用单倍体相合小鼠FBL-3红白血病细胞株移植建立CB6F1小鼠红白血病模型 被引量：3

1

作者 周健 李亚楠 +3 位作者 宋永平 魏旭东 郭坤元 吴远彬 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1128-1131,共4页

本研究探讨建立F1代单倍体相合小鼠FBL-3红白血病模型的可行性,并观察FBL-3细胞在小鼠体内的生物学特性。将FBL-3H2-d小鼠红白血病细胞经尾静脉分别接种给小鼠C57BL/6和CB6F1H-2b/d(C57BL/6×BALB/c),观察两种小鼠的生存时间和染色... 本研究探讨建立F1代单倍体相合小鼠FBL-3红白血病模型的可行性,并观察FBL-3细胞在小鼠体内的生物学特性。将FBL-3H2-d小鼠红白血病细胞经尾静脉分别接种给小鼠C57BL/6和CB6F1H-2b/d(C57BL/6×BALB/c),观察两种小鼠的生存时间和染色体变化,并对濒死小鼠的肝、脾、肺和肾进行病理检查,部分进行电子显微镜检查。分析骨髓和脾脏细胞染色体核型及MHC分子表达情况。结果表明:静脉接种103-107个白血病细胞的情况下,C57BL/6小鼠和CB6F1小鼠发病率分别为100%和92.5%;接种的细胞数量与存活时间呈线性关系;接种相同数量FBL-3细胞的CB6F1小鼠平均生存时间较C57BL/6小鼠延长。白血病细胞主要侵及肝、脾、骨髓、肺和肾组织,糖原染色阳性、氯醋酸染色部分阳性,过氧化物酶、碱性磷酸酶、丁酸染色均为阴性。电子显微镜观察到细胞内病毒样颗粒。脾脏和骨髓细胞染色体多数为非二倍体,且H-2b表达率升高,H-2d表达率降低。结论:经尾静脉接种FBL-3细胞可以建立CB6F1小鼠红白血病模型。 展开更多

关键词 单倍体相合小鼠 fbl-3红白血病细胞 小鼠红白血病模型

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家蝇抗菌肽对FBL-3红白血病原代细胞增殖影响浓度的探索 被引量：2

2

作者 杜斌 赵瑞君 +4 位作者 程璟侠 王文健 原发家 聂守民 李彦红 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 北大核心 2015年第1期24-28,共5页

本文初步探究不同浓度家蝇幼虫抗菌肽对FBL-3红白血病原代细胞增殖的影响。采用诱导、研磨、离心、C18固相萃取等方法制备家蝇幼虫抗菌肽混合物，然后处理传代期的FBL-3细胞，调整浓度为2．25×10^6／mL并通过尾静脉注射C57BL／6小... 本文初步探究不同浓度家蝇幼虫抗菌肽对FBL-3红白血病原代细胞增殖的影响。采用诱导、研磨、离心、C18固相萃取等方法制备家蝇幼虫抗菌肽混合物，然后处理传代期的FBL-3细胞，调整浓度为2．25×10^6／mL并通过尾静脉注射C57BL／6小鼠，建立红白血病动物模型。待肿瘤生长较大时，处死并剥离肿瘤，再通过研磨、裂红液裂解、获取原代肿瘤细胞并培养。将抗菌肽混合物调整为不同浓度作用于传代期的FBL-3原代细胞，之后经倒置显微镜观察照相，台盼蓝染色试验计算死亡率、CCK-8试剂盒做细胞毒性检测。结果显示抗菌肽混合物浓度为250—350μg／mL作用FBL-3原代细胞时，细胞碎片大量增多，死亡率增高，细胞毒性变大。初步证明了抗菌肽混合物在250～350μg／mL抑制细胞增殖效果明显，在300μg／mL浓度下抑制作用最强，本研究结果可作为动物模型体内实验的参考。 展开更多

关键词 家蝇 抗菌肽 fbl-3原代细胞 浓度

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FBL-3肿瘤抗原的研究:Ⅱ.从多肽池中分析肿瘤抗原 被引量：5

3

作者 陈永良 何球藻 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1997年第2期81-84,共4页

在抗肿瘤免疫效应中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合的肿瘤源性多肽.为分析肿瘤细胞的抗原性及肿瘤抗原的多肽性质,本文选用FBL-3肿瘤细胞,用pH3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液间隔24～36小时多次酸洗肿瘤细胞,以获得M... 在抗肿瘤免疫效应中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合的肿瘤源性多肽.为分析肿瘤细胞的抗原性及肿瘤抗原的多肽性质,本文选用FBL-3肿瘤细胞,用pH3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液间隔24～36小时多次酸洗肿瘤细胞,以获得MHC I类分子结合的多肽,并分析酸洗液中多肽混合物的肿瘤抗原性,以及RP-HPLC分离的部分收集液多肽的肿瘤抗原性,为FBL-3肿瘤细胞抗原的确定提供基本数据.结果表明:酸洗法能有效获得肿瘤细胞MHC I类分子相关的多肽抗原,肿瘤细胞多肽抗原的分离、纯化、HPLC分析以及抗原性鉴定是肿瘤抗原性确定的一个重要方法. 展开更多

