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外泌体miR-210-3p通过靶向FBXO31促进宫颈癌的化疗耐药和干细胞特性
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作者 唐晓玲 谢帮芳 黄海龙 《昆明医科大学学报》 2025年第7期54-64,共11页
目的探讨外泌体中的microRNA(miRNA)miR-210-3p在宫颈癌(cervical cancer,CC)化疗耐药及干细胞特性形成中的作用,并揭示其靶向F-盒蛋白31(F-box protein 31,FBXO31)蛋白的潜在机制。方法以顺铂敏感Hela细胞和顺铂耐药HeLa/DDP细胞为对象... 目的探讨外泌体中的microRNA(miRNA)miR-210-3p在宫颈癌(cervical cancer,CC)化疗耐药及干细胞特性形成中的作用,并揭示其靶向F-盒蛋白31(F-box protein 31,FBXO31)蛋白的潜在机制。方法以顺铂敏感Hela细胞和顺铂耐药HeLa/DDP细胞为对象,通过超速离心法提取HeLa外泌体,并通过PKH26红色荧光探针验证HeLa/DDP细胞对外泌体的摄取。将NC inhibitor、miR-210-3p inhibitor单独或联合si-NC、siFBXO31转入HeLa细胞。转染24 h后,提取外泌体,并与HeLa/DDP细胞共培养48 h。然后将HeLa/DDP细胞分为五组:Ctrl组(PBS空白对照)、NC inhibitor组、miR-210-3p inhibitor组、miR-210-3p inhibitor+si-NC组和miR-210-3p inhibitor+si-FBXO31组。RT-qPCR检测miR-210-3p和FBXO31表达水平;采用MTT法检测IC50;瘤球形成实验检测干细胞特性;Western Blot检测FBXO31和干细胞标志物的表达水平;双荧光素酶检测miR-210-3p与FBXO31靶向关系;裸鼠移植瘤检测外泌体miR-210-3p对宫颈癌体内转移的影响。结果与人正常宫颈上皮细胞HCeEpiC相比,miR-210-3p在宫颈癌细胞系HeLa、HT3、C33A和Caski显著高表达(P<0.05),而FBXO31显著低表达(P<0.05)。与HeLa细胞相比,HeLa/DDP细胞IC50和miR-210-3p的表达水平显著增加(P<0.05),且HeLa的外泌体可被HeLa/DDP细胞摄取。与NC inhibitor组相比,miR-210-3p inhibitor组的miR-210-3p、Oct-4、SOX2和NANOG表达水平、IC_(50)显著降低(P<0.05),而FBXO31表达显著增加(P<0.05)。与miR-210-3p inhibitor+si-NC组相比,miR-210-3p inhibitor+si-FBXO31组的FBXO31表达显著降低(P<0.05),IC_(50)、Oct-4、SOX2和NANOG表达水平显著增加(P<0.05)。与对照组和空载组相比,miR-210-3p干扰组的肿瘤重量和肿瘤体积显著降低(P<0.05)。结论外泌体miR-210-3p通过靶向抑制FBXO3,从而促进CC细胞的对化疗药物DDP耐药性和干细胞特性。 展开更多
关键词 外泌体 miR-210-3p 化疗耐药 干细胞特性 fbxo31 宫颈癌
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FBXO31、Cyclin D1在胃癌中的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 田钰 杨桂芳 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期707-709,732,共4页
目的:研究胃癌组织中FBXO31与Cyclin D1的表达以及二者与临床资料的相关性。方法:收集112例胃切除术患者胃癌组织及正常胃组织,采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测组织中FBXO31和Cyclin D1的表达,分析二者与... 目的:研究胃癌组织中FBXO31与Cyclin D1的表达以及二者与临床资料的相关性。方法:收集112例胃切除术患者胃癌组织及正常胃组织,采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测组织中FBXO31和Cyclin D1的表达,分析二者与胃癌临床病理特征的关系以及两者表达的相关性。结果:胃癌组织中FBXO31和Cyclin D1的阳性表达率分别为35.7%和75.9%,与癌旁正常组织中FBXO31和Cyclin D1的表达(分别为73.2%和26.8%)具有显著性差异(P均<0.001)。FBXO31和Cyclin D1在胃癌组织的表达与有无淋巴结转移、TNM分期以及肿瘤大小显著相关(P均<0.05)。且Cyclin D1表达与有无腹膜播散亦显著相关(P<0.05)。但二者的表达与患者年龄、性别并无相关性。FBXO31和Cyclin D1的表达呈显著负相关性(P<0.001,!=0.58)。结论:胃癌组织中FBXO31表达降低,Cyclin D1表达增高,二者在胃癌的发生、发展、侵袭和转移进程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 胃癌 fbxo31蛋白 细胞周期调节蛋白D1 免疫组化
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FBXO31对人宫颈癌细胞C-33A增殖的影响及其在人宫颈癌组织中的表达和临床意义研究 被引量:1
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作者 秦晓洋 张伟杰 《国际妇产科学杂志》 CAS 2020年第3期350-353,I0003,共5页
