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FGF2通过STAT3/SLC7A11信号通路介导肾纤维化细胞铁死亡的机制研究 被引量：1
1
作者 李晗 张朝甲 +3 位作者 段红阳 尹伟洲 吴金璐 鲁广建 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期1072-1077,共6页
目的:探究成纤维细胞生长因子2(FGF2)对肾纤维化细胞铁死亡的影响及潜在分子机制。方法:大鼠NRK-52E细胞被随机分为对照组、肾纤维化模型组、FGF2细胞因子刺激组、敲低空质粒组、si-FGF2组、过表达空质粒组、过表达FGF2组、Fer-1处理组... 目的:探究成纤维细胞生长因子2(FGF2)对肾纤维化细胞铁死亡的影响及潜在分子机制。方法:大鼠NRK-52E细胞被随机分为对照组、肾纤维化模型组、FGF2细胞因子刺激组、敲低空质粒组、si-FGF2组、过表达空质粒组、过表达FGF2组、Fer-1处理组。模型组采用TGF-β1处理得到肾纤维化细胞模型,细胞免疫荧光法测定细胞纤维化水平,Western blot检测细胞中铁死亡相关蛋白(Nrf2、GPX4和SLC7A11)及通路蛋白(STAT3、p-STAT3)的表达水平。结果:敲低FGF2可减轻TGF-β1刺激的肾纤维化模型组α-SMA、CollagenⅢ蛋白升高(P<0.05),FGF2可促进STAT3蛋白活化为p-STAT3。FGF2细胞因子刺激后SLC7A11蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。与对照组相比,si-FGF2组及Fer-1处理组肾纤维化细胞中Nrf2和GPX4表达显著降低(P<0.05)。此外,敲低FGF2可显著减轻肾小管上皮细胞的间质纤维化(P<0.05)。结论:FGF2可能通过STAT3/SLC7A11信号通路介导TGF-β1诱导的肾细胞铁死亡,敲低FGF2可改善肾小管上皮细胞的纤维化。 展开更多
关键词 fgf2 STAT3 SLC7A11 肾纤维化 铁死亡
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基于FGF2/FGFR1/p-ERK通路研究不同时间点电针对脑缺血再灌注大鼠反应性星形胶质细胞极化的影响
2
作者 孙世婧 张小卿 +8 位作者 马贤德 陈怡然 周歆 胡楠 苏妆 林星星 江静 李佳欣 石蓉 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第6期183-188,I0002,I0003,共8页
目的观察不同时长电针干预对脑缺血再灌注大鼠成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF2)/成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)/磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular sign... 目的观察不同时长电针干预对脑缺血再灌注大鼠成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF2)/成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)/磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)信号通路的调控作用,以及该通路对反应性星形胶质细胞极化的影响。方法108只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组,再灌注后1、3、5、7 d模型组,再灌注后1、3、5、7 d电针组,每组12只。模型组和电针组使用Koizumi线拴法制作MCAO/R模型,假手术组仅剥离颈动脉,不进行栓塞,Zea-Longa法进行模型的筛选和评分。对电针组大鼠的百会、印堂、双侧足三里穴进行电针治疗,10 min/d,分别治疗1、3、5、7 d。使用YLS-13A大小鼠抓力测定仪进行前肢抓力测定;HE染色观察各组大鼠海马CA1区损伤情况;TTC染色计算模型组及电针组大鼠脑梗死体积;免疫荧光双标法检测C_(3)^(+)/GFAP^(+)、S100A10^(+)/GFAP^(+)共染情况;Western blot检测模型组及电针组FGF2、FGFR1、p-ERK的蛋白表达。结果同假手术比较,模型组大鼠前肢抓力减弱(P<0.01);相对脑梗死面积显著增加(P<0.01);海马CA1区细胞排列杂乱,神经细胞大量坏死;C_(3)^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)细胞数显著升高(P<0.01);S100A10^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)细胞数在MCAO/R后1 d下降(P<0.05),第3天开始逐渐升高,5、7 d显著升高(P<0.01);1 d模型组FGF2、FGFR1、p-ERK蛋白表达量均显著降低(P<0.05;P<0.01);3、7 d模型组FGF2蛋白表达量显著升高(P<0.05;P<0.01),3、5、7 d模型组FGFR1、p-ERK蛋白表达量显著升高(P<0.01)。同模型组比较,电针组前肢抓力增强(P<0.05;P<0.01);相对脑梗死面积显著减小(P<0.01);海马CA1区细胞相对整齐,细胞较为完整;电针3、7 d后C_(3)^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)细胞数显著下降(P<0.05);S100A10^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)阳性细胞率显著升高(P<0.05);电针3、5、7 d后FGF2蛋白表达量增高(P<0.05;P<0.01),1、5、7 d后FGFR1蛋白表达量增高(P<0.05;P<0.01),1、7 d后p-ERK蛋白表达量增高(P<0.05;P<0.01)。电针组组内比较,7 d电针组大鼠前肢抓力增加(P<0.01),海马CA1区细胞病理损伤较轻,FGF2、FGFR1、p-ERK蛋白相对表达量最高(P<0.01)。结论电针干预能够改善MCAO/R大鼠神经损伤,有助于运动功能恢复,再灌注后电针持续治疗7 d疗效更为显著,其机制可能促进FGF2/FGFR1/p-ERK通路,促进反应性星形胶质细胞向A2型极化有关。 展开更多
