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FAB-M2亚型成人急性髓系白血病患者LPCAT1、CRP、PLT表达水平与临床疗效的相关性分析
1
作者 任羽 贺爱军 葛繁梅 《国际医药卫生导报》 2025年第7期1183-1189,共7页
目的 探讨成人急性髓系白血病(AML)根据法国(French)、美国(American)和英国(Britain)制定的(FAB)分型标准-M2亚型(M2-AML)患者中溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(LPCAT1)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血小板计数(platelet count,P... 目的 探讨成人急性髓系白血病(AML)根据法国(French)、美国(American)和英国(Britain)制定的(FAB)分型标准-M2亚型(M2-AML)患者中溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(LPCAT1)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血小板计数(platelet count,PLT)的表达水平与临床疗效的相关性,以期为AML的临床治疗提供更有针对性的生物标志物。方法 本研究为回顾性研究。选取2020年1月至2022年1月间于延安大学附属医院进行治疗的AML患者162例为AML组,选取同期健康体检志愿者25例为对照组。AML组患者男67例,女95例,年龄(45.82±4.79)岁,急性粒细胞白血病部分分化型(M2型)76例、急性早幼粒细胞白血病(M3型)25例、急性单核细胞白血病(M5型)61例。对照组男11例,女14例,年龄(45.67±5.43)岁。采用实时荧光定量法检测研究对象骨髓组织LPCAT1表达水平。AML组患者均接受治疗且随访资料完整。根据疗效将M2-AML患者分为完全缓解(CR)组(32例)与非CR组(44例)。统计并比较两组患者CD68、CRP、PLT水平。采用χ^(2)、Z、t检验进行统计分析。采用Spearman相关性分析LPCAT1、CRP、PLT表达水平与AML患者疗效的相关性。绘制AML患者总生存期(OS)、无进展生存期(PFS)Kaplan-Meier(K-M)生存曲线。结果 对照组LPCAT1表达水平为35.16%(37.99%,313.57%),低于AML组的93.31%(29.69%,63.20%),差异有统计学意义(Z=-3.452,P<0.05)。M2型患者LPCAT1表达水平为36.39%(28.08%,59.68%),M3型患者为22.68%(14.32%,35.74%),M5型患者为53.57%(33.53%,95.96%)。非CR组患者的CD68、CRP水平均高于CR组[(2.39±0.35)ng/L比(1.73±0.16)ng/L、(19.79±4.31)mg/L比(6.89±0.63)mg/L],PLT水平低于CR组[(77.34±27.92)×10^(9)/L比(213.97±39.65)×10^(9)/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。LPCAT1、CD68、CRP均与AML患者的临床疗效呈负相关(r=-0.420、-0.794、-0.855,均P<0.05),PLT水平与临床疗效呈正相关(r=0.854,P<0.05)。对AML患者进行为期2年的随访,结果显示,CR组存活16例、死亡16例,非CR组存活27例、死亡17例;两组患者OS、PFS比较,差异均有统计学意义(χ^(2)=-3.982、4.173,均P<0.05)。结论 在M2-AML患者中,LPCAT1、CD68、CRP、PLT表达水平可作为预测AML患者临床疗效的有效指标,LPCAT1在AML的病理过程中可能扮演重要角色。K-M生存曲线分析结果进一步验证了上述生物标志物与患者OS、PFS的相关性。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 fab-M2亚型 溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1 C反应蛋白 血小板计数 疗效
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芯片工厂Fab厂房布置综述
2
作者 罗桥 雍倩文 赵倩 《中国集成电路》 2025年第7期24-29,共6页