目的:分析FBXO31(F-box only protein 31)对人宫颈癌细胞C-33A增殖的影响及其在人宫颈癌组织中的表达与临床因素间的相关性,探究其在人宫颈癌中的作用,以期寻找新的分子靶点。方法:MTT法分别检测不同浓度、不同时间时FBXO31作用下的C-33... 目的:分析FBXO31(F-box only protein 31)对人宫颈癌细胞C-33A增殖的影响及其在人宫颈癌组织中的表达与临床因素间的相关性,探究其在人宫颈癌中的作用,以期寻找新的分子靶点。方法:MTT法分别检测不同浓度、不同时间时FBXO31作用下的C-33A细胞增殖抑制率。免疫组织化学法及蛋白质印迹(Western blotting)法检测70例人宫颈癌组织及癌旁组织中FBXO31的表达,并分析其与宫颈癌临床病理特征间的关系。结果:MTT法示,FBXO31作用后,C-33A细胞增殖受到抑制,且呈现浓度和时间依赖性。免疫组织化学法示,FBXO31主要表达于细胞核,人宫颈癌组织中FBXO31的阳性表达率(17/70,24.29%)明显低于癌旁组织(60/70,85.71%),差异有统计学意义(χ2=74.035,P<0.001)。Western blotting法示,人宫颈癌组织中FBXO31表达量明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);进一步分析示FBXO31在宫颈癌组织中的表达与年龄、肿瘤大小及病理学类型无关,而与国际妇产科联盟(FIGO)分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05)。结论:FBXO31可能作为一种抑癌基因而抑制人宫颈癌C-33A细胞增殖,且呈时间及浓度依赖性。其在人宫颈癌组织呈低表达,且与宫颈癌临床特征关系密切,可能成为宫颈癌治疗新的分子靶点。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 细胞增殖 免疫组织化学 存活率分析 fbxo31
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FBXO31基因对宫颈癌细胞增殖的影响 被引量:2
4
作者 杨蕾 徐福霞 程玲慧 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期3746-3750,共5页
为了探讨FBXO31在宫颈癌中的表达情况及其对宫颈癌细胞增殖的影响及其可能机制,本研究采用实时定量PCR法检测FBXO31在宫颈癌组织中的表达水平;MTT法检测Hela细胞增殖能力;流式细胞术检测Hela细胞周期分布;Western blotting检测Hela细胞F... 为了探讨FBXO31在宫颈癌中的表达情况及其对宫颈癌细胞增殖的影响及其可能机制,本研究采用实时定量PCR法检测FBXO31在宫颈癌组织中的表达水平;MTT法检测Hela细胞增殖能力;流式细胞术检测Hela细胞周期分布;Western blotting检测Hela细胞FBXO31、β-catenin、CyclinD1和c-Myc蛋白的表达水平。研究结果表明,FBXO31在宫颈癌组织中表达明显下调(p<0.05)。FBXO31过表达能够明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖能力。与空载质粒组比较,过表达FBXO31组的G1期细胞数显著增加,S期细胞数明显降低(p<0.05)。本研究还发现FBXO31过表达能明显下调β-catenin蛋白、cyclin D1和c-Myc蛋白水平(p<0.05)。本研究结论表明,FBXO31基因在宫颈癌中低表达;过表达FBXO31基因可通过抑制Wnt/β-catenin通路从而抑制宫颈癌细胞增殖。 展开更多
关键词 fbxo31基因 细胞增殖 WNT/Β-CATENIN通路 宫颈癌
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FBXO31对肺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响 被引量:1
5
作者 史亚鹏 何惠娟 +3 位作者 杨拉维 王亚红 黄海丽 姚卫民 《广东医学院学报》 2016年第4期351-356,共6页
目的探讨FBXO31基因对肺腺癌细胞系A549增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响。方法通过脂质体转染法将FBXO31表达质粒及FBXO31 si RNA序列分别转染肺癌A549细胞,用Western blot、MTT、平板克隆、划痕和Transwell实验分别检测A549细胞... 目的探讨FBXO31基因对肺腺癌细胞系A549增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响。方法通过脂质体转染法将FBXO31表达质粒及FBXO31 si RNA序列分别转染肺癌A549细胞,用Western blot、MTT、平板克隆、划痕和Transwell实验分别检测A549细胞中FBXO31蛋白表达、细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力。结果 Western blot显示FBXO31表达质粒转染上调A549细胞中FBXO31蛋白表达,而转染si RNA下调FBXO31蛋白表达。FBXO31基因过表达增强A549细胞增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力,而FBXO31基因沉默抑制细胞增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力(P<0.01)。结论 FBXO31基因可促进肺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 fbxo31 肺癌 增殖 侵袭
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The Significance of the Expression of FBXO31 in Gastric Cancer
6
作者 Tomoya Sudo Ryunosuke Kogo +15 位作者 Naohiro Nishida Keisuke Takahahi Genta Sawada Masahisa Ishibashi Junji Kurashige Ryutaro Uchi Tae Matsumura Hiroki Ueo Kousuke Mima Sayuri Akiyoshi Keishi Sugimachi Kouhei Shibata Hiromasa Fujita Kazuo Shirouzu Masaki Mori Koshi Mimori 《Journal of Cancer Therapy》 2013年第1期75-79,共5页
