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FATP5基因沉默抑制油酸诱导的HepG2细胞脂肪化及炎症作用 被引量：3
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作者 王天琦 孙文龙 +1 位作者 杨馥源 李敬达 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期692-699,共8页
目的 明确FATP5作为脂肪酸转运蛋白家族成员,其基因沉默对肝脏细胞脂肪化及炎症作用的影响,并初步探究该影响可能的机制。方法 设计合成5条shRNA序列,并借助siCHECK^(TM)系统筛选得到FATP5有效干扰序列。将有效干扰序列包装成慢病毒后,... 目的 明确FATP5作为脂肪酸转运蛋白家族成员,其基因沉默对肝脏细胞脂肪化及炎症作用的影响,并初步探究该影响可能的机制。方法 设计合成5条shRNA序列,并借助siCHECK^(TM)系统筛选得到FATP5有效干扰序列。将有效干扰序列包装成慢病毒后,通过细胞感染和嘌呤霉素筛选获得FATP5基因沉默HepG2细胞株。使用Western blot方法检测FATP5基因沉默的效率。之后,利用检测试剂盒、Western blot、核质分离及报告基因方法分别分析FATP5基因沉默细胞中油酸诱导ROS和MDA生成、TNF-α和IL-6蛋白表达与分泌,以及NF-κB活化的变化情况。结果 基因沉默细胞中FATP5蛋白表达水平下降90%,并且脂质蓄积作用也被显著抑制。此外,FATP5基因沉默可减少油酸诱导的ROS及MDA生成,同时还可降低NF-κB的转录活性,并下调其下游炎症因子TNF-α及IL-6的蛋白表达和分泌。结论FATP5基因沉默可减轻脂肪化肝脏细胞的炎症作用,其机制可能与抑制氧化应激和脂质过氧化作用有关。 展开更多
关键词 fatp5受体 shRNA基因干扰 炎症反应 非酒精性脂肪肝 NF-κB TNF-α
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