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长链非编码RNA FUT8-AS1通过调控生长分化因子15影响糖尿病性脑缺血再灌注损伤机制的研究
1
作者 柳晓锋 王婷婷 +2 位作者 宋哲 谷骞 宋春旺 《中国糖尿病杂志》 北大核心 2025年第10期768-779,共12页
目的探讨长链非编码RNA(Lnc RNA)FUT8-AS1通过调控生长分化因子15(GDF15)影响糖尿病性脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血再灌注损伤(MCAO/R)组、糖尿病性脑缺血再灌注损伤(DM-MCAO/R)组、DM-MC... 目的探讨长链非编码RNA(Lnc RNA)FUT8-AS1通过调控生长分化因子15(GDF15)影响糖尿病性脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血再灌注损伤(MCAO/R)组、糖尿病性脑缺血再灌注损伤(DM-MCAO/R)组、DM-MCAO/R+敲低阴性对照(DM-MCAO/R+sh NC)组、DM-MCAO/R+LncRNA FUT8-AS1敲低载体(DM-MCAO/R+sh FUT8-AS1)组。TTC染色评估脑梗死面积,Tunel染色检测脑组织神经细胞凋亡情况,尼氏染色观察脑组织中的神经元数量,q RT-PCR检测Lnc RNA FUT8-AS1、GDF15 mRNA表达,Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、p-e NOS、GDF15蛋白表达。将大鼠脑微血管内皮细胞分为对照(Con)组、脑缺血再灌注损伤(OGD/R)组、高糖-脑缺血再灌注损伤(HG-OGD/R)组、HG-OGD/R+sh NC组、HG-OGD/R+sh FUT8-AS1组、HG-OGD/R+sh FUT8-AS1+过表达阴性对照(HG-OGD/R+sh FUT8-AS1+oe NC)组、HG-OGD/R+sh FUT8-AS1+GDF15过表达载体(HG-OGD/R+sh FUT8-AS1+oe GDF15)组。MTT实验检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)实验检测细胞损伤,Western blot检测细胞中α-SMA、e NOS、p-e NOS蛋白表达。结果与Sham组比较,MCAO/R组脑梗死面积百分比、Tunel阳性细胞数、FUT8-AS1和GDF15 mRNA表达及GDF-15蛋白表达升高(P<0.05),α-SMA、e NOS、p-e NOS蛋白表达降低(P<0.05),海马区神经元尼氏体数量减少,形态皱缩,颜色深染。与MCAO/R组比较,DM-MCAO/R组脑梗死面积百分比、Tunel阳性细胞数、FUT8-AS1和GDF15 mRNA表达及GDF-15蛋白表达升高(P<0.05),α-SMA、e NOS、p-eNOS蛋白表达降低(P<0.05),海马区神经元尼氏体数量减少。与DM-MCAO/R+sh NC组比较,DM-MCAO/R+sh FUT8-AS1组脑梗死面积百分比、Tunel阳性细胞数、FUT8-AS1和GDF15 mRNA表达及GDF-15蛋白表达降低(P<0.05),α-SMA、e NOS、p-eNOS蛋白表达升高(P<0.05),海马区神经元尼氏体数增加。与Con组比较,OGD/R组LDH释放量、FUT8-AS1表达及GDF15 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),细胞活性、α-SMA、e NOS、p-eNOS蛋白表达降低(P<0.05)。与OGD/R组比较,HG-OGD/R组LDH释放量、FUT8-AS1表达及GDF15 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),细胞活性、α-SMA、e NOS、p-eNOS蛋白表达降低(P<0.05)。与HG-OGD/R+sh NC组比较,HG-OGD/R+sh FUT8-AS1组LDH释放量、FUT8-AS1表达及GDF15 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),细胞活性、α-SMA、e NOS、p-eNOS蛋白表达升高(P<0.05)。与HG-OGD/R+oe NC组比较,HG-OGD/R+oe GDF15组LDH释放量、GDF15 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),细胞活性降低(P<0.05)。与HG-OGD/R+sh FUT8-AS1+oe NC组比较,HG-OGD/R+sh FUT8-AS1+oe GDF15组α-SMA、e NOS、p-eNOS蛋白表达降低(P<0.05)。结论Lnc RNA FUT8-AS1可能通过调控GDF15加剧糖尿病性脑缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 长链非编码RNA fut8-as1 生长分化因子15 糖尿病 脑缺血再灌注损伤
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lncRNA FUT8-AS1通过调控miR-142-5p/BCL2轴促进上皮性卵巢癌细胞增殖、侵袭和EMT 被引量：3
2
作者 王娟 刘蕾蕾 +1 位作者 郝雅丽 康山 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期935-941,共7页
