6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物中最常见的mRNA甲基化修饰之一,影响mRNA的剪接、翻译、稳定、降解等过程。肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)作为第一个被发现的m6A去甲基化酶,在...6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物中最常见的mRNA甲基化修饰之一,影响mRNA的剪接、翻译、稳定、降解等过程。肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)作为第一个被发现的m6A去甲基化酶,在肿瘤增殖、迁移、侵袭、耐药、肿瘤微环境及代谢重编程方面发挥重要作用。本文就m6A去甲基化酶FTO在恶性肿瘤中的调控作用及作用机制的研究进展进行综述。展开更多
目的:探究m6A去甲基化酶FTO及其下游基因CLK2对3T3-L1细胞成脂分化的影响,以及FTO影响CLK2表达水平的分子机制。方法:(1)通过成脂分化诱导和后续的油红染色以及油红定量探究FTO和CLK2对3T3-L1细胞成脂分化的影响;(2)通过蛋白免疫印迹和...目的:探究m6A去甲基化酶FTO及其下游基因CLK2对3T3-L1细胞成脂分化的影响,以及FTO影响CLK2表达水平的分子机制。方法:(1)通过成脂分化诱导和后续的油红染色以及油红定量探究FTO和CLK2对3T3-L1细胞成脂分化的影响;(2)通过蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR测定FTO和CLK2蛋白水平和m RNA水平的改变;(3)通过生物信息学分析筛选不同分化时期的3T3-L1细胞差异化m6A修饰位点;(4)通过MeRIP-qPCR测定CLK2 m RNA上的m6A修饰水平;(5)通过放线菌素D抑制新生转录本合成探究CLK2 m RNA的降解速率;(6)通过胰岛素刺激探究3T3-L1细胞Insulin-AKT通路激活情况。结果:(1)3T3-L1细胞的成脂分化依赖FTO的去甲基化酶活性和CLK2的激酶活性;(2)CLK25'UTR区域存在可被FTO去甲基化的m6A修饰,且该位点m6A修饰提高CLK2 m RNA的降解速率;(3)CLK2表达水平与FTO表达水平存在正相关,且CLK2和FTO抑制剂均抑制3T3-L1细胞Insulin-AKT通路的激活。结论:FTO通过降低CLK25'UTR区域的m6A修饰水平从而抑制CLK2 m RNA的降解,促进CLK2的蛋白表达,CLK2进而通过维持Insulin-AKT通路活性促进3T3-L1细胞成脂分化。展开更多
目的探讨去甲基化酶脂肪质量和肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)在糖尿病冠脉平滑肌收缩功能异常中的影响。方法Cre-loxP重组技术制备平滑肌特异性FTO敲除小鼠(FTO^(SMKO))。分为4组:对照组(WT)、糖尿病组(DM)、...目的探讨去甲基化酶脂肪质量和肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)在糖尿病冠脉平滑肌收缩功能异常中的影响。方法Cre-loxP重组技术制备平滑肌特异性FTO敲除小鼠(FTO^(SMKO))。分为4组:对照组(WT)、糖尿病组(DM)、FTO敲除组(FTO^(SMKO))和FTOSMKO糖尿病组(FTO^(SMKO)-DM),每组各15只。糖尿病小鼠由腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备;其余小鼠注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。通过小血管环张力测定技术,观察5-HT对4组小鼠冠脉平滑肌收缩反应的影响;采用Western blot与Dot blot技术检测小鼠血管组织FTO蛋白及n6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化修饰水平的变化。结果与WT组相比,DM组血糖明显升高(P<0.01),体质量明显下降(P<0.05);DM组小鼠主动脉FTO蛋白水平升高( P <0.01),m6A甲基化修饰水平降低( P <0.01)。DM组5-HT诱导收缩反应与WT组相比明显下降( P <0.01),而FTOSMKO-DM组收缩反应比DM组明显增加( P <0.01);FTO^(SMKO) -DM组非L型钙通道介导的血管平滑肌收缩反应增强,其中,1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R)和咖啡因激活兰尼碱受体(RyR)介导的肌浆网钙释放诱导收缩反应均明显增加( P <0.05)。 结论 特异性敲除平滑肌 FTO 可改善糖尿病小鼠冠脉对血管收缩剂5-HT的反应性,可能与FTO介导5-HT受体信号通路异常有关。展开更多
脂肪和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)是N6-甲基腺苷(m6A)调控系统中关键的去甲基化酶。既往研究发现,FTO可参与肥胖、糖尿病以及昼夜节律等增加心血管疾病的患病和发病风险。FTO在心肌梗死、心肌肥厚以及...脂肪和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)是N6-甲基腺苷(m6A)调控系统中关键的去甲基化酶。既往研究发现,FTO可参与肥胖、糖尿病以及昼夜节律等增加心血管疾病的患病和发病风险。FTO在心肌梗死、心肌肥厚以及心力衰竭的发生发展中均具有重要调控作用,可能是治疗多种心血管疾病的潜在靶点。本文主要对FTO调控机制及其在多种心血管疾病中的研究进展进行综述。展开更多