关键词 电针 脑缺血再灌注损伤 星形胶质细胞极化 fgf2/FGFR1/p-ERK通路
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Apelin通过激活FGF2/FGFR1通路促进膀胱癌增殖、迁移及血管生成
3
作者 苏维 赖厚桦 +4 位作者 唐昕 周群 唐亚纯 符浩 陈选才 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1289-1296,共8页
目的 探究Apelin(APLN)对膀胱癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响,并分析可能的作用机制。方法 使用GEO数据筛选出膀胱癌组织及细胞中的差异表达基因。收集60例膀胱癌组织及癌旁组织样本,分析患者的临床及病理参数。体外培养膀胱癌J82细... 目的 探究Apelin(APLN)对膀胱癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响,并分析可能的作用机制。方法 使用GEO数据筛选出膀胱癌组织及细胞中的差异表达基因。收集60例膀胱癌组织及癌旁组织样本,分析患者的临床及病理参数。体外培养膀胱癌J82细胞或人脐静脉内皮细胞HUVEC,转染相关质粒。并将其分为对照组、si-NC组、si-APLN组、oe-NC组、oe-APLN组、oeAPLN+si-NC组及oe-APLN+si-FGFR1组。qRT-PCR及Western blotting实验检测APLN在膀胱癌组织及细胞中的表达情况,平板克隆实验检测J82细胞增殖情况,Transwell小室实验检测J82细胞迁移情况,血管生成实验检测HUVEC细胞血管生成情况,Western blotting实验检测FGF2表达以及FGFR1磷酸化水平。结果 APLN mRNA及蛋白表达在膀胱癌组织中的表达较正常组更高(P<0.05)。此外,与SV-HUC-1相比,膀胱癌细胞(T24和J82)中APLN mRNA及蛋白表达上调(P<0.05)。临床病理特征分析结果显示,APLN表达与膀胱癌的侵袭、远端转移及TNM分期密切相关(P<0.05)。si-APLN组J82细胞增殖和迁移率较siAPIN组下降,HUVEC细胞总血管生成长度减少(P<0.05)。与oe-NC组相比,oe-APLN组J82细胞增殖和迁移率上升,FGF2表达以及FGFR1磷酸化水平上升,HUVEC细胞总血管生成长度增加(P<0.05)。与oe-APLN+si-NC组相比,oe-APLN+si-FGF2组J82细胞增殖和迁移率下降,FGF2表达以及FGFR1磷酸化水平下降,HUVEC细胞总血管生成长度减少(P<0.05)。与oe-APLN+si-NC组相比,oe-APLN+si-FGFR1组J82细胞增殖和迁移率下降,FGFR1表达以及FGFR1磷酸化水平下降,HUVEC细胞总血管生成长度减少(P<0.05)。结论 APLN可能通过促进FGF2/FGFR1通路活化,促进J82细胞增殖、迁移及HUVEC血管生成。 展开更多
关键词 膀胱癌 APELIN fgf2/FGFR1通路 J82细胞 血管生成
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FGF2对小鼠肠道间质细胞R-spondin 1表达的调控作用
4
作者 李景聪 赵涵 +3 位作者 林巧雯 孙宏翔 苏冰 伍宁波 《上海交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第8期939-948,共10页
目的·初步探究成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)对小鼠结肠CD34^(+)CD81^(+)间质细胞R-spondin 1(Rspo1)表达的调控作用及机制。方法·利用流式细胞术分选Rspo1-tdTomato荧光报告基因小鼠结肠中CD45^(-)C... 目的·初步探究成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)对小鼠结肠CD34^(+)CD81^(+)间质细胞R-spondin 1(Rspo1)表达的调控作用及机制。方法·利用流式细胞术分选Rspo1-tdTomato荧光报告基因小鼠结肠中CD45^(-)CD326^(-)CD31^(-)GP38^(+)CD81^(+)Rspo1-tdTomato^(+)细胞,并进行体外培养。运用流式细胞术检测培养14 d后该类细胞表面蛋白标志物分子的表达情况。通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测该细胞分别在FGF2、FGF9、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、血小板衍生生长因子-bb(platelet-derived growth factor-bb,PDGFbb)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)刺激条件下Rspo1的表达情况。通过转录组测序和生物信息学方法分析FGF2调控Rspo1表达的信号通路,并用信号通路抑制剂及qPCR进行初步验证。结果·流式分选得到的小鼠结肠间质细胞经过体外培养14 d后,能够表达CD34、CD81和糖蛋白GP38,而不表达CD45、CD326、CD31等其他细胞谱系标志分子。qPCR结果发现,20 ng/mL的FGF2即可显著抑制该细胞Rspo1的表达,其他生长因子则无显著抑制作用。转录组测序和生物信息学分析结果显示,丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)信号通路可能是FGF2调节Rspo1表达的关键信号通路。qPCR结果显示,丝裂原细胞外激酶1/2(mitogen extracellular kinase 1/2,MEK1/2)抑制剂U0216预处理可逆转FGF2对Rspo1表达的抑制作用。结论·FGF2可能通过MEK1/2-细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase 1/2, ERK1/2)通路抑制小鼠结肠CD34^(+)CD81^(+)间质细胞Rspo1的表达。 展开更多
