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脂肽类抗生素fengycin在枯草芽胞杆菌NCD-2菌株抑制番茄灰霉病菌中的功能分析 被引量:19
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作者 董伟欣 李宝庆 +3 位作者 李社增 鹿秀云 马平 郭庆港 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期401-410,共10页
枯草芽胞杆菌NCD-2菌株及其无细胞发酵液对多种植物病原真菌具有较强的拮抗活性。为了明确NCD-2菌株抑菌作用机理,本研究利用快速蛋白液相色谱技术(FPLC)结合抑菌活性测定,对NCD-2菌株的脂肽类抑菌物质进行分离、纯化,经质谱鉴定,该抑... 枯草芽胞杆菌NCD-2菌株及其无细胞发酵液对多种植物病原真菌具有较强的拮抗活性。为了明确NCD-2菌株抑菌作用机理,本研究利用快速蛋白液相色谱技术(FPLC)结合抑菌活性测定,对NCD-2菌株的脂肽类抑菌物质进行分离、纯化,经质谱鉴定,该抑菌物质为芬荠素(fengycin)。从NCD-2菌株中克隆出fengycin合成酶基因fenC及其上游启动子序列,通过同源重组技术对fenC基因进行了内缺失突变,同NCD-2野生型菌株相比,fenC基因缺失突变子丧失了fengycin的合成能力,同时该突变子显著降低了对番茄灰霉病菌的拮抗活性。进一步在离体叶片上比较了NCD-2野生型菌株和突变子之间脂肽提取物和菌体细胞对番茄灰霉病的保护作用,结果发现,突变子不论是脂肽提取物还是菌体细胞显著降低了对番茄灰霉病的防治作用。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 番茄灰霉病菌 fengycin 突变
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脂肽surfactin、iturin、fengycin性质鉴定的研究与展望 被引量:13
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作者 龚谷迪 周广田 +1 位作者 郭阳 杜芳 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2013年第3期211-215,共5页
脂肽是一类由亲水的肽链和亲油的脂肪烃链两部分组成的生物表面活性剂。相比化学表面活性剂,生物表面活性剂除具有降低表面张力,增加泡沫,稳定乳液等性质外,还具有安全,可降解的特性。一些脂肽还具有抗真菌、抗细菌、抗病毒、抗肿瘤等... 脂肽是一类由亲水的肽链和亲油的脂肪烃链两部分组成的生物表面活性剂。相比化学表面活性剂,生物表面活性剂除具有降低表面张力,增加泡沫,稳定乳液等性质外,还具有安全,可降解的特性。一些脂肽还具有抗真菌、抗细菌、抗病毒、抗肿瘤等生物活性,在日化、食品、制药、生物防治、微生物采油等方面都有良好的应用前景。surfactin,iturin,fengycin是一类主要由革兰氏阳性菌芽孢杆菌产生的常见脂肽,表面活性或抑菌活性均十分突出。目前对surfactin、iturin、fengycin的分子量、结构、性质的研究比较透彻,也相应开发出来一些鉴定方法。本文主要对常见脂肽surfactin、iturin、fengycin的性质,抑菌效果及主要的鉴定方法进行了介绍。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 脂肽 SURFACTIN ITURIN fengycin 鉴定
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抗菌肽Fengycins抑制串珠镰刀菌的初步机制 被引量:9
3
作者 胡梁斌 周威 +3 位作者 章挺 杨志敏 徐剑宏 石志琦 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期251-255,共5页
Fengycins是枯草芽孢杆菌非核糖体合成的环状脂肽类抗生素,本文从其特性入手,研究了其抑制串珠镰刀菌的初步作用机制。普通显微观察结果显示,Fengycins处理能使部分串珠镰刀菌菌丝顶端破裂,进一步通过PI染色与荧光显微观察发现,Fengycin... Fengycins是枯草芽孢杆菌非核糖体合成的环状脂肽类抗生素,本文从其特性入手,研究了其抑制串珠镰刀菌的初步作用机制。普通显微观察结果显示,Fengycins处理能使部分串珠镰刀菌菌丝顶端破裂,进一步通过PI染色与荧光显微观察发现,Fengycins处理会导致串珠镰刀菌菌丝膜的损伤。在添加几丁质、壳聚糖、β-1,3葡聚糖、甾醇、胆固醇的平板内,Fengycins的抑菌活性没有受到太大影响;而在添加卵磷脂的平板,Fengycins的抑菌活性受到明显的拮抗。这些结果说明卵磷脂很可能是Fengycins在膜上的作用靶标。此外,研究还发现Fengycins能够抑制串珠镰刀菌分泌的磷脂酶A2的活性,该性质很可能也在Fengycins的抑菌活性中起到了一定作用。 展开更多
关键词 fengycins 串珠镰刀菌 抑制机制
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Bacillus subtilis fmbJ产Fengycin对Rhizopus stolonifer呼吸链及营养物质利用的影响 被引量:4
4
