目的探究甲基苯丙胺(METH)是否通过调控miR-129-5p/FAM104B分子轴从而影响大鼠胚胎成纤维细胞(REF)损伤。方法 MTT实验检测不同浓度甲基苯丙胺对REF细胞活力的影响;流式细胞术检测REF凋亡情况, Western blot检测增殖和凋亡相关蛋白的表...目的探究甲基苯丙胺(METH)是否通过调控miR-129-5p/FAM104B分子轴从而影响大鼠胚胎成纤维细胞(REF)损伤。方法 MTT实验检测不同浓度甲基苯丙胺对REF细胞活力的影响;流式细胞术检测REF凋亡情况, Western blot检测增殖和凋亡相关蛋白的表达;qRT-PCR检测miR-129-5p与FAM104B的表达表达量;双荧光素酶实验验证miR-129-5p与FAM104B的靶向结合关系。结果甲基苯丙胺可抑制REF细胞增殖,促进细胞凋亡,还可促进miR-129-5p的表达,抑制FAM104B的表达。双荧光素酶实验证实miR-129-5p可靶向调控FAM104B的表达。miR-129-5p过表达明显抑制了细胞增殖,促进细胞凋亡。沉默FMA104B可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。抑制miR-129-5p表达或FMA104B过表达可明显降低METH对REF细胞增殖及凋亡的作用。结论甲基苯丙胺通过调控miR-129-5p/FAM104B分子轴而抑制REF增殖及促进细胞凋亡。展开更多
文摘目的探究甲基苯丙胺(METH)是否通过调控miR-129-5p/FAM104B分子轴从而影响大鼠胚胎成纤维细胞(REF)损伤。方法 MTT实验检测不同浓度甲基苯丙胺对REF细胞活力的影响;流式细胞术检测REF凋亡情况, Western blot检测增殖和凋亡相关蛋白的表达;qRT-PCR检测miR-129-5p与FAM104B的表达表达量;双荧光素酶实验验证miR-129-5p与FAM104B的靶向结合关系。结果甲基苯丙胺可抑制REF细胞增殖,促进细胞凋亡,还可促进miR-129-5p的表达,抑制FAM104B的表达。双荧光素酶实验证实miR-129-5p可靶向调控FAM104B的表达。miR-129-5p过表达明显抑制了细胞增殖,促进细胞凋亡。沉默FMA104B可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。抑制miR-129-5p表达或FMA104B过表达可明显降低METH对REF细胞增殖及凋亡的作用。结论甲基苯丙胺通过调控miR-129-5p/FAM104B分子轴而抑制REF增殖及促进细胞凋亡。
