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FHL2通过调控子宫细胞衰老影响蛋鸡生产性能和蛋品质的研究
1
作者 王子聪 赵锡宇 +3 位作者 韩顺顺 张姚 陈浩 尹华东 《四川农业大学学报》 北大核心 2025年第5期1297-1304,共8页
【目的】旨在挖掘延长蛋鸡产蛋周期和提高鸡蛋质量的候选基因。【方法】采用免疫组化、转录组测序,细胞培养、qPCR等技术检测鸡子宫组织特征以及候选基因的表达情况。【结果】发现低产组后期产蛋率下降、蛋品质变差,子宫组织中衰老与炎... 【目的】旨在挖掘延长蛋鸡产蛋周期和提高鸡蛋质量的候选基因。【方法】采用免疫组化、转录组测序,细胞培养、qPCR等技术检测鸡子宫组织特征以及候选基因的表达情况。【结果】发现低产组后期产蛋率下降、蛋品质变差,子宫组织中衰老与炎症相关基因显著上调。干扰FHL2基因表达可促进子宫上皮细胞增殖,降低衰老和炎症因子表达。【结论】FHL2在子宫组织衰老及产蛋性能下降中发挥关键作用,可能为延缓母鸡生殖衰退的潜在靶点。 展开更多
关键词 蛋鸡 产蛋后期 输卵管子宫部 衰老 炎症 fhl2
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CRISPR/Cas9敲降FHL2基因及A549细胞系构建研究
2
作者 张辰超 杨松惠 +8 位作者 许智强 庄忻雨 狄亚心 于潼 张桐 王子良 田明尧 蔡锦顺 朱光泽 《中国病原生物学杂志》 北大核心 2025年第7期846-850,共5页
目的 了解流感B型病毒(Influenza B virus)和水泡型口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus)的感染试验FHL2在细胞抗病毒活性作用。方法 根据GenBank数据库中FHL2基因序列靶向设计sgRNA,合成并连接至慢病毒载体构建重组质粒。进行慢病毒... 目的 了解流感B型病毒(Influenza B virus)和水泡型口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus)的感染试验FHL2在细胞抗病毒活性作用。方法 根据GenBank数据库中FHL2基因序列靶向设计sgRNA,合成并连接至慢病毒载体构建重组质粒。进行慢病毒包装并感染A549细胞。利用Western blot和qPCR对单克隆阳性细胞进行验证。再通过Western blot和qPCR验证FHL2敲降对B型流感病毒复制的影响。结果 成功构建了重组质粒LentiCRISPRv2,敲降细胞系中FHL2的mRNA转录水平和蛋白表达水平明显下降,且细胞活性与增殖均未受明显影响。病毒感染试验结果显示FHL2敲降细胞的病变效应高于野生株细胞,流感病毒的增殖能力显著增强,IRF3的表达明显下降,表明敲降FHL2降低了细胞的抗病毒能力。结论 CRISPR/Cas9技术成功构建FHL2基因敲降的A549细胞系,初步验证了FHL2基因抗B型流感病毒感染和增殖的作用。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9基因编辑技术fhl2 细胞系 B型流感病毒
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HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的相关研究 被引量：6
3
作者 王莉莉 富伟能 +1 位作者 李增刚 孙开来 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期46-50,共5页
为研究HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的关系,应用变性梯度凝胶电泳技术检测HOXD13基因在先天性马蹄内翻足个体中的突变,应用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术检测HOXD13、FHL1在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中的表达;并用软件预测FHL... 