作者 唐群勇 周小虹 +3 位作者 陆兆新 吕凤霞 王昱沣 别小妹 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期248-254,共7页
研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)fmbJ产生的Fengycin对桃软腐病菌(Rhizopus stolonifer)呼吸代谢、线粒体NADH脱氢酶活性、琥珀酸脱氢酶活性及营养物质利用的影响。通过比较典型抑制剂(磷酸钠、碘乙酸和丙二酸)对Fengycin的叠加率... 研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)fmbJ产生的Fengycin对桃软腐病菌(Rhizopus stolonifer)呼吸代谢、线粒体NADH脱氢酶活性、琥珀酸脱氢酶活性及营养物质利用的影响。通过比较典型抑制剂(磷酸钠、碘乙酸和丙二酸)对Fengycin的叠加率。结果表明,Fengycin主要抑制Rhizopus stolonifer呼吸代谢的HMP途径。酶活性实验结果表明:在体内作用时,随着Fengycin浓度的增大,线粒体NADH脱氢酶活性逐渐减小,而体外活性变化不大;随着Fengycin浓度的增大,体内和体外作用都使琥珀酸脱氢酶活性呈现先降低后升高的现象。此外,Fengycin还使Rhizopus stolonifer对糖和蛋白质的利用受到抑制,蛋白合成受到影响。结论:Fengycin作用后,使Rhizopusstolonifer呼吸代谢受阻,合成和分解代谢的平衡被打破,引起病变,生长受到抑制。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 桃软腐病菌 fengycin 呼吸链 营养物质利用
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脂肽类抗生素fengycin对大丽轮枝菌孢子萌发和微菌核形成的影响 被引量:4
5
作者 王珺 郭庆港 +8 位作者 苏振贺 董丽红 王培培 张晓云 鹿秀云 赵卫松 曲远航 李社增 马平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期739-747,共9页
枯草芽胞杆菌NCD-2菌株能够产生脂肽类抗生素fengycin和surfactin。本研究分别比较了NCD-2野生型菌株、丧失fengycin合成的突变子MF和丧失surfactin合成的突变子MS对大丽轮枝菌的抑菌活性。结果表明,NCD-2菌株和突变子MS周围能形成清晰... 枯草芽胞杆菌NCD-2菌株能够产生脂肽类抗生素fengycin和surfactin。本研究分别比较了NCD-2野生型菌株、丧失fengycin合成的突变子MF和丧失surfactin合成的突变子MS对大丽轮枝菌的抑菌活性。结果表明,NCD-2菌株和突变子MS周围能形成清晰的透明圈,而突变子MF周围透明圈模糊,说明fengycin对大丽轮枝菌具有抑菌活性。不同浓度的脂肽提取物对大丽轮枝菌孢子萌发的抑制试验表明,NCD-2野生型菌株的脂肽提取物能抑制大丽轮枝菌孢子萌发,在0.1 mg·mL^(-1)浓度下对孢子萌发的抑制率为46.30%,且随着脂肽浓度的提高抑制效果更加明显;同野生型菌株相比,突变子MF脂肽提取物显著降低了对大丽轮枝菌孢子萌发的抑制效果,在0.1 mg·mL^(-1)浓度下对孢子萌发的抑制率仅为18.48%,而突变子MS的脂肽提取物对大丽轮枝菌孢子萌发抑制效果与野生型菌株没有显著差异。通过测试脂肽提取物对微菌核形成的影响,发现野生型菌株和突变子MS脂肽提取物均能够显著抑制微菌核的形成,而突变子MF几乎丧失了对微菌核形成的抑制作用。RT-qPCR结果证明,野生型菌株和突变子MS脂肽提取物能抑制微菌核形成相关基因的表达,而突变子MF丧失了对微菌核形成相关基因表达的抑制作用。以上结果证明,fengycin在NCD-2菌株抑制大丽轮枝菌孢子萌发和微菌核形成中发挥主要作用。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 fengycin SURFACTIN 微菌核
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Fengycin对苹果青霉病致病菌扩展青霉产展青霉素的抑制机制研究 被引量:3
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作者 付瑞敏 张利娟 +1 位作者 张红 陈五岭 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第22期98-103,共6页
目的:为了考察脂肽类抗生素Fengycin对扩展青霉合成真菌毒素展青霉素的抑制机制。方法:采用高效液相色谱法检测单位质量扩展青霉菌丝体产展青霉素的含量,并用SYBR GreenI Real-Time PCR方法检测Fengycin处理下扩展青霉菌丝体和未经Fengy... 目的:为了考察脂肽类抗生素Fengycin对扩展青霉合成真菌毒素展青霉素的抑制机制。方法:采用高效液相色谱法检测单位质量扩展青霉菌丝体产展青霉素的含量,并用SYBR GreenI Real-Time PCR方法检测Fengycin处理下扩展青霉菌丝体和未经Fengycin处理的扩展青霉菌丝体中合成展青霉素的2个关键基因6-MSAS和IDH的表达水平。结果:经过Fengycin处理,单位质量扩展青霉菌丝体产毒素含量显著下降。扩展青霉6-MSAS基因表达水平显著降低,只有对照组的11%,而IDH基因的表达水平降低差异不显著。结论:Fengycin抑制展青霉素的合成可通过抑制6-MSAS基因的表达来完成。 展开更多
