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FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析
被引量:
3
1
作者
殷长传
颜学恒
+2 位作者
郑佐华
黄啸宇
毛裕民
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期225-228,共4页
从嗜热细菌FD3009中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶(FD-TRT),逆转录反应在65℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体rRNA为模板,以与255和18S rRNA匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物...
从嗜热细菌FD3009中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶(FD-TRT),逆转录反应在65℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体rRNA为模板,以与255和18S rRNA匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了FD-TRT的最适反应条件: 25mmol/L Tris-HCl(pH 8.5,25℃),25 mmol/L(NH4)2SO4,2 mmol/L MnCl2,100 μg/ml明胶.5 unit RNasin,250 mmol/L 4种 dNTP, 1μCi3 H-dCTP, 12ug RNA,25 pmol引物,并在此条件下测得 FD-TRT和 Taq DNA 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为0.056,0.0045.
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关键词
耐热逆转录酶
fd-trt
DNA
逆转录反应
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职称材料
题名
FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析
被引量:
3
1
作者
殷长传
颜学恒
郑佐华
黄啸宇
毛裕民
出处
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期225-228,共4页
基金
国家自然科学基金
文摘
从嗜热细菌FD3009中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶(FD-TRT),逆转录反应在65℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体rRNA为模板,以与255和18S rRNA匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了FD-TRT的最适反应条件: 25mmol/L Tris-HCl(pH 8.5,25℃),25 mmol/L(NH4)2SO4,2 mmol/L MnCl2,100 μg/ml明胶.5 unit RNasin,250 mmol/L 4种 dNTP, 1μCi3 H-dCTP, 12ug RNA,25 pmol引物,并在此条件下测得 FD-TRT和 Taq DNA 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为0.056,0.0045.
关键词
耐热逆转录酶
fd-trt
DNA
逆转录反应
Keywords
thermostable reverse transcriptase
reverse transcription at high temperature
enzyme activity assay
分类号
Q783 [生物学—分子生物学]
Q55 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析
殷长传
颜学恒
郑佐华
黄啸宇
毛裕民
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
1998
3
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