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水稻中类受体蛋白激酶FERONIA-like Receptor 1的表达纯化及抗体制备
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作者 吴秀秀 蒋顺 +2 位作者 于峰 曹建中 汪龙 《生命科学研究》 CAS CSCD 2019年第5期393-400,416,共9页
类受体蛋白激酶参与调控植物的器官发育和抗逆性,是一种重要的蛋白激酶。通过对水稻中类受体蛋白激酶家族成员FERONIA-like receptor 1 (FLR1)进行蛋白质结构预测分析,发现FLR1蛋白具有跨膜结构,其N端在细胞膜外(FLR1-BW, 1~450 aa), C... 类受体蛋白激酶参与调控植物的器官发育和抗逆性,是一种重要的蛋白激酶。通过对水稻中类受体蛋白激酶家族成员FERONIA-like receptor 1 (FLR1)进行蛋白质结构预测分析,发现FLR1蛋白具有跨膜结构,其N端在细胞膜外(FLR1-BW, 1~450 aa), C端在细胞膜内(FLR1-BN, 474~892 aa)。为了得到FLR1抗体用于其功能分析,将FLR1的N端和C端分别构建到原核表达载体pET-32a、pGEX-4T-1、pET-22b、pTriEx-4上,比较FLR1-BW和FLR1-BN在不同载体和不同条件下的表达效果。结果显示:FLR1-BW在pET-32a及pGEX-4T-1中能够有效表达,最优条件为16℃/16 h、0.5 mmol/L IPTG;而FLR1-BN蛋白表达后会对大肠杆菌产生细胞毒性,但在293细胞中能够表达。进一步利用纯化的FLR1-BW蛋白制备FLR1多克隆抗体,结果显示该抗体特异识别FLR1蛋白。本研究为类受体蛋白激酶的抗体制备提供了良好的思路并为研究FLR1功能奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 FLR1 蛋白质表达纯化 抗体制备
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Identification of FERONIA-like receptor genes involved in rice-Magnaporthe oryzae interaction
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作者 Yan-Yan Huang Xin-Xian Liu +14 位作者 Ying Xie Xiao-Yu Lin Zi-Jin Hu He Wang Liang-Fang Wang Wen-Qiang Dang Ling-Li Zhang Yong Zhu Hui Feng Mei Pu Ji-Qun Zhao Ji-Wei Zhang Yan Li Jing Fan Wen-Ming Wang 《Phytopathology Research》 2020年第1期236-245,共10页
The receptor-like kinase(RLK)FERONIA functions in immunity in Arabidopsis.Here,we systemically screened rice RLK genes encoding FERONIA-like receptor(FLRs)that may be involved in rice-Magnaporthe oryzae interaction.Th... The receptor-like kinase(RLK)FERONIA functions in immunity in Arabidopsis.Here,we systemically screened rice RLK genes encoding FERONIA-like receptor(FLRs)that may be involved in rice-Magnaporthe oryzae interaction.The expression of 16 FLR genes was examined in response to the infection of M.oryzae in different rice varieties.For each FLR gene,at least two independent mutants were generated by CRISPR/Cas9 gene-editing technology in rice variety Zhonghua 11(ZH11).Blast disease assay identified that the mutants of FLR1 and FLR13 showed increased susceptibility,whereas the mutants of FLR2 and FLR11 displayed enhanced resistance.Consistently,the mutant of FLR1 enhanced,but the mutant of FLR2 delayed the M.oryzae infection progress,which might be associated with the altered expression of defense-related genes.Together,these data indicate that at least 4 FLR genes are involved in rice-M.oryzae interaction and thus are potentially valuable in blast disease resistance. 展开更多
关键词 feronia-like receptors Rice blast resistance Magnaporthe oryzae Receptor-like kinase CRISPR/Cas9
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橡胶树HbFER基因家族成员鉴定及其响应炭疽菌胁迫的表达分析
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作者 岳柳君 安邦 《生物学杂志》 北大核心 2025年第2期59-65,共7页
为深入研究橡胶树中FERONIA(HbFER)的功能,运用生物信息学方法从橡胶树基因组中筛选鉴定出31个HbFER家族成员,并对其理化性质、基序、结构域以及染色体定位进行详细分析。结果显示,这31个HbFER不均匀地分布在橡胶树的9条染色体上,编码... 为深入研究橡胶树中FERONIA(HbFER)的功能,运用生物信息学方法从橡胶树基因组中筛选鉴定出31个HbFER家族成员,并对其理化性质、基序、结构域以及染色体定位进行详细分析。结果显示,这31个HbFER不均匀地分布在橡胶树的9条染色体上,编码蛋白大小为453至900 aa。序列分析显示,所有HbFER蛋白均包含Malectin-like结构域,大多数还含有PKc-like结构域。通过种内和种间共线性分析,发现在橡胶树中的HbFER存在3组共线性基因对,并且橡胶树与水稻之间的基因共线性关系较为显著,表明FER在不同类群和物种间经历了不同的进化历程,导致基因功能出现分化。表达谱分析发现,在受到胶孢炭疽菌侵染时,橡胶树叶片中大部分HbFER的表达量有不同程度下降,而个别基因表达量上升,表明橡胶树HbFER家族不同基因在应对病原菌侵染时可能发挥着差异化作用。综上所述,结果为进一步研究HbFER在橡胶树抗病中的作用提供一定的参考,也为橡胶树抗病分子育种奠定基础。 展开更多
关键词 橡胶树 类受体激酶 FERONIA 表达模式 生物信息学
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巴西橡胶树FERONIA类受体激酶基因(HbFER)的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 王凉洁 秦云霞 罗红丽 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第7期1347-1353,共7页
