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托伐普坦抑制B16F10细胞黑色素合成的机制研究
1
作者 徐佳珵 岑卿卿 +1 位作者 朱翠翠 徐慧 《组织工程与重建外科》 2025年第2期172-177,共6页
目的研究托伐普坦在黑色素合成中的作用和机制。方法本研究以B16F10细胞为模型,通过细胞活性检测及黑色素含量测定,观察托伐普坦对细胞活力及黑色素含量的影响。通过酪氨酸酶活性检测,观察托伐普坦对细胞酪氨酸酶(TYR)活性的影响;通过... 目的研究托伐普坦在黑色素合成中的作用和机制。方法本研究以B16F10细胞为模型,通过细胞活性检测及黑色素含量测定,观察托伐普坦对细胞活力及黑色素含量的影响。通过酪氨酸酶活性检测,观察托伐普坦对细胞酪氨酸酶(TYR)活性的影响;通过蛋白免疫印迹实验,检测托伐普坦对TYR家族和其他参与黑色素合成的蛋白质表达水平的影响。结果细胞活性检测和黑色素含量测定显示,托伐普坦在不影响细胞活力的情况下,能显著降低细胞内黑色素含量。酪氨酸酶活性检测显示,托伐普坦不影响TYR的催化活性。蛋白免疫印迹实验显示,托伐普坦下调TYR家族蛋白、小眼相关转录因子(MITF)、环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)和黑素皮质素1受体(MC1R)的表达水平。结论托伐普坦具有抑制黑色素合成的作用,其作用机制可能是通过MC1R/cAMP信号通路实现的。 展开更多
关键词 托伐普坦 B16f10细胞 黑色素 环磷酸腺苷 黑素皮质素1受体
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当归乙醇提取物抑制黑色素瘤B16-F10细胞增殖、诱导凋亡的作用及机制研究
2
作者 柯佳杰 沈煜洲 +3 位作者 许雅苹 陈煜沛 陈培元 吴黉坦 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第1期51-60,共10页
目的:探究当归乙醇提取物(EEA)对黑色素瘤细胞B16-F10细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法评价细胞存活率;细胞克隆形成法检测细胞增殖能力;倒置显微镜观察细胞汇合度及形态变化;Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡;流... 目的:探究当归乙醇提取物(EEA)对黑色素瘤细胞B16-F10细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法评价细胞存活率;细胞克隆形成法检测细胞增殖能力;倒置显微镜观察细胞汇合度及形态变化;Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡;透射电镜(TEM)观察细胞线粒体形态结构变化;免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期、凋亡、线粒体生物发生和动力学相关蛋白的表达情况。结果:与空白对照组相比,10~400μg/mL EEA处理24 h和48 h后,细胞存活率降低(P<0.05,P<0.01);100μg/mL和200μg/mL EEA处理24 h后,细胞汇合度下降,出现皱缩变圆、体积缩小等形态改变及染色质固缩等凋亡特征;10~200μg/mL EEA处理14 d后,细胞克隆数目减少(P<0.01);200μg/mLEEA处理24h后,细胞内线粒体变圆变短,其内容物严重破坏甚至消失;20~200μg/mL EEA处理24 h后,G0/G1期细胞比例增加(P<0.01),早期细胞凋亡率增加(P<0.01),活化胱天蛋白酶-9(cleaved caspase-9)和Bax蛋白表达升高(P<0.01),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Cyclin E、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、CDK4、Bcl-2、Bad、Bcl-XL、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、视神经萎缩蛋白1(OPA1)蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),动力相关蛋白1(DRP1)和Fission 1蛋白(FIS1)表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:EEA对B16-F10细胞具有显著抑制作用,其机制可能与诱导细胞G1/S期阻滞,激活内源性线粒体途径细胞凋亡,破坏线粒体生物发生与动力学平衡有关。 展开更多
关键词 当归乙醇提取物 B16-f10细胞 细胞周期 凋亡 线粒体生物发生与动力学
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肿瘤细胞裂解物抗小鼠B16F10黑色素瘤的作用研究 被引量：3
3
作者 路蕾 陈科 +7 位作者 刘彬 王泽宇 葛驰宇 侯景 金亮 邢芸 曹荣月 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2012年第3期232-237,共6页