An effect of inhibition of tumor necrosis factor-α(TNF-α)on differentiation of mesenchymal stromal cells(MSCs)has been demonstrated,but the exact mechanisms that govern MSCs differentiation remain to be further eluc...An effect of inhibition of tumor necrosis factor-α(TNF-α)on differentiation of mesenchymal stromal cells(MSCs)has been demonstrated,but the exact mechanisms that govern MSCs differentiation remain to be further elucidated.Here,we show that TNF-αinhibits the differentiation of MSCs to sweat glands in a specific sweat gland-inducing environment,accompanied with reduced expression of Nanog,a core pluripotency factor.We elucidated that fat mass and obesity-associated protein(FTO)-mediated m^6 A demethylation is involved in the regulation of MSCs differentiation potential.Exposure of MSCs to TNF-αreduced expression of FTO,which demethylated Nanog m RNA.Reduced expression of FTO increased Nanog m RNA methylation,decreased Nanog m RNA and protein expression,and significantly inhibited MSCs capacity for differentiation to sweat gland cells.Our finding is the first to elucidate the functional importance of m^6 A modification in MSCs,providing new insights that the microenvironment can regulate the multipotency of MSCs at the post-transcriptional level.Moreover,to maintain differentiation capacity of MSCs by regulating m^6 A modification suggested a novel potential therapeutic target for stem cellmediated regenerative medicine.展开更多
文摘6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物中最常见的mRNA甲基化修饰之一,影响mRNA的剪接、翻译、稳定、降解等过程。肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)作为第一个被发现的m6A去甲基化酶,在肿瘤增殖、迁移、侵袭、耐药、肿瘤微环境及代谢重编程方面发挥重要作用。本文就m6A去甲基化酶FTO在恶性肿瘤中的调控作用及作用机制的研究进展进行综述。
文摘目的:探究m6A去甲基化酶FTO及其下游基因CLK2对3T3-L1细胞成脂分化的影响,以及FTO影响CLK2表达水平的分子机制。方法:(1)通过成脂分化诱导和后续的油红染色以及油红定量探究FTO和CLK2对3T3-L1细胞成脂分化的影响;(2)通过蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR测定FTO和CLK2蛋白水平和m RNA水平的改变;(3)通过生物信息学分析筛选不同分化时期的3T3-L1细胞差异化m6A修饰位点;(4)通过MeRIP-qPCR测定CLK2 m RNA上的m6A修饰水平;(5)通过放线菌素D抑制新生转录本合成探究CLK2 m RNA的降解速率;(6)通过胰岛素刺激探究3T3-L1细胞Insulin-AKT通路激活情况。结果:(1)3T3-L1细胞的成脂分化依赖FTO的去甲基化酶活性和CLK2的激酶活性;(2)CLK25'UTR区域存在可被FTO去甲基化的m6A修饰,且该位点m6A修饰提高CLK2 m RNA的降解速率;(3)CLK2表达水平与FTO表达水平存在正相关,且CLK2和FTO抑制剂均抑制3T3-L1细胞Insulin-AKT通路的激活。结论:FTO通过降低CLK25'UTR区域的m6A修饰水平从而抑制CLK2 m RNA的降解,促进CLK2的蛋白表达,CLK2进而通过维持Insulin-AKT通路活性促进3T3-L1细胞成脂分化。
