FUT4-siRNA增强5-aza-dC对鳞癌细胞增殖和迁移的抑制 被引量：1

1

作者 李洪艳 佟少明 +1 位作者 邹伟 燕秋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期836-842,共7页

岩藻糖基转移酶IV(fucosyltransferase IV,FUT4)是催化蛋白质岩藻糖基化的关键酶.已经证明,FUT4-siRNA能够抑制鳞癌细胞的增殖.5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-d C)是临床常用化疗药物,但5-aza-d C是否对鳞癌有治疗作用,以及与FUT4-siRNA联合... 岩藻糖基转移酶IV(fucosyltransferase IV,FUT4)是催化蛋白质岩藻糖基化的关键酶.已经证明,FUT4-siRNA能够抑制鳞癌细胞的增殖.5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-d C)是临床常用化疗药物,但5-aza-d C是否对鳞癌有治疗作用,以及与FUT4-siRNA联合使用能否加强对鳞癌细胞增殖和迁移的抑制尚不清楚.本研究以鳞癌细胞系A431和SCC12为对象,探讨5-aza-d C及其与FUT4-siRNA联合使用对细胞增殖和迁移的影响.MTT结合流式细胞周期分析显示,5-aza-d C处理A431和SCC12细胞4 d后,细胞增殖被明显抑制,抑制率分别为18%和20%(P<0.05);与对照组比较,加药处理组G1期细胞数量减少,S期细胞数量明显增加.Western印迹结果揭示,A431细胞FUT4表达水平较SCC12细胞高.经5-aza-d C处理后SCC12细胞FUT4表达有所增加,但仍低于A431细胞中的表达.FUT4-siRNA转染结合台盼蓝活细胞记数证明,FUT4-siRNA明显降低细胞FUT4表达,5-azad C处理同时转染FUT4-siRNA的A431和SCC12细胞增殖进一步被抑制,抑制率分别为54%和60%(P<0.05).细胞划痕法显示,5-aza-d C与FUT4-siRNA联合使用,对细胞迁移能力的抑制作用比5-aza-d C单独使用增强.上述结果提示,5-aza-d C通过诱导细胞S期阻滞抑制鳞癌细胞增殖,FUT4-siRNA与5-aza-d C联合使用可加强对细胞增殖和迁移的抑制. 展开更多

关键词 5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-dC) fut4-sirna 鳞癌细胞 增殖 迁移

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Fut8基因通过促进VLA-4/VCAM-1表达影响B细胞发育 被引量：5

2

作者 焦鑫艳 马彪 +2 位作者 王旭 刘庆平 李文哲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期683-686,共4页

目的探讨核心岩藻糖基化修饰对VLA-4/VCAM-1表达及B细胞发育的影响。方法通过RNA干扰技术使前B细胞(70Z/3)和基质细胞(ST2)的Fut8基因沉默,免疫沉淀和Western blot检测Fut8基因沉默效率,以细胞黏附实验和克隆形成实验分别研究Fut8基因对... 目的探讨核心岩藻糖基化修饰对VLA-4/VCAM-1表达及B细胞发育的影响。方法通过RNA干扰技术使前B细胞(70Z/3)和基质细胞(ST2)的Fut8基因沉默,免疫沉淀和Western blot检测Fut8基因沉默效率,以细胞黏附实验和克隆形成实验分别研究Fut8基因对VLA-4/VCAM-1之间亲和力和对B细胞分化发育的影响。结果 Fut8基因沉默使VLA-4/VCAM-1之间的亲和力以及前B细胞和基质细胞之间的黏附作用降低,并使前B细胞的克隆形成能力明显下降。流式细胞仪分析结果也表明,Fut8-/-祖B细胞向前B细胞分化过程受阻。结论本实验揭示了Fut8基因调节VLA-4/VCAM-1之间结合能力以及前B细胞克隆形成的机理,为B细胞分化发育研究提供理论依据。 展开更多

关键词 VLA-4 VCAM-1 前B细胞 fut8 相互作用

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HaCaT细胞中FUT4表达与其启动子区甲基化的相关性分析 被引量：2