本文探讨了集成电路行业芯片工厂(Fab)的特点、Fab厂房发展趋势、Fab厂房不同形式、布置方法、考虑的各种因素以及工艺设备布置原则等。文章首次系统分析和总结了芯片工厂特点及Fab厂房布局形式,对工艺工程设计及实际工艺布局有较强的... 本文探讨了集成电路行业芯片工厂(Fab)的特点、Fab厂房发展趋势、Fab厂房不同形式、布置方法、考虑的各种因素以及工艺设备布置原则等。文章首次系统分析和总结了芯片工厂特点及Fab厂房布局形式,对工艺工程设计及实际工艺布局有较强的参考价值。 展开更多
关键词 集成电路 工艺布局 fab厂房
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船用高强钢薄板FAB法埋弧焊接头显微组织与残余应力变形
3
作者 黄佳建 江泽新 +3 位作者 罗磊 刘博 徐晓萍 胡文洪 《理化检验(物理分册)》 2025年第9期12-17,共6页
采用有限元软件对高强钢薄板FAB法埋弧焊焊接过程进行数值模拟,对试板焊接接头进行低倍检验、金相检验、硬度测试和X射线残余应力测试。结果表明:FAB法埋弧焊仿真模拟试样呈现中部下凹和横向收缩的现象,最大下凹量和收缩量分别为0.61 mm... 采用有限元软件对高强钢薄板FAB法埋弧焊焊接过程进行数值模拟,对试板焊接接头进行低倍检验、金相检验、硬度测试和X射线残余应力测试。结果表明:FAB法埋弧焊仿真模拟试样呈现中部下凹和横向收缩的现象,最大下凹量和收缩量分别为0.61 mm和0.52 mm;焊接接头宏观成型良好,表面粗晶区宽度约为1 mm,组织晶粒有所增大,细晶区及不完全重结晶区宽度约为1.5 mm,以细小的铁素体和珠光体带状组织为主,组织位错密度降低,硬度略有下降;焊接残余应力分布特征表现为焊缝中心区域存在较大的拉应力,其数值沿焊缝两侧呈递减趋势,热影响区则以压应力为主;焊缝区最大拉应力达到187 MPa,而热影响区最大压应力为-180 MPa,二者均显著低于材料的屈服强度极限。 展开更多
关键词 fab法埋弧焊 薄板 残余应力 变形 显微组织
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IgG型自身抗体Fab段遮断红细胞自身抗原的探索研究
4
作者 黄海涛 温学红 《中国输血杂志》 CAS 2024年第9期1077-1080,1090,共5页
目的应用自身抗体的Fab段结合红细胞上的自身抗原,以遮断完整自身抗体与自身抗原的结合。方法含自身抗体的患者血清,通过吸收放散试验获得成分单一的自身抗体,再应用木瓜酶37℃过夜水解自身抗体IgG分子获得Fab段,用Fab段特异性结合相对... 目的应用自身抗体的Fab段结合红细胞上的自身抗原,以遮断完整自身抗体与自身抗原的结合。方法含自身抗体的患者血清,通过吸收放散试验获得成分单一的自身抗体,再应用木瓜酶37℃过夜水解自身抗体IgG分子获得Fab段,用Fab段特异性结合相对应的自身抗原,从而遮断完整自身抗体与自身抗原的结合。结果3例含自身抗体的患者血浆标本,经过吸收放散试验获得的组分单一的自身抗体,均经过木瓜酶水解处理生成Fab段,此Fab段与各自放散液中的完整自身抗体混合后,均能遮断完整自身抗体与红细胞自身抗原的结合。同时3例标本之间,1号标本与2号标本的有相互遮断效应,而2号标本和3号标本之间未见相互遮断效应。结论自身抗体Fab段能消除完整自身抗体与红细胞自身抗原的凝集,此方法可以应用到临床实践中,解决多种临床问题。 展开更多
关键词 自身抗体 fab片段 遮断效应
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嵌合抗CD_(20) Fab′对B淋巴瘤细胞Raji细胞生长的影响 被引量：1
5
作者 范冬梅 赖增祖 +3 位作者 熊冬生 许元富 彭晖 杨纯正 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期415-417,共3页
目的：研究嵌合抗CD_(20)基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性。方法：利用MTT法以及3H掺入法测定嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞生长的影响。结果：MTT法测定结果显示嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用，抑制作用成剂量依赖... 目的：研究嵌合抗CD_(20)基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性。方法：利用MTT法以及3H掺入法测定嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞生长的影响。