关键词 肿瘤 多肽抗原 酸洗抗原 fbl-3

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移植性C57BL/6小鼠FBL-3红白血病模型的建立及其生物学特性 被引量：4

4

作者 吴远彬 周健 +4 位作者 郭坤元 李达 代喜平 吴顺杰 王国征 《肿瘤基础与临床》 2010年第3期192-194,共3页

目的探讨利用国内传代培养的FBL-3细胞建立H-2相合C57BL/6小鼠FBL-3红白血病模型的可行性,并观察模型的生物学特性。方法把FBL-3小鼠红白血病细胞经尾静脉接种C57BL/6小鼠,观察小鼠的生存时间和染色体变化,并对濒死小鼠的肝、脾、肺和... 目的探讨利用国内传代培养的FBL-3细胞建立H-2相合C57BL/6小鼠FBL-3红白血病模型的可行性,并观察模型的生物学特性。方法把FBL-3小鼠红白血病细胞经尾静脉接种C57BL/6小鼠,观察小鼠的生存时间和染色体变化,并对濒死小鼠的肝、脾、肺和肾进行病理检查,部分进行电镜检查。结果静脉接种1×10^3-1×10^7个白血病细胞,C57BL/6小鼠发病率分别为100%;接种细胞的数量与存活时间呈线性关系;白血病细胞主要侵及肝、脾、骨髓、肺和肾组织,糖原染色阳性、氯醋酸染色部分阳性,过氧化物酶、碱性磷酸酶、丁酸染色均阴性。电镜下观察到细胞内病毒样颗粒。脾脏和骨髓细胞染色体多数为非二倍体,只表达H-2b。结论经尾静脉接种FBL-3细胞可建立C57BL/6小鼠红白血病模型。 展开更多

关键词 小鼠 fbl-3红白血病细胞 红白血病模型

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FBL-3肿瘤抗原的实验研究:Ⅰ.抗原的预测及合成多肽抗原性的验证 被引量：1

5

作者 陈永良 何球藻 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第4期259-263,共5页

T细胞在肿瘤免疫中发挥着重要作用,它是通过T细胞抗原受体(TCR)识别肿瘤细胞表面由MHC分子呈递的肿瘤源性多肽,其中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合并呈递的多肽。研究表明:CTL识别的多肽常由8～9个氨基酸组成,... T细胞在肿瘤免疫中发挥着重要作用,它是通过T细胞抗原受体(TCR)识别肿瘤细胞表面由MHC分子呈递的肿瘤源性多肽,其中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合并呈递的多肽。研究表明:CTL识别的多肽常由8～9个氨基酸组成,多肽的呈递受MHC分子等位型的限制,不同的MHC分子具有不同的等位型特异的多肽结合基序(peptidebinding motif)。FBL-3是B6小鼠(H-2~b)源由Friend病毒诱导的小鼠白血病细胞,灭活FBL-3免疫B6小鼠可诱导FBL-3特异CTL产生,从而建立FBL-3特异的免疫应答,保护小鼠免受FBL-3的致瘤性。因此,实验中根据H-2D^b多肽结合基序和Friend病毒gag基因序列,预测出7个可能编码FBL-3抗原多肽的片段。根据预测的结果人工合成了7个九肽(gag1-gag7)。实验结果显示:合成多肽免疫B6小鼠可诱导多肽特异的CTL产生,但用体外实验方法不能诱导初次免疫应答;FBL-3特异CTL可以杀伤gag3,gag5致敏的靶细胞EL-4(H-2~b),但体内实验表明gag3,gag5不象FBL-3一样,它们体内免疫后不能建立有效的抗FBL-3肿瘤免疫效应。表明预测的7个多肽可能不是FBL-3的肿瘤抗原。文中讨论了多肽抗原性预测的复杂性和可能的对策。 展开更多

关键词 fbl-3肿瘤抗原 实验研究 Ⅰ.抗原 预测 合成多肽抗原性 验证

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C57BL/6小鼠树突状细胞的培养及其诱导细胞毒性T淋巴细胞对FBL-3细胞杀伤效应的研究