关键词 R-spondin 1基因 成纤维细胞生长因子2 CD34^(+)CD81^(+)间质细胞 丝裂原活化蛋白激酶通路
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基于FGF2表达探讨红景天苷对阿霉素诱导的心脏毒性的保护作用及对NLRP3炎症小体的影响 被引量：1
5
作者 陈鹏 刘石琳 +2 位作者 朱小蕾 王晓慧 冷静 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第13期1794-1800,1806,共8页
目的探讨红景天苷对阿霉素诱导的心脏毒性的保护作用及分子机制。方法①将18只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、红景天苷组,每组6只。对照组不做处理;模型组和红景天苷组分别于实验第1天、第2天、第4天尾静脉注射阿霉素6 mg/kg... 目的探讨红景天苷对阿霉素诱导的心脏毒性的保护作用及分子机制。方法①将18只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、红景天苷组,每组6只。对照组不做处理;模型组和红景天苷组分别于实验第1天、第2天、第4天尾静脉注射阿霉素6 mg/kg,红景天苷组在实验第1天时于阿霉素注射前腹腔注射红景天苷8 mg/kg。分别于实验第1天、第7天和第14天称量小鼠体重,超声心动图测定左心室射血分数(LVEF)。实验第14天,处死小鼠后称心脏和左心室质量,测量胫骨长度,计算心脏质量/胫骨长度比值和左心室质量/胫骨长度比值,硫代巴比妥酸法测定心肌组织匀浆(总)、心肌组织线粒体部分、心肌组织细胞质部分中丙二醛(MDA)相对含量,DHE荧光探针法测定心肌组织匀浆(总)中活性氧(ROS)含量,Western blot法检测心肌组织中白细胞介素-1β前体(Pro-IL-1β)、IL-1β、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)前体(Pro-Caspase-1)、Caspase-1 p20蛋白表达情况。②取大鼠H9c2心肌细胞,实验设空白组(细胞不做处理)、阿霉素组(加入0.5μmol/L阿霉素处理48 h)、阿霉素+红景天苷组(加入0.5μmol/L阿霉素和10μg/mL红景天苷处理48 h)、阿霉素+红景天苷+FGF2抗体组(加入0.5μmol/L阿霉素+10μg/mL红景天苷+0.1μg/mL FGF2抗体处理48 h),CCK-8测定细胞活力,Western blot法测定细胞中FGF2蛋白表达情况。结果①实验第1天、第7天和第14天,3组小鼠体重比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。实验第7天,模型组和红景天苷组小鼠LVEF均明显低于对照组(P均<0.05),模型组和红景天苷组比较差异无统计学意义(P>0.05);造模第14天,模型组小鼠LVEF、心脏质量/胫骨长度比值和左心室质量/胫骨长度比值均明显低于对照组(P均<0.05),红景天苷组均明显高于模型组(P均<0.05)。实验第14天,模型组小鼠心肌组织(总)MDA相对含量、心肌细胞线粒体部分MDA相对含量、心肌组织中ROS含量和心肌组织中IL-1β、NLRP3、Caspase-1 p20蛋白相对表达量均明显高于对照组(P均<0.05),红景天苷组上述各指标均明显低于模型组(P均<0.05);模型组小鼠心肌组织中Pro-Caspase-1蛋白相对表达量明显低于对照组(P<0.05),红景天苷组明显高于模型组(P<0.05);各组间心肌细胞胞质部分MDA相对含量和心肌组织中Pro-IL-1β相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。②阿霉素组细胞活力OD值和细胞中FGF2蛋白相对表达量均明显低于空白组(P均<0.05);阿霉素+红景天苷组细胞活力OD值明显高于阿霉素组和阿霉素+红景天苷+FGF2抗体组(P均<0.05);阿霉素+红景天苷组和阿霉素+红景天苷+FGF2抗体组细胞中FGF2蛋白相对表达量均明显高于阿霉素组(P均<0.05),阿霉素+红景天苷组和阿霉素+红景天苷+FGF2抗体组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论红景天苷可通过上调FGF2的表达抑制NLRP3炎症小体激活,减轻阿霉素诱导的心脏毒性。 展开更多
关键词 阿霉素 心脏毒性 红景天苷 NLRP3炎症小体 成纤维细胞生长因子2
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FGF2通过PERK/EIF2α/ATF4信号通路调节缺氧诱导的巩膜成纤维细胞增殖和胶原代谢 被引量：1
6
作者 翟瑜如 白艳 李云云 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第10期22-28,共7页
目的研究FGF2对缺氧诱导的巩膜成纤维细胞(scleral fibroblasts,SF)增殖和胶原的影响并探讨其可能调节的下游信号通路。方法用5%O2刺激SF 24 h诱导近视SF模型,RT-qPCR检测FGF2 mRNA表达,Western blot检测FGF2蛋白表达。细胞计数试剂盒8(... 目的研究FGF2对缺氧诱导的巩膜成纤维细胞(scleral fibroblasts,SF)增殖和胶原的影响并探讨其可能调节的下游信号通路。方法用5%O2刺激SF 24 h诱导近视SF模型,RT-qPCR检测FGF2 mRNA表达,Western blot检测FGF2蛋白表达。细胞计数试剂盒8(Cell Count Kit-8,CCK-8)、流式细胞术和Western blot分别检测细胞增殖活力、细胞凋亡和胶原代谢相关蛋白collagenⅠ、MMP2以及通路蛋白PERK、p-PERK、EIF2α、EIF2α、ATF4表达。结果缺氧刺激可促进FGF2 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)并激活PERK/EIF2α/ATF4通路(P<0.001),抑制SF细胞增殖(P<0.001)和collagenⅠ表达(P<0.001),诱导MMP2表达(P<0.001)及细胞凋亡(P<0.001)。敲降FGF2或经PERK抑制剂GSK2606414处理可逆转缺氧对SF细胞的作用,促进细胞增殖活力(P<0.001)和collagenⅠ表达(P<0.01),减少细胞凋亡(P<0.01)。结论FGF2通过调节PERK/EIF2α/ATF4通路的激活,影响缺氧诱导的SF增殖及胶原代谢。 展开更多
