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过表达外源FUT7对乳腺癌细胞黏附及迁移能力的影响 被引量：1
1
作者 崔红霞 赵学梅 +2 位作者 孙超 林宇 岳丽玲 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期252-255,共4页
目的观察过表达外源岩藻糖基转移酶VII(FUT7)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞黏附和迁移能力的影响。方法构建以FUT7为靶基因的真核表达载体pEGFP-C1-FUT7,转染人乳腺癌MDAMB-231细胞,采用RT-PCR检测FUT7 mRNA的表达;Western blot检测FUT7及... 目的观察过表达外源岩藻糖基转移酶VII(FUT7)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞黏附和迁移能力的影响。方法构建以FUT7为靶基因的真核表达载体pEGFP-C1-FUT7,转染人乳腺癌MDAMB-231细胞,采用RT-PCR检测FUT7 mRNA的表达;Western blot检测FUT7及其催化产物sLeX蛋白水平;细胞黏附实验及Transwell小室检测转染后细胞与HUVECs细胞黏附、迁移能力。结果转染细胞外源FUT7表达在mRNA水平和蛋白水平及sLeX含量均明显增加;转染的乳腺癌细胞黏附和迁移能力明显增强。结论过表达外源FUT7基因可增强人乳腺癌MDA-MB-231细胞黏附和迁移能力。 展开更多
关键词 fut7基因 转染 乳腺癌 黏附 迁移
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人α1,3-岩藻糖基转移酶VII荧光真核表达载体的构建及鉴定 被引量：2
2
作者 张媛媛 王忠山 +1 位作者 刘帅 燕秋 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期727-730,744,共5页
目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pIRES2-EGFP-FUT7真核表达载体。方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶VII(FUT7)全长基因,克隆至pMD18-TSimple载体后,将FUT7亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体并进行鉴定。通过脂质体转染... 目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pIRES2-EGFP-FUT7真核表达载体。方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶VII(FUT7)全长基因,克隆至pMD18-TSimple载体后,将FUT7亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体并进行鉴定。通过脂质体转染到子宫内膜RL95-2细胞中,荧光显微镜下观察并经RT-PCR检测FUT7的表达。结果:测序及酶切鉴定证明获得人全长FUT7基因,FUT7基因正确插入pIRES2-EGFP中,在荧光显微镜下观察到了绿色荧光蛋白在RL95-2细胞中的表达,半定量RT-PCR检测结果显示FUT7的表达明显增加。结论:成功构建了绿色荧光蛋白为报告基因的FUT7真核表达载体,并检测到在RL95-2细胞中的表达,为研究FUT7及其合成的糖抗原sLex在胚胎着床中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 α1 3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(fut7) 绿色荧光蛋白 基因克隆 基因表达
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