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题名大豆FAD2-1b基因沉默载体的构建
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作者
杜景红
刘丽君
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机构
东北林业大学博士后科研流动站
黑龙江省农业科学院博士后科研工作站
黑龙江大学农业资源与环境学院
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出处
《中国农学通报》
CSCD
2013年第21期131-136,共6页
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基金
黑龙江省农业科学院博士后科研启动经费(LR1307-384)
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文摘
旨在培育生物安全的转基因大豆。设计引物、采用RT-PCR从高蛋白大豆品种‘黑农35’中克隆大豆种子特异表达启动子GY1;从高油大豆‘黑农37’中克隆FAD2-1b基因内含子1;从5个转基因受体大豆品种中克隆FAD2-1b基因片段,作为正向臂和反向臂。连接这些目的片段,构建筛选标记基因为bar,启动子为GY1,内含子为FAD2-1b基因内含子1的双T-DNA载体。将双T-DNA载体转化大肠杆菌DH5α,扩增得到的重组质粒经酶切和序列分析鉴定正确,命名为pDT-FAD2I。本研究构建了针对大豆FAD2-1b基因的沉默载体,为进一步获得FAD2-1b基因沉默大豆,培育转基因安全的高品质大豆奠定了基础。
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关键词
大豆
fad2-1b
RNAI
载体构建
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Keywords
soybean
fad2-1b
RNAi
vector construction
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分类号
Q812
[生物学—生物工程]
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题名大豆fad3c基因沉默载体的构建
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作者
杜景红
刘丽君
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机构
黑龙江省农业科学院博士后科研工作站
黑龙江大学农业资源与环境学院
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出处
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期28-32,共5页
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基金
黑龙江省农业科学院博士后科研启动经费
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文摘
构建大豆fad3c基因的沉默载体,旨在为培育生物安全的高油酸低亚麻酸转基因大豆奠定基础。从高蛋白大豆黑农35中克隆大豆种子特异表达启动子GY1;从高油大豆黑农37中克隆fad2-1b基因内含子1;从5个转基因受体大豆中克隆fad3c基因片段,作为正向臂和反向臂。构建筛选标记基因为bar,启动子为GY1,内含子为fad2-1b基因内含子1的双T-DNA载体。将双T-DNA载体转化大肠杆菌DH5α,酶切和序列分析鉴定表明扩增得到的重组质粒正确,命名为pDT-GFAD3I。
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关键词
大豆fad2-1b
fad3c
RNAI
载体构建
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Keywords
Soybean
fad2-1 b
fad3c
RNAi
Vector construction
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分类号
S565.1
[农业科学—作物学]
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题名大豆油酸脱氢酶基因启动子的克隆及其表达活性分析
被引量：1
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作者
赵艳
沙伟
张梅娟
杨晓杰
范震宇
王艳梅
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机构
齐齐哈尔大学生命科学与农林学院
齐齐哈尔市龙沙公园
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期80-84,共5页
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基金
黑龙江省教育厅科学技术研究资助项目(12521611)
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文摘
大豆油酸脱氢酶(FAD2-1B)基因是种子特异表达基因,利用PCR方法从大豆基因组DNA中分离FAD2-1B基因的启动子片段,命名为FP。PLACE在线启动子预测工具分析表明:序列中含有多种典型的种子特异性表达元件,如Skn-1 motif、AACACA、SEF4 motif、E-box、ACGT等。将克隆得到的FP片段替换pCAMBIA1301中的CaMV35S启动子,构建表达载体pCAM-FP。通过农杆菌介导法在大豆各组织中进行瞬时表达,GUS组织化学染色显示FP驱动GUS基因在大豆根、茎、叶中基本不表达,在种子中有较高的表达活性,推测FP启动子具有种子特异表达活性。
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关键词
大豆
油酸脱氢酶基因
启动子
瞬时表达
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Keywords
Soybean
fad2-1b
Promoter
Transient expression
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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