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沉默FAM83D基因调控上皮-间质转化对食管鳞癌放射敏感性影响 被引量：1
1
作者 杨兴肖 邹乃祎 +2 位作者 张雪原 马鸣 祝淑钗 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第10期1071-1077,共7页
目的探讨沉默FAM83D对X线照射后食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、存活能力及侵袭、迁移能力的影响及机制。方法采用免疫组化法检测69例ESCC患者组织中FAM83D、E-cadherin、vimentin的表达。免疫印迹法检测ECA109、KYSE30细胞FAM83D基因... 目的探讨沉默FAM83D对X线照射后食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、存活能力及侵袭、迁移能力的影响及机制。方法采用免疫组化法检测69例ESCC患者组织中FAM83D、E-cadherin、vimentin的表达。免疫印迹法检测ECA109、KYSE30细胞FAM83D基因沉默效果。MTS、克隆形成实验和Transwell方法检测ECA109、KYSE30细胞增殖活性、存活能力及侵袭能力。流式细胞术和免疫印迹法检测ECA109、KYSE30细胞凋亡分布、上皮-间质转化(EMT)及凋亡相关蛋白表达。结果ESCC组织中55%(38/69)FAM83D强表达,36%(25/69)E-cadherin强表达,61%(42/69)vimentin强表达;FAM83D强表达与E-cadherin强表达呈负相关(r=-0.350,P<0.01),与vimentin强表达呈正相关(r=0.470,P<0.01)。ECA109、KYSE30细胞沉默FAM83D后降低了FAM83D蛋白表达(P<0.01)。MTS和克隆形成实验数据显示照射后沉默FAM83D显著抑制了ECA109、KYSE30细胞增殖水平(P<0.05)、增加了放射敏感性(P<0.01)。照射后FAM83D shRNA组ECA109、KYSE30细胞侵袭力降低(P<0.01)、E-cadherin表达增加,而N-cadherin、vimentin、Snail、p-Akt、p-GSK-3β表达降低(P<0.01)。照射后FAM83D shRNA组ECA109、KYSE30细胞凋亡率明显增加(P<0.01),同时Bcl-2、Mcl-1表达下调,Cleaved caspase-3的表达上调(P<0.01)。结论FAM83D与ESCC的侵袭发展密切相关。沉默ECA109、KYSE30细胞FAM83D表达联合X线照射降低了其增殖、侵袭和存活能力,诱导了细胞凋亡,增加了放射敏感性,该作用可能通过Snail/Akt/GSK-3β信号途径来调控EMT。 展开更多
关键词 fam83d基因 上皮-间质转化 X线照射 放射敏感性 食管肿瘤/食管癌细胞系
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敲低FAM83D调节宫颈癌细胞干细胞特性的作用及机制
2
作者 张岚 王静依 +2 位作者 刘述江 叶礼翠 吴欣瑜 《重庆医学》 CAS 2023年第14期2107-2114,共8页
目的探究敲低序列相似性83蛋白质家族成员D(FAM83D)对调节宫颈癌细胞干细胞特性的作用及其机制。方法收集手术切除的宫颈癌组织及对应癌旁组织,培养宫颈癌细胞株Hela、Siha、C33A及正常宫颈上皮细胞株H8,检测FAM83D及干细胞标志基因Sox2... 目的探究敲低序列相似性83蛋白质家族成员D(FAM83D)对调节宫颈癌细胞干细胞特性的作用及其机制。方法收集手术切除的宫颈癌组织及对应癌旁组织,培养宫颈癌细胞株Hela、Siha、C33A及正常宫颈上皮细胞株H8,检测FAM83D及干细胞标志基因Sox2、Oct4的mRNA及蛋白表达水平。对Hela细胞进行分组,转染阴性对照(NC)siRNA、FAM83D siRNA,感染NC shRNA慢病毒、FAM83D shRNA慢病毒,联合使用对照溶剂二甲基亚砜(DMSO)或β-catenin通路激动剂SKL2001,检测FAM83D及干细胞标志基因Sox2、Oct4的mRNA及蛋白表达水平,并采用瘤球形成实验检测肿瘤干细胞特性。结果宫颈癌组织中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA相对表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.001),且宫颈癌组织中FAM83D mRNA与Oct4、Sox2 mRNA相对表达水平均呈负相关(r=-0.351、-0.332,P<0.05)。Hela、Siha、C33A细胞中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显高于H8细胞(P<0.05),并且Hela细胞中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显高于Siha、C33A细胞(P<0.05)。转染siRNA或感染shRNA慢病毒敲低FAM83D后,Hela细胞的细胞球形成率及Oct4、Sox2、β-catenin mRNA和蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05);联合使用β-catenin通路激动剂SKL2001,Hela细胞的细胞球形成率及Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显升高(P<0.05)。结论敲低FAM83D对宫颈癌细胞干细胞特性具有抑制作用,该作用与抑制Wnt/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 肿瘤干细胞 fam83d基因 Wnt/β-连环蛋白信号通路
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