关键词 fengycin 扩展青霉 展青霉素 6-MSAS IDH
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高产抗菌脂肽Fengycin芽孢杆菌的诱变育种和发酵条件优化 被引量:8
7
作者 陈尚里 于福田 +1 位作者 沈圆圆 刘小玲 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第23期134-143,共10页
为了提高Fengycin产量,以芽孢杆菌YA-215为出发菌,通过复合诱变(紫外诱变、ARTP-LiCl诱变)育种来获取高产Fengycin突变体。通过单因素实验和响应面试验等确定最佳发酵工艺优化。结果表明,复合诱变选育获得一株高产Fengycin突变株UA397,... 为了提高Fengycin产量,以芽孢杆菌YA-215为出发菌,通过复合诱变(紫外诱变、ARTP-LiCl诱变)育种来获取高产Fengycin突变体。通过单因素实验和响应面试验等确定最佳发酵工艺优化。结果表明,复合诱变选育获得一株高产Fengycin突变株UA397,全基因组测序结合16S进化样本分析显示为暹罗芽孢杆菌。其最佳发酵工艺条件为:蔗糖25 g/L、蛋白胨30 g/L、发酵温度37.7℃、发酵时间37.8 h、接种量5.01%。在此发酵条件下,暹罗芽孢杆菌UA-397的Fengycin产量为517.09 mg/L,是野生型在未进行发酵条件优化时Fengycin产量113.02 mg/L的4.575倍。研究结果为抗菌脂肽Fengycin应用于食品、医药和生物防治等领域奠定了产量基础。 展开更多
关键词 暹罗芽孢杆菌 fengycin 诱变育种 响应面 发酵优化
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芽孢杆菌源Fengycin合成调控研究进展 被引量:1
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作者 王一凡 张飞燕 +5 位作者 孟祥荷 王雅娜 米婧璇 刘洪伟 赵山山 张丽萍 《河北省科学院学报》 CAS 2023年第6期28-32,共5页
Fengycin是由革兰氏阳性芽孢杆菌通过非核糖体合成途径产生的次级代谢产物,属于脂肽类化合物,具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤等功能,在农业、医药、食品等多个领域具有广阔的应用前景。但天然菌株产Fengycin效率低、生产成本高,严重限制... Fengycin是由革兰氏阳性芽孢杆菌通过非核糖体合成途径产生的次级代谢产物,属于脂肽类化合物,具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤等功能,在农业、医药、食品等多个领域具有广阔的应用前景。但天然菌株产Fengycin效率低、生产成本高,严重限制了Fengycin的实际应用。本文在阐述Fengycin的生物合成基础上,重点综述了发酵工艺优化、诱变育种、基因工程理性设计等可以提高其产量合成的策略,为进一步提高Fengycin产量提供参考。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 抗生物质 fengycin 合成
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C_(17)-fengycin B,produced by deep-sea-derived Bacillus subtilis,possessing a strong antifungal activity against Fusarium solani 被引量:6
9
作者 Weixiang LIU Chaomin SUN 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2021年第5期1938-1947,共10页
Root rot disease caused by Fusarium solani is the most devastating disease of the tomato and legume crops in China.The metabolites of Bacillus species can inhibit many fungal diseases.In this study,the metabolites of ... Root rot disease caused by Fusarium solani is the most devastating disease of the tomato and legume crops in China.The metabolites of Bacillus species can inhibit many fungal diseases.In this study,the metabolites of deep-sea-derived bacterium Bacillus subtilis 2 H11 can significantly inhibit the growth of F.solani.The metabolite C_(17)-fengycin