为研究HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的关系,应用变性梯度凝胶电泳技术检测HOXD13基因在先天性马蹄内翻足个体中的突变,应用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术检测HOXD13、FHL1在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中的表达;并用软件预测FHL1基因上游HOXD13的结合位点,凝胶阻滞试验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证HOXD13和FHL1的相互作用。结果84例先天性马蹄内翻足患者中未发现HOXD13基因编码区突变存在。与同期正常足部肌肉组织相比HOXD13(33.3%),FHL1(46.6%)在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中表达明显下调。EMSA结果表明,当HOXD13存在时出现特异的DNA阻滞条带。上述结果说明:HOXD13的编码区突变可能不是先天性马蹄内翻足发生的原因,而HOXD13和FHL1表达水平的改变可能与马蹄内翻足畸形的发生有关,HOXD13可能通过直接调控FHL1发挥作用。 展开更多
关键词 先天性马蹄内翻足 HOXD13 fhl1 突变 表达
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FHL1在人胰腺癌族中的表达及其与胰腺癌的侵袭及转移的相关性研究 被引量：9
4
作者 刘哲 许元鸿 +4 位作者 龙锦 葛春林 毕淑龙 杜瑞霞 蒋红军 《临床与病理杂志》 CAS 2015年第3期423-427,共5页
目的:探讨FHL1蛋白在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌临床病理特征的关系。方法:利用Western blot检测62例胰腺癌手术切除标本与其相对应的癌旁胰腺组织中FHL1蛋白的表达。用Logrank检验分析FHL1蛋白表达与预后的关系。结果:FHL1的蛋白... 目的:探讨FHL1蛋白在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌临床病理特征的关系。方法:利用Western blot检测62例胰腺癌手术切除标本与其相对应的癌旁胰腺组织中FHL1蛋白的表达。用Logrank检验分析FHL1蛋白表达与预后的关系。结果:FHL1的蛋白表达在胰腺癌中与对应癌旁胰腺组织相比下降明显(0.197±0.042 vs.0.508±0.272,P<0.01)。同时,FHL1在胰腺癌中的表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移、肿瘤累及范围、远处转移均有明显差异(P<0.05),与高表达FHL1组相比,低表达FHL1组患者术后生存时间明显缩短(P<0.01)。结论:FHL1的异常表达很可能与胰腺癌的侵袭、转移等密切相关,而这种异常表达又影响了胰腺癌患者的预后。 展开更多
关键词 fhl1 胰腺癌 侵袭 转移
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FHL1抗体的制备与特异性鉴定 被引量：4
5
作者 丁丽华 袁斌 +4 位作者 严景华 韩聚强 姜艳超 李杰之 叶棋浓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期804-806,共3页
目的:制备FHL1及其剪接体FHL1B、FHL1C的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:融合表达GST-FHL1蛋白,常规免疫小鼠,制备多克隆抗体。分别构建带有FLAG标签的FHL1-5、FHL1B、FHL1C以及FHL1N端和C端缺失突变体的真核表达载体。Westernb... 目的:制备FHL1及其剪接体FHL1B、FHL1C的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:融合表达GST-FHL1蛋白,常规免疫小鼠,制备多克隆抗体。分别构建带有FLAG标签的FHL1-5、FHL1B、FHL1C以及FHL1N端和C端缺失突变体的真核表达载体。Westernblot检测抗体的特异性。结果:获得了FHL1-5、FHL1B、FHL1C及FHL1(1-169aa)和FHL1(168-280aa)的真核表达载体;得到的多克隆抗体可特异识别FHL1、FHL1B和FHL1C,而不识别FHL2-5;抗体与FHL1N端反应,而不与其C端反应。结论:成功得到可特异识别FHL1、FHL1B和FHL1C的多克隆抗体,为进一步研究FHL1及其剪接突变体的功能奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 fhl1 剪接突变体 多克隆抗体