结果：MTT法测定结果显示嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用，抑制作用成剂量依赖性，其IC50为24μg／ml；嵌合抗CD_(20) Fab′对3H－TdR掺入Raji细胞无抑制作用，表明抗CD_(20) Fab′不影响Raji细胞DNA的合成；但嵌合抗CD_(20) Fab′抑制3H－UdR掺入Raji细胞，表明嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞RNA合成具有抑制作用，其抑制作用成剂量相关性。结论：嵌合抗CD_(20) Fab′抑制Raji细胞生长，嵌合抗CD_(20) Fab′具有较好的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 B淋巴细胞瘤 嵌合fab'CD20 RAJI细胞 抗CD20fab’
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嵌合抗CD20 Fab′诱导Raji细胞凋亡
6
作者 范冬梅 赖增祖 +3 位作者 熊冬生 许元富 彭晖 杨纯正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第7期20-22,共3页
为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细... 为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细胞凋亡作用 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′可诱导Raji细胞凋亡作用。这些实验结果证明嵌合抗CD2 0Fab′通过诱导Raji细胞凋亡的机制抑制Raji细胞生长。 展开更多
关键词 B淋巴细胞瘤 嵌合fab' CD20 细胞凋亡 抗CD20fab’ 临床 单克隆抗体 抗肿瘤活性
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Fab类抗体的研究进展 被引量：5
7
作者 刘美君 高向东 徐晨 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 2014年第3期318-324,347,共8页
在基因工程抗体中,Fab类(Fabs)抗体有许多优势,如相对分子质量小、组织分布特异性强和免疫原性低等,使Fab类抗体成为近几十年来的研究热点。除了应用较广泛的体外酶消化法外,多种表达系统(如大肠杆菌和昆虫等)皆用于Fab类抗体的获得,其... 在基因工程抗体中,Fab类(Fabs)抗体有许多优势,如相对分子质量小、组织分布特异性强和免疫原性低等,使Fab类抗体成为近几十年来的研究热点。除了应用较广泛的体外酶消化法外,多种表达系统(如大肠杆菌和昆虫等)皆用于Fab类抗体的获得,其中大肠杆菌表达的系统研究最为彻底,且已经应用于制备Fab类临床药物。目前已经有赛妥珠单抗等6种Fab类抗体药物通过了美国FDA申请并上市,并有多种Fab类药物正处于临床试验阶段。本文分别对Fab类抗体的基本结构及特点、Fab类抗体的生成、表达和提高产量的策略、临床应用的研究进展进行介绍。 展开更多
关键词 fab类抗体 木瓜蛋白酶 大肠杆菌 fabs药物 临床应用
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Fab Lab创新模式及其启示 被引量：42
8
作者 宋刚 陈凯亮 +2 位作者 张楠 唐蔷 朱慧 《科学管理研究》 CSSCI 北大核心 2008年第6期1-4,共4页
信息技术融合与发展为科技创新模式嬗变提供了新机遇。本文讨论了Fab Lab创新模式的发展背景及典型案例,并重点分析了其对我国以用户创新为中心的应用创新实践的理论及现实意义,以期引发研究与实践领域围绕用户参与的创新2.0模式发展的... 信息技术融合与发展为科技创新模式嬗变提供了新机遇。本文讨论了Fab Lab创新模式的发展背景及典型案例,并重点分析了其对我国以用户创新为中心的应用创新实践的理论及现实意义,以期引发研究与实践领域围绕用户参与的创新2.0模式发展的深入思考。 展开更多
关键词 创新2.0 fab Lab应用创新 用户创新 个人制造
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人源中和性抗汉滩病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达 被引量：14
9
