一组降解纤维素细菌的分离筛选及产酶特性研究 被引量：7

1

作者 黄宁珍 赵志国 +4 位作者 何成新 付传明 郭伦发 王新桂 唐凤鸾 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期683-688,共6页

用稀释法从腐殖泥中分离菌株,根据它们在羧甲基纤维素钠(CMC-Na)-刚果红培养基上的透明圈直径及对滤纸的崩解能力,获得7株纤维素分解细菌(编号:B-37、B-35、B-31、B-25、B-17、Z-a和Z-b),其中菌株Z-b的纤维素崩解能力最强,分子鉴定结果... 用稀释法从腐殖泥中分离菌株,根据它们在羧甲基纤维素钠(CMC-Na)-刚果红培养基上的透明圈直径及对滤纸的崩解能力,获得7株纤维素分解细菌(编号:B-37、B-35、B-31、B-25、B-17、Z-a和Z-b),其中菌株Z-b的纤维素崩解能力最强,分子鉴定结果表明它与Stenotrophomonas maltophilia的16S rDNA序列有99.8%的同源性,初步确定为嗜麦芽窄食单胞菌。适合7个菌株生长的C源为马铃薯浸出液,无机盐组分为:CaCl_2 0.20、MgSO_4 1.25、NaCl 5.00、(NH_4)_2SO_4 1.30、KH_2PO_4 1.35、FeSO_4·7H_2O 0.015、Na-EDTA 0.02g/L。在滤纸为唯一碳源的培养基中,菌株Z-b的滤纸酶(FPase)和CMC酶(CMCase)活性最大,为0.099 U/mL和0.075 U/mL,而在固体PSA上,菌株B-31和B-37的FPase和CMCase活性最高,为0.131 U/mL和0.175 U/mL。7个细菌单独发酵,Z-b对滤纸的崩解能力最强,滤纸块完全崩解成粉未状;与真菌34混合发酵,菌株组合Z-a+34、Z-b+34、B-31+34、B-25+34将滤纸完全水解为水溶性物质。可见,各菌株的纤维素酶活与培养条件密切相关,某些真菌、细菌间存在协同作用,它们混合发酵可大大提高纤维素的水解效率。 展开更多

关键词 纤维素降解 细菌 分离筛选 产酶特性 fpase CMCASE 混合发酵

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不同纤维素酶的酶学性质比较研究 被引量：4

2

作者 黄燕华 王国霞 周晔 《饲料研究》 CAS 2006年第11期47-49,共3页

在pH4.8,温度40℃的条件下,测定不同纤维素酶A、B和C的CMCase活力和FPase活力,其中A、B和C的CMCase活力分别为30.088、25.541和3.542u/g,FPase活力分别为6.558、6.703和1.513u/g。同时比较了3种纤维素酶的最适pH、温度及热稳定性,结果表... 在pH4.8,温度40℃的条件下,测定不同纤维素酶A、B和C的CMCase活力和FPase活力,其中A、B和C的CMCase活力分别为30.088、25.541和3.542u/g,FPase活力分别为6.558、6.703和1.513u/g。同时比较了3种纤维素酶的最适pH、温度及热稳定性,结果表明,酶A、B和C的CMCase最适pH相同,均为4.8;酶A和B的FPase最适pH也相同,为4.8;而酶C为5.4。酶A、B和C的CMCase最适温度均为50℃;酶A和B的FPase最适温度为50℃,而酶C为60℃。热稳定性酶C最好。 展开更多

关键词 纤维素酶 CMCase酶活 fpase酶活

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香菇、杏鲍菇与平菇部分胞外酶种类及活性变化规律的对比分析 被引量：17