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FHL2蛋白在肿瘤中的转录调控及其分子生物学机制 被引量：5
6
作者 蔡婷 何伟春 +3 位作者 骆静 袁琦 孟美娟 杨俊伟 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第10期1958-1961,共4页
FHL2是仅有四个半LIM结构域(FHL)蛋白家族的成员,目前在FHL蛋白家族中研究最为广泛。FHL2作为重要的衔接蛋白和支架蛋白,主要通过LIM结构域介导蛋白分子间的相互作用以实现其生物学功能。Fhl2基因在转录水平受多种肿瘤相关基因的调控,如... FHL2是仅有四个半LIM结构域(FHL)蛋白家族的成员,目前在FHL蛋白家族中研究最为广泛。FHL2作为重要的衔接蛋白和支架蛋白,主要通过LIM结构域介导蛋白分子间的相互作用以实现其生物学功能。Fhl2基因在转录水平受多种肿瘤相关基因的调控,如p53,血清应答因子等。FHL2与恶性肿瘤的关系是近年来的研究热点,目前认为FHL2能够作为癌蛋白及抑癌蛋白通过不同机制广泛影响乳腺癌、胃肠道肿瘤、肝癌、前列腺癌等肿瘤的发生发展,并且在不同肿瘤中的表达具有组织特异性。本文就FHL2的结构特点、功能、转录调控及与肿瘤的关系几个方面展开综述,从而明确FHL2在不同肿瘤中所发挥的作用及其分子生物学机制将会为治疗相关肿瘤提供新的干预靶点。 展开更多
关键词 fhl2 LIM结构域 肿瘤
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FHL家族功能研究进展 被引量：2
7
作者 翁剑锋 廖明芳 +2 位作者 邹思力 侯乐伟 景在平 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第3期572-573,共2页
FHL是含有4个半LIM结构域的蛋白家族,体内现已发现5个成员,即FHL1、FHL2、FHL3、FHL4、FHL5/ACT,不同成员在组织中表达具有特异性。FHL家族通过LIM结构域与其他蛋白质相互作用,在各种肌细胞的生长与分化、肿瘤的发生发展以及基因的转录... FHL是含有4个半LIM结构域的蛋白家族,体内现已发现5个成员,即FHL1、FHL2、FHL3、FHL4、FHL5/ACT,不同成员在组织中表达具有特异性。FHL家族通过LIM结构域与其他蛋白质相互作用,在各种肌细胞的生长与分化、肿瘤的发生发展以及基因的转录调节中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 fhl 肌细胞 肿瘤 转录调节
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低氧性肺动脉高压大鼠肺内FHL1的表达 被引量：4
8
作者 杨艳娟 郑西卫 +2 位作者 杨桂兰 侯嘉 程德云 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第26期5-10,共6页
目的了解低氧肺动脉高压时肺内FHL1与肺血管重建的关系。方法将20只雄性Wistar大鼠分为对照组和低氧肺动脉高压组,低氧肺动脉高压组以常压低氧复制大鼠肺动脉高压模型,以微导管法测定各组大鼠肺动脉压,采用免疫组织化学法检测各组大鼠肺... 目的了解低氧肺动脉高压时肺内FHL1与肺血管重建的关系。方法将20只雄性Wistar大鼠分为对照组和低氧肺动脉高压组,低氧肺动脉高压组以常压低氧复制大鼠肺动脉高压模型,以微导管法测定各组大鼠肺动脉压,采用免疫组织化学法检测各组大鼠肺内FHL1、细胞骨架蛋白1(Talin1)及细胞周期素D(Cyclin D)的表达,对肺组织切片进行图像分析。结果低氧3周后,低氧肺动脉高压组大鼠形成明显的肺动脉高压,管壁增厚,管腔狭窄,大鼠肺动脉压(2.86±0.39)kPa,右心室肥厚指数[RV/(LV+S)]为(43.53±3.38)%,管壁厚度占外径的百分比(WT%)为(35.24±11.2)%,管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)为(55.09±12.38)%,分别与对照组[(1.35±0.28)kPa、(23.68±3.48)%、(23.63±9.74)%和(41.62±12.83)%]相比升高(P<0.01);肺小动脉FHL1免疫阳性染色在低氧肺动脉高压组大鼠为1.48±0.03,与对照组(0.86±0.02)相比增强(P<0.01);低氧肺动脉高压组大鼠Talin1免疫阳性染色为(1.52±0.04),与对照组(0.92±0.03)相比增强(P<0.01);低氧肺动脉高压组大鼠Cyclin D免疫阳性染色为(1.46±0.02),与对照组(0.73±0.04)相比增强(P<0.01)。结论低氧所致FHL1的合成增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用,其作用可能与Talin1、Cyclin D有关。 展开更多
