沉默FGF5基因促进胰腺癌BxPC-3细胞自噬并抑制增殖的研究

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作者 梁梓宇 陆才金 +5 位作者 潘志刚 苏娟 卢丽霞 黄忠向 苏东星 梁秀丽 《海南医学》 2025年第18期2585-2591,共7页

目的探讨沉默成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5,FGF5)在胰腺癌(pancreatic cancer)BxPC-3细胞系的细胞增殖与自噬变化。方法通过构建BxPC-3细胞中FGF5的siRNA沉默模型,采用RT-PCR和Western blot验证FGF5表达的下调效果,... 目的探讨沉默成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5,FGF5)在胰腺癌(pancreatic cancer)BxPC-3细胞系的细胞增殖与自噬变化。方法通过构建BxPC-3细胞中FGF5的siRNA沉默模型,采用RT-PCR和Western blot验证FGF5表达的下调效果,并结合CCK-8和EdU实验评估细胞增殖变化,同时通过Western blot和免疫荧光检测Beclin1、LC3和p62蛋白表达分析细胞自噬水平。结果siRNA转染后48 h检测,si-FGF5#1组和si-FGF5#2组的FGF5 mRNA分别为0.18±0.02和0.15±0.00,明显低于NC组的1.10±0.02,蛋白表达分别为0.22±0.01和0.17±0.02,明显低于NC组的0.71±0.01,差异均有显著统计学意义(P<0.001);si-FGF5#1组和si-FGF5#2组的CCK-8显示第5天细胞增殖OD450值分别为1.21±0.04和1.12±0.07,明显低于NC组的1.87±0.07,EdU阳性细胞率分别为(20.33±1.53)%和(13.33±1.53)%,明显低于NC组的(67.00±0.37)%,差异均有显著统计学意义(P<0.001);si-FGF5#1组和si-FGF5#2组的Beclin1表达分别为0.65±0.03和0.73±0.02,明显高于NC组的0.45±0.02,LC3表达分别为0.80±0.02和0.70±0.01,明显高于NC组的0.40±0.02,而p62表达(0.53±0.02和0.56±0.02)较NC组(0.92±0.03)明显降低,免疫荧光证实LC3信号增强,LC3阳性细胞率[(78.33±1.53)%和(85.67±1.58)%]较NC组的(16.67±1.16)%明显上升,差异均有显著统计学意义(P<0.001)。结论研究表明沉默FGF5基因促进胰腺癌BxPC-3细胞自噬激活并抑制增殖,具有作为潜在治疗靶点的研究价值。 展开更多

关键词 胰腺癌 fgf5 基因沉默 细胞增殖 自噬激活

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兔成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因SNP及其与产毛量的相关分析 被引量：26

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作者 李春笑 蒋美山 +1 位作者 陈仕毅 赖松家 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期893-899,共7页

通过PCR产物直接测序的方法,对荥经长毛兔、天府黑兔以及加利福尼亚兔的FGF5基因外显子1和外显子3进行单核苷酸多态性分析。在外显子1的217位(位点A)检测到由TCT三碱基插入引起的移码突变,在外显子3的59位(位点B)和3位(位点C)分别发生... 通过PCR产物直接测序的方法,对荥经长毛兔、天府黑兔以及加利福尼亚兔的FGF5基因外显子1和外显子3进行单核苷酸多态性分析。在外显子1的217位(位点A)检测到由TCT三碱基插入引起的移码突变,在外显子3的59位(位点B)和3位(位点C)分别发生了错义突变由T→C和同义突变由T→C。通过计算发现各位点不同的基因型和等位基因频率在3个兔品种中存在较大的差异,位点A、B在长毛兔和肉兔中均有各自的优势基因型和等位基因。各位点基因型与产毛量的最小二乘分析表明,位点A各基因型的个体在产毛量上差异不显著(P>0.05),位点B各基因型个体产毛量的差异极显著(P<0.01),位点C各基因型个体产毛量的差异显著(P<0.05)。初步推断FGF5基因可能是影响长毛兔产毛量潜在的主效基因或者与主效基因连锁,可作为长毛兔产毛性状连锁分析的候选遗传标记。 展开更多

关键词 兔 fgf5基因 单核苷酸多态性 产毛量

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不同绵羊品种FGF5基因的多态性分析 被引量：16

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作者 高爱琴 李宁 +1 位作者 赵兴波 李金泉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期326-330,共5页

