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恶性疟原虫FCC-1/HN株裂殖子表面抗原2(MSA-2)基因在卡介苗BCG中的表达 被引量：7
1
作者 郑春福 吴少庭 +2 位作者 陈雅棠 高世同 林敏 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2002年第4期193-197,共5页
目的 :裂殖子表面抗原 2基因 (Merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )是恶性疟原虫的一种保护性抗原 ,为研究其重组BCG疫苗的保护作用 ,首先探讨携带有恶性疟原虫FCC 1 HN株MSA2基因的重组分枝杆菌-大肠杆菌穿梭质粒pBCG MSA2在卡介苗 (Bac... 目的 :裂殖子表面抗原 2基因 (Merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )是恶性疟原虫的一种保护性抗原 ,为研究其重组BCG疫苗的保护作用 ,首先探讨携带有恶性疟原虫FCC 1 HN株MSA2基因的重组分枝杆菌-大肠杆菌穿梭质粒pBCG MSA2在卡介苗 (BacillusCalmetteGuerin ,BCG)中的表达情况。方法 :采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG MSA2导入BCG中 ,通过卡那霉素抗性筛选并经PCR鉴定的重组BCG培养于Middlebrook 7H9Broth (M7H9)培养基 ,并添加 10 %M7H9EnrichmentADC和 0 0 5 %Tween80 ,4周后于 4 5℃进行诱导表达 ,表达产物进行十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (Sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis,SDS PAGE)及免疫印迹 (Western blot)分析。结果 :SDS PAGE及Western blot分析结果均显示在约 31kDa的位置上可见明显的蛋白条带 ,并与MSA2基因编码序列推断的分子量相符。结论 :恶性疟原虫裂殖子表面抗原 2可在BCG中表达 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 fcc-1/hn株 裂殖子 表面抗原2 MSA-2 基因 卡介苗BCG 表达 穿梭质粒
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恶性疟原虫FCC-1/HN株不同期基因重组质粒混合接种小鼠后的免疫反应 被引量：1
2
作者 吕芳丽 余新炳 陈海峰 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期28-32,共5页
寻找有效的抗恶性疟原虫混合基因疫苗 ,探讨其在宿主体内的免疫反应。将恶性疟原虫重组质粒 pc DNA 3-EBA175 / HRP 经骨骼肌途径单独注射或与有性期阶段的重组质粒 pc DNA3- Pfs2 5混合注射免疫 Balb/ c小鼠。对小鼠的骨骼肌进行预处... 寻找有效的抗恶性疟原虫混合基因疫苗 ,探讨其在宿主体内的免疫反应。将恶性疟原虫重组质粒 pc DNA 3-EBA175 / HRP 经骨骼肌途径单独注射或与有性期阶段的重组质粒 pc DNA3- Pfs2 5混合注射免疫 Balb/ c小鼠。对小鼠的骨骼肌进行预处理 ,即于注射前 7d在左后肢股四头肌注射 0 .5 %盐酸布比卡因 5 0μl,注射深度为 2 m m。观察免疫后不同时间点小鼠血清 Ig G抗体滴度、脾淋巴细胞增殖反应、CD4+ / CD8+ T细胞亚群比率和 NK细胞杀伤活性的变化。结果显示 ,pc DNA3- EBA 175 / HRP 单独肌肉注射或与 pc DNA3- Pfs2 5混合肌肉注射免疫小鼠 ,均可见血清 Ig G抗体滴度增高、经恶性疟原虫抗原刺激后的特异性 T淋巴细胞增殖反应增强、CD4+ / CD8+ T细胞比率下降以及 NK细胞杀伤活性增强 ;加强免疫注射机体的免疫反应能增强。提示肌肉注射 DNA疫苗为一有效的免疫途径 ,采用编码恶性疟原虫两个基因的重组质粒单独免疫或与编码不同阶段基因的重组质粒混合免疫小鼠 ,均能诱导明显的体液免疫反应、细胞免疫和 展开更多
关键词 恶性疟原虫 fcc-1/hn 基因重组 免疫疗法
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恶性疟原虫FCC-1/HN株pcDNA3-EBA175/HRPⅡ重组质粒直接注射小鼠骨骼肌的体内表达
3
作者 吕芳丽 余新炳 +3 位作者 陈海峰 方建民 罗树红 方政 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第3期161-164,共4页
为观察恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 pc DNA3- EBA175 / HRP 重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达。BAL B/ c小鼠分为 3组 ,1组 (实验组 )经后腿股四头肌注射重组质粒 pc DNA3- EBA175 / HRP 10 0 μg;2组 (实验对照组 )注射空白质粒 ... 为观察恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 pc DNA3- EBA175 / HRP 重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达。BAL B/ c小鼠分为 3组 ,1组 (实验组 )经后腿股四头肌注射重组质粒 pc DNA3- EBA175 / HRP 10 0 μg;2组 (实验对照组 )注射空白质粒 pc DNA3 10 0 μg;3组 (正常对照组 )注射 PBS(p H7.4) 10 0 μl。每隔 2 0 d加强注射 ,于第 1次接种后 2 0 d和第 2次接种后 10 d取小鼠双侧股四头肌免疫组化染色 ,于第 3次接种后 40 d取小鼠各组织作聚合酶链反应 (PCR)检测目的基因。结果显示 ,(1) 1组经重组质粒免疫小鼠血清、恶性疟原虫抗原免疫小鼠血清、恶性疟原虫人工合成九肽 HRP 单克隆抗体及抗恶性疟原虫全虫抗原单克隆抗体作用 ,免疫组化染色后 ,在注射部位肌肉组织的肌膜、肌间隙处见到褐色分泌颗粒 ;1组未注射侧肌肉组织、2组及 3组均未见褐色颗粒。 (2 )采用PCR从 1组肌肉、心脏、肝脏、肺脏和肾脏组织扩增出目的基因 EBA175和 HRP ,2组及 3组相应组织均未扩增出目的基因片段。本研究为疟疾多基因 展开更多