关键词 低氧 肺动脉高压 肺血管重建 fhl1 细胞骨架蛋白 细胞周期素D
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FHL-1及FHL-2在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1
9
作者 杨梅 操寄望 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第3期213-215,共3页
目的检测FHL-1及FHL-2在胃癌组织中的表达情况,探讨FHL-1及FHL-2与胃癌相关临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SP法检测35例胃癌和20例切缘正常组织中FHL-1及FHL-2表达。结果FHL-2蛋白在胃癌组织及正常胃黏膜组织中的阳性表达率分别... 目的检测FHL-1及FHL-2在胃癌组织中的表达情况,探讨FHL-1及FHL-2与胃癌相关临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SP法检测35例胃癌和20例切缘正常组织中FHL-1及FHL-2表达。结果FHL-2蛋白在胃癌组织及正常胃黏膜组织中的阳性表达率分别为88.57%、20%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05),且表达程度与临床病理因素无明显相关性(P>0.05)。FHL-1蛋白在正常组织及胃癌组织中阳性表达率分别为80.00%、34.29%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论FHL-1和FHL-2可能在胃癌的发生、发展过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 fhl-1 fhl-2 胃癌 免疫组化
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siRNA抑制FHL2对胃肠癌细胞β-catenin活性的影响 被引量：2
10
作者 张文静 郭蒸 +4 位作者 夏国盛 王玮 牛凌云 姜泊 王继德 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期992-995,共4页
目的本研究旨在调查通过siRNA抑制FHL2表达后对β-catenin活性及其下游基因sur-vivin表达的影响,探讨两者在肠癌发生中的协同作用。方法 (1)PCR扩增含有β-catenin作用位点、长为340bp的survivin基因启动子片段,克隆入PGL3-basic载体,... 目的本研究旨在调查通过siRNA抑制FHL2表达后对β-catenin活性及其下游基因sur-vivin表达的影响,探讨两者在肠癌发生中的协同作用。方法 (1)PCR扩增含有β-catenin作用位点、长为340bp的survivin基因启动子片段,克隆入PGL3-basic载体,构建荧光素酶报告质粒pluc340。(2)脂质体瞬时转染法将β-catenin活性报告质粒pTOPFLASH、pFOPFLASH和pluc340转染入胃肠癌及正常细胞株,双荧光素酶法测定其启动子活性,并评价其对fhl2siRNA的反应。(3)RT-PCR方法检测基因表达。结果成功构建了survivin启动子片段pluc340;荧光素酶活性检测显示:β-catenin转录活性在胃肠癌细胞明显高于正常细胞;siRNA抑制FHL2表达后,β-catenin转录活性下降,survivin表达降低。结论抑制FHL2的表达能够降低β-catenin转录活性及下游癌基因的表达,干扰Wnt信号通路,说明fhl2有望成为肠癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 fhl2 Β-CATENIN SURVIVIN 肠癌
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FHL1在胃癌中的表达及其临床意义 被引量：3
11
