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粘细菌转录因子FruA结合蛋白敲除分析 被引量:2
1
作者 毛晓华 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2002年第1期20-23,共4页
目的 :构建粘细菌发育特异性转录因子FruA相关蛋白FruB的敲除菌株 ,初步阐明FruB在粘细菌发育周期中的作用。方法 :在fruB基因中央编码区插入四环素抗性基因 ,导入野生型粘细菌DZF1后通过双交叉同源重组途径阻断基因组内fruB的功能。结... 目的 :构建粘细菌发育特异性转录因子FruA相关蛋白FruB的敲除菌株 ,初步阐明FruB在粘细菌发育周期中的作用。方法 :在fruB基因中央编码区插入四环素抗性基因 ,导入野生型粘细菌DZF1后通过双交叉同源重组途径阻断基因组内fruB的功能。结果 :抗性筛选和PCR检测显示分离出了fruB基因阻断菌株fruB ::TcΩ2。fruB功能缺失延缓子实体的发育及营养细胞向粘孢子分化。结论 :fruB与粘细菌发育分化存在相关性。 展开更多
关键词 粘细菌 转录因子 发育 基因 敲除 frua结合蛋白
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粘细菌转录因子FruA与结合蛋白FruB协同参与发育基因的调控 被引量:3
2
作者 毛晓华 丁蕾 汪道涌 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第6期556-562,共7页
粘细菌中一系列发育相关基因受到转录因子FruA的调节。用亲和层析法从粘细菌分离出另一种与FruA结合的蛋白因子FruB。实验表明,FruB可以被粘细菌细胞膜上的蛋白激酶磷酸化,磷酸化后的FruB与FruA形成复合物,此复合物通过与靶基因顺式... 粘细菌中一系列发育相关基因受到转录因子FruA的调节。用亲和层析法从粘细菌分离出另一种与FruA结合的蛋白因子FruB。实验表明,FruB可以被粘细菌细胞膜上的蛋白激酶磷酸化,磷酸化后的FruB与FruA形成复合物,此复合物通过与靶基因顺式元件的结合来调节基因的表达。有助于深入理解FruA对发育相关基因的调节作用机制。 展开更多
关键词 frua FruB 发育 基因调控 粘细菌
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粘细菌转录因子FruA的表达、纯化及调控作用
3
作者 毛晓华 丁蕾 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期121-125,共5页
FruA是粘细菌(Myxocoxccusxanthus)发育所必需的转录因子,影响着一系列发育特异性基因的表达。在大肠杆菌中表达了带组氨酸标记的FruA,并用镍离子层析进行快速分离纯化。凝胶阻滞试验提示FruA对靶基因的调控可能需要其它因子的参与。
关键词 frua 粘细菌 基因表达 基因调控 发育
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黄色黏细菌转录因子FruA对自身基因的表达不具自调节作用
4
作者 郑颖 毛晓华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期205-211,共7页
粘细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是粘细菌发育所必需的一种关键性转录因子,调节一系列发育相关基因的表达,本文研究FruA对自身基因是否存在反馈调节从而导致发育后期fruA表达水平的下调.以野生型粘细菌模式菌株DK162... 粘细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是粘细菌发育所必需的一种关键性转录因子,调节一系列发育相关基因的表达,本文研究FruA对自身基因是否存在反馈调节从而导致发育后期fruA表达水平的下调.以野生型粘细菌模式菌株DK1622为基础构建fruA基因敲除突变株DK1622ΔfruA,再将fruA-lacZ转录融合载体pMF1A整合入fruA突变株染色体attB,获得重组菌株DK1622ΔfruA/pMF1A,通过检测β-半乳糖苷酶活性来确认FruA对自身基因的表达水平是否有影响.结果表明fruA调控序列完整的fruA-lacZ转录融合体β-半乳糖苷酶活性在DK1622/pMF1A和DK1622ΔfruA/pMF1A之间无明显差异,即fruA表达产物作为一种转录因子对自身基因的转录没有调节作用,黏细菌发育后期fruA表达水平的下降存在其它调节机制. 展开更多
关键词 黏细菌 发育 frua 调节
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fruA基因对伤寒沙门菌侵袭力和生物膜形成的影响
5
作者 党娟娟 唐浩 +4 位作者 靳梦彤 占子阳 汤新逸 张盈 黄新祥 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期255-261,共7页
为探究fruA对伤寒沙门菌生长、毒力及生物膜形成的影响,利用pBAD33制备fruA的高表达菌株(WT-pfruA)及其空载体对照菌株(WT-pBAD33).通过细菌的生长曲线测定、泳动试验、T84细胞侵袭实验以及96孔微量板结晶紫染色法分别检测fruA对伤寒沙... 为探究fruA对伤寒沙门菌生长、毒力及生物膜形成的影响,利用pBAD33制备fruA的高表达菌株(WT-pfruA)及其空载体对照菌株(WT-pBAD33).通过细菌的生长曲线测定、泳动试验、T84细胞侵袭实验以及96孔微量板结晶紫染色法分别检测fruA对伤寒沙门菌生长、毒力及生物膜形成的影响;同时应用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析fruA对伤寒沙门菌毒力及生物膜相关基因的调控作用.结果显示,成功制备了伤寒沙门菌的WT-pfruA及其WT-pBAD33,发现高表达fruA后,伤寒沙门菌的生长无明显变化、运动能力增强、侵袭力上升、生物膜形成能力增加;同样地,与WT-pBAD33相比,WT-pfruA中动力、侵袭及生物膜相关基因的转录水平明显上调.综上,fruA基因可增强伤寒沙门菌的毒力及生物膜形成,并对其相关表型基因起正调控作用. 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 frua 毒力 生物膜