B,one of the cyclic lipopeptides,was identified by the combination of silica column chromatography,high-performance liquid chromatography(HPLC),high-energy collision induced dissociation mass spectrometry(HCD-MS)and tandem mass spectrometry(HCD-MS/MS).The results of scanning electron microscopy(SEM)and transmission electron microscopy(TEM)showed that C_(17)-fengycin B could destroy the structure of the hyphae and spores of F.solani.The antifungal activities of C_(17)-fengycin B against F.solani were tested at concentrations ranging from 0.05 mg/mL to 0.20 mg/mL.The results indicated that C_(17)-fengycin B inhibited the growth of F.solani with antifungal index of 89.80%at 0.20 mg/mL,and the antifungal activity of C_(17)-fengycin B was further verified by the pot experiment.In addition,the cytotoxicity experiment showed that C_(17)-fengycin B had good biocompatibility and was a potential candidate for the development of biocontrol pesticide in the future. 展开更多
关键词 Bacillus species LIPOPEPTIDE fengycin ANTIFUNGAL pesticide
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Iturin and fengycin lipopeptides inhibit pathogenic Fusarium by targeting multiple components of the cell membrane and their regulative effects in wheat
10
作者 Qing-Song Yuan Peng Yang +7 位作者 Yi-Ke Liu Karim MTabl Mao-Wei Guo Jing-Bo Zhang Ai-Bo Wu Yu-Cai Liao Tao Huang Wei-Jie He 《Journal of Integrative Plant Biology》 2025年第8期2184-2197,共14页
Biocontrol microorganisms and their derived metabolites with antagonistic activity represent promising alternatives to chemical fungicides in managing plant pathogens.The lipopeptides(LPs)iturin and fengycin derived f... Biocontrol microorganisms and their derived metabolites with antagonistic activity represent promising alternatives to chemical fungicides in managing plant pathogens.The lipopeptides(LPs)iturin and fengycin derived from Bacillus amyloliquefaciens S76-3 exhibit highly inhibitory effects against pathogenic fungi,especially Fusarium graminearum(Fg),the primary pathogen causing Fusarium head blight(FHB)in cereals.However,the specific target of iturin and fengycin in Fg and the underlying mechanism of antagonistic activity remain unclear.Here,global transcriptome sequencing,combined with both genetic and chemical approaches,demonstrates that the LPs exhibit antagonism toward Fg by binding to multiple components in the cell membrane of Fg