3

作者 李洪艳 佟少明 燕秋 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期48-54,共7页

岩藻糖基转移酶Ⅳ(FucosyltransferaseⅣ,FUT4)在正常细胞中表达量很低,但其低表达的调控机制以及是否受其启动子甲基化调控并不十分清楚。文章采用Western blot、免疫荧光和Real-time PCR的方法检测正常人永生化表皮细胞系HaCaT细胞FUT... 岩藻糖基转移酶Ⅳ(FucosyltransferaseⅣ,FUT4)在正常细胞中表达量很低,但其低表达的调控机制以及是否受其启动子甲基化调控并不十分清楚。文章采用Western blot、免疫荧光和Real-time PCR的方法检测正常人永生化表皮细胞系HaCaT细胞FUT4的表达,观察DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-d C处理对FUT4表达的影响。应用甲基化特异性PCR方法分析HaCaT细胞中FUT4启动子甲基化状态。结果表明,HaCaT细胞中FUT4的表达水平明显低于人表皮鳞癌细胞A431和SCC12。5μmol/L的5-aza-d C处理72 h的HaCaT细胞,其FUT4m RNA水平明显升高,并且与未经5-aza-d C处理的对照组相比,U引物扩增检测到的产物量增加,M引物扩增检测到的产物量明显减少。这些结果表明,HaCaT细胞中FUT4的低表达可能与其启动子区Cp G岛甲基化有关。 展开更多

关键词 岩藻糖基转移酶Ⅳ 低表达 甲基化 HACAT细胞 fut4

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miR-105靶向调控FUT4影响骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的研究 被引量：4

4

作者 谢易 魏杰 龚泰芳 《中华骨与关节外科杂志》 2019年第6期458-463,共6页

背景:骨关节炎(OA)的发生与进展与软骨细胞增殖和凋亡密切相关,探究micro RNA-105(miR-105)对软骨细胞增殖和凋亡的影响及机制可为OA治疗提供作用靶点。目的:研究miR-105通过靶向调控岩藻糖基转移酶4(FUT4)对OA软骨细胞增殖和凋亡的影... 背景:骨关节炎(OA)的发生与进展与软骨细胞增殖和凋亡密切相关,探究micro RNA-105(miR-105)对软骨细胞增殖和凋亡的影响及机制可为OA治疗提供作用靶点。目的:研究miR-105通过靶向调控岩藻糖基转移酶4(FUT4)对OA软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过分离和培养人OA软骨细胞和人正常软骨细胞,通过Real-time PCR检测不同细胞中miR-105和FUT4 mRNA的表达水平,蛋白质免疫印迹(WB)分析FUT4的蛋白表达水平,通过细胞转染法构建上调或下调miR-105的OA软骨细胞,Real-time PCR检测miR-105的表达以验证转染效果,MTT法检测OA软骨细胞增殖情况,Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡率,通过生物信息学方法预测miR-105靶基因结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-105和FUT4的靶向关系,检测上调或下调miR-105对细胞中FUT4表达的影响。通过共转染构建上调miR-105和FUT4以及下调miR-105和FUT4的OA软骨细胞,以同样的方法检测对细胞中FUT4表达及细胞增殖和凋亡的影响。结果:人OA软骨细胞中miR-105的表达水平与人正常软骨细胞相比显著降低,FUT4 mRNA和蛋白的表达水平显著升高。miR-105模拟物转染OA软骨细胞可上调miR-105的表达,且细胞增殖能力增强,细胞凋亡率下降;下调OA软骨细胞中miR-105的表达则表现出相反的效果。靶基因预测miR-105和FUT4 3’非编码区(3’UTR)存在靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证了FUT4是miR-105的靶向基因。上调miR-105的表达可显著抑制FUT4 mRNA和蛋白的表达,下调miR-105的表达可显著促进FUT4 mRNA和蛋白的表达。共转染FUT4互补脱氧核糖核酸(cDNA)和miR-105模拟物可上调由过表达miR-105导致的OA软骨细胞中FUT4表达量下降,逆转了miR-105上调引起的细胞增殖促进、凋亡抑制的作用;共转染FUT4小干扰RNA(siRNA)和miR-105抑制剂可下调由过表达miR-105导致的OA软骨细胞中FUT4表达量升高,逆转了miR-105下调引起的细胞增殖抑制、凋亡促进的作用。结论:miR-105能够抑制OA软骨细胞增殖、促进凋亡,其作用机制与靶向调控FUT4有关。 展开更多