根据人和小鼠成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因的同源序列设计引物对绵羊基因组进行PCR扩增,将扩增片段进行克隆和测序,并与人和小鼠的成纤维细胞生长因子5基因序列进行同源性比较,确定扩增的片段为绵羊的FGF5基因片段。采用PCR-SSCP技术... 根据人和小鼠成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因的同源序列设计引物对绵羊基因组进行PCR扩增,将扩增片段进行克隆和测序,并与人和小鼠的成纤维细胞生长因子5基因序列进行同源性比较,确定扩增的片段为绵羊的FGF5基因片段。采用PCR-SSCP技术分析了FGF5基因外显子在小尾寒羊、湖羊、藏羊、中国美利奴等4个绵羊品种的多态性。结果表明:FGF5基因在P1和P2引物扩增片段中存在PCR-SSCP多态性。经克隆测序分析,位于外显子1的引物1扩增产物存在G→T突变,该突变位点使编码的氨基酸发生A→S的改变;引物2扩增产物发生了碱基序列C→T的突变,这一突变位点没有引起编码氨基酸的改变,属于同义突变。对不同绵羊品种的基因型和基因频率统计结果表明,引物1扩增产物小尾寒羊、湖羊、藏羊以等位基因A为主,而中国美利奴羊则以等位基因B为主,且各群体均处于Hardy-Weinberg平衡;引物2扩增产物小尾寒羊、湖羊、中国美利奴羊均以等位基因E为主,而藏羊的基因型频率与其它品种有显著差异,中国美利奴羊在引物2位点的基因频率处于Hardy-Weinberg不平衡状态。 展开更多

关键词 绵羊 成纤维细胞生长因子5基因 PCR—SSCP

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山羊FGF5基因单核苷酸多态性群体遗传学分析 被引量：18

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作者 高爱琴 李宁 +1 位作者 李金泉 赵兴波 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第3期71-76,共6页

为了研究成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因在山羊被毛生长中的的作用,进一步寻找与山羊被毛生长相关的遗传标记,为山羊绒毛性状的标记辅助选择和育种提供一定的理论依据,根据人和小鼠成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因的同源序列设计引物对... 为了研究成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因在山羊被毛生长中的的作用,进一步寻找与山羊被毛生长相关的遗传标记,为山羊绒毛性状的标记辅助选择和育种提供一定的理论依据,根据人和小鼠成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因的同源序列设计引物对山羊基因组进行PCR扩增,将扩增片段进行克隆和测序,并与人和小鼠的成纤维细胞生长因子5基因序列进行同源性比较,确定扩增的片断为山羊的FGF5基因片断。采用PCR-SSCP技术分析了FGF5基因外显子在内蒙古绒山羊、辽宁绒山羊和文登奶山羊品种的多态性,结果表明:FGF5基因在P1和P2引物扩增片段中存在PCR-SSCP多态性,而在P3和P4中没有发现多态。经克隆测序分析,位于外显子1的引物1内存在A→G突变;引物2中发生了碱基序列C→T的突变,这2个突变位点均没有引起编码氨基酸的改变,属于同义突变。对不同山羊品种的基因型和基因频率统计结果表明,引物1中内蒙古绒山羊、辽宁绒山羊、文登奶山羊均以等位基因B为主,且不同群体均处于Hardy-Weinberg平衡;引物2中内蒙古绒山羊、辽宁绒山羊均以等位基因E为主,而文登奶山羊的基因型频率与其他品种有显著差异;内蒙古绒山羊、辽宁绒山羊在引物2位点的基因频率处于Hardy-Weinberg不平衡状态,而文登奶山羊的基因频率处于Hardy-Weinberg平衡状态。 展开更多

关键词 山羊 成纤维细胞生长因子5基因 PCR-SSCP 哈代-温博格平衡

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绵羊FGF5基因的克隆、表达及RNA干扰 被引量：6

5

作者 刘伍限 贾斌 +3 位作者 石国庆 任建功 刘卡 马润林 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期982-988,共7页

根据牛的成纤维细胞内生长因子5(Fibroblast growth factor 5,FGF5)基因cDNA序列设计引物,PCR扩增得到绵羊FGF5基因cDNA的开放阅读框序列,并比较和其他6种高等哺乳动物的序列同源性;同时研究该基因在绵羊多种组织的表达情况,以及研究以... 根据牛的成纤维细胞内生长因子5(Fibroblast growth factor 5,FGF5)基因cDNA序列设计引物,PCR扩增得到绵羊FGF5基因cDNA的开放阅读框序列,并比较和其他6种高等哺乳动物的序列同源性;同时研究该基因在绵羊多种组织的表达情况,以及研究以细胞模型RNA干扰下的表达情况。结果表明,绵羊FGF5基因ORF全长为813 bp,编码270个氨基酸,分子量约为29.58 kDa,理论等电点10.59。绵羊FGF5基因cDNA序列与牛、人、小鼠、大鼠、犬和猫的对应序列同源性高度保守,预测氨基酸序列同源性同样具有高度保守性。RT-PCR分析表明FGF5在绵羊皮肤、小肠、肾脏、心脏、肝脏、脾脏、胰脏和肺中均有表达,皮肤中表达量最高。构建该基因的原核表达载体和RNAi载体,IPTG诱导在大肠杆菌中融合表达获得55 kDa的蛋白条带,设计的RNA干扰片段能显著抑制FGF5基因的表达。文章为进一步阐明绵羊FGF5的功能尤其是在羊毛生长发育中的作用提供了理论和实验基础。 展开更多