作者 吴成利 周洲 +4 位作者 钱建新 潘军 柳珂 于观贞 王杰军 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2011年第3期228-231,共4页
目的观察肿瘤抑制因子FHL1在人胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌预后的关系。方法应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测1072例胃癌术后癌组织中FHL1的表达,并分析其与癌浸润深度、分化、分期等病理特征及预后之间的相关性。结果 FHL... 目的观察肿瘤抑制因子FHL1在人胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌预后的关系。方法应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测1072例胃癌术后癌组织中FHL1的表达,并分析其与癌浸润深度、分化、分期等病理特征及预后之间的相关性。结果 FHL1在分化高、中和低、未分化的胃癌组织中阳性表达率分别为58.4%和24.9%(P<0.001);FHL1在T1、T2期和T3、T4期胃癌组织中的阳性表达率分别为60.3%和38.3%(P<0.001);FHL1在淋巴结转移阴性和阳性的胃癌组织中阳性表达率分别为59.0%和37.6%(P<0.001);FHL1在TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织中的阳性表达率分别为58.8%和35.3%(P<0.001);生存分析表明FHL1是判断胃癌患者预后的独立指标。结论 FHL1表达与人胃癌的浸润深度、组织分化、淋巴结转移、TNM分期和预后相关,并可能参与人胃癌发生发展的过程。 展开更多
关键词 fhl1 胃癌 组织芯片
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FHL1在新辅助化疗后乳腺癌组织中的表达变化及临床意义 被引量：2
12
作者 秦洪真 李席如 +3 位作者 张均歆 叶棋浓 郑一琼 李荣 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期916-917,共2页
目的研究经新辅助化疗(NCT)的乳腺癌组织中抑癌基因FHL1表达的变化及临床意义。方法对76例多西他赛联合吡柔比星新辅助化疗前后的乳腺癌标本进行FHL1检测,最终69例化疗前标本和63例化疗后检测结果纳入评价,前后配对的标本共59例,对新辅... 目的研究经新辅助化疗(NCT)的乳腺癌组织中抑癌基因FHL1表达的变化及临床意义。方法对76例多西他赛联合吡柔比星新辅助化疗前后的乳腺癌标本进行FHL1检测,最终69例化疗前标本和63例化疗后检测结果纳入评价,前后配对的标本共59例,对新辅助化疗前后FHL1的表达率和表达强度进行比较。结果化疗前FHL1阳性率为79.7%,化疗后阳性率为65.1%。化疗后FHL1表达增强17例,不变12例,下调30例,配对等级资料检验证明FHL1在化疗后表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论多西他赛加吡柔比星新辅助化疗后FHL1表达下降。新辅助化疗降低FHL1表达可能会对部分患者的预后产生不良影响。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 新辅助化疗 fhl1
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FHL2抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭生长的机制探讨 被引量：2
13
作者 李沛雨 赵亚力 +3 位作者 刘娜 伍志强 司艺玲 韩为东 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期572-574,共3页