关键词 miR-105 fut4 骨关节炎 软骨细胞 增殖 凋亡

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FUT4过表达促进胚胎细胞与子宫内膜细胞的黏附 被引量：1

5

作者 刘帅 范立雪 +1 位作者 杨雪松 燕秋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期968-971,共4页

胚胎与子宫内膜上皮细胞之间的黏附是胚胎成功植入的关键.岩藻糖基转移酶Ⅳ(FUT4)对胚胎细胞与子宫内膜细胞黏附的影响未见报道.本研究以人子宫内膜细胞(HEC-1A)和胚胎细胞(JAR)为体外着床模型,观察上调HEC-1A细胞中FUT4表达对JAR细胞与... 胚胎与子宫内膜上皮细胞之间的黏附是胚胎成功植入的关键.岩藻糖基转移酶Ⅳ(FUT4)对胚胎细胞与子宫内膜细胞黏附的影响未见报道.本研究以人子宫内膜细胞(HEC-1A)和胚胎细胞(JAR)为体外着床模型,观察上调HEC-1A细胞中FUT4表达对JAR细胞与HEC-1A细胞黏附的影响.RT-PCR和免疫细胞化学检测结果显示,FUT4过表达增加HEC-1A细胞中FUT4基因及蛋白的表达;免疫细胞化学及Western印迹结果表明,上调HEC-1A细胞中FUT4增加细胞表面LeY的合成;细胞黏附实验结果显示,与未转染组相比较,FUT4过表达增加了JAR细胞与HEC-1A细胞的黏附率.本研究证明,FUT4过表达可以增加细胞表面LeY寡糖抗原的合成,从而促进胚胎细胞与子宫内膜细胞的黏附. 展开更多

关键词 岩藻糖基转移酶Ⅳ(fut4) 子宫内膜 胚胎 黏附

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DLL4-SiRNA对内皮细胞增殖和迁移的影响 被引量：1

6

作者 王珺 谢玉波 +1 位作者 方娟 余明华 《山西医药杂志》 CAS 2014年第23期2746-2747,共2页

血管内皮细胞是构成新生血管管腔的重要物质基础之一,其增殖是血管新生的第一步,从这一角度来说,内皮细胞增殖对缺血性心血管疾病的治疗有积极意义。DLL4（delta like ligand 4）作为一种重要的血管生长发育调节因子,其与邻近细胞相应受... 血管内皮细胞是构成新生血管管腔的重要物质基础之一,其增殖是血管新生的第一步,从这一角度来说,内皮细胞增殖对缺血性心血管疾病的治疗有积极意义。DLL4（delta like ligand 4）作为一种重要的血管生长发育调节因子,其与邻近细胞相应受体Notch（Notchl或Notch4）相互作用启动细胞内的信号传递,从而调节血管的生成和分支过程。 展开更多

关键词 内皮细胞增殖 DLL4-sirna 分支过程 NOTCH 血管内皮细胞 血管管腔 启动细胞 信号传递 调节因子 空白对照组

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子宫内膜癌中FUT1、FUT4、LeY寡糖抗原的表达及意义

7

作者 邓燕杰 霍凤霞 +2 位作者 何永娜 席勇 刘玲 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2009年第36期5206-5208,共3页