3

作者 高锋 曹旸 +3 位作者 何明霞 刘静 方艺伟 张春霞 《北方园艺》 CAS 北大核心 2017年第23期199-206,共8页

为了比较不同腐生食用菌降解纤维素、木质素以及淀粉的能力,以平菇(Pleurotus ostreatus)、香菇(Lentinus edodes)和杏鲍菇(Pleurotus eryngii)为研究对象,采用平板变色圈法对胞外酶种类进行定性检测,选用36%木屑、43%锯末、20%麸皮、1... 为了比较不同腐生食用菌降解纤维素、木质素以及淀粉的能力,以平菇(Pleurotus ostreatus)、香菇(Lentinus edodes)和杏鲍菇(Pleurotus eryngii)为研究对象,采用平板变色圈法对胞外酶种类进行定性检测,选用36%木屑、43%锯末、20%麸皮、1%蔗糖,58%~60%水分,pH 6.6为栽培基质进行栽培出菇,再利用分光光度计法检测其中4种代表性胞外酶在生长发育各阶段的酶活性变化。结果表明:利用变色圈法在平菇、香菇和杏鲍菇中均检测到羧甲基纤维素钠酶(CMCase)、木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,LiP)、漆酶(Laccase)和锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,MnP);在平菇及香菇中检测到淀粉酶(Amylase),在香菇中未检测到淀粉酶。杏鲍菇羧甲基纤维素钠酶、滤纸酶、淀粉酶活性与子实体形成正相关,子实体快速生长或者子实体成熟时活性峰值,在发菌及潮菇间期酶活性低;漆酶活性在发菌期有较高的水平,在菇蕾形成达到第一个活性高峰,随后逐渐下降直到子实体老化阶段酶活性升高到第二个高峰;表明杏鲍菇利用木质素先于纤维素和淀粉。平菇羧甲基纤维素钠酶、漆酶活性与子实体形成正相关,其活性峰分别出现在子实体快速生长及成熟阶段;滤纸酶及淀粉酶在整个生长发育阶段均维持价低水平,子实体形成过程无严格相关性。香菇羧甲基纤维素钠酶、滤纸酶在发菌阶段酶活性较高,在幼菇阶段达到峰值,之后逐渐下降;淀粉酶活性与子实体形成过程无严格相关性,始终维持在较低水平;在生长发育过程中几乎检测不到漆酶活性。在生长发育过程中,同种菌不同胞外酶之间、相同胞外酶在不同菌之间酶活性大小及变化规律存在一定的差异。 展开更多

关键词 香菇 杏鲍菇 平菇 纤维素酶 滤纸酶 淀粉酶 漆酶

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不同培养料对元蘑胞外酶活性的影响 被引量：17

4

作者 叶云霞 金宁 +2 位作者 杨杰 孟俊龙 常明昌 《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第2期172-175,共4页

为了探明不同培养料对胞外酶活性的影响,设计了3种培养料配方,分别取其在菌丝覆面、菌丝半瓶、菌丝满瓶、原基出现、开伞期、子实体成熟6个生长期的粗酶夜,测定其分泌的纤维素酶、半纤维素酶、漆酶、淀粉酶等胞外酶的活性。结果表明,在... 为了探明不同培养料对胞外酶活性的影响,设计了3种培养料配方,分别取其在菌丝覆面、菌丝半瓶、菌丝满瓶、原基出现、开伞期、子实体成熟6个生长期的粗酶夜,测定其分泌的纤维素酶、半纤维素酶、漆酶、淀粉酶等胞外酶的活性。结果表明,在不同培养料和不同生长发育阶段,元蘑菌丝所分泌的胞外酶活性具有明显的差异性,但同种酶在不同培养料中酶活性的变化趋势是一致的。这说明,培养料的不同对胞外酶活性的变化趋势影响小,但是对其活性影响较大。 展开更多

关键词 元蘑 培养料 胞外酶活性 羧甲基纤维素酶 滤纸纤维素酶 半纤维素酶 淀粉酶 漆酶

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纤维素酶高产细菌的筛选、鉴定及酶学特性分析 被引量：10

5

作者 李碧婵 陈金燕 +1 位作者 苏雅娜 张敏 《湖北农业科学》 2016年第17期4572-4576,共5页

从武夷山森林腐烂枯叶及附近土壤中筛选分离得到1株产纤维素酶活力较高的菌株CS-7。通过形态特征观察和16S rDNA序列分析,将其鉴定为蜡状芽胞杆菌（Bacillus cereus）。对菌株CS-7所产纤维素酶的相关酶学特性进行研究,结果表明,该菌株... 从武夷山森林腐烂枯叶及附近土壤中筛选分离得到1株产纤维素酶活力较高的菌株CS-7。通过形态特征观察和16S rDNA序列分析,将其鉴定为蜡状芽胞杆菌（Bacillus cereus）。对菌株CS-7所产纤维素酶的相关酶学特性进行研究,结果表明,该菌株所产纤维素酶CMC酶活为7.91 U/mL,FPA酶活为2.40 U/mL;酶的最适反应温度和最适反应pH分别为60℃和6;在40-50℃温度范围内热稳定性较好;在pH 5.0-7.0范围内pH稳定性较好。研究结果表明,CS-7菌株是能产生耐高温中性纤维素酶的菌株,具有进一步研究开发利用的潜力。 展开更多

关键词 纤维素酶 筛选 CMC酶活 滤纸酶活 酶学特性

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里氏木霉高产纤维素酶菌株的选育及产酶培养基的优化 被引量：7

