帕金森模型细胞活力及ROS水平的影响
6
作者 张敏 刘国荣 《医学食疗与健康》 2020年第2期8-9,共2页
目的:分析miR-99a对帕金森病细胞模型作用。方法:采用Western blotting以及Real-time PCR方法,对miR-99a以及其靶基因FZD5表达水平进行研究。采用CCK-8方法,检测细胞存活力。结果:过表达miR-99a,可将MPP+抑制PC12细胞存活作用明显缓解,... 目的:分析miR-99a对帕金森病细胞模型作用。方法:采用Western blotting以及Real-time PCR方法,对miR-99a以及其靶基因FZD5表达水平进行研究。采用CCK-8方法,检测细胞存活力。结果:过表达miR-99a,可将MPP+抑制PC12细胞存活作用明显缓解,该作用是通过调控miR-99a/FZD5轴完成的。结论:miR-99a在帕金森病细胞模型中,可对MPP+导致的PC12细胞存活抑制作用明显缓解,是通过靶向及下调FZD5实现的。 展开更多
关键词 miR-99a 帕金森病细胞模型 fzd5
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miR-99a对帕金森病细胞模型作用研究 被引量：1
7
作者 张敏 刘国荣 《包头医学院学报》 CAS 2018年第11期87-89,共3页
目的:探讨miR-99a对帕金森病细胞模型的体外作用。方法:利用MPP+诱导的PC12细胞模型,采用Real-time PCR和Western blotting方法研究miR-99a及其靶基因FZD5的表达水平,采用CCK-8方法检测细胞的存活能力。结果:MPP+显著抑制PC12细胞存活,... 目的:探讨miR-99a对帕金森病细胞模型的体外作用。方法:利用MPP+诱导的PC12细胞模型,采用Real-time PCR和Western blotting方法研究miR-99a及其靶基因FZD5的表达水平,采用CCK-8方法检测细胞的存活能力。结果:MPP+显著抑制PC12细胞存活,并下调miR-99a的表达。过表达miR-99a可以显著缓解MPP+对PC12细胞存活的抑制作用。MPP+通过调控miR-99a/FZD5轴抑制PC12细胞的存活。结论:在帕金森病细胞模型中,miR-99a具有缓解MPP+引起的PC12细胞存活抑制的作用,而该作用是通过靶向并下调FZD5来实现的。 展开更多
关键词 帕金森病 MPP+ miR-99a fzd5 PC12细胞
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白三烯受体拮抗剂对脊髓损伤大鼠氧化应激及细胞凋亡的影响及可能机制 被引量：2
8
作者 季英楠 东黎阳 冯时 《解剖科学进展》 CAS 2022年第1期66-69,共4页
目的探讨白三烯受体拮抗剂对脊髓损伤大鼠氧化应激及细胞凋亡的影响,探究Wnt5a/FZD2信号通路对氧化应激及细胞凋亡的调节机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤模型组(SCI组)和白三烯受体拮抗剂组(MK组),参照Allen’s... 目的探讨白三烯受体拮抗剂对脊髓损伤大鼠氧化应激及细胞凋亡的影响,探究Wnt5a/FZD2信号通路对氧化应激及细胞凋亡的调节机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤模型组(SCI组)和白三烯受体拮抗剂组(MK组),参照Allen’s方法建立脊髓损伤的大鼠模型。对大鼠运动功能进行BBB评分;HE染色观察脊髓损伤病理变化;免疫荧光法检测活性氧ROS的表达;ELISA方法检测血清中SOD、MDA、NSE的含量;TUNEL方法检测细胞凋亡情况;Western blot方法检测Wnt5a、FZD2、β-catenin、cyclinD1的表达水平。结果白三烯受体拮抗剂减轻SCI大鼠病理损伤,抑制ROS的释放,抑制MDA、NSE的分泌,促进SOD的释放,下调Wnt5a、FZD2的表达,上调β-catenin、cyclinD1的表达。结论白三烯受体拮抗剂抑制SCI大鼠氧化应激改善细胞凋亡,其机制与调控Wnt5a/FZD2信号通路有关。 展开更多
关键词 白三烯受体拮抗剂 脊髓损伤 氧化应激 细胞凋亡 Wnt5a/FZD2信号通路
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