文摘目的探讨去甲基化酶脂肪质量和肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)在糖尿病冠脉平滑肌收缩功能异常中的影响。方法Cre-loxP重组技术制备平滑肌特异性FTO敲除小鼠(FTO^(SMKO))。分为4组:对照组(WT)、糖尿病组(DM)、FTO敲除组(FTO^(SMKO))和FTOSMKO糖尿病组(FTO^(SMKO)-DM),每组各15只。糖尿病小鼠由腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备;其余小鼠注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。通过小血管环张力测定技术,观察5-HT对4组小鼠冠脉平滑肌收缩反应的影响;采用Western blot与Dot blot技术检测小鼠血管组织FTO蛋白及n6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化修饰水平的变化。结果与WT组相比,DM组血糖明显升高(P<0.01),体质量明显下降(P<0.05);DM组小鼠主动脉FTO蛋白水平升高( P <0.01),m6A甲基化修饰水平降低( P <0.01)。DM组5-HT诱导收缩反应与WT组相比明显下降( P <0.01),而FTOSMKO-DM组收缩反应比DM组明显增加( P <0.01);FTO^(SMKO) -DM组非L型钙通道介导的血管平滑肌收缩反应增强,其中,1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R)和咖啡因激活兰尼碱受体(RyR)介导的肌浆网钙释放诱导收缩反应均明显增加( P <0.05)。 结论 特异性敲除平滑肌 FTO 可改善糖尿病小鼠冠脉对血管收缩剂5-HT的反应性,可能与FTO介导5-HT受体信号通路异常有关。
文摘脂肪和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)是N6-甲基腺苷(m6A)调控系统中关键的去甲基化酶。既往研究发现,FTO可参与肥胖、糖尿病以及昼夜节律等增加心血管疾病的患病和发病风险。FTO在心肌梗死、心肌肥厚以及心力衰竭的发生发展中均具有重要调控作用,可能是治疗多种心血管疾病的潜在靶点。本文主要对FTO调控机制及其在多种心血管疾病中的研究进展进行综述。
基金funded in part by the National Natural Science Foundation of China(81571909,81721092,81701906)the National Key R&D Program of China(2017YFC1103300)+1 种基金the Beijing Natural Science Foundation(7174352)Fostering Funds of Chinese PLA General Hospital for National Distinguished Young Scholar Science Fund(2017-JQPY-002)
文摘An effect of inhibition of tumor necrosis factor-α(TNF-α)on differentiation of mesenchymal stromal cells(MSCs)has been demonstrated,but the exact mechanisms that govern MSCs differentiation remain to be further elucidated.Here,we show that TNF-αinhibits the differentiation of MSCs to sweat glands in a specific sweat gland-inducing environment,accompanied with reduced expression of Nanog,a core pluripotency factor.We elucidated that fat mass and obesity-associated protein(FTO)-mediated m^6 A demethylation is involved in the regulation of MSCs differentiation potential.Exposure of MSCs to TNF-αreduced expression of FTO,which demethylated Nanog m RNA.Reduced expression of FTO increased Nanog m RNA methylation,decreased Nanog m RNA and protein expression,and significantly inhibited MSCs capacity for differentiation to sweat gland cells.Our finding is the first to elucidate the functional importance of m^6 A modification in MSCs,providing new insights that the microenvironment can regulate the multipotency of MSCs at the post-transcriptional level.Moreover,to maintain differentiation capacity of MSCs by regulating m^6 A modification suggested a novel potential therapeutic target for stem cellmediated regenerative medicine.