6

作者 傅力 涂正东 +1 位作者 叶凯 丁友昉 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2009年第3期10-13,共4页

通过对里氏木霉DWC原生质体紫外线诱变，筛选产纤维素酶活力高的突变株并对该菌株的产酶培养基进行优化。研究原生质体最佳诱变时间以筛选高产纤维素酶的突变株，同时分别对产酶培养基中不同种类碳源和氮源、Vogel’s母液、表面活性剂对... 通过对里氏木霉DWC原生质体紫外线诱变，筛选产纤维素酶活力高的突变株并对该菌株的产酶培养基进行优化。研究原生质体最佳诱变时间以筛选高产纤维素酶的突变株，同时分别对产酶培养基中不同种类碳源和氮源、Vogel’s母液、表面活性剂对CMC酶活（CMCA）、FP酶活（FPA）的影响进行了研究。结果表明：原生质体经过90s诱变，得到产纤维素酶活力高的突变株DWC5，其CMCA、FPA分别达到410．2ms／mL·0．5h和23．2ms／mL·h分别为原菌株的1．5倍和1．2倍。DWC5突变株的CMCA、FPA达到最高水平的培养基条件是：氮源NH4 Cl0．2％、碳源微晶纤维素1％、Vogel’s母液4．0％、吐温800．1％～0．15％、微量元素母液0．01％。 展开更多

关键词 里氏木霉 纤维素酶 培养基 FP酶活 CMC酶活

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自然条件下纤维素分解真菌的分离筛选 被引量：4

7

作者 付传明 黄宁珍 +3 位作者 何金祥 何成新 唐凤鸾 王新桂 《广西农业科学》 CSCD 2009年第3期224-228,共5页

以自然界中腐烂的枝条、朽木为材料,经过多代分离、筛选,获得4株可降解利用纤维素的真菌,分别标记为F-1、F-2、F-3和F-4。生长速率和纤维素酶活性检测结果表明,4株真菌都能较好地利用培养基中的纤维素类物质,在以羧甲基纤维素钠(CMC-Na... 以自然界中腐烂的枝条、朽木为材料,经过多代分离、筛选,获得4株可降解利用纤维素的真菌,分别标记为F-1、F-2、F-3和F-4。生长速率和纤维素酶活性检测结果表明,4株真菌都能较好地利用培养基中的纤维素类物质,在以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)或滤纸为唯一碳源的平板培养基上长势良好,能使滤纸快速裂解;4株真菌对蔗糖的利用效果好于葡萄糖,适宜的富集增殖培养基为马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA)。在MS无机盐添加羧甲基纤维素钠的发酵培养基中,各菌株具有不同的产纤维素酶能力,其中F-1的羧甲基纤维素(CMCase)酶活最高,F-4的滤纸酶活力(FPase)最高;在单独的杂草、木屑培养基上,4株真菌均能迅速生长并大量增殖,其中以F-1和F-3生长速率最快。因此,初步认为4株真菌分解纤维素类物质的能力都较强。 展开更多

关键词 纤维素 真菌 羧甲基纤维素酶 滤纸酶

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5株土著真菌的纤维素降解活性分析 被引量：2

8

作者 吴琴燕 陈宏州 +1 位作者 杨敬辉 潘以楼 《江西农业学报》 CAS 2011年第5期160-161,共2页

对分离自江苏句容市瓦屋山竹林土壤的5株真菌纤维素降解活性的分析结果表明:各菌株在CMC平板上均能较好地生长,而在CMC液体培养时仅TZ-4和TZ-15菌体干重较高;秸秆固态发酵后,TZ-4木聚糖酶活最高达355 U/g,TZ-15滤纸酶活最高达2.28 U/g,... 对分离自江苏句容市瓦屋山竹林土壤的5株真菌纤维素降解活性的分析结果表明:各菌株在CMC平板上均能较好地生长,而在CMC液体培养时仅TZ-4和TZ-15菌体干重较高;秸秆固态发酵后,TZ-4木聚糖酶活最高达355 U/g,TZ-15滤纸酶活最高达2.28 U/g,与里氏木霉相近,TZ-4和TZ-15的纤维素类物质分解能力较强,可作为功能性菌株应用于发酵床。 展开更多

关键词 土著真菌 纤维素 降解活性 木聚糖酶 滤纸酶

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稻草和精料及非蛋白氮对水牛瘤胃纤维素酶活力的影响 被引量：4