作者 梁米芳 李德新 +5 位作者 杭长寿 吴兴安 朱公文 薛颍 李川 宋干 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期297-308,共12页
运用噬菌体表面表达（Ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙ）技术，获得人源中和性抗汉滩病毒汉滩型Ｇ１基因工程单克隆抗体（单抗）Ｆａｂ段基因及其表达，并同时获得抗汉滩病毒核蛋白（ＮＰ）的Ｆａｂ抗体。从肾综合征出血热疫区恢复期病人抗凝... 运用噬菌体表面表达（Ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙ）技术，获得人源中和性抗汉滩病毒汉滩型Ｇ１基因工程单克隆抗体（单抗）Ｆａｂ段基因及其表达，并同时获得抗汉滩病毒核蛋白（ＮＰ）的Ｆａｂ抗体。从肾综合征出血热疫区恢复期病人抗凝血中分离到的外周淋巴细胞中，提取了总细胞ＲＮＡ。通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，用一组人ＩｇＧＦａｂ基因特异性引物，从合成的ｃＤＮＡ中经ＰＣＲ扩增了一组轻链和重链Ｆａｂ段基因，将轻链和重链先后插入噬菌体载体ｐＣｏｍｂ３，成功地建立了抗汉滩病毒抗体基因库，并用纯化的汉滩病毒颗粒及抗汉滩病毒糖蛋白鼠单抗捕捉糖蛋白抗体原的方法，对此抗体库进行了富集筛选，在短期内成功地获得了抗汉滩病毒核蛋白和糖蛋白Ｇ１的人源单抗Ｆａｂ段基因，并在大肠杆菌中获得有效表达。核苷酸序列分析证实，所获得的基因为人源ＩｇＧＦａｂ基因。用特异性放射免疫沉淀（ＩＰ）、ＩＦＡＴ和ＥＬＩＳＡ以及空斑减少中和试验鉴定表明，表达的人Ｆａｂ抗体能识别汉滩病毒结构蛋白，其中抗Ｇ１人Ｆａｂ抗体具有体外中和活性。人源抗汉滩病毒基因工程抗体的获得，为今后可能的临床应用提供了良好前景。 展开更多
关键词 汉滩病毒 单克隆抗体 fab段 基因表达
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人源性抗HBsAg抗体Fab段在酵母中的表达 被引量：11
10
作者 邓宁 粟宽源 +3 位作者 王珣章 龙綮新 杨林 余宙耀 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期546-550,共5页
通过分步整合的方式 ,将人源性抗乙肝表面抗原 (HBsAg)抗体Fab的轻、重链基因分步整合到巴斯德毕赤(Pichiapastoris)酵母GS115菌株的染色体上 ,经甲醇诱导 ,成功地分泌表达出抗HBsAg抗体的Fab片段 ,表达量达5 0～ 80mg L。ELISA结果显... 通过分步整合的方式 ,将人源性抗乙肝表面抗原 (HBsAg)抗体Fab的轻、重链基因分步整合到巴斯德毕赤(Pichiapastoris)酵母GS115菌株的染色体上 ,经甲醇诱导 ,成功地分泌表达出抗HBsAg抗体的Fab片段 ,表达量达5 0～ 80mg L。ELISA结果显示重组酵母分泌表达出的Fab具有较强的结合HBsAg的能力。通过抗Fab的抗体柱亲和层析 。 展开更多
关键词 人源性抗HBsAg抗体 fab段 酵母 表达
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Fab Lab发展模式及其创新生态系统 被引量：11
11
作者 徐婧 房俊民 +2 位作者 唐川 田倩飞 王立娜 《科学学研究》 CSSCI 北大核心 2016年第5期765-770,共6页
近年来,数字制造业的变革性发展引领着大众创新的新局面。创客空间作为这一过程中重要的角色在全球都掀起了热潮。Fab Lab是创客空间的一种类型,为研究人员、创新者、小公司提供基础设施和服务的创新空间,使其能够将创新思想形成原型,... 近年来,数字制造业的变革性发展引领着大众创新的新局面。创客空间作为这一过程中重要的角色在全球都掀起了热潮。Fab Lab是创客空间的一种类型,为研究人员、创新者、小公司提供基础设施和服务的创新空间,使其能够将创新思想形成原型,弥补了目前教育和产业中无法为普通人提供现代化的发明教育培训和基础设施搭建的这一空缺。本文对创客空间以及Fab Lab的发展历程进行了介绍,归纳并详细分析了Fab Lab的五个运作特点。本文认为,Fab Lab起到了引领工程师和企业家贯穿创新价值链的作用,起到了创造教育、商业、创新和社会效益的作用,是新的创新生态系统中的重要部分。因此本文最后对Fab Lab所形成的包括了政府机构、产业界和教育研究机构的创新生态系统进行了分析。 展开更多
关键词 创客 fab LAB 创客空间 创新生态系统 大众创新
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抗HBsAg抗体Fab段在大肠肝菌中的高效表达与复性 被引量：8