目的探讨FHL2对分化抑制蛋白1(Id1)的转录调控活性及Id1促乳腺癌细胞侵袭生长效应的影响。方法采用共转染双荧光素酶相对活性检测方法检测乳腺癌MCF-7细胞中FHL2对Id1介导的转录抑制功能的影响,MTT方法检测细胞的增殖能力,Transwell方... 目的探讨FHL2对分化抑制蛋白1(Id1)的转录调控活性及Id1促乳腺癌细胞侵袭生长效应的影响。方法采用共转染双荧光素酶相对活性检测方法检测乳腺癌MCF-7细胞中FHL2对Id1介导的转录抑制功能的影响,MTT方法检测细胞的增殖能力,Transwell方法观察细胞的侵袭能力。结果Id1对碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子E47介导的转录激活功能具有显著抑制作用,而FHL2明显削弱了该效应,并呈现出对FHL2转染剂量的依赖性;与空载体转染组比较,Id1明显促进了MCF-7细胞的增殖速率与侵袭能力,而该效应可被FHL2显著削弱(P<0.05)。结论FHL2可通过抑制Id1的功能活性来抑制乳腺癌细胞的增殖及侵袭生长,为深入研究FHL2-Id1信号途径在乳腺癌发生发展中的功能效应奠定了基础。 展开更多
关键词 fhl2 分化抑制蛋白1 功能抑制蛋白 MCF-7细胞 细胞增殖
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FHL1和桩蛋白在低氧/炎症诱导形成肺动脉高压大鼠肺内的表达 被引量：2
14
作者 杨艳娟 王海滨 +2 位作者 杨桂兰 訾瑞 王婷 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第21期6-10,共5页
目的了解FHL1和桩蛋白(Paxillin)在低氧/炎症条件下与肺血管重塑的关系。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、低氧组、百合碱组、低氧+百合碱组,每组10只,测大鼠平均肺动脉压力(m PAP)、右心室肥厚指数(RVHI)及肺小动脉相应管壁... 目的了解FHL1和桩蛋白(Paxillin)在低氧/炎症条件下与肺血管重塑的关系。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、低氧组、百合碱组、低氧+百合碱组,每组10只,测大鼠平均肺动脉压力(m PAP)、右心室肥厚指数(RVHI)及肺小动脉相应管壁中膜厚度占其管径的百分比(WT%)。采用免疫组织化学染色法测定各组大鼠肺内FHL1、Paxillin的表达情况,并对肺组织切片进行图像分析。结果低氧组、百合碱组及低氧+百合碱组大鼠的m PAP与对照组相比均显著升高(均P<0.01),三组的RVHI与对照组相比均升高(均P<0.05),三组的WT%与对照组相比均显著升高(P<0.01)。低氧组、百合碱组及低氧+百合碱组三组大鼠的肺动脉FHL1免疫阳性染色分别为(0.16±0.03)、(0.15±0.03)、(0.21±0.03),与对照组(0.08±0.02)相比明显增强(均P<0.05);三组的Paxillin免疫阳性染色分别为(0.19±0.03)、(0.21±0.04)、(0.22±0.04),与对照组(0.11±0.03)相比明显增强(均P<0.05)。结论在缺氧/炎症诱导肺动脉高压形成的过程中FHL1、Paxillin均表达增加,可能在肺血管重塑和肺动脉高压的发病过程中起到一定的作用。 展开更多
关键词 肺动脉高压 血管重塑 低氧 炎症 fhl1 桩蛋白
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FHL2抗体的制备及其在癌细胞和组织中表达的检测 被引量：2
15
作者 丁丽华 熊志红 +5 位作者 王朝云 朱翠 程龙 张寅炜 吕秋军 叶棋浓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期765-766,共2页
目的:制备FHL2特异性的多克隆抗体,并检测FHL2在癌细胞和组织中的表达。方法:在大肠杆菌中融合表达GST-FHL2蛋白,纯化后免疫小鼠,制备多克隆抗体。采用Western blot检测抗体的特异性,并检测FHL2在乳腺癌细胞、肝癌细胞和小鼠组织中的表... 目的:制备FHL2特异性的多克隆抗体,并检测FHL2在癌细胞和组织中的表达。方法:在大肠杆菌中融合表达GST-FHL2蛋白,纯化后免疫小鼠,制备多克隆抗体。采用Western blot检测抗体的特异性,并检测FHL2在乳腺癌细胞、肝癌细胞和小鼠组织中的表达。结果:获得了可特异识别FHL2,而不识别FHL家族其他成员的多克隆抗体;FHL2蛋白在乳腺癌和肝癌细胞株中表达;FHL2在心脏、肌组织、乳腺、前列腺和肝脏组织中都有表达。结论:成功地得到可特异识别FHL2的多克隆抗体,且发现FHL2在癌细胞和更广泛地正常组织中都有表达,为进一步研究FHL2在凋亡、癌变、分化等生命过程中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 fhl2 多克隆抗体 癌症
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FHL2通过相互作用抑制Id2的功能活性 被引量：2