Loss of Heterozygosity (LOH) is commonly considered to be one of a reason when some genes lose their function. Numbers of tumor suppressor genes are existing on the LOH lesion and chromosome 16q24 had been reported as... Loss of Heterozygosity (LOH) is commonly considered to be one of a reason when some genes lose their function. Numbers of tumor suppressor genes are existing on the LOH lesion and chromosome 16q24 had been reported as a LOH region in gastric cancer. Little is known about what kind of tumor suppressor genes locates around the position. F-box protein, (FBXO31) is a candidate tumor suppressor gene encoded in chromosome 16q24.3 and LOH of the gene was reported in breast cancer, hepatocellular carcinoma and ovarian cancer but the status of FBXO31 was not analyzed in gastric cancer so far. One hundred twenty-seven pairs of tumor and corresponding normal tissue specimens collected from gastric cancer patients who underwent gastrectomy. Total RNAs were extracted from those samples and the expression of FBXO31 was investigated using real time quantitative RT-PCR analysis. Patients were classified into FBXO31 high expression group and low expression group. Clinicopahological factors were compared between the two groups and importance of FBXO31 was investigated. The standardized expression of FBXO31 was not significantly different between tumor (0.43 ± 0.46) and the corresponding 0.49 ± 0.55 in normal tissue (p = 0.39). Two years survival rate was 77% in FBXO31 high expression group and 54% in low expression group however the chance of survival rate of high expression group was dropped in 5 years (Wilcoxon p = 0.01). Clinicopathological factors were compared between the two groups and peritoneal dissemination was observed significantly higher in FBXO31 low expression group than did in high expression group (p = 0.0398). In order to predict existence of peritoneal dissemination of gastric cancer before surgery, FBXO31 may become a favorite marker for the low risk of peritoneal dissemination. 展开更多
关键词 fbxo31 LOH GASTRIC CANCER
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FBXO31基因促进顺铂诱导的肝癌细胞凋亡
7
作者 何惠娟 黄海丽 +3 位作者 王镇南 杨拉维 陈婷 吴平 《广东医科大学学报》 2017年第4期350-352,共3页
目的探讨FBXO31基因对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响。方法通过脂质体转染法将FBXO31基因表达质粒转染至肝癌HepG2细胞,再用2 mg/L顺铂处理,分别用MTT、流式细胞术、免疫印迹检测细胞活性、凋亡、FBXO31蛋白表达。结果与pcDNA组比较,FBXO3... 目的探讨FBXO31基因对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响。方法通过脂质体转染法将FBXO31基因表达质粒转染至肝癌HepG2细胞,再用2 mg/L顺铂处理,分别用MTT、流式细胞术、免疫印迹检测细胞活性、凋亡、FBXO31蛋白表达。结果与pcDNA组比较,FBXO31组细胞活力显著降低,细胞凋亡明显增多,FBXO31蛋白表达显著升高(P<0.01或0.05)。结论上调FBXO31基因表达促进顺铂诱导的肝癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝癌 fbxo31 顺铂 细胞凋亡
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人FBXO31蛋白的原核表达及抗体制备
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作者 黄海丽 郑文岭 +4 位作者 赵蕊 严启涛 蔡翠霞 张宝 马文丽 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期24-27,共4页