12
作者 毛春生 宋宏彬 +2 位作者 李季枝 于长明 王海涛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期229-231,共3页
将抗ＨＢｓＡｇ 抗体的轻链（Ｌ）和重链Ｆｄ 段基因，分别克隆于ｐＥＴ２０ｂ 质粒中并分别转化到大肠肝菌ＢＬ２１（ＤＥ３），ＬＰＴＧ诱导后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析发现在２７ＫＤ（Ｌ）和２５ＫＤ（Ｆｄ）处有外源蛋白表达，表达... 将抗ＨＢｓＡｇ 抗体的轻链（Ｌ）和重链Ｆｄ 段基因，分别克隆于ｐＥＴ２０ｂ 质粒中并分别转化到大肠肝菌ＢＬ２１（ＤＥ３），ＬＰＴＧ诱导后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析发现在２７ＫＤ（Ｌ）和２５ＫＤ（Ｆｄ）处有外源蛋白表达，表达蛋白含量分别为５３％ 和４８％ 。Ｌ链和Ｆｄ 包涵体蛋白经盐酸胍变性后，等量混合于折叠液中，Ｌ和Ｆｄ 可复性形成了约５０ＫＤ的蛋白。ＥＬＩＳＡ结果表明，复性蛋白具有与ＨＢｓＡｇ 结合的能力。抗ＨＢｓＡｇ 抗体Ｆａｂ 段在大肠杆菌中的表达与复性的成功，表明包涵体表达基因工程抗体在技术是可行的。 展开更多
关键词 抗HBSAG fab段 表达 复性 抗体
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397例急性白血病细胞遗传学与FAB分型相关性研究 被引量：16
13
作者 霍菲菲 刘欣 +4 位作者 孙自敏 朱薇波 郑昌成 汪健 邬志伟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期6-10,共5页
本研究探讨急性白血病的细胞遗传学改变,了解染色体核型异常与急性白血病FAB分型的关系及其对预后因素的影响。397例急性白血病患者于治疗前抽取骨髓标本,采用短期细胞培养法制备染色体标本,应用G显带技术进行染色体核型分析。结果显示,... 本研究探讨急性白血病的细胞遗传学改变,了解染色体核型异常与急性白血病FAB分型的关系及其对预后因素的影响。397例急性白血病患者于治疗前抽取骨髓标本,采用短期细胞培养法制备染色体标本,应用G显带技术进行染色体核型分析。结果显示,397例急性白血病中78例无分裂相,319例可供染色体核型分析的患者中染色体核型异常175例(占54.9%)。在急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓系白血病(AML)和急性混合细胞白血病(AMLL)3种类型的白血病患者中,染色体核型异常分别为33/120例(占27.5%)、129/252例(占51.2%)和13/25例(占52.0%)。超二倍体41例(占23.4%),亚二倍体22例(占12.5%),正常二倍体112例(占64.0%)。AML染色体核型异常中与FAB分型相关的特异性染色体重排74/129例(占57.4%)。结论:大约55%左右的急性白血病存在克隆性染色体异常,一些特异性染色体异常改变是急性白血病的细胞遗传学特征,与急性白血病的FAB分型有明显相关性,染色体检查和分子遗传学方法相结合,对于白血病的诊断、分型、治疗和预后都具有重要意义。 展开更多
关键词 急性白血病 染色体 fab分型
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抗乙型肝炎表面抗原Fab片段联合抗细胞核单抗为载体的肝癌放射免疫治疗实验研究 被引量：10
14
作者 杜阳峰 罗荣城 +4 位作者 李贵平 李爱民 丁雪梅 严晓 黄凯 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期460-462,共3页
目的探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAgFab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供... 目的探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAgFab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供实验依据。方法荷瘤裸鼠分为五组,分别瘤内注射131I-抗HBsAgFab、131I-chTNT、131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT、131I-无关抗体(131I-IgG)及PBS。治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并测量肿瘤大小变化,计算肿瘤抑制率。结果研究发现2种标记抗体联合应用组的肿瘤抑制率为73.09%,明显高于131I-抗HBsAgFab组的47.8%和131I-chTNT组的54.26%。联合应用组标记抗体在肿瘤组织/非肿瘤组织内的放射活度比值(T/NT值)大于单独应用组。结论131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤组织内的浓聚,并能提高放射免疫治疗效果。 展开更多