9

作者 沈赞明 韩正康 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期646-649,共4页

试验用 3头安装永久性瘤胃瘘管的成年水牛。采用自身对照方式在不同日粮条件下分别测定了瘤胃液内纤维素酶 (CMCase和FPase)活力以及厌氧真菌孢子数量。试验分为 4期 :稻草期 (Ⅰ期 ) ,稻草 +精料期 (Ⅱ期 ) ,稻草、精料 +羟甲基尿素期 ... 试验用 3头安装永久性瘤胃瘘管的成年水牛。采用自身对照方式在不同日粮条件下分别测定了瘤胃液内纤维素酶 (CMCase和FPase)活力以及厌氧真菌孢子数量。试验分为 4期 :稻草期 (Ⅰ期 ) ,稻草 +精料期 (Ⅱ期 ) ,稻草、精料 +羟甲基尿素期 (Ⅲ期 )和稻草、精料、羟甲基尿素 +硫酸铵期 (Ⅳ期 ) ,每期 2 0d。Ⅱ期稻草添喂精料 (2kg/d)时CMCase和Fpase平均活力分别下降 39% (P <0 .0 1)和 11% (P <0 .0 5 ) ;Ⅲ期加入羟甲基尿素 (80 g/d)CM Case和Fpase平均活力比Ⅱ期上升 89% (P <0 .0 1)和 19(P <0 .0 5 ) ,且显著高于Ⅰ期 (P <0 .0 5 )。Ⅳ期饲喂稻草、精料、羟甲基尿素 +硫酸铵 ,FPase活力比Ⅲ期进一步提高 (9% ,P <0 .0 5 )。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间真菌孢子数量没有显著差异 ,Ⅳ期显著低于其它 3期 (P <0 .0 5 )。结果表明稻草基础日粮添加淀粉等非结构多糖时加入羟甲基尿素和硫酸铵显著提高瘤胃微生物纤维素酶活性。 展开更多

关键词 水牛 瘤胃纤维素酶 稻草日粮 羟甲基尿素 硫酸铵

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一株纤维素降解菌产酶活性研究与初步鉴定 被引量：1

10

作者 于洪久 郭炜 +3 位作者 刘杰 王大蔚 李玉梅 于春生 《黑龙江农业科学》 2016年第2期118-121,共4页

为从环境中筛选高效纤维素降解菌,并研究其产酶能力,从农村堆肥粪堆的底部土壤中分离、纯化获得了1株纤维素降解菌NY06,进行了透明圈、滤纸崩解、CMC酶和FPA酶活力的测定。结果表明:与对照菌株相比,菌株NY06处理的透明圈出现较早,透明... 为从环境中筛选高效纤维素降解菌,并研究其产酶能力,从农村堆肥粪堆的底部土壤中分离、纯化获得了1株纤维素降解菌NY06,进行了透明圈、滤纸崩解、CMC酶和FPA酶活力的测定。结果表明:与对照菌株相比,菌株NY06处理的透明圈出现较早,透明圈更大,滤纸崩解效果更好;菌株NY06的CMC酶和FPA酶活的最大OD值分别为0.158和0.108,均大于对照菌株;经初步鉴定,菌株NY06为枯草芽孢杆菌。 展开更多

关键词 纤维素降解菌 透明圈 CMC酶 FPA酶

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高产纤维素酶的拟康宁木霉菌株8985固态发酵条件优化 被引量：11

11

作者 李鹏 陈秀珍 庄文颖 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期743-758,共16页

木霉是重要的产纤维素酶真菌,在其可利用性评价筛选过程中,获得了一株在实验室条件下高产纤维素酶的拟康宁木霉菌株8985。采用响应面法对8985产纤维素酶的固态发酵条件进行了研究,以滤纸酶活为响应值,通过Plackett-Burman设计对11个因... 木霉是重要的产纤维素酶真菌,在其可利用性评价筛选过程中,获得了一株在实验室条件下高产纤维素酶的拟康宁木霉菌株8985。采用响应面法对8985产纤维素酶的固态发酵条件进行了研究,以滤纸酶活为响应值,通过Plackett-Burman设计对11个因素进行了筛选,包括温度、湿度、发酵时间、K_(2)HPO_(4)、(NH_(4))_(2)SO_(4)、Tween-80、麸皮添加量、CaCl_(2)、MgSO_(4)、乳糖和pH;分析结果表明,影响产酶的3个关键因素分别为发酵时间、K_(2)HPO_(4)浓度和麸皮添加量。进而采用最陡爬坡试验逼近3个关键因素的最大响应区域,采用Box-Behnken设计建立数学模型,获得最佳产酶条件为:发酵5d、K_(2)HPO_(4) 5.18g/L、麸皮添加量0.281g/g,滤纸酶活性可达7.00IU/g,与理论值7.03IU/g接近,是优化前的1.37倍,是菌株里氏木霉QM9414该酶活的2.92倍。研究结果为木霉菌种资源的利用提供了有价值的科学信息。 展开更多