关键词 绵羊 fgf5 基因克隆 表达 RNAI

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绵羊FGF5基因编码蛋白的生物信息学分析 被引量：9

6

作者 刘伍限 贾斌 石国庆 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第3期296-300,共5页

为了应用生物信息学分析绵羊FGF5基因编码蛋白的结构与抗原表位,预测该蛋白的免疫原性。根据牛的FGF5基因cDNA保守区序列设计引物对绵羊FGF5基因cDNA进行扩增,将扩增片段进行克隆和测序,并与牛的FGF5基因序列进行同源性比较,确定扩增的... 为了应用生物信息学分析绵羊FGF5基因编码蛋白的结构与抗原表位,预测该蛋白的免疫原性。根据牛的FGF5基因cDNA保守区序列设计引物对绵羊FGF5基因cDNA进行扩增,将扩增片段进行克隆和测序,并与牛的FGF5基因序列进行同源性比较,确定扩增的片段为绵羊FGF5基因片段。利用蛋白分析专家系统(ExPASy)提供的ProtParam、SOSUI、MotifScan、SWISS-MODEL等生物信息学在线分析程序,结合TMH-MM2.0、SignalP3.0、TargetP 1.1和PSORTⅡprediction、Gene Runner和DNAMAN等生物信息学软件,分析、预测FGF5蛋白的理化性质、可溶性、翻译后修饰位点、亲(疏)水性、跨膜区、信号肽序列、蛋白细胞定位区域、二级结构、抗原表位等。结果显示该蛋白由270个氨基酸组成,分子式C1315H2085N389O378S6,分子质量单位为29.5847 ku,理论等电点为10.59,波长280 nm时的吸光度(A)值为0.864,半衰期为30 h,22个翻译后修饰位点、多个亲水性高的区域、2个跨膜区域、11个潜在抗原表位,为可溶性和分泌型蛋白,具有免疫原性,可据此制备多克隆抗体。 展开更多

关键词 绵羊 fgf5基因 蛋白质结构 生物信息学 抗原表位

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伊拉肉兔和美系獭兔FGF5基因外显子及部分内含子多态性研究 被引量：2

7

作者 牛华锋 张成东 +3 位作者 杨雪娇 任战军 王淑辉 赵永攀 《家畜生态学报》 北大核心 2021年第8期30-35,共6页

为了探索与家兔毛质性状有关的遗传标记,为家兔分子选育提供理论依据,该研究采用PCR直接测序法,对伊拉肉兔和美系獭兔FGF5基因的外显子Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的序列进行分析,结果表明:(1)FGF5基因外显子Ⅰ和Ⅲ均存在多态性,FGF5外显子Ⅱ不存在多态... 为了探索与家兔毛质性状有关的遗传标记,为家兔分子选育提供理论依据,该研究采用PCR直接测序法,对伊拉肉兔和美系獭兔FGF5基因的外显子Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的序列进行分析,结果表明:(1)FGF5基因外显子Ⅰ和Ⅲ均存在多态性,FGF5外显子Ⅱ不存在多态性;(2)FGF5基因外显子Ⅰ的A位点存在AGA插入突变(反向测序),有A_(1)A_(1)(突变型)、A_(1)A_(2)和A_(2)A_(2)(野生型)3种基因型,其中A_(1)A_(1)为美系獭兔的优势基因型,A_(2)A_(2)为伊拉肉兔的优势基因型;(3)FGF5基因外显子Ⅲ的B位点存在G-C突变,有B_(1)B_(1)(野生型)和B_(1)B_(2)2种基因型,且B_(1)B_(1)为这两种家兔的优势基因型;(4)应用适合性检验FGF5基因外显子ⅠA位点和外显子ⅢB位点基因型频率,发现只有伊拉肉兔群体中外显子ⅠA位点的基因型分布不符合Hardy-Weinberg平衡定律(P<0.05),而外显子ⅠA位点基因型在美系獭兔群体中和外显子ⅢB位点基因型在这两种家兔群体中的分布均符合hardy-weinberg平衡定律(P>0.05);(5)在伊拉肉兔和美系獭兔外显子Ⅰ的A位点和伊拉肉兔外显子Ⅲ的B位点均存在中度多态(0.25<PIC<0.5),美系獭兔外显子Ⅲ的B位点存在低度多态(PIC<0.25)。研究结果显示FGF5可作为影响家兔毛绒品质的候选基因,对繁育优良的皮用家兔品种具有重要意义。 展开更多