关键词 巩膜成纤维细胞 缺氧 fgf2 增殖 胶原代谢
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慢性应激损害大鼠学习记忆且抑制海马及额叶FGF2蛋白表达 被引量：10
7
作者 汤明明 侯公林 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2011年第7期784-791,共8页
慢性应激能够影响学习和记忆等认知功能。海马和额叶是与学习和记忆联系密切的脑区,参与信息的获得、保持及提取。碱性成纤维生长因子(FGF2)对神经元发生、存活以及损伤修复具有重要促进作用,目前成为神经系统退行性疾病相关研究的热点... 慢性应激能够影响学习和记忆等认知功能。海马和额叶是与学习和记忆联系密切的脑区,参与信息的获得、保持及提取。碱性成纤维生长因子(FGF2)对神经元发生、存活以及损伤修复具有重要促进作用,目前成为神经系统退行性疾病相关研究的热点。本研究旨在探索慢性应激如何影响大鼠学习和记忆能力,以及这一过程中FGF2蛋白在海马和额叶中表达的改变。实验中将16只雄性SD大鼠随机分为对照组和慢性应激组,采用慢性不可预见温和刺激建立大鼠慢性应激模型,通过Morris水迷宫实验及Y迷宫实验检测学习与记忆功能的改变,并对海马及额叶中FGF2蛋白的表达情况进行Western blot及免疫组织化学检测。结果发现,5周慢性应激导致大鼠学习和记忆能力受损,海马及额叶FGF2蛋白表达下调。因此认为,FGF2蛋白可能参与慢性应激损害学习记忆能力的机制,提示FGF2可能是诊断和治疗神经系统退行性病变的分子靶目标。 展开更多
关键词 fgf2 慢性应激 学习记忆 海马 额叶
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FGF2通过MAPK信号通路影响奶牛乳腺分支形态变化 被引量：4
8
作者 崔英俊 于广璞 +2 位作者 汤云飞 孙喆 张莉 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期48-53,72,共7页
为确定FGF2调节奶牛乳腺分支主要信号通路,首先将青春期奶牛乳腺类器官镶嵌在鼠尾Ⅰ型胶原中并添加FGF2作三维培养;通过FGFR1受体抑制剂(FGF2+PD173074组)、PI3K/AKT信号通路抑制剂(FGF2+LY-294002组)或MAPK/ERK信号通路抑制剂(FGF2+U0... 为确定FGF2调节奶牛乳腺分支主要信号通路,首先将青春期奶牛乳腺类器官镶嵌在鼠尾Ⅰ型胶原中并添加FGF2作三维培养;通过FGFR1受体抑制剂(FGF2+PD173074组)、PI3K/AKT信号通路抑制剂(FGF2+LY-294002组)或MAPK/ERK信号通路抑制剂(FGF2+U0126组)阻断信号通路,确定不同处理下84 h时奶牛乳腺分支率;利用Western blot检测处理时间0、15、60、240和600 min时各组p-AKT、AKT、p-ERK和ERK相对蛋白表达量。研究发现,FGF2主要通过MAPK信号通路影响奶牛乳腺分支。文章揭示FGF2在影响奶牛乳腺分支形态发生中起主要作用的下游信号通路,对奶牛乳腺分支形态发生分子机制研究具有推动作用。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺 Ⅰ型胶原 fgf2
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miR-195在宫腔粘连组织中的表达及其与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的关系 被引量：4
9
作者 靳灵鸽 巫剑红 张宇迪 《海南医学院学报》 CAS 2020年第7期529-532,共4页
目的:探讨miR-195在宫腔粘连(IUA)组织中的表达及其与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的关系。方法:选取2017年9月~2019年2月在本院接受宫腔镜治疗的IUA患者118例作为IUA组,同期在本院进行宫腔镜下诊刮的功能失调性子宫出血患者80例... 目的:探讨miR-195在宫腔粘连(IUA)组织中的表达及其与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的关系。方法:选取2017年9月~2019年2月在本院接受宫腔镜治疗的IUA患者118例作为IUA组,同期在本院进行宫腔镜下诊刮的功能失调性子宫出血患者80例作为对照组。比较两组宫腔镜所得组织中miR-195及转化生长因子-β1(TGF-β1)/信号传导蛋白(Smads)、成纤维细胞生长因子(FGF2)/成纤维细胞生长因子受体(FGFR1)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路相关分子表达量的差异,采用Pearson检验评估IUA患者宫腔粘连组织中miR-195表达量与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的相关性。结果:IUA组中miR-195的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。IUA组中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达量均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);IUA组中FGF2、FGFR1、ERKmRNA的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson检验发现,IUA组中miR-195表达量与TGF-β1/Smads通路相关分子TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达量呈正相关,与FGF2/FGFR1/ERK通路相关分子FGF2、FGFR1、ERK mRNA的表达量呈正相关(P<0.05)。结论:miR-195在IUA病灶组织中高表达,可能通过激活TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK信号通路促进病情进展。 展开更多