关键词 放射免疫治疗 抗乙肝表面抗原fab片段 抗细胞核抗体 单克隆抗体 裸鼠
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新工科背景下应用型本科Fab Lab实验平台构建 被引量：14
15
作者 倪伟传 李佳 +3 位作者 王凤 刘少江 许志明 万智萍 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2018年第1期269-272,共4页
近年来,随着物联网、人工智能、大数据等新兴技术的快速发展,有力地推动了社会的变革,引领了新的工业革命。在这样的背景下,建立适应应用型本科院校的Fab Lab实验平台可以看作很好的借鉴。从具体建设到创新生态系统的构成,Fab Lab实验... 近年来,随着物联网、人工智能、大数据等新兴技术的快速发展,有力地推动了社会的变革,引领了新的工业革命。在这样的背景下,建立适应应用型本科院校的Fab Lab实验平台可以看作很好的借鉴。从具体建设到创新生态系统的构成,Fab Lab实验平台可作为众创空间的一种形式,为创新型人才培养提供先进创客教育理念的实施场地,起到有效的人才培养作用。 展开更多
关键词 fab Lab实验平台 新工科 众创空间 众创教育
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IgG Fab-BPI融合蛋白真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达 被引量：7
16
作者 马越云 马文煜 +3 位作者 于文彬 尹文 苏明权 丁振若 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期470-472,共3页
目的构建抗抗LPSFab-BPI真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法通过RT-PCR,获得广谱抗LPSmAbC3A2IgG的Fd和完整轻链LCcDNA片段。在分别构建了pcDNA3-Fd和pcDNA3-LC表达载体的基础上,将包括BPIN端抗LPS活性中心的180bpDNA片段,通过一段... 目的构建抗抗LPSFab-BPI真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法通过RT-PCR,获得广谱抗LPSmAbC3A2IgG的Fd和完整轻链LCcDNA片段。在分别构建了pcDNA3-Fd和pcDNA3-LC表达载体的基础上,将包括BPIN端抗LPS活性中心的180bpDNA片段,通过一段长16个氨基酸的linker连接于上述Fab表达载体中Fd基因的下游,构建成Fab-BPI融合蛋白FB真核表达载体。将pcDNA3-LC质粒中包括hCMV启动子、LC和BGHpolyA等序列在内的片段,插入到pcDNA3-Fd中hCMV启动子上游,从而构建成单质粒的Fab-BPI表达载体pcD-NA3-FB,转染真核细胞。结果序列测定表明,重组质粒构建正确。pcDNA3-FB转染CHO细胞后,经ELISA、免疫荧光和mR-NA鉴定表达成功,免疫印迹试验显示,与抗κ轻链和抗BPI抗体反应的蛋白区带的Mr均为60000左右。交叉反应试验证明,Fab和FB与多种革兰氏阴性菌的LPS有交叉反应性。结论成功地在CHO细胞中表达出了抗LPSFab-BPIFB融合蛋白。FB作为融合蛋白,集广泛交叉反应性和强大中和活性于一身,有可能成为更适于临床应用的新的抗LPS免疫制剂。 展开更多
关键词 LPS fab 杀菌通透性增强蛋白 真核表达 IGG
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人源噬菌体Fab抗体库构建过程中引物的优化和初步鉴定 被引量：7
17
作者 包国强 马庆久 +2 位作者 邢金良 杨向民 陈志南 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期220-223,共4页