关键词 伊拉肉兔 美系獭兔 fgf5基因 多态性

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CRISPR/Cas9编辑绒山羊FGF5基因细胞株的建立 被引量：5

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作者 阿力玛 高原 +1 位作者 苏小虎 周欢敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期41-47,共7页

拟利用CRISPR/Cas9技术建立编辑FGF5基因的绒山羊细胞株。在FGF5基因的第一外显子设计靶点并合成gRNA靶点引物,构建2个编辑FGF5基因的Cas/gRNA真核表达质粒载体。电穿孔法转染绒山羊成纤维细胞后T7核酸内切酶(T7E1)检测载体活性,选择活... 拟利用CRISPR/Cas9技术建立编辑FGF5基因的绒山羊细胞株。在FGF5基因的第一外显子设计靶点并合成gRNA靶点引物,构建2个编辑FGF5基因的Cas/gRNA真核表达质粒载体。电穿孔法转染绒山羊成纤维细胞后T7核酸内切酶(T7E1)检测载体活性,选择活性最高的载体转染细胞,单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。经测序分析共获得20个FGF5基因敲除细胞株(包括FGF5+/-和FGF5-/-),总突变率为14.81%。双敲除突变细胞株可作为供体细胞进行重构胚构建,为创造高产绒性状的FGF5基因编辑绒山羊奠定基础。 展开更多

关键词 绒山羊 fgf5 CRISPR/Cas9 基因编辑

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5个家兔群体FGF5基因的遗传多样性分析 被引量：5

9

作者 冯凯 吴添文 +3 位作者 张蕾 何孟颉 高波 吴信生 《中国草食动物》 2012年第3期5-8,共4页

设计5对特异性引物,采用PCR-RFLP法及PCR-SSCP法对5个家兔群体FGF5基因CDS序列进行分析。结果显示：FGF5-1A发现了2个等位基因、3种基因型,在该引物285~287位点存在TCT缺失;FGF5-3B发现了2个等位基因、2种基因型,在该引物58位点处存在T... 设计5对特异性引物,采用PCR-RFLP法及PCR-SSCP法对5个家兔群体FGF5基因CDS序列进行分析。结果显示：FGF5-1A发现了2个等位基因、3种基因型,在该引物285~287位点存在TCT缺失;FGF5-3B发现了2个等位基因、2种基因型,在该引物58位点处存在T→C突变。所有的群体均处于哈代-温伯格平衡,且在所选的5个家兔群体的FGF5-1A中,A1等位基因均为优势等位基因,獭兔群体表现为中度多态,肉兔群体表现为低度多态,毛兔未检测到多态。皖系长毛兔与其他家兔群体之间分布均差异极显著（P〈0.01）,九疑山兔与海狸色獭兔之间分布差异显著（P〈0.05）。该研究为FGF5基因是否能作为家兔毛质性状选育工作的分子标记提供了一定参考。 展开更多

关键词 家兔 fgf5基因 遗传多样性

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绵羊FGF5基因Exon 3多态性对毛用性状的影响 被引量：6

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作者 张立春 尹峰 +6 位作者 柳俭强 李梦姝 王春昕 曹阳 朴庆林 金海国 张明新 《中国草食动物科学》 CAS 2018年第6期1-5,共5页

为探寻不同细毛羊品种FGF5基因多态性及其对毛用性状的影响,采用PCR-SSCP方法对苏博美利奴羊和东北细毛羊两个群体的FGF5基因Exon 3区进行了多态性分析,并在苏博美利奴羊群体中对不同基因型个体与其毛用性状进行了差异显著性分析。结果... 为探寻不同细毛羊品种FGF5基因多态性及其对毛用性状的影响,采用PCR-SSCP方法对苏博美利奴羊和东北细毛羊两个群体的FGF5基因Exon 3区进行了多态性分析,并在苏博美利奴羊群体中对不同基因型个体与其毛用性状进行了差异显著性分析。结果表明:苏博美利奴羊群体FGF5基因Exon 3区存在5种基因型,分别是DD、EE、FF、DE和EF,而东北细毛羊群体只存在DD、EE和DE三种基因型;苏博美利奴羊F等位基因由CDs区c.618和c.733多态位点构成,其中c.733位点C->G突变导致E等位基因型个体氨基酸L->V变异。苏博美利奴羊群体只有FF基因型个体在产毛量指标上显著高于DD基因型个体(P<0.05)。不同毛用绵羊品种FGF5基因多态性及其与毛用性状相关性的研究可为利用FGF5基因进行毛用性状选育奠定基础。 展开更多