16
作者 韩为东 赵亚力 +4 位作者 伍志强 司艺玲 杨洁 田丽媛 孟元光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期810-817,共8页
分化抑制蛋白2(Id2)通过抑制碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)类转录因子的功能活性调控多种组织细胞的分化发育,并参与人类多种肿瘤的发生与进展.Id2相互作用蛋白可能调控其翻译后的功能活性.本研究以HLH结构域缺失的Id2作为诱饵蛋白,采用酵母... 分化抑制蛋白2(Id2)通过抑制碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)类转录因子的功能活性调控多种组织细胞的分化发育,并参与人类多种肿瘤的发生与进展.Id2相互作用蛋白可能调控其翻译后的功能活性.本研究以HLH结构域缺失的Id2作为诱饵蛋白,采用酵母双杂交方法对MCF-7 cDNA文库进行筛选,识别了1个新的Id2相互作用蛋白FHL2(属于LIM蛋白家族的一员),哺乳动物双杂交实验系统验证了Id2与FHL2之间的相互作用,同时证实,该作用不依赖于Id2中的HLH结构域;GST-pulldown、免疫共沉淀方法,进一步证实FHL2/Id2之间的相互作用;免疫荧光共定位实验结果证实,FHL2/Id2相互作用主要发生在细胞核内;共转染实验结果发现,FHL2通过相互作用阻抑了Id2对bHLH类转录因子E47的功能抑制活性.总之,本研究识别了1个新的Id2相互作用蛋白FHL2,通过直接的相互作用,FHL2抑制了Id2的功能活性,FHL2可能参与调控Id2介导的细胞分化与发育过程,并可能参与肿瘤的发生与进展. 展开更多
关键词 fhl2 分化抑制蛋白2(Id2) 相互作用 抑制子
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FHL1和Smad4在结直肠癌中的表达及与肝转移的关系 被引量：2
17
作者 刘岩青 盛吉章 +4 位作者 孙凤莉 崔国忠 赵磊 杨文华 戴殿禄 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第2期215-218,共4页
目的探讨FHL1和Smad4在结直肠癌组织中的表达及与结直肠癌肝转移的相关性。方法选择结直肠癌患者112例,分为肝转移组及无肝转移组,应用免疫组织化学法检测FHL1和Smad4在结直肠癌及癌旁组织中的表达,分析两者在结直肠癌中的表达情况,及... 目的探讨FHL1和Smad4在结直肠癌组织中的表达及与结直肠癌肝转移的相关性。方法选择结直肠癌患者112例,分为肝转移组及无肝转移组,应用免疫组织化学法检测FHL1和Smad4在结直肠癌及癌旁组织中的表达,分析两者在结直肠癌中的表达情况,及与肝转移的相关性。结果在结直肠癌组织中,FHL1的阳性表达率为20.5%(23/112),在癌旁组织中阳性表达率为94.6%(106/112),Smad4在两种组织中的阳性表达率分别为14.3%(16/112),96.4%(108/112),差异均有统计学意义(P均<0.05);无肝转移组中Smad4和FHL1的阳性表达率明显高于肝转移组中Smad4和FHL1的阳性表达率,差异有统计学意义(均P<0.05)。单因素分析结果提示结直肠癌临床分期、淋巴结转移、FHL1及Smad4表达与肝转移相关(均P<0.05),多因素logistic回归分析显示FHL1及Smad4蛋白表达是结直肠肝转移的独立危险因素。Spearman相关分析显示FHL1蛋白表达与Smad4呈正相关(r=0.462,P<0.05)。结论结直肠癌中FHL1及Smad4低表达与肝转移相关,是结直肠癌肝转移的独立影响因素,可作为预测结直肠癌肝转移的生物学指标。 展开更多
关键词 结直肠癌 肝转移 fhl1 SMAD4
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KISS1、KAI1和FHL1在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤转移的关系 被引量：3
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作者 秦文星 颜芳 王雅杰 《实用临床医药杂志》 CAS 2010年第7期37-40,共4页