关键词 宫腔粘连组织 miR-195 TGF-β1/Smads fgf2/FGFR1/ERK
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Klotho对FGF2诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转分化的抑制作用 被引量：2
10
作者 管旭 杨可 +4 位作者 肖堂利 李艺 何婷 徐新丽 赵景宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1327-1330,共4页
目的探讨Klotho抑制成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor2,FGF2)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质转分化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。方法重组人Klotho蛋白预孵育前后,倒置显微镜观察FGF2对H... 目的探讨Klotho抑制成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor2,FGF2)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质转分化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。方法重组人Klotho蛋白预孵育前后,倒置显微镜观察FGF2对HK-2细胞形态的影响,免疫荧光检测上皮细胞标志物cytokeratin和间充质细胞标志物vimentin的表达变化,Western blot检测α-SMA、E-cadherin和ERK1/2的表达变化。结果 100 ng/mL的FGF2作用于HK-2细胞48 h后,HK-2细胞变成长梭形,细胞间隙明显增大,上皮细胞标志物E-cadherin的表达明显下降,间充质细胞标志物α-SMA表达明显升高(P<0.05),提示FGF2可以诱导HK-2细胞发生EMT。而Klotho蛋白预孵育可以显著抑制FGF2诱导的EMT,并且FGF2/FGFR(FGFs受体)下游信号分子pERK1/2的表达明显减弱(P<0.05)。结论 Klotho可以通过减弱FGF2信号通路活化抑制FGF2诱导的HK-2细胞EMT,Klotho可能参与了肾间质纤维化的发生和发展。 展开更多
关键词 KLOTHO fgf2 上皮-间充质转分化
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FGF2/FGFR1/ERK信号通路在高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化中的机制及肾元颗粒的干预作用 被引量：7
11
作者 陈立 袁军 +2 位作者 詹理睿 万亚琴 王小琴 《中国中西医结合肾病杂志》 2017年第3期201-204,共4页
目的:探讨FGF2/FGFR1/ERK在高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化中的信号转导机制及肾元颗粒的干预作用。方法:以高糖(30 mmol/L)诱导HK-2细胞上皮-间充质细胞转分化建立模型,分为正常组、模型组、高渗对照组、肾元颗粒组、厄贝沙坦组及ERK... 目的:探讨FGF2/FGFR1/ERK在高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化中的信号转导机制及肾元颗粒的干预作用。方法:以高糖(30 mmol/L)诱导HK-2细胞上皮-间充质细胞转分化建立模型,分为正常组、模型组、高渗对照组、肾元颗粒组、厄贝沙坦组及ERK阻断剂组。采用CCK-8法确定大鼠血清加入浓度,Western blot及RT-PCR检测FGF2、CollgenⅣ蛋白及mRNA表达水平,ELISA法分析各组细胞ERK及磷酸化ERK(p-ERK)水平。结果:与正常组比较,模型组FGF2、CollgenⅣ蛋白及mRNA表达显著增高(P<0.05),p-ERK水平显著增高(P<0.05)。与模型组比较,肾元颗粒组FGF2、CollgenⅣ蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),p-ERK水平显著降低(P<0.05)。结论:肾元颗粒含药血清能通过下调高糖诱导的HK-2细胞FGF2的表达,抑制FGF2/FGFR信号转导途径从而改善肾小管上皮细胞转分化,这可能是其防治糖尿病肾病的机制之一。 展开更多
关键词 肾元颗粒 肾小管上皮细胞 fgf2/FGFR信号转导途径 上皮间质转分化
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电离辐射对大鼠颌下腺TNFα和FGF2表达的影响 被引量：2
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作者 朱红华 鞠昊 +4 位作者 公柏娟 李志民 童辉燕 马珊珊 孙宏晨 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2015年第4期253-257,共5页
目的:观察照射后大鼠颌下腺TNFα和FGF2的表达变化,探讨放疗后唾液腺纤维化的可能分子机制。方法 :19只大鼠随机分为对照组(只麻醉不照射)、照射组。照射组用15 Gy的X射线进行颌下腺区局部照射1次,照射后3 d和30 d处死大鼠取颌下腺,4%... 目的:观察照射后大鼠颌下腺TNFα和FGF2的表达变化,探讨放疗后唾液腺纤维化的可能分子机制。方法 :19只大鼠随机分为对照组(只麻醉不照射)、照射组。照射组用15 Gy的X射线进行颌下腺区局部照射1次,照射后3 d和30 d处死大鼠取颌下腺,4%多聚甲醛固定、石蜡包埋、切片,免疫组化染色观察颌下腺TNFα和FGF2表达的变化。结果:照射后3 d和30 d大鼠颌下腺TNFα和FGF2表达均升高,30 d组高于3 d组。结论:照射后唾液腺纤维化可能与TNFα和FGF2表达升高有关。 展开更多