关键词 苏博美利奴羊 东北细毛羊 fgf5 羊毛性状 基因多态性

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CRISPR/Cas9介导的MSTN/FGF5基因编辑陕北白绒山羊粪便菌群分析 被引量：1

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作者 李陇平 杨吉 +2 位作者 朱海鲸 黄帅 屈雷 《中国农学通报》 2018年第14期134-139,共6页

为了从绒山羊粪便微生物群落变化的角度对MSTN/FGF5基因编辑陕北白羊绒山的自身健康和环境安全性进行研究,利用6种不同培养基分别对MSTN/FGF5基因编辑和野生型陕北白绒山羊粪便中的微生物进行培养、计数,并做菌群结构的显著性检验分析... 为了从绒山羊粪便微生物群落变化的角度对MSTN/FGF5基因编辑陕北白羊绒山的自身健康和环境安全性进行研究,利用6种不同培养基分别对MSTN/FGF5基因编辑和野生型陕北白绒山羊粪便中的微生物进行培养、计数,并做菌群结构的显著性检验分析。结果表明:FGF5/MSTN基因编辑和野生型陕北白绒山羊F0代和F1代公羊和母羊新鲜粪样经LB琼脂、伊红美蓝琼脂、TPY琼脂、胆硫乳琼脂、肠球菌琼脂和甘露醇盐琼脂培养后微生物计数分别为,F0代:公羊6.35±0.68,5.89±0.25;5.32±0.10,5.27±0.34;6.64±0.57,6.71±0.35;5.03±0.53,5.32±0.14;4.12±0.13,4.15±0.21;5.34±0.18,5.25±0.25;母羊6.62±0.45,6.64±0.31;4.80±0.51,4.75±0.45;7.20±0.30,7.15±0.55;4.30±0.52,4.42±0.62;5.83±0.51,5.73±0.86;6.24±0.28,6.24±0.21。F1代:公羊6.92±0.12,7.08±0.04;4.02±0.64,3.99±0.51;6.32±0.15,6.25±0.30;5.21±0.28,5.17±0.20;3.66±0.50,3.88±0.67;4.06±0.50,3.97±0.46;母羊7.12±0.24,6.96±0.19;4.15±0.19,4.25±0.24;6.45±0.30,6.56±0.45;4.97±0.42,4.87±0.38;4.04±0.96,3.96±0.57;4.10±0.28,3.85±0.37。F0和F1代MSTN/FGF5基因编辑陕北白绒山羊与野生型陕北白绒山羊粪便中菌群结构之间不存在显著性差异(P>0.05)。本研究为FGF5/MSTN基因编辑陕北白绒山羊的安全性评价研究提供了试验数据和研究基础。 展开更多

关键词 MSTN/fgf5基因 基因编辑 陕北白绒山羊 粪便菌群结构 生物安全

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水貂FGF5基因多态性及其与毛长性状的关联分析 被引量：1

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作者 刘琳玲 宋兴超 +4 位作者 丛波 刘宗岳 宋姗姗 杨福合 王桂武 《特产研究》 2020年第5期45-49,共5页

本研究旨在检测水貂成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5,FGF5)基因多态性,解析该基因变异位点与水貂毛长性状的相关性。首先对30只美国短毛黑水貂的FGF5基因部分序列进行了扩增和测序;使用DNAMAN软件分析发现,FGF5基因内含... 本研究旨在检测水貂成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5,FGF5)基因多态性,解析该基因变异位点与水貂毛长性状的相关性。首先对30只美国短毛黑水貂的FGF5基因部分序列进行了扩增和测序;使用DNAMAN软件分析发现,FGF5基因内含子1中T376C位点存在多态性位点;通过在线酶切软件NEBcutter V2.0分析表明,Taq I内切酶可用于该SNP位点基因分型。以美国短毛黑水貂和丹麦咖啡水貂共计252个血液样本的基因组DNA作为模板,采用PCR-RFLP技术对252只美国短毛黑水貂和丹麦咖啡水貂FGF5基因T376C位点进行了基因分型,并将该位点与水貂毛长性状进行关联分析。结果表明:PCR扩增片段在376位点存在突变,该位点存在2个等位基因T和C,形成TT、TC和CC 3种基因型,该变异位点在美国短毛黑水貂群体中为中度多态(0.25<PIC<0.05),而在丹麦咖啡水貂群体中表现为高度多态(PIC>0.25);χ^2检验结果显示,T376C位点在美国短毛黑水貂群体处于Hardy-Weinberg平衡状态,在丹麦咖啡水貂群体显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态;关联分析表明,FGF5基因T376C位点与水貂毛长性状极显著相关(P<0.0001)。研究结果提示,FGF5基因T376C位点可能是影响水貂毛长性状的主控位点,可作为水貂毛长性状潜在的分子遗传标记。 展开更多