目的:研究LeY、FUT1、FUT4在正常子宫内膜、异常增生子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接(SP)法,检测子宫内膜腺癌、子宫内膜不典型增生、单纯与复杂增生及正常增值期内膜LeY... 目的:研究LeY、FUT1、FUT4在正常子宫内膜、异常增生子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接(SP)法,检测子宫内膜腺癌、子宫内膜不典型增生、单纯与复杂增生及正常增值期内膜LeY、FUT1、FUT4的表达。结果:FUT1、FUT4、LeY在正常子宫内膜不表达,在单纯与复杂增生型子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜腺癌中过表达,主要表达于子宫内膜腺上皮的细胞膜和(或)胞浆;LeY寡糖抗原在子宫内膜腺癌中过表达,并与组织学分级有关,与临床手术病理分期无关。结论:FUT1、FUT4、LeY在子宫内膜癌的发生发展中可能起重要的作用,可能参与了子宫内膜癌的早期病变。 展开更多

关键词 LeY fut1 fut4 子宫内膜腺癌

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FUT4和LeY在子宫内膜异位症中的表达及临床意义

8

作者 张莉 汪霆 +2 位作者 孙琳 王晓彬 李晓东 《中国医药导报》 CAS 2014年第29期38-42,共5页

目的 探讨FUT4和LeY在子宫内膜异位症患者中的表达情况及其临床价值。方法 选择2010年3月～2012年6月辽宁省大连市妇幼保健院（以下简称“我院”）妇产科经腹腔镜手术证实为子宫内膜异位症的70例患者,将患者分为在位内膜组和异位内膜组... 目的 探讨FUT4和LeY在子宫内膜异位症患者中的表达情况及其临床价值。方法 选择2010年3月～2012年6月辽宁省大连市妇幼保健院（以下简称“我院”）妇产科经腹腔镜手术证实为子宫内膜异位症的70例患者,将患者分为在位内膜组和异位内膜组,每组各35例。同时选择同期我院行手术治疗的单纯子宫肌瘤患者35例为对照组。采用免疫组化、RT-PCR检测三组患者子宫内膜组织中FUT4和LeY的表达情况,并对其变化的意义进行评价和分析。结果 1与对照组比较,在位内膜组和异位内膜组患者的FUT4阳性表达率均明显提高,差异有统计学意义（P〈0.05）,异位内膜组FUT4的阳性表达率高于在位内膜组（P〈0.05）;2与对照组比较,在位内膜组和异位内膜组患者的LeY的阳性表达率均明显提高,差异有统计学意义（P〈0.05）,异位内膜组LeY的阳性表达率高于在位内膜组,差异有统计学意义（P〈0.05）;3与对照组比较,FUT4在异位内膜组和在位内膜组中的阳性表达率明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,异位内膜组FUT4的阳性表达率高于在位内膜组（P〈0.05）。结论 FUT4和LeY不仅在子宫内膜异位症的形成和发展过程中发挥着重要作用,其在胚胎黏附、植入过程中也起着重要作用,而FUT4是LeY合成的关键酶,当其表达量高于某一临界值时,会诱发子宫内膜异位症,影响胚胎的正常着床,从而进一步导致不孕。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜 fut4 LeY

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不同品种猪SLA-DQA、FUT1和MUC4基因遗传变异初析 被引量：5

9

作者 李聪聪 刘思雨 +3 位作者 吴姣 牛晖 李梦云 李婉涛 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第2期55-61,共7页