cells,including ergosterol,phospholipids,glycosylphosphatidylinositol,and ankyrin.Lipopeptides result in cell swelling by inducing cell wall remodeling and osmotic substance glycerol synthesis mediated by cell wall integrity and high-osmolarity glycerol signaling pathways.Furthermore,we found that LPs can activate the induced systemic resistance in wheat against FHB and deoxynivalenol accumulation.Additionally,LPs were able to promote wheat growth by regulating auxin,cytokinin,and gibberellin signaling pathways while also delaying seed germination through the stimulation of abscisic acid and ethylene signaling pathways.These findings advance knowledge on the underlying mechanism of iturin and fengycin antagonistic activity and provide a new avenue for developing agricultural and clinical broad-spectrum antifungal agents and identifying plant growth regulators in the future. 展开更多
关键词 ANTAGONISM Fusarium graminearum Fusarium head blight induced systemic resistance iturin and fengycin lipopeptides plantgrowthregulation
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Bacillus amyloliquefaciensBA-16-8所产fengycin对扩展青霉细胞的抑制机制研究 被引量:7
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作者 付瑞敏 常慧萍 陈五岭 《食品科技》 CAS 北大核心 2017年第5期7-13,共7页
目的:从细胞层面探究B.amyloliquefaciensBA-16-8所产fengycin对Penicillium expansum的抑制机制。方法:采用扫描电镜、透射电镜、核酸染色、光谱吸收和荧光显微观察分析fengycin对P.expansum细胞膜通透性及线粒体等细胞器的影响;采用... 目的:从细胞层面探究B.amyloliquefaciensBA-16-8所产fengycin对Penicillium expansum的抑制机制。方法:采用扫描电镜、透射电镜、核酸染色、光谱吸收和荧光显微观察分析fengycin对P.expansum细胞膜通透性及线粒体等细胞器的影响;采用凝胶阻滞实验探讨fengycin对菌丝体核酸的作用效果。结果:Fengycin处理P.expansum的菌丝体细胞,会导致细胞表面粗糙且细胞形态发生改变,细胞膜的完整性发生了改变,细胞结构遭到破坏。PI染色及光谱吸收实验结果显示,Fengycin可破坏细胞膜的完整性并增加P.expansum细胞膜的通透性。凝胶阻滞实验结果表明fengycin可与P.expansum的DNA于体外结合。结论:Fengycin可改变P.expansum的细胞膜通透性并作用于核酸,抑制基因的表达和细胞器的合成。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 扩展青霉 fengycin 抑菌机制
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氮源和碳源对解淀粉芽孢杆菌Q-426抗菌脂肽合成的影响 被引量:16
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作者 赵朋超 权春善 +2 位作者 金黎明 王丽娜 范圣第 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期50-56,共7页
微生物来源的环状脂肽在生物农药以及医学领域极具应用潜力。通过测量抑菌活性并利用反相高效液相色谱(RP-HPLC),液相质谱联用(HPLC-MS)和串联质谱(MS/MS)技术检测抗菌脂肽组分的变化研究了氮(N)源、碳(C)源和培养基中的初始pH值对解淀... 微生物来源的环状脂肽在生物农药以及医学领域极具应用潜力。通过测量抑菌活性并利用反相高效液相色谱(RP-HPLC),液相质谱联用(HPLC-MS)和串联质谱(MS/MS)技术检测抗菌脂肽组分的变化研究了氮(N)源、碳(C)源和培养基中的初始pH值对解淀粉芽孢杆菌Q-426菌株中抗菌脂肽bacillomycin D和fengycins合成的影响,从而为进一步研究它们生物合成的基因调控以及更有目的性提高产量提供理论依据。结果表明:L-组氨酸、L-赖氨酸、甘油、山梨醇以及培养基中的[OH]-均能促进脂肽bacillomycin D的合成,但它们在该实验菌株抗菌脂肽bacillomycinD合成途径中的调控靶点有所不同。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌Q-426 Bacillomycin D fengycins 碳源 氮源