关键词 水貂 fgf5基因 毛长性状 PCR-RFLP

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下司犬FGF5基因mRNA的表达与绒毛性状的相关性分析

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作者 李平 燕志宏 +2 位作者 杨忠诚 杨红文 李毅 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期563-567,共5页

本试验目的在于研究贵州省下司犬长剑与短剑对成纤维生长因子5(FGF5)基因的表达,利用实时荧光定量PCR技术,分别测定长剑下司犬与短剑下司犬的下丘脑、垂体与皮肤组织中FGF5基因的表达水平,并测定耆甲部、体侧部与尾中部毛长。试验结果表... 本试验目的在于研究贵州省下司犬长剑与短剑对成纤维生长因子5(FGF5)基因的表达,利用实时荧光定量PCR技术,分别测定长剑下司犬与短剑下司犬的下丘脑、垂体与皮肤组织中FGF5基因的表达水平,并测定耆甲部、体侧部与尾中部毛长。试验结果表明:长剑母犬在皮肤组织中的表达量最高,显著高于垂体、下丘脑等组织的表达(p<0.05),长剑公犬在各组织中的表达差异不显著(p>0.05);短剑母犬在垂体组织中的表达量最高,显著高于下丘脑组织(p<0.05);耆胛部、体侧部、尾中部长剑母犬较长剑公犬毛长,短剑母犬较短剑公犬毛长,但差异都不显著(p>0.05)。该研究为FGF5基因控制毛长性状的机制提供理论基础,对下司犬的研究提供科学依据。 展开更多

关键词 下司犬 fgf5基因 长剑 短剑 毛长

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绒山羊FGF5基因启动子至第二外显子片段的序列拼接及启动子的预测和序列分析

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作者 郭慧琴 苏少锋 +2 位作者 郭俊 王潇 尹俊 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2014年第6期60-67,共8页

为构建绒山羊FGF5基因敲除载体及探明FGF5基因更多的序列信息,通过PCR方法分别扩增获得FGF5基因上游启动子至第一外显子1.6 kb片段、第一内含子至部分第二外显子8.0 kb片段及1.8 kb、2.4 kb和4.5 kb三段缺口片段。分别对以上PCR扩增片... 为构建绒山羊FGF5基因敲除载体及探明FGF5基因更多的序列信息,通过PCR方法分别扩增获得FGF5基因上游启动子至第一外显子1.6 kb片段、第一内含子至部分第二外显子8.0 kb片段及1.8 kb、2.4 kb和4.5 kb三段缺口片段。分别对以上PCR扩增片段进行测序,通过序列比对分析拼接获得了全长为9483 bp FGF5基因的部分序列,其结构包括编码区上游1 255 bp、第一外显子364 bp,第一内含子7 809 bp、部分第二外显子55 bp。并对绒山羊、绵羊、牛的FGF5基因启动子序列进行了分析,结果显示绒山羊和绵羊只有5个核苷酸的差异,而与牛的序列比较发现差异较大,牛的启动子中缺失了一个24 bp的DNA序列。本研究获得了绒山羊FGF5基因启动子至第二外显子部分序列的共9 483 bp的序列,为构建绒山羊FGF5基因敲除载体及探究FGF5基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 绒山羊 fgf5基因 序列拼接 启动子

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绒山羊FGF5基因打靶载体的构建

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作者 郭慧琴 苏少锋 +1 位作者 任卫波 尹俊 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-7,共7页

[目的]构建绒山羊FGF5基因打靶载体,以期获得基因敲除的绒山羊个体,为研究绒山羊FGF5基因的功能以及培养长绒毛型绒山羊新品种提供新思路。[方法]通过PCR法扩增并克隆了绒山羊FGF5基因启动子区和部分第一外显子的1.6 kb片段和部分第一... [目的]构建绒山羊FGF5基因打靶载体,以期获得基因敲除的绒山羊个体,为研究绒山羊FGF5基因的功能以及培养长绒毛型绒山羊新品种提供新思路。[方法]通过PCR法扩增并克隆了绒山羊FGF5基因启动子区和部分第一外显子的1.6 kb片段和部分第一内含子的4.5 kb片段,并将1.6 kb片段插入到打靶载体p Lox的XbaⅠ/ClaⅠ位点,获得了9.6 kb的中间打靶载体p Lox5;再将4.5 kb片段插入到p Lox5的NotⅠ位点,通过酶切和PCR法验证获得了插入方向正确的打靶载体p Lox5-33。[结果]经过酶切和PCR法鉴定,最终获得了大小为14.1 kb的p Lox5-33。[结论]成功构建了绒山羊FGF5基因包含启动子区第一外显子部分序列和第一内含子部分序列的大小为14.1 kb的基因打靶载体p Lox5-33,为进一步获得基因敲除绒山羊个体以及研究绒山羊FGF5基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 绒山羊 fgf5基因 打靶载体