目的 观察FUT8-AS1基因在上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer, EOC)组织和细胞株中的表达,探讨影响EOC细胞增殖、侵袭和EMT的机制。方法 采用GEPIA2和Kaplan-Meier Plotter数据库分析FUT8-AS1在EOC组织中的表达及与患者生存期的关... 目的 观察FUT8-AS1基因在上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer, EOC)组织和细胞株中的表达,探讨影响EOC细胞增殖、侵袭和EMT的机制。方法 采用GEPIA2和Kaplan-Meier Plotter数据库分析FUT8-AS1在EOC组织中的表达及与患者生存期的关系。收集74例EOS组织标本和60例正常组织标本,应用RT-PCR法检测FUT8-AS1、miR-142-5p、BCL2和EMT相关基因的表达;运用CCK-8和Transwell实验检测敲低FUT8-AS1基因表达对EOC细胞CAOV3增殖和侵袭的影响。利用双荧光素酶报告分析FUT8-AS1与miR-142-5p的相互作用。结果 GEPIA2和Kaplan-Meier Plotter数据库分析发现,FUT8-AS1在EOC组织中的表达显著高于正常组织(P<0.05),FUT8-AS1高表达组的总生存率显著低于FUT8-AS1低表达组(P<0.01);FUT8-AS1基因在74例EOC组织中的表达明显高于正常组织[(2.547±1.370)vs(1.330±0.831),P<0.01],与大网膜转移、淋巴结转移、FIGO分期和总生存期均相关(P<0.01或P<0.05),敲低FUT8-AS1基因可以抑制CAOV3细胞的体外增殖、侵袭能力和EMT(P<0.01或P<0.05)。双荧光素酶报告分析系统检测显示,共转染miR-142-5p mimics和野生型FUT8-AS1-WT质粒,CAOV3细胞的荧光素酶活性明显降低(P<0.05),同时转染miR-142-5p mimics可抵消CAOV3细胞中由敲低FUT8-AS1导致的BCL2基因表达下调(P<0.05)。结论 FUT8-AS1基因在EOC中呈高表达且导致预后差,敲低FUT8-AS1基因可以抑制CAOV3细胞的体外增殖、侵袭能力和EMT,FUT8-AS1基因可能通过靶向miR-142-5p/BCL2分子轴促进EOC的进展。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 上皮性卵巢癌 fut8-as1 miR-142-5p 预后 增殖 侵袭 EMT
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LncRNA FUT8-AS1调控miR-139-5p促进糖尿病合并脑梗死大鼠血管生成的机制研究 被引量：1
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作者 谷骞 柳晓锋 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第12期2017-2022,共6页
目的:探讨lncRNA FUT8-AS1调控miR-139-5p对糖尿病(DM)合并脑梗死(CI)大鼠血管的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、DM+CI组、Vector组、shFUT8-AS1组、miR-139-5p Agomir组、pcDNA-FUT8-AS1组和pcDNA-FUT8-AS1+miR-139-5p Ag... 目的:探讨lncRNA FUT8-AS1调控miR-139-5p对糖尿病(DM)合并脑梗死(CI)大鼠血管的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、DM+CI组、Vector组、shFUT8-AS1组、miR-139-5p Agomir组、pcDNA-FUT8-AS1组和pcDNA-FUT8-AS1+miR-139-5p Agomir组。采用TTC染色检测CI面积,免疫组化染色检测血管内皮生长因子(VEGF)和FMS样酪氨酸激酶(FLT-1)蛋白表达,并检测内皮依赖性微血管密度(MVD)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测FUT8-AS1、VEGF、FLT-1 mRNA表达。Western blotting检测VEGF蛋白表达。双荧光素酶实验检测FUT8-AS1与miR-139-5p的靶向关系。结果:与对照组比较,DM+CI组CI面积显著增加,脑组织FUT8-AS1、FLT-1 mRNA表达上调,VEGF mRNA及蛋白表达上调,miR-139-5p表达下调(均P<0.05)。与Vector组相比,pcDNA-FUT8-AS1组FLT-1和VEGF mRNA及蛋白表达上调,MVD增加(均P<0.05);shFUT8-AS1组和miR-139-5p Agomir组FLT-1和VEGF mRNA及蛋白表达下调,MVD减少(均P<0.05)。与pcDNA-FUT8-AS1组相比,pcDNA-FUT8-AS1+miR-139-5p Agomir组FLT-1和VEGF mRNA及蛋白表达下调,MVD减少(均P<0.05)。结论:过表达FUT8-AS1通过靶向miR-139-5p上调VEGF和FLT-1表达,促进DM合并CI大鼠血管生成。 展开更多
关键词 LncRNA fut8-as1 miR-139-5p 糖尿病 脑梗死 血管生成
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