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Bacillus subtilis S21产抗菌脂肽分离鉴定及半固态发酵工艺初探 被引量:3
13
作者 田秋月 刘杰 +1 位作者 张亮 胡美忠 《饲料工业》 北大核心 2019年第2期40-46,共7页
采用酸沉、甲醇萃取和LH-20层析,从Bacillus subtilis S21发酵菌液纯化出两种抗菌脂肽,通过质谱鉴定两种抗菌脂肽分别为Surfactin和Fengycin,二级质谱表明Surfactin由β-OH脂肪酸链(C_(12-15))和Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu(Ile)组成,F... 采用酸沉、甲醇萃取和LH-20层析,从Bacillus subtilis S21发酵菌液纯化出两种抗菌脂肽,通过质谱鉴定两种抗菌脂肽分别为Surfactin和Fengycin,二级质谱表明Surfactin由β-OH脂肪酸链(C_(12-15))和Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu(Ile)组成,Fengycin由β-OH脂肪酸链(C_(14-16))和Glu-Orn-Tyr-Thr-Glu-Val-Pro-Gln-Tyr-Ile组成。在前期探索试验基础上,以黄豆为主要培养基质,通过正交实验,确定了B. subtilis S21产Surfactin半固态发酵条件:无机盐体系添加20%,葡萄糖添加5%,发酵时间48 h,发酵温度37℃,验证实验表明此条件下Surfactin产量比landy培养基产量增加了180余倍。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 SURFACTIN fengycin 半固态发酵 分离鉴定
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枯草芽孢杆菌ge25对两种人参病原菌的抑制作用及脂肽类抑菌代谢产物的鉴定 被引量:13
14
作者 胡陈云 李勇 +2 位作者 刘敏 秦民坚 丁万隆 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期386-393,共8页
为明确枯草芽孢杆菌ge25抑菌代谢产物的组成,采用层析柱分离结合抑菌活性追踪方法分离、纯化菌株发酵液中的抑菌脂肽,使用UPLC-ESI-Q-TOF对抑菌活性组分进行鉴定。层析柱分离共获得28个组分,其中G23~G27有抑菌活性,且G25和G26的抑菌活... 为明确枯草芽孢杆菌ge25抑菌代谢产物的组成,采用层析柱分离结合抑菌活性追踪方法分离、纯化菌株发酵液中的抑菌脂肽,使用UPLC-ESI-Q-TOF对抑菌活性组分进行鉴定。层析柱分离共获得28个组分,其中G23~G27有抑菌活性,且G25和G26的抑菌活性最强;G25和G26经硅胶柱层析及TLC薄层层析分离,共获得3个组分L1、L2和L3,均有显著抑菌活性。UPLC-ESI-Q-TOF分析发现,L2和L3中包括1个fengycin A和6个fengycin B同系物或其衍生物;L1中发现2个化合物,但其分子量及碎片裂解规律与已知脂肽类成分存在明显差异,且未能获得明确的氨基酸裂解顺序,推测其可能不同于已报道的抑菌脂肽。扫描电镜观察发现,菌株ge25分泌的抑菌脂肽严重影响人参黑斑菌和人参锈腐菌菌丝体的正常生长,导致菌丝体形态异常、发育畸形。 展开更多
关键词 人参 枯草芽孢杆菌 抑菌脂肽 fengycin UPLC-ESI-Q-TOF
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枯草芽胞杆菌HMB19198菌株抑菌物质的鉴定及其对番茄灰霉病的防治 被引量:14
15
作者 郭庆港 刘高鸽 +5 位作者 陈秀叶 张晓云 鹿秀云 苏振贺 及增发 马平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期247-255,共9页
设施番茄灰霉病发生频繁,易产生抗药性,利用微生物杀菌剂防治番茄灰霉病是切实可行且对环境友好的措施之一。本研究通过抑菌活性测定和田间棚室试验,获得一株有效防治番茄灰霉病的生防细菌HMB19198,通过16S rDNA联合gyrA、gyrB、rpoB和r... 设施番茄灰霉病发生频繁,易产生抗药性,利用微生物杀菌剂防治番茄灰霉病是切实可行且对环境友好的措施之一。本研究通过抑菌活性测定和田间棚室试验,获得一株有效防治番茄灰霉病的生防细菌HMB19198,通过16S rDNA联合gyrA、gyrB、rpoB和rpoC等看家基因序列比对将菌株HMB19198鉴定为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。对峙培养结果表明,菌株HMB19198的脂肽提取物对灰霉菌表现较强的抑菌活性,通过色谱分离技术结合质谱分析,证明菌株HMB19198主要产生脂肽类抗生素丰原素(fengycin)和表面活性素surfactin,其中fengycin包含fengycin A(C15-C18)和fengycin C(C19-C20)两种同系物。抑菌活性测定表明,fengycin对灰霉菌表现较强的抑菌活性,显微观察发现,fengycin处理后造成灰霉菌菌丝畸形。通过对菌株HMB19198全基因组序列进行分析,获得fengycin合成酶基因簇,从基因水平证明菌株HMB19198可以产生fengycin。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 灰霉菌 丰原素 生物防治