6

作者 叶欣 于连玲 +3 位作者 赵梅 宋文刚 周宝琴 张春梅 《泰山医学院学报》 CAS 2009年第7期485-489,共5页

目的探讨C57BL／6小鼠树突状细胞（DC）的培养及其诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对FBL-3细胞的杀伤效应。方法应用GM—CSF和114培养C57BL／6小鼠骨髓DC，用冻融法制备FBL-3细胞抗原致敏DC，用3H—TdR法检测T细胞增殖反应的能力，标准的4... 目的探讨C57BL／6小鼠树突状细胞（DC）的培养及其诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对FBL-3细胞的杀伤效应。方法应用GM—CSF和114培养C57BL／6小鼠骨髓DC，用冻融法制备FBL-3细胞抗原致敏DC，用3H—TdR法检测T细胞增殖反应的能力，标准的4h51cr释放测定法检测CTL杀伤活性。结果用IL4和GM—CSF联合培养小鼠骨髓细胞3天后，可见细胞形态发生改变，细胞形态不规则。培养第6～8天，细胞表面出现较多毛刺样突起，拉长，为典型的DC特征。流式细胞仪检测DC表面分子有CD80、CD86、H-2Kd及I-Ad表达。FBL-3细胞冻融组和PBS组的DC在体外均可以诱导T细胞增殖，冻融组的DC体外诱导T细胞增殖能力明显高于PBS组。冻融组DC体外诱导的CTL对FBL-3细胞有明显的细胞毒作用。结论应用IL-4联合GM—CSF培养C57BL／6小鼠骨髓细胞，可大量扩增成熟DC，培养的DC符合其自身的特性；用冻融法制备FBL-3细胞抗原致敏DC，可以诱导T细胞细胞大量增殖，并能诱导出杀伤效应较强的CTL。 展开更多

关键词 树突状细胞 细胞毒性T淋巴细胞 fbl-3细胞

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家蝇幼虫抗菌肽粗提物对原代FBL-3细胞增殖周期的影响 被引量：2

7

作者 聂守民 邢佳欣 +2 位作者 赵瑞君 程璟侠 刘娟娟 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 北大核心 2015年第4期244-249,共6页

为利用家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用于原代FBL-3肿瘤细胞,探究其对原代FBL-3细胞周期的影响,本文通过构建小鼠肿瘤模型,获取原代FBL-3肿瘤细胞,之后用家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用于该肿瘤细胞,运用流式细胞术检测每个实验组的细胞增殖周期的... 为利用家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用于原代FBL-3肿瘤细胞,探究其对原代FBL-3细胞周期的影响,本文通过构建小鼠肿瘤模型,获取原代FBL-3肿瘤细胞,之后用家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用于该肿瘤细胞,运用流式细胞术检测每个实验组的细胞增殖周期的分布情况.经家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用后的FBL-3原代肿瘤细胞,其细胞增殖周期发生了如下改变：G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,细胞增殖指数降低,与对照组比较具有统计学意义.因此得出结论,家蝇幼虫抗菌肽粗提物可以通过阻滞原代FBL-3肿瘤细胞的增殖周期来诱导细胞凋亡. 展开更多

关键词 家蝇幼虫 抗菌肽粗提物 原代fbl-3细胞 细胞周期

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用合成肽替代肿瘤抗原诱导肿瘤特异性T杀伤细胞的研究 被引量：3

8

作者 储以微 何球藻 陈卫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期195-197,共3页

利用海绵移植模型，将Ｆｒｉｅｎｄ病毒ｇａｇ基因编码蛋白的两个合成肽片段分别注入海绵中，植入Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２￣ｂ）小鼠皮下，经一定潜伏期后收集其中的浸润淋巴细胞（ｓｐｏｎｇｅｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇｌｙｍｐｈｏｃ... 利用海绵移植模型，将Ｆｒｉｅｎｄ病毒ｇａｇ基因编码蛋白的两个合成肽片段分别注入海绵中，植入Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２￣ｂ）小鼠皮下，经一定潜伏期后收集其中的浸润淋巴细胞（ｓｐｏｎｇｅｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＳＩＬｓ），体外培养扩增后，发现合成肽３号能诱导出针对该合成肽特异性的ＳＩＬｓ，并特异性杀伤用合成肽３号致敏的Ｅ＿（１０）靶细胞。但不杀伤Ｆｒｉｅｎｄ病毒在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠诱导的ＦＢＬ－３瘤细胞；反之，用ＦＢＬ－３瘤细胞注入海绵收集到的ＳＩＬｓ，只能杀伤ＦＢＬ－３瘤细胞而不杀伤合成肽３号致敏的Ｅ＿（１０）靶细胞，提示合成肽３号与ＦＢＬ－３瘤细胞表面多肽的抗原性存在差异。另外，用合成肽６号未能诱导出免疫应答反应。 展开更多