关键词 响应面法 拟康宁木霉 滤纸酶 固态发酵

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两种不同来源的绿色木霉降解木质纤维素研究 被引量：5

12

作者 赵爽 李婉云 +3 位作者 杨静雅 侯怡婷 赵丽莉 贺学礼 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期856-869,共14页

利用纤维素酶高产菌绿色木霉Trichoderma viride降解木质纤维素是实现废料资源化的重要手段。本研究选取来自不同生境的两株T.viride,分别以玉米秸秆和甘草药渣为基质,测定两者滤纸纤维素酶(filter paper cellulase,FPase)活性和还原糖... 利用纤维素酶高产菌绿色木霉Trichoderma viride降解木质纤维素是实现废料资源化的重要手段。本研究选取来自不同生境的两株T.viride,分别以玉米秸秆和甘草药渣为基质,测定两者滤纸纤维素酶(filter paper cellulase,FPase)活性和还原糖产量。从时间、温度、水分、pH 4个方面比较两株T.viride的环境适应性和不同基质的差异性。结果表明,以玉米秸秆为基质,T.viride XJ最适初始料液比为1:4–1:5.5,T.viride AG最适初始料液比为1:5–1:5.5。初始料液比1:5.5时,T.viride AG产FPase活性显著高于T.viride XJ。两株T.viride最适发酵温度均为28℃,各温度处理下不同菌株间无显著差异。两株T.viride均表现为还原糖消耗。以甘草药渣为基质,T.viride XJ最适初始料液比为1:2–1:2.5,T.viride AG最适初始料液比为1:3–1:3.5。料液比高于1:3,T.viride AG产FPase活性显著高于T.viride XJ。T.viride AG最适发酵温度为28℃,T.viride XJ最适发酵温度为23–28℃。温度低于28℃,T.viride XJ产FPase活性显著高于T.viride AG。两株T.viride均表现为还原糖积累。两株T.viride最适初始pH均为6–7,最适发酵时间均为3d。最优发酵条件下FPase活性:T.viride AG>T.viride XJ。对T.viride产FPase诱导能力:甘草药渣>玉米秸秆。变差分解表明两株T.viride产FPase活性差异主要源于菌株对生境的生态适应。比较分析菌种来源、基质类型、环境条件对T.viride发酵效果的影响,将有助于该菌大规模应用性研究。 展开更多

关键词 绿色木霉 固态发酵 滤纸纤维素酶活性 还原糖含量 甘草药渣 玉米秸秆

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高效降解秸秆的深绿木霉菌ATMT突变株的筛选 被引量：1

13

作者 马逸飞 沈新迁 +4 位作者 刘雨晴 曹珊珊 黄博 陈雪吟 陈云鹏 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2012年第1期15-22,共8页

以羧甲基纤维素粉或滤纸为唯一碳源,对深绿木霉菌T23的农杆菌介导的突变株进行了生长速度、产孢率、色素形成等形态学观测,同时,测定了滤纸酶酶活及羧甲基纤维素酶酶活,从中筛选出降解纤维素能力较出发菌T23显著变化的突变株7株。其中,... 以羧甲基纤维素粉或滤纸为唯一碳源,对深绿木霉菌T23的农杆菌介导的突变株进行了生长速度、产孢率、色素形成等形态学观测,同时,测定了滤纸酶酶活及羧甲基纤维素酶酶活,从中筛选出降解纤维素能力较出发菌T23显著变化的突变株7株。其中,多拷贝T-DNA插入突变株较单拷贝的突变株生长速度快,产孢率高。并且,这些突变株的发酵液呈明显的色素差异。突变株插入的拷贝数越多,酶活越强,在降解过程中这2种酶都观察到了产物的反馈抑制现象。 展开更多

关键词 深绿木霉 ATMT 滤纸酶 纤维素酶 突变株 纤维素降解

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工业纤维素酶的测定和比较 被引量：15

14

作者 冯骉 《无锡轻工业学院学报》 CSCD 1994年第4期323-330,共8页

以ＣＭＣ，滤纸和纤维二糖等作底物，用大量实验测定了纤维素酶活力。研究了产物浓度随时间的变化关系和稀释倍数对测定的影响。９种工业酶制剂的测定和比较结果表明：只有诸活力的综合测定方能全面地反映酶制剂对纤维素的作用。

关键词 纤维素酶 活力测定 纤维二糖酶 酶制剂

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