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应用Frua-2测定人腹腔巨噬细胞胞浆游离钙浓度 被引量:2
6
作者 刘义 罗丽兰 +2 位作者 赵海波 胡清华 刘晨红 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第2期133-134,137,共3页
为了解子宫内膜异位症患者腹腔巨噬细胞活性变化,建立了应用Frua-2测定人腹腔巨噬细胞胞浆游离钙浓度([Ca2+]i)的方法。结果显示,正常盆腔患者腹腔巨噬细胞[Ca2+]i为(100.32±5.69)nmol/... 为了解子宫内膜异位症患者腹腔巨噬细胞活性变化,建立了应用Frua-2测定人腹腔巨噬细胞胞浆游离钙浓度([Ca2+]i)的方法。结果显示,正常盆腔患者腹腔巨噬细胞[Ca2+]i为(100.32±5.69)nmol/L,而子宫内膜异位症患者腹腔巨噬细胞较正常盆腔者显著升高。 展开更多
关键词 巨噬细胞 胞浆游离钙 子宫内膜异位 腹腔
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黄色黏细菌fruA mRNA 5′非翻译区正性调节其自身基因的表达
7
作者 吴倩 毛晓华 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第20期2066-2071,共6页
黏细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是黏细菌发育所必需的一种转录因子,其mRNA5′端存在相当长的由235个核苷酸组成的非翻译区(5′-UTR).以lacZ为报告基因,构建保留或缺失5′-UTR的fruA-lacZ翻译融合载体并在染色体att... 黏细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是黏细菌发育所必需的一种转录因子,其mRNA5′端存在相当长的由235个核苷酸组成的非翻译区(5′-UTR).以lacZ为报告基因,构建保留或缺失5′-UTR的fruA-lacZ翻译融合载体并在染色体attB位点定点整合.5′-UTR自+4~+220缺失后fruA-lacZ在发育阶段几乎不表达,说明完整的5-′UTR为fruA表达所必需.二级结构预测显示,该区域可形成高度稳定的3螺旋接合结构,可能是蛋白因子的结合位点或存在调节fruA表达的顺式元件.因此,fruA发育特异性表达受其5′-UTR的正性调控. 展开更多
关键词 黏细菌 5′-UTR frua 土壤菌 模式生物
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粗细菌转录因子FruA及其结合蛋白FruB协同参与发育相关基因的调控
8
作者 毛晓华 丁蕾 汪道涌 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期372-373,共2页
关键词 发育相关基因 转录因子 结合蛋白 粘细菌 蛋白激酶 磷酸化 frua FruB 子实体 细胞膜
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The 5′ untranslated region of fruA mRNA in Myxococcus xanthus positively regulates the expression of its own gene 被引量:1
9
作者 WUQian MAOXiaohua 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第21期2266-2271,共6页
Myxococcus xanthus provides an excellent model organism for studying the mechanism of multicellular morphogenesis. The mRNA for FruA, a transcription factor essential for the development of M. xanthus, contains a very... Myxococcus xanthus provides an excellent model organism for studying the mechanism of multicellular morphogenesis. The mRNA for FruA, a transcription factor essential for the development of M. xanthus, contains a very long 5′-UTR consisting of 235 nucleotides. Using lacZ as a reporter gene, two fruA-lacZ translational fusions retaining or lacking the fruA 5′-UTR were constructed and separately integrated at phage Mx8 attachment site (attB) in M. xanthus chromosome. Deletion in 5′-UTR between nucleotides from +4 to +220 abolished fruA-lacZ expression during develop- ment, indicating that the 5′-UTR is essential for the induction of fruA. Prediction of the RNA secondary structure of 5′-UTR shows that this region could form an extremely sta- ble three-helix junction structure, which might be a binding site for a regulatory protein or contain a cis-acting element(s) to control fruA expression. Thus, the 5′-UTR of fruA mRNA positively regulates the expression of its own gene. 展开更多
关键词 5'-UTR MRNA 粘球菌属鸡血石 基因表达 frua 生物模型 多细胞形态 核苷
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