FBXO31位于人染色人体16q24.3,是一个乳腺癌候选抑癌基因。为了获得抗FBXO31的多克隆抗体,构建了FBXO31基因的原核表达质粒pET-28a-FBXO31。将原核表达质粒pET-28a-FBXO31转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,IPTG诱导表达融合蛋白。融合蛋白... FBXO31位于人染色人体16q24.3,是一个乳腺癌候选抑癌基因。为了获得抗FBXO31的多克隆抗体,构建了FBXO31基因的原核表达质粒pET-28a-FBXO31。将原核表达质粒pET-28a-FBXO31转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,IPTG诱导表达融合蛋白。融合蛋白主要以包涵体形式存在,常规方法纯化包涵体。将纯化的pET-28a-FBXO31融合蛋白用于免疫新西兰大白兔获得抗血清,用pET-28a-FBXO31对抗血清进行分离纯化,得到抗FBXO31多克隆抗体。用Western印迹和免疫沉淀对其进行初步鉴定。获得了兔抗人FBXO31的多克隆抗体,为进一步研究FBXO31的生物功能提供了有用的工具。 展开更多
关键词 FBX031 原核表达 多克隆抗体
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FBXO31与细胞周期蛋白D1在结直肠腺癌中的表达及临床意义 被引量:5
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作者 王杰 向德兵 +1 位作者 唐瑶 孙贵银 《重庆医学》 CAS 2019年第3期420-422,427,共4页
目的研究结直肠腺癌组织中FBXO31及细胞周期蛋白(Cyclin)D1的表达和临床意义。方法收集146例结直肠腺癌及癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测所有标本中FBXO31及Cyclin D1的表达情况。结果结直肠腺癌组织中FBXO31和Cyclin D1表达阳性... 目的研究结直肠腺癌组织中FBXO31及细胞周期蛋白(Cyclin)D1的表达和临床意义。方法收集146例结直肠腺癌及癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测所有标本中FBXO31及Cyclin D1的表达情况。结果结直肠腺癌组织中FBXO31和Cyclin D1表达阳性率分别为36.99%和69.86%,与癌旁组织中FBXO31和Cyclin D1的表达(76.71%和16.44%)比较差异有统计学意义(P<0.05)。FBXO31和Cyclin D1的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位及大小无关(P>0.05),与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);Cyclin D1的表达也与肿瘤分化程度相关(P<0.05)。FBXO31与Cyclin D1的表达呈负相关(r=-0.641,P<0.05)。结论在结直肠腺癌的发生、发展、侵袭和转移过程中,FBXO31和Cyclin D1的异常表达可能发挥了重要的作用。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 腺癌 fbxo31 CYCLIN D1 免疫组织化学
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C-terminal amide-bearing proteins:emerging targets for protein homeostasis in health and disease
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作者 Chen Zhang Ruichen Zang +2 位作者 Yanlan Yu Jie Zhang Guoqing Ding 《Medicine Plus》 2025年第2期23-25,共3页
This study highlights the role of C-terminal amide-bearing proteins(CTAPs)in protein homeostasis.Researchers discovered that CTAPs,formed under oxidative stress,are selectively recognized and degraded by the E3 ubiqui... This study highlights the role of C-terminal amide-bearing proteins(CTAPs)in protein homeostasis.Researchers discovered that CTAPs,formed under oxidative stress,are selectively recognized and degraded by the E3 ubiquitin ligase FBXO31 to maintain cellular health.Mutations in FBXO31,such as D334N,impair CTAP recognition,leading to abnormal protein accumulation and neurodevelopmental disorders.These findings not only elucidate the mechanism of protein quality control but also suggest potential therapeutic targets for diseases related to oxidative stress and protein misregulation. 展开更多
关键词 C-terminal amide proteins Protein homeostasis Oxidative stress response fbxo31
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