目的　优化设计一套引物 ,扩增全套人抗体Fd片段和L链基因 ,改善扩增效率 ,益于人源噬菌体抗体库的构建。方法　根据V BASE数据库提供的人抗体可变区胚系基因 ,在其家族分类基础上 ,根据FR1区 5’端保守序列重新分组 ,设计特异性的 5’... 目的　优化设计一套引物 ,扩增全套人抗体Fd片段和L链基因 ,改善扩增效率 ,益于人源噬菌体抗体库的构建。方法　根据V BASE数据库提供的人抗体可变区胚系基因 ,在其家族分类基础上 ,根据FR1区 5’端保守序列重新分组 ,设计特异性的 5’端扩增引物。同时对设计引物的匹配情况进行分析 ,并应用PCR扩增和测序反应对其扩增效果进行鉴定。结果　Fd链 5’端扩增引物有 5条 ,κ轻链有 6条 5’端扩增引物 ,而λ轻链 5’和 3’扩增引物有 10条。分析表明 ,人抗体可变区胚系基因与 5’引物有较好的匹配率 ,数目较少 ,匹配率较高。PCR结果显示 ,全部的重链及轻链引物对均能高效扩增出特异性较高的目的片段。测序结果表明PCR扩增产物具有较好的亚类和可变区家族分布。结论　优化了一套扩增全套人抗体Fd片段和L基因的引物 。 展开更多
关键词 抗体库 fab 引物 优化
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抗体Fab片段的表达与应用研究进展 被引量：2
18
作者 肖凌宇 李巧玲 +1 位作者 倪孟祥 方宏清 《生物技术通讯》 CAS 2017年第3期397-404,共8页
目前,抗体Fab片段在癌症、病毒感染和炎症等疾病的诊断治疗中越发重要,占抗体市场份额逐渐上升。相对于全长抗体,抗体Fab片段具有无须N糖基化、可用原核系统进行表达、分子小、免疫原性低等优势,使之成为研究的热点。大肠杆菌由于遗传... 目前,抗体Fab片段在癌症、病毒感染和炎症等疾病的诊断治疗中越发重要,占抗体市场份额逐渐上升。相对于全长抗体,抗体Fab片段具有无须N糖基化、可用原核系统进行表达、分子小、免疫原性低等优势,使之成为研究的热点。大肠杆菌由于遗传背景清晰、使用广泛、生产成本低,因而常作为原核表达宿主。本文综述了大肠杆菌系统抗体Fab片段产量低的解决方法、Fab抗体的临床应用,并结合当前研究现状展望了Fab抗体生产的研究方向。 展开更多
关键词 抗体fab片段 大肠杆菌 优化表达 fab抗体药物
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筛选Fab抗体库的细菌展示技术的建立 被引量：7
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作者 徐黎明 尹成凯 +4 位作者 任桂萍 田辉 王雪琴 丁良君 李德山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1090-1093,共4页
目的:利用NlpA蛋白的前六个氨基酸(CDQSSS)将抗体锚定在细菌内膜建立筛选Fabs抗体库的展示技术,为今后抗体的研发工作奠定基础。方法:从pNAD质粒中克隆出NlpAleader(含有CDQSSS序列)基因序列,利用相应的酶切位点将该序列插入pComb3表达... 目的:利用NlpA蛋白的前六个氨基酸(CDQSSS)将抗体锚定在细菌内膜建立筛选Fabs抗体库的展示技术,为今后抗体的研发工作奠定基础。方法:从pNAD质粒中克隆出NlpAleader(含有CDQSSS序列)基因序列,利用相应的酶切位点将该序列插入pComb3表达载体中构建成用于展示Fab的重组质粒pBFD。将从pEAI质粒克隆得到的anti-human IL-1β抗体的重链Fab和全长轻链分别插入到NlpAleader和pelBleader(pComb3载体自带的果胶酶基因前导肽)的下游。将pBFD-Fab转入到E.coli DH5α中诱导表达,原生质球制备后,采用梯度浓度的抗原进行孵育,最后经流式细胞术(FCM)检测抗体展示情况并且分选阳性群体,利用质粒提取的方法来替代PCR方法拯救阳性基因,转化E.coli DH5α,利用FCM再次检测该群体展示的抗体与抗原结合情况。结果:所展示的anti-hIL-1β Fab抗体依次与抗原和FITC标记的抗原特异性抗体孵育后,用FCM实时检测,结果显示出很强的荧光信号并且表现出抗原浓度依赖性。拯救出的pBFD-Fab-原生质球的FCM检测结果与首次展示的FCM结果一致,该系统能够稳定的展示抗体。结论:经过该细菌展示系统展示的Fab抗体能够有效的折叠,与相应的抗原具有很好的特异性结合能力。成功改进该展示技术的基因拯救方法,避免了基因突变和链置换的发生。此外还证明了该展示技术具有很好的稳定性。本实验成功构建了筛选Fab抗体库的细菌展技术。 展开更多
关键词 细菌展示 fab 抗体库 流式细胞仪筛选
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