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靶除内蒙古白绒山羊FGF5基因对其毛被性状的影响 被引量：5

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作者 高原 阿力玛 +2 位作者 李璐 刘奕奕 周欢敏 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第1期61-65,共5页

本研究以内蒙古自治区生物制造重点实验室应用基因打靶技术和TALEN技术获得的靶除FGF5基因的内蒙古白绒山羊为材料,通过对其进行绒毛指标测定,探讨了基因打靶技术和TALEN技术靶除FGF5基因对绒山羊绒毛性状的影响,并在国内外首次将模糊... 本研究以内蒙古自治区生物制造重点实验室应用基因打靶技术和TALEN技术获得的靶除FGF5基因的内蒙古白绒山羊为材料,通过对其进行绒毛指标测定,探讨了基因打靶技术和TALEN技术靶除FGF5基因对绒山羊绒毛性状的影响,并在国内外首次将模糊数学的模糊综合评价方法运用于两种基因编辑技术的评价。结果表明与对照白绒山羊相比,基因打靶技术获得靶除FGF5基因绒山羊的绒长度明显降低、细度明显变粗和毛长度明显增加;TALEN技术获得靶除FGF5基因绒山羊的绒长度明显增加。模糊综合评价结果说明在2只不同敲除技术的绒山羊个体中,应用TALEN技术敲除的绒山羊和基因打靶技术敲除的绒山羊在毛被性能改善方面是有差异的。 展开更多

关键词 内蒙古白绒山羊 基因打靶技术 TALEN技术 fgf5 毛被性状 模糊综合评价

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太行黑山羊FGF5基因CDs区的序列特征及其表达规律研究 被引量：2

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作者 何永新 陈玉林 +1 位作者 姜维 薛鹏 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第12期45-50,共6页

【目的】克隆太行黑山羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因CDs区,并对其进行序列特征分析和实时荧光定量表达检测。【方法】于2009年的7～10月份采集太行黑山羊的皮肤组织样品,利用RT-PCR方法克隆FGF5基因CDs区序列,并分析其序列特征及在... 【目的】克隆太行黑山羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因CDs区,并对其进行序列特征分析和实时荧光定量表达检测。【方法】于2009年的7～10月份采集太行黑山羊的皮肤组织样品,利用RT-PCR方法克隆FGF5基因CDs区序列,并分析其序列特征及在不同生长发育时期的表达情况。【结果】太行黑山羊FGF5基因CDs区全序列长度为813bp,编码270个氨基酸,其中包含一个FGF结构域(87～221位氨基酸);太行黑山羊FGF5基因CDs区核苷酸序列与牛、马、人、猩猩和小鼠的同源性分别为98%,92%,90%,90%和86%,其编码氨基酸序列与牛、马、人、猩猩和小鼠的同源性分别为98%,91%,91%,91%和91%;实时荧光定量分析结果表明,在检测的4个月份的皮肤组织中,FGF5基因在9月份表达量显著高于7、8、10月份(P<0.05),而7、8、10月份之间表达量无显著差异(P>0.05)。【结论】太行黑山羊的FGF5基因编码的氨基酸高度保守;太行黑山羊毛囊发育在7、8月份处于生长期,9月份由生长期向退行期过渡,10月份进入退行期。 展开更多

关键词 太行黑山羊 fgf5基因 RT-PCR 基因序列 氨基酸序列

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5个家兔群体FGF5基因部分外显子1的遗传多样性分析 被引量：5

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作者 夏圣荣 冯凯 +2 位作者 吴添文 朱程程 吴信生 《草食家畜》 2010年第4期22-25,共4页