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解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌脂肽芬芥素的分离鉴定及抑菌作用 被引量:10
16
作者 刘宇帅 张杰 +3 位作者 钟瑾 李晶 孟利强 张淑梅 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期20-29,134-136,共10页
对一株解淀粉芽孢杆菌TF28产生的抗菌脂肽进行分离鉴定及抑菌活性研究,采用酸沉淀、乙酸乙酯和甲醇萃取技术制备了抗菌脂肽粗提物,经过2次HPLC分离纯化,在保留时间32-42min内获得8个抗菌脂肽纯品,经MALDI-TOF-MS鉴定为芬芥素(fengycins... 对一株解淀粉芽孢杆菌TF28产生的抗菌脂肽进行分离鉴定及抑菌活性研究,采用酸沉淀、乙酸乙酯和甲醇萃取技术制备了抗菌脂肽粗提物,经过2次HPLC分离纯化,在保留时间32-42min内获得8个抗菌脂肽纯品,经MALDI-TOF-MS鉴定为芬芥素(fengycins),对尖孢镰刀菌和禾谷镰刀菌显示出较强的抑菌活性,该研究为提高菌株TF28抗菌脂肽产量的定向遗传改造奠定基础。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 尖孢镰刀菌 禾谷镰刀菌 抗菌脂肽 芬芥素
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生防菌Bs916合成脂肽抗生素泛革素的操纵子结构功能及生物活性 被引量:5
17
作者 罗楚平 王晓宇 +2 位作者 周华飞 刘邮洲 陈志谊 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期5142-5149,共8页
【目的】明确枯草芽胞杆菌Bs916(Bacillus subtilis 916)分泌的脂肽化合物Fengycin操纵子的结构、功能和生物活性,阐明枯草芽孢杆菌Bs916防治真菌病害的分子作用机制。【方法】在Bs916全基因组测序基础上,采用LA-PCR方法克隆Fengycin的... 【目的】明确枯草芽胞杆菌Bs916(Bacillus subtilis 916)分泌的脂肽化合物Fengycin操纵子的结构、功能和生物活性,阐明枯草芽孢杆菌Bs916防治真菌病害的分子作用机制。【方法】在Bs916全基因组测序基础上,采用LA-PCR方法克隆Fengycin的操纵子Fen;通过生物信息学方法分析Fen操纵子的遗传特征;运用基质辅助解离质谱法测定Fen操纵子合成的脂肽类化合物中同系物的分子量;采用同源重组方法构建Fengycin突变株BSFG;通过抑菌活性和溶血活性试验测定突变株BSFG的生物活性。【结果】克隆到Bs916基因组DNA中全长约37.67 kb的Fen操纵子,含有5个开放阅读框架分别编码FenA、FenB、FenC、FenD和FenE多功能复合酶;与Bs168对应Fen操纵子的同源性为65%。根据该操纵子特征推测其编码的脂肽类化合物为Fengycin;Fen操纵子负责合成的Fengycin包含5个变异体,分属于两类不同同系物。同系物1的质子化峰分子量分别为1 449.8、1 463.9、1 477.9;属于相差1个(-CH2)亚甲基的同系物,一级结构为[cyclo-([cyclo-(Glu-Orn-Tyr-Thr-Glu-Ala-Pro-GlnTyr-β-amino fatty acid)];同系物2的质子化峰分子量分别为1 491.9和1 505.9,也属于相差1个(-CH2)亚甲基的同系物,相对于同系物1其第6位的Ala氨酸残基变为Val氨酸残基。生物活性测定结果表明突变株BSFG抗菌活性相对于野生型菌株Bs916得到显著下降,但溶血活性的变化不明显。【结论】本研究克隆了生防菌Bs916中合成Fengycin的完整操纵子,通过对操纵子生物信息学分析和生化试验鉴定了Fengycin的5种变异体的化学结构,并阐明了脂肽Fengycin是Bs916抗真菌活性的重要因子之一。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 泛革素 操纵子 结构 生物活性
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一株扩展青霉拮抗菌的分离、鉴定及抑菌活性物质 被引量:5
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作者 付瑞敏 于烽 +2 位作者 常慧萍 张红 陈五岭 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1715-1724,共10页