关键词 恶性疟原虫fcc-1/hn株 pcDNA3-EBA175/HRPⅡ
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恶性疟原虫FCC-1/HN株环子孢子蛋白基因片段的亚克隆及表达 被引量：4
4
作者 郑春福 吴少庭 +3 位作者 陈雅棠 高世同 林敏 占国清 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期81-83,共3页
目的　构建恶性疟原虫FCC 1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒 pBK CSP ,在大肠杆菌中进行表达 ,并进行鉴定。方法　采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌 分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 .6 /CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段 ,将其亚克隆于... 目的　构建恶性疟原虫FCC 1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒 pBK CSP ,在大肠杆菌中进行表达 ,并进行鉴定。方法　采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌 分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 .6 /CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段 ,将其亚克隆于 pBK CMV真核表达载体 ,构建重组真核表达质粒 pBK CSP。经IPTG诱导 ,重组质粒在大肠杆菌DH5α中进行表达 ,并进行SDS PAGE及免疫印迹分析。结果　从 pBCG5 .6 /CSP中分离出CSP基因片段 ,成功构建 pBK CSP重组质粒 ;SDS PAGE及免疫印迹分析结果显示特异性蛋白条带的相对分子质量约为 42 0 0 0。结论　从pBCG5 .6 /CSP中成功分离出CSP基因片段 ,并成功构建 pBK CSP重组质粒 ,诱导表达CSP非融合蛋白 。 展开更多
关键词 恶生疟原虫 环子孢子蛋白 严克隆 基因表达 fcc-1/hn株
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体外连续培养FCC-1/HN株恶性疟原虫红内期超微结构改变的透射电镜观察
5
作者 苏天成 严继舟 李传明 《湖北医学院学报》 1989年第3期239-244,共6页
将1979年正式定名建株到现在,其间经历了9年反复冻存、复苏、培养的FCC-1/HN株恶性疟原虫,用培养效果明显优于成人血清的10%脐带血清进行体外培养。60天后取培养物用透射电镜观察了疟原虫和其宿主细胞——红细胞近期的超微结构情况。观... 将1979年正式定名建株到现在,其间经历了9年反复冻存、复苏、培养的FCC-1/HN株恶性疟原虫,用培养效果明显优于成人血清的10%脐带血清进行体外培养。60天后取培养物用透射电镜观察了疟原虫和其宿主细胞——红细胞近期的超微结构情况。观察结果表明与以往已报道的同株疟原虫相比,除见到了仍有相似之处外;还发现有某些不同的特征性改变:①疟原虫寄生的红细胞,其表面结节完全消失;也未见到典型的茂氏裂隙。②疟原虫虫体胞质内空泡结构和胞质裂隙增多。提示:疟原虫和被寄生的红细胞的超微结构在外界环境条件改变时,也会随之发生一些变化。这些变化,应引起我们今后在以体外培养研究疟原虫的生物学、生理生化和药物筛选中的重视,尤其是免疫学的重视。 展开更多
关键词 疟原虫 超微结构 fcc-1/hn株
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废餐油催化裂化制备生物燃料的工艺研究 被引量：1
6
作者 王彦 曹阳 李进 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期151-154,共4页
利用催化裂化方法,以废餐油为原料,研究了不同反应温度、不同催化剂和掺炼不同比例的海南炼化减三线油对制备生物燃料的影响。采用固定流化床装置进行催化裂化反应,测定生成油组分和含量,再生烟气,PONA和炼厂气中各组分的含量。实验结... 利用催化裂化方法,以废餐油为原料,研究了不同反应温度、不同催化剂和掺炼不同比例的海南炼化减三线油对制备生物燃料的影响。采用固定流化床装置进行催化裂化反应,测定生成油组分和含量,再生烟气,PONA和炼厂气中各组分的含量。实验结果表明:在废餐油催化试验中,Endurance比CGP-1HN的产物轻质油、总收率高,分别为65%和97%;CGP-1HN液化气收率较高为33%,且其催化活性更为稳定,转化率基本保持在98%。反应温度对催化剂为Endurance的影响较明显,而对催化剂CGP-1HN,反应温度没有明显的影响。海南炼化减三线油中掺入废餐油对海南炼化减三线油的催化裂化产品分布无明显影响,故废餐油是一种良好的催化裂化原料油。 展开更多
关键词 催化裂化 生物燃料 废餐油 CGP-1hn催化剂 Endurance催化剂
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