关键词 电离辐射 口干症 TNFΑ fgf2 纤维化
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腹腔冲洗液中FGF2表达改变与子宫内膜异位症的关系 被引量：1
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作者 周倩珺 叶艳娜 +3 位作者 李婵 黎普茜 李栩萍 蒋敏桥 《安徽医药》 CAS 2012年第9期1308-1309,共2页
目的检测FGF2蛋白在子宫内膜异位症(EMs)患者及非内异症患者腹腔冲洗液中的表达,探讨其在EMs发生、发展中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例子宫内异症患者(EMs组)及40例非内异症患者(对照组)腹腔冲洗液中FGF2水平。结果... 目的检测FGF2蛋白在子宫内膜异位症(EMs)患者及非内异症患者腹腔冲洗液中的表达,探讨其在EMs发生、发展中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例子宫内异症患者(EMs组)及40例非内异症患者(对照组)腹腔冲洗液中FGF2水平。结果 (1)在EMs组中,FGF2水平分别为(126.67±39.26)ng·L-1,均高于对照组的(50.31±27.33)ng·L-1,差异具有显著性(P<0.01);(2)在EMs组中,Ⅲ～Ⅳ期患者的FGF2水平为(118.75±45.81)ng·L-1,高于I～Ⅱ期患者的(90.43±22.05)ng·L-1(P<0.05)。结论腹腔冲洗液中FGF2增加可能与EMs发病及发展有关。 展开更多
关键词 fgf2 子宫内膜异位症 腹腔冲洗液 酶联免疫吸附试验
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FGF2基因转染人牙周膜细胞及其稳定表达和鉴定
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作者 蒋宏伟 郭俊兵 +2 位作者 杨辉俊 张继斌 田军 《中华医学丛刊》 2004年第5期5-7,共3页
目的探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrobbst growth factor,FGF2)基因在人牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)获得稳定表达的可能性。方法提取重组真核表达栽体pcDNA3-FGF2利用细胞培养和细胞基因转染技术体外转... 目的探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrobbst growth factor,FGF2)基因在人牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)获得稳定表达的可能性。方法提取重组真核表达栽体pcDNA3-FGF2利用细胞培养和细胞基因转染技术体外转染pcDNA3-FGF2基因至PDLCs；利用免疫组化SABC法和免疫印迹杂交技术检测细胞转染4周后FGF2基因的表达情况。结果免疫细胞化学证实转染与未转染细胞均在胞浆内表达FGF2，免疫印迹杂交结果显示转染前后均表达17KD FGF2，但转染后表达量增高。结论在脂质体的介导下。重组真核表达载体pcDNA3-FGF2能够转染PDLCs并获得稳定表达。 展开更多
关键词 fgf2 基因转染 鉴定 牙周膜成纤维细胞 外源性碱性成纤维细胞生长因子 基因表达 牙周病
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肾元颗粒含药血清对高糖诱导人肾小管上皮-间充质细胞转分化中Klotho/FGFR1/FGF2信号途径的影响 被引量：8
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作者 陈立 王小琴 +2 位作者 袁军 詹理睿 万亚琴 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1215-1221,共7页
目的探讨高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质细胞转分化过程中Klotho/FGFR1/FGF2信号转导途径的表达及肾元颗粒含药血清的干预作用。方法 30只Wistar大鼠采用随机数字表法分为空白组、肾元颗粒组及厄贝沙坦组,每组10只,灌胃7天... 目的探讨高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质细胞转分化过程中Klotho/FGFR1/FGF2信号转导途径的表达及肾元颗粒含药血清的干预作用。方法 30只Wistar大鼠采用随机数字表法分为空白组、肾元颗粒组及厄贝沙坦组,每组10只,灌胃7天后门静脉取血。采用CCK-8法测定细胞增殖率以确定大鼠血清加入浓度,以LDH法检测含药血清对HK-2细胞的毒性作用。以高糖(30 mmol/L)诱导HK-2细胞上皮-间充质细胞转分化建立模型,分为正常组、模型组、高渗对照组、肾元颗粒组、厄贝沙坦组及ERK阻断剂组。免疫荧光检测Klotho及FGF2的表达,Western blot及RT-PCR检测Klotho、FGF2、ECadherin、α-SMA、FN、CollgenⅣ蛋白及m RNA表达水平,Western blot分析各组细胞ERK及磷酸化ERK(p-ERK)水平。结果 CCK-8法结果显示大鼠空白血清培养HK-2细胞最佳浓度为20%。LDH结果显示,与10%胎牛血清比较,肾元颗粒含药血清、厄贝沙坦含药血清对细胞LDH活性的影响差异无统计学意义(P> 0. 05)。与正常组比较,模型组Klotho、E-Cadherin蛋白及m RNA表达降低(P <0. 05),FGF2、α-SMA、FN、CollgenⅣ蛋白及m RNA表达增高(P <0. 05),p-ERK水平显著增高(P <0. 05)。与模型组比较,肾元颗粒组Klotho、E-Cadherin蛋白及m RNA表达显著增高(P <0. 05),FGF2、α-SMA、FN、CollgenⅣ蛋白及m RNA表达显著降低(P <0. 05),p-ERK水平显著降低(P <0. 05)。结论肾元颗粒含药血清能改善高糖诱导的人肾小管上皮细胞转分化,其作用机制可能与调节Klotho/FGFR1/FGF2信号通路有关。 展开更多
