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耐热碱性磷酸酯酶的基因克隆及在大肠杆菌中的表达
被引量:
8
1
作者
袁有忠
盛小禹
+2 位作者
吕鸿雁
佟石
毛裕民
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1998年第4期375-380,共6页
以pUC118质粒为载体,以E.coil TGl为受体,构建了产耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)的菌株Thermus sp.FD3041的染色体基因文库。在包含1.2万个转化子的文库中,90%的转化子插入有3~10kb的外源DNA片段。用菌落原位碱性磷酸酯酶显色法从文库中...
以pUC118质粒为载体,以E.coil TGl为受体,构建了产耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)的菌株Thermus sp.FD3041的染色体基因文库。在包含1.2万个转化子的文库中,90%的转化子插入有3~10kb的外源DNA片段。用菌落原位碱性磷酸酯酶显色法从文库中筛选到5个阳性克隆。对其中的1个克隆(pTAP362)所产的TAP进行了研究,发现克隆的TAP与出发菌株所产的TAP的热稳定性、最适反应温度和最适pH等性质都相同。通过做物理图谱和测定部分缺失的质粒的TAP活性,将TAP基因定位于2kb的BamHⅠ-HindⅢ DNA片段上。模拟PCR实验表明该酶可用于PCR扩增产物的检出。
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关键词
基因克隆
表达
大肠杆菌
fd-tap
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职称材料
耐热性碱性磷酸酯酶作为非放射性标记物的研究
被引量:
2
2
作者
朱运良
盛小禹
+2 位作者
董海
周宗祥
毛裕民
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第6期805-807,共3页
通过生物素与亲和素-酶复合物系统或地高辛与抗地高辛-酶复合物系统可把酶间接标记到探针上.Renz等通过不同的化学方法直接把酶标记到探针上[1~3].耐热性碱性磷酸酯酶FD-TAP(thermostablealkali...
通过生物素与亲和素-酶复合物系统或地高辛与抗地高辛-酶复合物系统可把酶间接标记到探针上.Renz等通过不同的化学方法直接把酶标记到探针上[1~3].耐热性碱性磷酸酯酶FD-TAP(thermostablealkalinephosphatase)具有耐...
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关键词
碱性磷酸酯酶
fd-tap
非放射性标记物
耐热性
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职称材料
基于PSD-FDS的内蒙古电网中长期动态仿真分析
3
作者
武海燕
张爱军
+4 位作者
邢华栋
刘石川
王立强
雷轲
郭裕
《内蒙古电力技术》
2020年第4期37-42,共6页
基于全过程动态仿真软件PSD-FDS,在内蒙古电网仿真数据中加入典型中长期模型,即火电厂锅炉及其调速器模型、发电机过励磁限制器(OEL)和有载调压变压器(OLTC)模型,分析其对系统稳定性的影响。仿真结果显示,加入锅炉及其调速器模型后,机...
基于全过程动态仿真软件PSD-FDS,在内蒙古电网仿真数据中加入典型中长期模型,即火电厂锅炉及其调速器模型、发电机过励磁限制器(OEL)和有载调压变压器(OLTC)模型,分析其对系统稳定性的影响。仿真结果显示,加入锅炉及其调速器模型后,机组的机械输出功率跟随系统需求的能力减弱,更好地模拟了火力发电机组的出力特性;OEL正确动作虽达到了保护发电机的目的,但却使相关节点电压明显跌落;加入OLTC后,负荷侧端电压得到提高,但在无功功率储备较不充裕的区域,分接头动作会加重系统无功缺额。对此提出提高过励恢复系数及锅炉汽包存储时间常数、合理设置有载调压变压器参考电压、加装无功补偿装置等提高电网中长期电压稳定性的措施。
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关键词
内蒙古电网
中长期模型
锅炉
过励磁限制器
有载调压变压器
动态仿真
PSD-FDS软件
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职称材料
耐热碱性磷酸酯酶基因的亚克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
2
4
作者
袁有忠
佟石
+3 位作者
吕鸿雁
周宗祥
盛小禹
毛裕民
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期146-150,共5页
根据耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)基因的酶切图谱和DNA序列,分别在基因的起始密码子和终止密码子处设计了2个突变引物.引物的5’端分别带有Nde I和BamHI酶切位点.通过PCR从质粒pTAP118B中扩增获得了...
根据耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)基因的酶切图谱和DNA序列,分别在基因的起始密码子和终止密码子处设计了2个突变引物.引物的5’端分别带有Nde I和BamHI酶切位点.通过PCR从质粒pTAP118B中扩增获得了FD-TAP基因的全序列.经过酶切将基因亚克隆于高表达载体pJLA503.重组质粒pTAP503F的FD-TAP在大肠杆菌Mph44中的表达量比pTAP118B提高了约10倍.重组酶和原始菌株所产的天然酶耐热性无明显差异.