为了解析地方猪种淮南猪抗逆性强的分子机制,试验采用PCR-RFLP方法对4个猪种(淮南猪、杜洛克猪、大白猪和长白猪共计395头)的猪耳组织白细胞抗原(SLA)-DQA基因、α-1岩藻糖转移酶基因1(FUT1基因)和4型黏蛋白(MUC4)基因进行多态性分析。... 为了解析地方猪种淮南猪抗逆性强的分子机制,试验采用PCR-RFLP方法对4个猪种(淮南猪、杜洛克猪、大白猪和长白猪共计395头)的猪耳组织白细胞抗原(SLA)-DQA基因、α-1岩藻糖转移酶基因1(FUT1基因)和4型黏蛋白(MUC4)基因进行多态性分析。结果表明:4个猪种在SLA-DQA基因座位存在多态性,AA型在4个猪种中基因型频率最高,淮南猪为中等多态,其他3个猪种为低度多态,淮南猪与长白猪、大白猪品种间基因型分布差异极显著(P<0.01),淮南猪与杜洛克猪品种间基因型分布差异不显著(P>0.05);FUT1基因座位也存在多态性,GG基因型在4个猪种中基因型频率最高,淮南猪、大白猪和杜洛克猪都是中等多态,长白猪是低度多态,淮南猪与长白猪品种间基因型分布差异极显著(P<0.01),淮南猪与大白猪、杜洛克猪品种间基因型分布差异不显著(P>0.05);MUC4基因座位同样也存在多态性,AA基因型在淮南猪、长白猪和大白猪中基因型频率最高,AG基因型在杜洛克猪中基因型频率最高,淮南猪和杜洛克猪都是中等多态,大白猪是低度多态,淮南猪与长白猪、杜洛克猪品种间基因型分布差异极显著(P<0.01),淮南猪与大白猪品种间基因型分布差异显著(P<0.05)。说明淮南猪在这3个基因上都有着较高的遗传多样性,更适合用于抗病育种研究的实践中。 展开更多

关键词 淮南猪 SLA-DQA基因 fut1基因 MUC4基因 多态性

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黄芩、白术通过调节岩藻糖基转移酶Ⅳ、Ⅶ的表达促进胚胎体外黏附 被引量：4

10

作者 张媛媛 张玉梅 +3 位作者 燕秋 邱士超 李晓航 张小梅 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2014年第11期875-880,886,共7页

目的:探讨黄芩、白术对胚胎体外黏附的影响及其调控的糖分子机制。方法:培养人子宫内膜细胞(RL95-2)和人绒毛膜细胞(JAR),并经米非司酮诱导后建立着床障碍模型。通过黏附实验观察不同浓度黄芩、白术水煎液对胚胎黏附率的影响,采用RT-PCR... 目的:探讨黄芩、白术对胚胎体外黏附的影响及其调控的糖分子机制。方法:培养人子宫内膜细胞(RL95-2)和人绒毛膜细胞(JAR),并经米非司酮诱导后建立着床障碍模型。通过黏附实验观察不同浓度黄芩、白术水煎液对胚胎黏附率的影响,采用RT-PCR、Western blotting检测着床相关寡糖合成关键酶的表达变化。结果:黄芩、白术50 mg/L治疗组胚胎黏附率较模型组显著升高(P<0.05),着床相关的岩藻糖基转移酶Ⅳ、Ⅶ(FUT4、FUT7)的m RNA及蛋白表达显著增加(P<0.001)。结论:中药黄芩、白术可通过上调FUT4、FUT7的表达促进胚胎体外黏附。 展开更多

关键词 黄芩 白术 着床 岩藻糖基转移酶Ⅳ(fut4) 岩藻糖基转移酶Ⅶ(fut7)

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米非司酮通过调节岩藻糖基转移酶IV的表达抑制胚胎体外黏附 被引量：2

11

作者 尉晓蔚 刘帅 +1 位作者 刘佳 燕秋 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2014年第1期1-5,26,共6页

目的:探讨米非司酮对人胚胎细胞JAR与人子宫内膜细胞RL95-2之间黏附的影响及其调控的分子机制。方法:采用黏附实验分别观察RU486以及岩藻糖基转移酶IV(FUT4)对JAR细胞与RL95-2细胞之间黏附的影响。采用RT-PCR以及Western blotting检测... 目的:探讨米非司酮对人胚胎细胞JAR与人子宫内膜细胞RL95-2之间黏附的影响及其调控的分子机制。方法:采用黏附实验分别观察RU486以及岩藻糖基转移酶IV(FUT4)对JAR细胞与RL95-2细胞之间黏附的影响。采用RT-PCR以及Western blotting检测米非司酮对RL95-2细胞以及流产妇女子宫内膜中FUT4表达的调控。结果:①米非司酮抑制JAR细胞与RL95-2单层细胞之间的黏附;②米非司酮抑制RL95-2细胞以及流产妇女子宫内膜中FUT4基因和蛋白的表达;③FUT4质粒转染RL95-2细胞后,调节JAR细胞与RL95-2单层细胞之间的黏附。结论:米非司酮通过调节FUT4的表达抑制胚胎体外黏附。 展开更多