关键词 肾元颗粒 肾小管上皮细胞 Klotho/FGFR1/fgf2信号转导途径
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秦川肉牛FGF2基因多态性与其生长和肉质性状的关联分析 被引量：3
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作者 刘嫣然 吴森 +1 位作者 王晓宇 昝林森 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第6期16-22,29,共8页
【目的】研究秦川肉牛FGF2基因的多态性及其与肉牛生长和肉质性状的关联性。【方法】选取18~24月龄的健康秦川肉牛384头,测定其生长和肉质性状指标,采集血样,采用DNA技术检测FGF2基因全部外显子中的单核苷酸突变位点,对突变位点进行基... 【目的】研究秦川肉牛FGF2基因的多态性及其与肉牛生长和肉质性状的关联性。【方法】选取18~24月龄的健康秦川肉牛384头,测定其生长和肉质性状指标,采集血样,采用DNA技术检测FGF2基因全部外显子中的单核苷酸突变位点,对突变位点进行基因型分型,研究其单核苷酸基因多态性(SNP),并以一般线性模型(GLM)分析该SNP位点与秦川肉牛生长和肉质性状的关联性。【结果】在第1、2外显子上未发现突变位点,在第3外显子上存在4个SNP突变位点:SV1(g.A54740>T),SV2(g.A54758>C),SV3(g.T56809>C)和SV4(g.C59443>T)。其中,SV1有AA、AT和TT 3种基因型,SV2有AA、AC和CC 3种基因型,SV3有TT、TC和CC 3种基因型,SV4有CC、CT和TT 3种基因型。相比其野生基因型,SV1位点突变会降低体斜长、体高、腰高、胸深、胸围、腰角宽、尻长和体质量性状(P<0.05);SV2、SV3和SV4位点突变会改善这些性状(P<0.05);SV1位点突变会降低坐骨端宽性状(P<0.05),但SV3和SV4位点突变会改善坐骨端宽性状(P<0.05);SV4位点突变会改善背膘厚性状(P<0.05);SV2和SV4位点突变会改善眼肌面积性状(P<0.05);SV1突变会改善肌间脂肪性状(P<0.05)。【结论】FGF2基因对秦川肉牛生长性状和肉质性状有一定影响,可作为秦川肉牛现代分子选育的候选参考基因。 展开更多
关键词 秦川肉牛 fgf2基因 多态性 关联分析
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同时表达活化型IGF1、EGF和FGF2的慢病毒载体的构建 被引量：2
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作者 郑丹丹 叶景佳 +1 位作者 杨蓓蓓 曹江 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1497-1505,共9页
共培养体系及添加外源性生长因子是诱导干细胞向内耳样细胞分化研究中的常用手段。为了将两种方法结合用于研究,该实验设计了一种可同时表达三种活化型生长因子的慢病毒载体。活化型表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)编码序列... 共培养体系及添加外源性生长因子是诱导干细胞向内耳样细胞分化研究中的常用手段。为了将两种方法结合用于研究,该实验设计了一种可同时表达三种活化型生长因子的慢病毒载体。活化型表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)编码序列采用RT-PCR方法从SW620人大肠癌细胞中克隆,活化型胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)和成纤维细胞生长因子2(fi broblast growth factor 2,FGF2)编码序列为人工合成。用PCR方法分别从p Sec Tag2A和p IRES2-EGFP质粒中克隆出引导分泌的免疫球蛋白Igκ链信号肽编码序列和引导翻译的内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)序列。将Igκ链信号肽和三种因子的编码序列分别融合、由IRES间隔并克隆到带绿荧光蛋白报告基因的慢病毒表达质粒p LVX-IRES-Zs Green1上并包装获得慢病毒。将慢病毒感染HEK293T细胞,通过有限稀释法筛选出稳定表达绿荧光蛋白的单细胞克隆。用Western blot检测单细胞克隆的IGF1、EGF和FGF2的表达,并通过促进肺癌A549细胞生长实验验证了分泌的生长因子的活性。该研究成功构建了导入细胞后可同时表达活化型IGF1、EGF和FGF2的慢病毒载体,为今后设计可表达这三种因子的共培养工程细胞用于干细胞诱导分化提供了有力的工具。 展开更多
关键词 IGF1 EGF fgf2 慢病毒表达载体
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FGF2和FGFR在牦牛繁殖周期子宫的表达与定位 被引量：1
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作者 秦树俭 李谷月 +4 位作者 孙娟 潘阳阳 彭秀梅 崔燕 余四九 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期529-536,共8页