【目的】筛选有效抑制扩展青霉(Penicillium expansum)的拮抗菌,并鉴定其所产抑菌物质的主要种类及相对含量。【方法】从苹果表面分离到拮抗扩展青霉的菌株BA-16,经形态学、生理生化及16S r RNA基因序列分析对该菌进行鉴定;根据已知脂... 【目的】筛选有效抑制扩展青霉(Penicillium expansum)的拮抗菌,并鉴定其所产抑菌物质的主要种类及相对含量。【方法】从苹果表面分离到拮抗扩展青霉的菌株BA-16,经形态学、生理生化及16S r RNA基因序列分析对该菌进行鉴定;根据已知脂肽类抗生素合成相关基因序列设计3对特异性引物对菌株BA-16进行检测,对PCR产物克隆、测序和BLAST分析,采用酸沉淀法从菌株发酵液中制备出抑菌物质粗提液,对活性粗提物进行HPLC和MALDI-TOF-MS分析。【结果】经鉴定,BA-16被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),所得PCR产物经测序和BLAST分析,证实BA-16带有sfp和fen B基因。HPLC和MS结果显示菌株发酵液中含有Fengycin和Surfactin两种脂肽类产物,Fengycin是拮抗扩展青霉的主要因素。【结论】本研究对于苹果采后青霉病的生物防治具有良好的应用开发前景。 展开更多
关键词 扩展青霉 解淀粉芽胞杆菌 丰原素 伊枯草菌素 表面活性素
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枯草芽胞杆菌WY8-7的溶磷、抑菌及促生长作用 被引量:21
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作者 宫安东 孔宪巍 +3 位作者 翟新可 路亚南 文淑婷 张静柏 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期697-705,共9页
[目的]本文旨在筛选兼有溶磷和抑菌作用的微生物菌株,分析其在水体和土壤中的溶磷效果以及对植物生长的作用,同时分析其抑菌活性,鉴定其抑菌物质。[方法]采用稀释涂平板法,从茶园土壤中分离具有溶磷和抑菌作用的菌株WY8-7,通过形态学、... [目的]本文旨在筛选兼有溶磷和抑菌作用的微生物菌株,分析其在水体和土壤中的溶磷效果以及对植物生长的作用,同时分析其抑菌活性,鉴定其抑菌物质。[方法]采用稀释涂平板法,从茶园土壤中分离具有溶磷和抑菌作用的菌株WY8-7,通过形态学、生理生化和分子生物学分析,确定菌株WY8-7的分类地位;检测菌株WY8-7在土壤和培养液中对难溶性无机磷的降解作用;检测其对苗期玉米植株生长的影响;对峙培养法分析菌株WY8-7对不同病原真菌的抑菌作用;超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱鉴定抑菌功能物质。[结果]经鉴定,菌株WY8-7为枯草芽胞杆菌(Bacillussubtilis),在固体培养基、液体培养基和土壤中均可转化难溶性无机磷,提升可溶性磷含量;液体振荡培养20d后,可溶性磷含量达512.77mg·L^-1,为对照的174倍;菌株WY8-7可提升土壤中可溶性磷含量,并促进苗期玉米的生长,与对照组相比,在叶长、叶宽、单叶叶面积、株高和鲜质量等指标均有显著增长(P<0.05),增长率分别达17.68%、22.08%、42.62%、20.34%和20.59%;质谱分析表明,菌株WY8-7可产生伊枯草菌素A和丰原素A两类抑菌物质,对3种真菌具有高效广谱抑菌作用,对禾谷炭疽菌的抑菌率最高,达87.34%。[结论]分离自茶园的枯草芽胞杆菌WY8-7,在土壤和液体振荡培养中可高效转化难溶性无机磷为可溶性磷,促进苗期玉米植株生长,同时WY8-7还可产生伊枯草菌素A和丰原素A两种脂肽类物质,抑制多种病原真菌生长。WY8-7具有高效溶磷和抑菌作用,为新型微生物菌肥的研发提供重要材料。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 溶磷 抑菌活性 促生长 伊枯草菌素A 丰原素
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Bacillus velenzensis S3-1基因组中表面活性素、伊枯草菌素和丰原素合成基因簇的定位与分析 被引量:7
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作者 金清 张蕾 +2 位作者 蒋秋悦 苏翠珠 肖明 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2018年第4期451-457,共7页
通过Gen Bank数据库寻找能产生表面活性素、伊枯草菌素或丰原素并在基因组中其合成基因已得到注释的芽胞杆菌,经过BLAST比对序列初步确定这三类脂肽类抗菌肽的合成基因簇的位置,再运用anti SMASH进行其合成基因簇的最终定位.对表面活性... 通过Gen Bank数据库寻找能产生表面活性素、伊枯草菌素或丰原素并在基因组中其合成基因已得到注释的芽胞杆菌,经过BLAST比对序列初步确定这三类脂肽类抗菌肽的合成基因簇的位置,再运用anti SMASH进行其合成基因簇的最终定位.对表面活性素、伊枯草菌素和丰原素的结构及相关的合成酶结构域进行了预测与分析. 展开更多
关键词 生物信息学 BACILLUS velezensis S3-1 表面活性素 伊枯草菌素 丰原素
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