关键词 米非司酮 岩藻糖基转移酶IV(fut4) 子宫内膜 黏附

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母猪繁殖性能相关5个候选基因的PCR-RFLP多态性研究 被引量：5

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作者 吴华莉 涂尾龙 +4 位作者 曹建国 都启晶 常华 羊兆洪 谈永松 《上海农业学报》 CSCD 2018年第1期66-73,共8页

为了比较ESR、NCOA1、ADAMTS1、FUT1和RBP4基因对猪繁殖性能的效应大小,采用PCR-RFLP技术,分别检测了杜洛克、长白和大白群体内5个基因的基因型频率和等位基因频率,并分析不同基因型与3个猪群体的总产仔数(TNB)、产活仔数(NBA)和出生窝... 为了比较ESR、NCOA1、ADAMTS1、FUT1和RBP4基因对猪繁殖性能的效应大小,采用PCR-RFLP技术,分别检测了杜洛克、长白和大白群体内5个基因的基因型频率和等位基因频率,并分析不同基因型与3个猪群体的总产仔数(TNB)、产活仔数(NBA)和出生窝重(BLW)相关性。结果表明:对猪繁殖性能影响效应最大的是NCOA1和RBP4基因,其次是FUT1和ADAMTS1基因,最小的是ESR基因。NCOA1基因在杜洛克和大白群体内AA型的NBA比BB型的分别高1.11和1.92头,AA型的TNB比BB型的分别高1.18头和0.53头。RBP4基因在3个猪群体内AA型的TNB比BB型的高0.53—0.86,在杜洛克和大白群体内AA型的NBA比BB型的分别高1.1头和1.29头。FUT1在杜洛克和大白群体内AA型的TNB比CBB型的分别高0.47和0.56),AA型的NBA比BB型的分别高0.76头和1.06头。ADAMTS1基因在3个猪群体内AB型的TNB比AA型的高0.67—0.88,AB型的NBA比AA型的高0.54—0.86。在大白群体内ESR基因的BB型的TNB、NBA比AA型的分别高0.36头和0.41头。5个基因的不同基因型对3个猪群体BLW影响不显著。 展开更多

关键词 繁殖性状 雌激素受体(ESR) 核受体辅激活蛋白1(NCOA1) 含凝血酶敏感蛋白模体的去解联金属蛋白酶1基因(ADAMTS1) 岩藻糖转移酶1基因(fut1) 视黄醇结合蛋白4基因(RBP4)

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TLR4基因的沉默下调了NOD1信号通路在RAW264．7细胞中抗烟曲霉孢子刺激作用 被引量：3

13

作者 饶振华 谢卫华 +3 位作者 苏明声 龙凯 罗闳丹 谢小梅 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2012年第6期503-512,共10页

为研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时NOD1和TLR4信号通路在细胞处于正常状态和免疫抑制状态时发挥的作用,以及沉默TLR4基因后对NOD1信号通路的影响,通过建立细胞免疫抑制模型,利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染细胞24h后给予烟曲... 为研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时NOD1和TLR4信号通路在细胞处于正常状态和免疫抑制状态时发挥的作用,以及沉默TLR4基因后对NOD1信号通路的影响,通过建立细胞免疫抑制模型,利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,运用RT-PCR和Western blot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后NOD1,TLR4,RIP2,MyD88 mRNA及TNF-α蛋白表达变化.研究发现:(1)给予RAW264.7细胞含免疫抑制剂甲泼尼龙琥珀酸钠浓度为0.04mg/mL的RPMI1640培养液培养12h后,细胞抑制效果最佳,存活率约为90%.(2)正常RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,NOD1和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用,当细胞处于免疫抑制状态时,NOD1和TLR4信号通路不能激发其有效的免疫应答.(3)TLR4-siRNA转染RAW264.7细胞,沉默效率达83%.(4)TLR4基因的沉默,使NOD1信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,表明沉默TLR4基因下调了NOD1信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用. 展开更多