本研究设计了1对特异性引物,采用PCR-RFLP法对5个家兔群体FGF5基因部分外显子1的序列进行分析,结果显示:FGF5基因外显子1发现了2个等位基因、3种基因型,220-222位点存在TCT缺失。所有的群体均处于哈代-温伯格平衡,且在所选的5个家兔群体... 本研究设计了1对特异性引物,采用PCR-RFLP法对5个家兔群体FGF5基因部分外显子1的序列进行分析,结果显示:FGF5基因外显子1发现了2个等位基因、3种基因型,220-222位点存在TCT缺失。所有的群体均处于哈代-温伯格平衡,且在所选的5个家兔群体的FGF5基因外显子1中,A1等位基因均为优势等位基因,獭兔群体表现为中度多态,肉兔群体表现为低度多态,毛兔未检测到多态。皖系长毛兔与其他家兔群体之间分布差异极显著(P<0.01),九疑山兔与有色獭兔之间分布差异显著(P<0.05),其他群体间不存在分布差异(P>0.05)。 展开更多

关键词 家兔 fgf5基因 PCR-RFLP 遗传变异

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敲除FGF5基因对陕北白绒山羊血液生理生化指标的影响 被引量：5

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作者 朱蓉慧 白玉恒 +2 位作者 王荣斌 屈雷 陈玉林 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2018年第6期52-56,共5页

为探究敲除FGF5基因对陕北白绒山羊血液生理生化指标的影响,本实验以敲除FGF5基因的陕北白绒山羊(公、母羊各8只,阳性)、同龄普通陕北白绒山羊(公、母羊各5只,阴性)为研究对象,分别在10月龄、1岁与1.5岁时测定8项血常规指标和14项血液... 为探究敲除FGF5基因对陕北白绒山羊血液生理生化指标的影响,本实验以敲除FGF5基因的陕北白绒山羊(公、母羊各8只,阳性)、同龄普通陕北白绒山羊(公、母羊各5只,阴性)为研究对象,分别在10月龄、1岁与1.5岁时测定8项血常规指标和14项血液生化指标。结果表明:血常规指标中,10月龄、1岁时,阳性公羊的红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)显著低于阴性公羊(P<0.05),阳性母羊的红细胞分布宽度变异系数(RDW)、血红蛋白(HGB)、HCT极显著高于阴性母羊(P<0.01);1岁时,阳性公羊和母羊的红细胞数目(RBC)均显著高于阴性公羊和母羊(P<0.05);1.5岁时,阳性母羊的白细胞数目(WBC)显著高于阴性母羊(P<0.05)。血液生化指标中,10月龄时,阳性母羊的球蛋白极显著低于阴性母羊(P<0.01);1岁、1.5岁时,阳性母羊的白蛋白极显著高于阴性母羊(P<0.01);1.5岁时,阳性母羊的尿素极显著低于阴性母羊(P<0.01);其余指标均差异不显著(P>0.05)。因所有指标均在参考范围内,说明敲除FGF5基因的陕北白绒山羊的蛋白质代谢、糖代谢、脂类代谢、肝胆功能、钙磷代谢均无显著影响。表明采用CRISPR/Cas9技术敲除FGF5基因并未对陕北白绒山羊的健康产生影响,但部分存在显著差异的血液生理生化指标有待进一步研究。 展开更多

关键词 陕北白绒山羊 基因敲除 fgf5 血生理生化指标

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CYP17A1联合FGF5基因多态性与高血压的相关性评价 被引量：1

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作者 刁晓艳 何燕 《贵州医药》 CAS 2021年第2期174-176,共3页

目的探讨CYP17A1基因C/T及FGF5 T/A多态性与原发性高血压(EH)关系。方法选取原发性高血压患者191例和健康体检者196例。应用TaqMan探针分析CYP17A1基因C/T和FGF5 T/A多态性的基因型,并探讨其相关性。结果经χ^(2)检验CYP17A1基因两组间... 目的探讨CYP17A1基因C/T及FGF5 T/A多态性与原发性高血压(EH)关系。方法选取原发性高血压患者191例和健康体检者196例。应用TaqMan探针分析CYP17A1基因C/T和FGF5 T/A多态性的基因型,并探讨其相关性。结果经χ^(2)检验CYP17A1基因两组间基因型分布差异有统计学意义(χ^(2)=8.963,P<0.05),两组间等位基因频率分布差异有统计学意义(χ^(2)=9.913,P<0.05)。而FGF5 T/A多态性的基因型以及等位基因在两组中比较未见明显差异。多元回归分析中提示年龄、FGF5 TT基因型、CYP17A1 TT基因型和空腹血糖高于正常标准的人群具有更高的患病风险。空腹高血糖组较对照组患病风险提高4倍,且发现EH组血糖、甘油三酯、年龄及体重指数明显高于对照组。结论CYP17A1基因C/T基因多态性与原发性高血压发病可能相关,其中TT基因型及T等位基因的个体患高血压的风险升高。获得性因素对高血压的发病有明显的影响。 展开更多

关键词 高血压 fgf5 CYP17A1 基因多态性 获得性因素

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