为探索成纤维细胞因子2(fibroblast growth factor,F2GF2)及成纤维细胞因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)在健康成年牦牛繁殖周期中的生物学功能,本研究选取了不同繁殖周期(发情期-卵泡期、发情期-黄体期、妊娠期-黄体... 为探索成纤维细胞因子2(fibroblast growth factor,F2GF2)及成纤维细胞因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)在健康成年牦牛繁殖周期中的生物学功能,本研究选取了不同繁殖周期(发情期-卵泡期、发情期-黄体期、妊娠期-黄体期)牦牛子宫组织,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)和免疫组织化学方法从基因和蛋白水平分别检测不同繁殖周期牦牛子宫FGF2和FGFR的表达和分布,用积分光密度方法分析FGF2和FGFR蛋白表达水平。结果显示,不同繁殖周期牦牛子宫中FGF2mRNA表达水平为:发情期-卵泡期>发情期-黄体期>妊娠期-黄体期(P<0.01);FGFRmRNA表达水平为:发情期-黄体期>妊娠期-黄体期>发情期-卵泡期(P<0.05)。FGF2和FGFR在牦牛不同繁殖周期的子宫内膜、子宫腺及血管上皮中均有表达,子宫内膜和子宫腺为主要表达部位,阳性细胞的细胞质中表达较高。积分光密度分析结果显示,FGF2蛋白表达水平为:发情期-卵泡期子宫>发情期-黄体期子宫>妊娠期-黄体期子宫;FGFR蛋白表达水平为:妊娠期-黄体期子宫>发情期-卵泡期子宫>发情期-黄体期子宫。以上结果表明,FGF2和FGFR在不同繁殖周期的表达差异性可能与其参与早期胚胎附植及胚胎发育的调控相关,这为进一步研究FGF2和FGFR在牦牛繁殖周期中的调控作用提供了理论依据。 展开更多
关键词 牦牛 fgf2 FGFR 子宫 繁殖周期
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饲养层FGF2表达量对猕猴胚胎干细胞自我更新及多能性的影响 被引量：1
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作者 张敬 魏强 +5 位作者 卢斌 陈永昌 陈洪伟 李荣荣 王喜宏 季维智 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期405-414,共10页
用转基因和RNA干扰(RNAi)法建立5组不同成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)表达量的猕猴耳部皮肤成纤维细胞(MESF)系:过表达FGF2组(f1),过表达的阴性对照组(f2),FGF2RNA干扰组(f3),RNA干扰的阴性对照组(f4)和未作... 用转基因和RNA干扰(RNAi)法建立5组不同成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)表达量的猕猴耳部皮肤成纤维细胞(MESF)系:过表达FGF2组(f1),过表达的阴性对照组(f2),FGF2RNA干扰组(f3),RNA干扰的阴性对照组(f4)和未作任何处理的对照组(f5)。5组MESF的FGF2表达量相对值为f1:f2:f3:f4:f5=4∶2∶1∶2∶2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlin1在f1中表达量上升,在f3中表达量下降;BMP4,TGF-β2在f1中表达量下降,在f3中表达量上升;表明内源FGF2能够作用于MESF的TGF-β信号通路,引起相关基因表达量的变化。用这些细胞作为饲养层长期培养(10代)猕猴胚胎干细胞(RhESC),结果在f1上培养的RhESC增殖速度都比对照组快,并且c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlin1,Oct-4,Nanog,Sox2表达量均上升,BMP4表达下调;在f3上培养的RhESC增殖较慢,BMP4表达上调,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlin1,Oct-4,Nanog,Sox2表达下调。5组MESF上培养的RhESC形成的EB均表达各胚层早期标记基因(marker),说明RhESC的多能性没有受到影响,但表达量有差异,f1上RhESC形成的EB所有marker都低表达。结果表明饲养层的FGF2含量不仅影响自身相关基因的表达,还对RhESC的自我更新有一定的作用。 展开更多
关键词 猕猴 fgf2 饲养层 胚胎干细胞 增殖
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过表达水牛睾丸FGF2基因维持水牛精原细胞的体外培养 被引量：1
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作者 李婷婷 罗奥林 +7 位作者 耿双双 赵鹏伟 杨欢 许惠艳 陆阳清 梁兴伟 杨小淦 卢克焕 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期494-503,共10页
水牛睾丸支持细胞(Sertoli cells)是环绕在精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)周围的一类体细胞,为SSCs增殖提供物理支持及稳定的环境,同时参与血睾屏障形成。支持细胞可分泌FGF2,从而提高SSCs存活和增殖。至今为止,水牛SSCs... 水牛睾丸支持细胞(Sertoli cells)是环绕在精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)周围的一类体细胞,为SSCs增殖提供物理支持及稳定的环境,同时参与血睾屏障形成。支持细胞可分泌FGF2,从而提高SSCs存活和增殖。至今为止,水牛SSCs培养体系仍然面临许多挑战,推测内源性的FGF2可提高SSCs在体外培养时的自我更新和增殖能力。为此,本研究探索了水牛支持细胞的分离纯化方法,对比了幼年和成年水牛支持细胞FGF2的表达差异,并构建了支持细胞FGF2过表达细胞系。结果表明,幼年水牛支持细胞作为饲养层更有利于维持SSCs的增殖。实时荧光定量PCR显示FGF2在过表达细胞系中的水平显著高于幼年水牛支持细胞对照组的水平。与幼年水牛支持细胞作为饲养层共培养的SSCs相比,FGF2过表达支持细胞系作为饲养层共培养SSCs显著提高PLZF(P<0.05)、OCT4(P<0.05)和GFRα1(P<0.05)的表达水平,并且明显改善了SSCs的体外培养性能。本研究为优化水牛SSCs体外培养系统提供理论和实践基础。 展开更多
关键词 水牛 精原干细胞 支持细胞 过表达 fgf2
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