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关键词
碱性磷酸酯酶
亚克隆
基因表达
fd-tap
基因
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职称材料
题名
耐热碱性磷酸酯酶的基因克隆及在大肠杆菌中的表达
被引量:
8
1
作者
袁有忠
盛小禹
吕鸿雁
佟石
毛裕民
机构
复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室
出处
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1998年第4期375-380,共6页
基金
国家自然科学基金(39380012)~~
文摘
以pUC118质粒为载体,以E.coil TGl为受体,构建了产耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)的菌株Thermus sp.FD3041的染色体基因文库。在包含1.2万个转化子的文库中,90%的转化子插入有3~10kb的外源DNA片段。用菌落原位碱性磷酸酯酶显色法从文库中筛选到5个阳性克隆。对其中的1个克隆(pTAP362)所产的TAP进行了研究,发现克隆的TAP与出发菌株所产的TAP的热稳定性、最适反应温度和最适pH等性质都相同。通过做物理图谱和测定部分缺失的质粒的TAP活性,将TAP基因定位于2kb的BamHⅠ-HindⅢ DNA片段上。模拟PCR实验表明该酶可用于PCR扩增产物的检出。
关键词
基因克隆
表达
大肠杆菌
fd-tap
Keywords
Thermostable alkaline phosphatase
Gene cloning
Expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
耐热性碱性磷酸酯酶作为非放射性标记物的研究
被引量:
2
2
作者
朱运良
盛小禹
董海
周宗祥
毛裕民
机构
复旦大学遗传学研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第6期805-807,共3页
文摘
通过生物素与亲和素-酶复合物系统或地高辛与抗地高辛-酶复合物系统可把酶间接标记到探针上.Renz等通过不同的化学方法直接把酶标记到探针上[1~3].耐热性碱性磷酸酯酶FD-TAP(thermostablealkalinephosphatase)具有耐...
关键词
碱性磷酸酯酶
fd-tap
非放射性标记物
耐热性
Keywords
Thermostable alkaline phosphatase, Hybridization, Non radioactive labeling, Dot blot
分类号
Q783 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
基于PSD-FDS的内蒙古电网中长期动态仿真分析
3
作者
武海燕
张爱军
邢华栋
刘石川
王立强
雷轲
郭裕
机构
内蒙古电力科学研究院
内蒙古自治区电力系统智能化电网仿真企业重点实验室
出处
《内蒙古电力技术》
2020年第4期37-42,共6页
基金
内蒙古电力(集团)有限责任公司科技项目“蒙西电网全过程动态仿真平台建设”(2018-12)。
文摘
基于全过程动态仿真软件PSD-FDS,在内蒙古电网仿真数据中加入典型中长期模型,即火电厂锅炉及其调速器模型、发电机过励磁限制器(OEL)和有载调压变压器(OLTC)模型,分析其对系统稳定性的影响。仿真结果显示,加入锅炉及其调速器模型后,机组的机械输出功率跟随系统需求的能力减弱,更好地模拟了火力发电机组的出力特性;OEL正确动作虽达到了保护发电机的目的,但却使相关节点电压明显跌落;加入OLTC后,负荷侧端电压得到提高,但在无功功率储备较不充裕的区域,分接头动作会加重系统无功缺额。对此提出提高过励恢复系数及锅炉汽包存储时间常数、合理设置有载调压变压器参考电压、加装无功补偿装置等提高电网中长期电压稳定性的措施。
关键词
内蒙古电网
中长期模型
锅炉
过励磁限制器
有载调压变压器
动态仿真
PSD-FDS软件
Keywords
Inner Mongolia power grid
mid-and-long term model
boiler
over-excitation limiter
on-load tap changing transformer
dynamic simulation
PSD-FDS software
分类号
TM712 [电气工程—电力系统及自动化]
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职称材料
题名
耐热碱性磷酸酯酶基因的亚克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
2
4
作者
袁有忠
佟石
吕鸿雁
周宗祥
盛小禹
毛裕民
出处
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期146-150,共5页
基金
国家自然科学基金
文摘
根据耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)基因的酶切图谱和DNA序列,分别在基因的起始密码子和终止密码子处设计了2个突变引物.引物的5’端分别带有Nde I和BamHI酶切位点.通过PCR从质粒pTAP118B中扩增获得了FD-TAP基因的全序列.经过酶切将基因亚克隆于高表达载体pJLA503.重组质粒pTAP503F的FD-TAP在大肠杆菌Mph44中的表达量比pTAP118B提高了约10倍.重组酶和原始菌株所产的天然酶耐热性无明显差异.
关键词
碱性磷酸酯酶
亚克隆
基因表达
fd-tap
基因
Keywords
thermostable alkaline phosphatase
subcloning
expression
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
耐热碱性磷酸酯酶的基因克隆及在大肠杆菌中的表达
袁有忠
盛小禹
吕鸿雁
佟石
毛裕民
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1998
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
耐热性碱性磷酸酯酶作为非放射性标记物的研究
朱运良
盛小禹
董海
周宗祥
毛裕民
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
基于PSD-FDS的内蒙古电网中长期动态仿真分析
武海燕
张爱军
邢华栋
刘石川
王立强
雷轲
郭裕
《内蒙古电力技术》
2020
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
耐热碱性磷酸酯酶基因的亚克隆及其在大肠杆菌中的表达
袁有忠
佟石
吕鸿雁
周宗祥
盛小禹
毛裕民
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
1998
2
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职称材料
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