植物受体类激酶在植物的生长发育和抗逆等生理过程中起着重要作用。在橡胶树转录组测序的基础上,通过RACE技术和RT-PCR方法,扩增得到橡胶树的一个类受体激酶基因的全长,命名为HbFER。该片段包含1个2 679 bp的开放阅读框,可编码892个氨... 植物受体类激酶在植物的生长发育和抗逆等生理过程中起着重要作用。在橡胶树转录组测序的基础上,通过RACE技术和RT-PCR方法,扩增得到橡胶树的一个类受体激酶基因的全长,命名为HbFER。该片段包含1个2 679 bp的开放阅读框,可编码892个氨基酸。生物信息学分析结果表明:该氨基酸序列与拟南芥、番茄、甘蓝和杨树的FER蛋白高度同源,其同源性分别为74.5%、74.7%、73.4%、82.9%。HbFER蛋白除了含有Malectin_like和PTKc结构域外,还含有1个信号肽(含22个氨基酸)和2个跨膜结构域。半定量分析结果表明,HbFER基因在不同组织中的表达水平存在差异,叶片和花中的表达丰度最高,胶乳中的表达丰度最低,且该基因在叶片中的表达受植物激素水杨酸的诱导。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 FERONIA类受体激酶 表达分析
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花生响应干旱胁迫的FERONIA类受体蛋白激酶基因克隆与表达分析 被引量:3
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作者 张欣悦 李佳婷 +4 位作者 邹婷 黄婉茹 莫爱琼 万小荣 郑奕雄 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期297-304,共8页
FERONIA(FER)类受体蛋白激酶是CrRLK1L(Catharanthus roseus RLK1-like)激酶亚家族成员,在植物受精、细胞伸长、顶端生长以及非生物胁迫响应等方面起重要作用。本研究克隆了两个花生(Arachis hypogaea)FER类受体蛋白激酶基因AhFER1和AhF... FERONIA(FER)类受体蛋白激酶是CrRLK1L(Catharanthus roseus RLK1-like)激酶亚家族成员,在植物受精、细胞伸长、顶端生长以及非生物胁迫响应等方面起重要作用。本研究克隆了两个花生(Arachis hypogaea)FER类受体蛋白激酶基因AhFER1和AhFER2,它们的完整编码序列(CDS)和相应基因组DNA序列完全一致,说明AhFER1和AhFER2基因编码区均无内含子,分别包括2 655和2 640 bp的完整开放阅读框,编码的蛋白分别含885和880个氨基酸,分子量分别为99.58和98.96 kDa,等电点分别为6.5和6.22。生物信息学分析发现,AhFER1及AhFER2的氨基酸序列与其他植物FER蛋白均具有较高同源性,都包含malectin-like和蛋白激酶催化域两个保守结构域。AhFER1和AhFER2基因在花生幼苗的叶、茎和根中的表达水平有差异:AhFER1基因在叶中表达量最高,其次是根,茎中表达量最低;而AhFER2基因则在茎中表达量最高,其次是叶,表达量最低是根。干旱胁迫对花生茎和根中AhFER1基因的表达以及花生叶、茎和根中AhFER2基因的表达均无影响,但干旱胁迫显著增强花生叶中AhFER1基因的表达,说明AhFER1基因可能在花生叶响应干旱胁迫时起重要作用。 展开更多
关键词 花生 类受体蛋白激酶 FERONIA 基因克隆与表达分析 干旱胁迫
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Phosphorylation of CPR5 by the receptor-like kinase FLR2 promotes mRNA poly(A)tail processing and immunity to Magnaporthe oryzae in rice
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作者 Xiao Luo Junjie Xing +5 位作者 Zhirong Peng Min Zhang Zhongwei Wei Jingbo Xu Feng Yu Huafeng Deng 《Plant Communications》 2025年第6期149-163,共15页
Regulation of RNA metabolism is crucial for the modulation of gene expression in plants exposed to external stresses.However,the mechanism by which plant membrane receptors transmit external signals to regulate RNA me... Regulation of RNA metabolism is crucial for the modulation of gene expression in plants exposed to external stresses.However,the mechanism by which plant membrane receptors transmit external signals to regulate RNA metabolism has not been determined.In this study,we show that FERONIA-like receptor 2(FLR2)modulates innate immunity in rice by inducing the translation of the immune regulator OsEIL1,thereby promoting resistance to Magnaporthe oryzae.FLR2 interacts with and phosphorylates the mRNA processing factor CONSTITUTIVE EXPRESSER OF PATHOGENESIS-RELATED GENES 5(CPR5),leading to modulation of OsEIL1 poly(A)tail length and translation in response to M.oryzae infection.Like the flr2 loss-of-function mutant,the cpr5 mutant exhibited increased resistance to M.oryzae,induced reactive oxygen species generation,and activated the MAPK cascade.Furthermore,the phospho-dead cpr5 mutant(cpr5mut5A),in which the FLR2 phosphorylation sites are altered,could not rescue the cpr5 phenotype and resulted in longer OsEIL1 poly(A)tails than in the wild type.Conversely,the phospho-mimic cpr5mut5D restored both the wild-type phenotype and OsEIL1 poly(A)tail length in the cpr5 mutant background.These findings suggest that FLR2 perceives external stressors and regulates RNA meta-bolism via CPR5,revealing a novel posttranscriptional regulatory pathway in rice. 展开更多
关键词 RICE feronia-like receptor plant immunity rice blast poly(A)tail
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