目的研究转移抑制基因KISS1、KAI1和FHL1在淋巴结转移与否的乳腺癌组织中表达的差异及其与雌、孕激素受体的关系。方法应用组织芯片和免疫组织化学EnVision法检测59例乳腺癌组织和31例非癌组织中的KISS1、KAI1和FHL1表达情况及其与乳腺... 目的研究转移抑制基因KISS1、KAI1和FHL1在淋巴结转移与否的乳腺癌组织中表达的差异及其与雌、孕激素受体的关系。方法应用组织芯片和免疫组织化学EnVision法检测59例乳腺癌组织和31例非癌组织中的KISS1、KAI1和FHL1表达情况及其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果①乳腺癌中KISS1、KAI1和FHL1的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②KISS1、KAI1和FHL1表达与乳腺癌的腋窝淋巴结转移、临床分期呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与患者年龄、肿瘤大小无关,差异无统计学意义(P>0.05)。③KAI1表达与ER、PR呈负相关(P<0.05);FHL1表达与PR呈负相关(P<0.05);差异均有统计学意义。④分析KISS1、KAI1和FHL1之间的关系可以看出:两两之间呈正相关,差异有统计学意义(P<0.01)。结论有淋巴结转移的乳腺癌患者KISS1、KAI1和FHL1的表达明显低于无淋巴结转移的乳腺癌患者。 展开更多
关键词 乳腺癌 组织芯片 肿瘤转移抑制基因 KISS1 KAI1 fhl1
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FHL家族的克隆及其融合蛋白的纯化 被引量：2
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作者 丁丽华 方言 +4 位作者 严景华 袁斌 韩聚强 吕秋军 叶棋浓 《生物技术通讯》 CAS 2006年第2期174-176,共3页
目的:纯化FHL家族(FHL1～FHL5)融合表达蛋白。方法:用PCR方法从乳腺文库和卵巢文库中扩增FHL1～FHL5编码序列,将其以正确相位与pGEX-KG载体中的GST编码序列融合,将重组质粒分别转化E.coliDH5α后,用谷胱甘肽-Sepharose4B纯化融合蛋白,并... 目的:纯化FHL家族(FHL1～FHL5)融合表达蛋白。方法:用PCR方法从乳腺文库和卵巢文库中扩增FHL1～FHL5编码序列,将其以正确相位与pGEX-KG载体中的GST编码序列融合,将重组质粒分别转化E.coliDH5α后,用谷胱甘肽-Sepharose4B纯化融合蛋白,并用Westernblot检测融合蛋白的表达。结果:构建得到FHL1～FHL5的融合表达载体,West-ernblot检测表明GST-FHL1～GST-FHL5共5种融合蛋白均成功表达,并纯化得到融合蛋白。结论:成功克隆FHL1～FHL5基因,并得到纯化的融合蛋白。 展开更多
关键词 fhl 克隆 融合蛋白
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利用RNAi抑制FHL2基因的表达 被引量：1
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作者 王朝云 周蕾 +3 位作者 丁丽华 吕秋军 杨晓 叶棋浓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1149-1151,共3页
目的:构建FHL2基因的siRNA真核表达载体,观察其对FHL2蛋白表达的影响。方法:利用RNAi干扰技术,设计并合成了两条针对FHL2基因的siRNA,将其克隆到siR-NA表达载体pSliencer 2.1-U6 neo上。将重组质粒和带FLAG标签的FHL2共转染293T人胚肾细... 目的:构建FHL2基因的siRNA真核表达载体,观察其对FHL2蛋白表达的影响。方法:利用RNAi干扰技术,设计并合成了两条针对FHL2基因的siRNA,将其克隆到siR-NA表达载体pSliencer 2.1-U6 neo上。将重组质粒和带FLAG标签的FHL2共转染293T人胚肾细胞,通过Western blot实验检验RNAi干扰效应。结果:经过酶切和测序证明,成功构建了FHL2 siRNA真核表达载体。通过Western blot证明,构建的siRNA能有效抑制FHL2基因的表达。结论:成功地构建了FHL2基因的siRNA真核表达载体,转染细胞后能有效地抑制FHL2基因的表达。 展开更多
关键词 fhl2 SIRNA 基因表达
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