关键词 合成肽 fbl-3瘤细胞 淋巴细胞 肿瘤 T杀伤细胞

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肿瘤抗原多肽诱导的CD8^+CTL的体内外抗瘤效应 被引量：3

9

作者 储以微 何球藻 陈卫 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第4期251-258,共8页

利用海绵移植模型,将Friend小鼠白血病病毒gag编码的二个多肽CCLCLTVFL(gPr80 gag 85-93)和RSPTNLAKV(Pr65 gag P30 131-139)分别注入正常或经FBL-3肿瘤细胞免疫过的C57BL/6小鼠皮下的植入海绵中,10天后,收集海绵中浸润淋巴细胞,在体外... 利用海绵移植模型,将Friend小鼠白血病病毒gag编码的二个多肽CCLCLTVFL(gPr80 gag 85-93)和RSPTNLAKV(Pr65 gag P30 131-139)分别注入正常或经FBL-3肿瘤细胞免疫过的C57BL/6小鼠皮下的植入海绵中,10天后,收集海绵中浸润淋巴细胞,在体外用免疫肽周期性刺激培养扩增。实验结果表明:用多肽体内免疫正常或经FBL-3免疫的B6小鼠均能诱导出对免疫多肽特异的CD8^+CTL。其中,P85-93多肽诱导的CD8^+CTL除能杀伤该多肽致敏的同系靶细胞外,还能特异性杀伤FBL-3瘤细胞.抗原多肽诱导的CD8^+CTL在体外经用免疫多肽致敏的同系小鼠脾细胞作周期性刺激并在低浓度IL-2的条件下培养,可长期生长并大量扩增。用体外培养扩增的P85-93多肽特异性CD8^+CTL过继转输治疗FBL-3荷瘤小鼠,能有效治愈FBL-3白血病荷瘤小鼠。上述结果表明,用肿瘤抗原多肽替代肿瘤细胞体内免疫动物可诱导特异性抗瘤效应的CD8^+CTL,并可在体外扩增用于肿瘤过继性免疫治疗。 展开更多

关键词 肿瘤抗原多肽 诱导 CD8^+CTL 抗瘤效应 过继免疫治疗

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从植入载有抗原的海绵中收集肿瘤特异性T细胞方法的应用 被引量：1

10

作者 储以微 向荣 +1 位作者 何球藻 陈卫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期10-13,共4页

将含灭活ＦＢＬ－３瘤细胞的聚氨酯海绵块植入免疫的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠皮下，１０天后收 集海绵中的浸润淋巴细胞（Ｓｐｏｎｇｅ Ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＳＩＬｓ），经体外含ｒＩＬ－２的培养系统中 扩增后... 将含灭活ＦＢＬ－３瘤细胞的聚氨酯海绵块植入免疫的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠皮下，１０天后收 集海绵中的浸润淋巴细胞（Ｓｐｏｎｇｅ Ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＳＩＬｓ），经体外含ｒＩＬ－２的培养系统中 扩增后作特异性杀伤试验。结果表明：所获得的ＳＩＬｓ对ＦＢＬ－３瘤细胞显示出明显的特异杀伤活 性，而且高于同一宿主脾脏中的致敏Ｔ细胞和未免疫鼠中ＳＩＬｓ。经流式细胞仪分析表明，从免疫鼠 中收集到的ＳＩＬｓ是以Ｌｙｔ２＋占绝对优势的Ｔ细胞系列，联合应用化疗与ＳＩＬｓ过继输至Ｃ５７ＢＬ／６ 荷瘤小鼠显示出明显的抗瘤效应。 展开更多

关键词 海绵移植模型 SILS 肿瘤细胞 过继转输治疗

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麻竹叶黄酮类成分研究 被引量：17

11

作者 唐浩国 郑卫东 陈宗道 《中国农学通报》 CSCD 2005年第4期114-118,共5页

从麻竹(Dendrocalamuslatiflorus)叶中分离得到四个黄酮类化合物。经性质和光谱(UV,IR,MS,1HNMR,13CNMR等)法鉴定其结构,分别为牡荆苷(Ⅰ),芦丁(Ⅱ),山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷(Ⅱ-Ⅰ),山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基(1-2)-α-L-鼠李糖苷(Ⅳ)... 从麻竹(Dendrocalamuslatiflorus)叶中分离得到四个黄酮类化合物。经性质和光谱(UV,IR,MS,1HNMR,13CNMR等)法鉴定其结构,分别为牡荆苷(Ⅰ),芦丁(Ⅱ),山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷(Ⅱ-Ⅰ),山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基(1-2)-α-L-鼠李糖苷(Ⅳ)。四种化合物均为首次从该植物中得到。 展开更多

关键词 成分研究 ^13CNMR 竹叶 黄酮类化合物 ^1HNMR 葡萄糖基 糖苷 山奈

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