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B亚型禽偏肺病毒可视化荧光RT-LAMP方法的建立 被引量：1
1
作者 赵俊柯 谢芝勋 +7 位作者 余丹 张艳芳 谢志勤 范晴 尹文巧 杨冰怡 黄青红 喻华英 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期92-98,共7页
为了能快速鉴别B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus B,aMPVB)与其他禽类常见病毒,试验基于aMPVB F基因的保守区域设计一套特异性环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplilication,LAMP)引物,包括外引物F3和B3,内引物FIP(F1c+... 为了能快速鉴别B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus B,aMPVB)与其他禽类常见病毒,试验基于aMPVB F基因的保守区域设计一套特异性环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplilication,LAMP)引物,包括外引物F3和B3,内引物FIP(F1c+F2)和BIP(B1c+B2),环引物Floop和Bloop,其中FIP的5′端用淬灭基团BHQ2标记,同时在F3、B3之间引入1条探针FD,其3′端用CY5荧光基团标记,建立可视化荧光RT-LAMP方法,对该方法进行反应条件优化及特异性、敏感性检测,并利用该方法对临床样品进行检测。结果表明:建立的可视化荧光RTLAMP方法的最佳探针复合物浓度为0.32μmol/L,最佳反应温度为63℃;该方法仅能检测到aMPVB,其他17种禽类常见病毒均呈阴性;对aMPVB的最低检出限为1.2×10^(2)copies/μL,敏感性是普通PCR方法(1.2×10^(3)copies/μL)的10倍。该方法的反应时间为60 min,约为普通PCR方法的一半,大大提高了检测效率。利用该方法对采自广西地区的23份临床样本进行检测,结果与普通PCR方法完全一致。说明该方法能够快速、准确地检测aMPVB,特异性好,敏感性高,具有良好的实际应用价值。 展开更多
关键词 禽偏肺病毒 荧光RT-LAMP 可视化 fd探针 检测方法
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乳腺导管内乳头状瘤的外科治疗 被引量：6
2
作者 王靖 徐晓洲 方仪 《中国微创外科杂志》 CSCD 2008年第4期360-361,共2页
目的探讨治疗乳腺导管内乳头状瘤的有效方法。方法对68例乳头溢液未扪及肿物患者采用乳管镜置针定位肿瘤位置,选择合适切口切除病变。结果68例肿瘤均完整切除,包括4例恶性行局部扩大切除。术后乳房外形无明显改变。68例随访5～24个月,... 目的探讨治疗乳腺导管内乳头状瘤的有效方法。方法对68例乳头溢液未扪及肿物患者采用乳管镜置针定位肿瘤位置,选择合适切口切除病变。结果68例肿瘤均完整切除,包括4例恶性行局部扩大切除。术后乳房外形无明显改变。68例随访5～24个月,中位数14个月。1例不同导管出现溢液,余无复发。结论经乳管镜置针明确肿瘤位置切除导管内乳头状瘤准确可靠。 展开更多
关键词 乳腺导管内乳头状瘤 乳管镜置针 定位 切口选择
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二重荧光RT-LAMP鉴别检测禽呼肠孤病毒和鸡滑液囊支原体 被引量：4
3
作者 曾婷婷 谢芝勋 +9 位作者 谢丽基 王盛 谢志勤 黄娇玲 万丽军 任红玉 张艳芳 张民秀 范晴 邓显文 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第9期66-75,共10页
本研究旨在建立一套通过添加荧光探针FD,反应后可使用成像仪直接观测结果的鉴别检测禽呼肠孤病毒(ARV)和鸡滑液囊支原体(MS)的二重荧光RT-LAMP检测方法。根据ARV和MS的保守基因片段,设计了2套LAMP引物,并各添加1条FD荧光探针,2条FD探针... 本研究旨在建立一套通过添加荧光探针FD,反应后可使用成像仪直接观测结果的鉴别检测禽呼肠孤病毒(ARV)和鸡滑液囊支原体(MS)的二重荧光RT-LAMP检测方法。根据ARV和MS的保守基因片段,设计了2套LAMP引物,并各添加1条FD荧光探针,2条FD探针分别标记CY5和6-FAM荧光基团。结果:ARV阳性对照在成像仪下发出红色荧光,MS阳性对照发出绿色荧光,双重模板经过图像融合后为黄色荧光;特异性结果显示,该二重荧光RT-LAMP检测方法仅能扩增ARV和MS两种病原,对其他常见病原如鸡毒支原体(MG)、禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)等无扩增反应;敏感性结果显示,该二重荧光RT-LAMP检测方法对ARV和MS的最低检测量分别为1.7×10^(2)copies和1.9×10^(2)copies;使用该方法检测40份临床样品,检出率与本实验室前期建立的二重荧光RT-PCR检测结果相同。综上,该二重荧光RT-LAMP检测方法可特异、敏感地鉴别检测ARV和MS,通过添加FD荧光探针和成像仪观测结果,为不同条件的实验室提供了新的检测手段。 展开更多
关键词 fd荧光探针 二重荧光RT-LAMP 禽呼肠孤病毒 鸡滑液囊支原体
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全镀银膜四面锥尖光增强的数值求解
4
作者 姜宇驰 《常熟理工学院学报》 2011年第2期39-41,共3页
利用依赖于频率的时域有限差分法(FD)2TD计算了入射平面波波长分别为355nm和800nm情况下,从四面锥尖底面入射和侧面入射时锥尖所在平面光增强大小,并对结果进行了比较和分析.结果表明,较大波长的入射光从锥底面入射时能够获得较大的光... 利用依赖于频率的时域有限差分法(FD)2TD计算了入射平面波波长分别为355nm和800nm情况下,从四面锥尖底面入射和侧面入射时锥尖所在平面光增强大小,并对结果进行了比较和分析.结果表明,较大波长的入射光从锥底面入射时能够获得较大的光增强和纳米尺度的光斑. 展开更多
关键词 光增强 (fd)2TD 四面锥尖 光斑
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