关键词 NOD1 TLR4 TLR4-sirna 烟曲霉孢子 调控关系

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TLR4基因沉默下调TLR2信号通路在RAW264．7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用 被引量：2

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作者 饶振华 朱根华 +4 位作者 谢卫华 苏明声 龙凯 罗闳丹 谢小梅 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期108-113,共6页

目的研究单核巨噬细胞RAW264．7受烟曲霉孢子刺激时，TLR2和TLR4信号通路发挥的作用，以及沉默TLR4基因后，对TLR2信号通路的影响。方法利用RNAi技术将11LR4-siRNA转染RAW264．7细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h，将细胞随机分为正常组（... 目的研究单核巨噬细胞RAW264．7受烟曲霉孢子刺激时，TLR2和TLR4信号通路发挥的作用，以及沉默TLR4基因后，对TLR2信号通路的影响。方法利用RNAi技术将11LR4-siRNA转染RAW264．7细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h，将细胞随机分为正常组（N组）、正常＋烟曲霉孢子刺激组（N＋Af组）、正常＋TLR4-siRNA组[TLR4（RNAi）组]、正常＋TLR4-siRNA＋烟曲霉孢子刺激组[TLR4（RNAi）＋Af组]，RT-PCR和Westernblot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF-α蛋白的表达变化。结果（1）TLR4基因沉默前：与N组比较，N＋Af组TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF．Ot蛋白表达量均显著升高（P〈0．05）。（2）TLR4-siRNA（100nmol／L）转染RAW264．7细胞，沉默效率达83％。（3）TLR4基因沉默后：与N组比较，TLR4（RNAi）组TLR2、MyD88mRNA的表达量均显著降低（P〈0．05）；与N＋缈组比较，rrLR4（RNAi）＋4厂组的TLR2、MyD88mRNA和TNF-α蛋白的表达量均显著降低（P〈0．05）；与TLR4（RNAi）组比较，TLR4（RNAi）＋A厂组MyD88mRNA表达量显著升高（P〈0．05），而TLR2mRNA及TNF．仪蛋白表达量却无显著变化（P〉0．05）。结论RAW264．7细胞受烟曲霉孢子刺激时，TLR2和TLR4信号通路被激活，通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用；当沉默TLR4基因后，TLR2信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用，沉默TLR4基因下调了TLR2信号通路在RAW264．7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用，可能TLR4较TLR2在抵抗烟曲霉孢子刺激时发挥更重要的作用。 展开更多

关键词 TLR2 TLR4 TLR4-sirna 烟曲霉孢子 调控机制

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东北民猪荷包猪抗性基因多态性及其与免疫指标的相关性研究

15

作者 朱弘焱 赵颂 +1 位作者 巴彩凤 苏玉虹 《畜牧与兽医》 北大核心 2011年第8期11-16,共6页

研究目的是检测荷包猪FUT 1和Mx1基因位点多态性及其与免疫指标的相关关系。采用PCR-RFLP技术分析基因多态性,采用ELISA方法检测免疫指标白介素-4(IL-4)、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、α-干扰素(IFN-α)的表达量。结果表明,荷包猪FUT 1基... 研究目的是检测荷包猪FUT 1和Mx1基因位点多态性及其与免疫指标的相关关系。采用PCR-RFLP技术分析基因多态性,采用ELISA方法检测免疫指标白介素-4(IL-4)、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、α-干扰素(IFN-α)的表达量。结果表明,荷包猪FUT 1基因和Mx1基因Hin6I点酶切位点上显示多态性,优势基因型分别为GG和AA型,在Mx1基因其他两位点处未发现多态性;荷包猪免疫指标IL-4、sIgA、IFN-α的表达量明显高于大白猪(P<0.05),但抗性基因型与免疫指标间的相关性表现不明显。 展开更多

关键词 荷包猪 fut1 Mx1 PCR-RFLP 白介素-4 分泌型免疫球蛋白A Α-干扰素

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