反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407～426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B1... 反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407～426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B16F10-DT-M2-OK432(BDTMOK),探讨其能否抑制小鼠B16黑色素瘤,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的BDTMOK免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗B16肿瘤细胞裂解物(B16 tumor cell lysate,B16TCL)类抗体。淋巴细胞增殖实验的结果显示,BDTMOK的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防结合治疗性实验的结果显示,BDTMOK激发的免疫应答对于B16肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,皮下注射BDTMOK可以延长皮下移植瘤发生的潜伏期(P<0.05),并且平均瘤重显著降低(P<0.05);抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P<0.01)。疫苗BDTMOK能有效的抑制小鼠B16黑色素瘤的生长。 展开更多
关键词 肿瘤细胞疫苗 B16f10-DT-M2-OK432 B16f10黑色素瘤
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葡萄胎病理相关新基因F10重组蛋白的表达及鉴定 被引量：5
4
作者 庞战军 周君桂 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第6期577-581,共5页
目的 F10是从葡萄胎组织中克隆的新基因,前期研究显示F10基因可能与滋养细胞侵袭性有关,为进一步研究F10基因功能,拟构建原核质粒表达葡萄胎相关新基因F10重组蛋白,分离纯化并鉴定。方法用逆转录聚合酶链反应法从人组织中扩增F10基因编... 目的 F10是从葡萄胎组织中克隆的新基因,前期研究显示F10基因可能与滋养细胞侵袭性有关,为进一步研究F10基因功能,拟构建原核质粒表达葡萄胎相关新基因F10重组蛋白,分离纯化并鉴定。方法用逆转录聚合酶链反应法从人组织中扩增F10基因编码序列,将其克隆到pET28a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达F10基因重组蛋白,用层析柱予以纯化并采用SDS-PAGE电泳鉴定。结果成功构建了pET28a/F10原核表达质粒,并获得高纯度的重组F10蛋白。结论表达及纯化的重组F10蛋白纯度高,适合作为制备单克隆抗体的抗原,可用于F10功能的进一步研究。 展开更多
关键词 f10基因 f10重组蛋白 葡萄胎
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葡萄胎病理相关基因F10编码蛋白单克隆抗体的制备与应用 被引量：1
5
作者 庞战军 周君桂 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期156-160,共5页
目的构建原核质粒表达葡萄胎相关新基因F10重组蛋白,分离纯化制备其单克隆抗体,并鉴定其生物学特性。方法用逆转录聚合酶链反应法从成人组织中扩增F10编码序列,将其克隆到p ET28a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达F10基... 目的构建原核质粒表达葡萄胎相关新基因F10重组蛋白,分离纯化制备其单克隆抗体,并鉴定其生物学特性。方法用逆转录聚合酶链反应法从成人组织中扩增F10编码序列,将其克隆到p ET28a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达F10基因重组蛋白。以纯化后的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体。ELISA法检测杂交瘤细胞分泌F10单克隆抗体的效价和类型,免疫组织化学染色检测F10蛋白在葡萄胎及胎盘组织中的表达,鉴定制备F10单克隆抗体的特异性。结果成功构建了p ET28a/F10原核表达质粒并获得高纯度的重组F10蛋白。筛选出3株能稳定分泌抗F10蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞系,其效价比高达1∶7.2×105,免疫球蛋白类型均为Ig G1类。免疫组织化学染色显示该抗体能特异结合葡萄胎及胎盘绒毛组织中的F10蛋白,且葡萄胎组织中F10蛋白的表达显著高于正常胎盘组织。结论表达及纯化的重组F10蛋白纯度高,免疫原性强。以此为抗原制备的抗F10蛋白的单克隆抗体效价高、特异性强,可用于F10功能的进一步研究。 展开更多
关键词 新基因f10 f10重组蛋白 葡萄胎 单克隆抗体
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F10基因过表达对A549细胞致瘤性的影响 被引量：7
6
作者 宋亚丽 张弓 +5 位作者 庞战军 朱秀兰 杨晓萍 李雅芳 全松 邢福祺 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期676-680,共5页
目的探讨F10基因过表达对肺癌A549细胞裸鼠成瘤的影响及其机制。方法取SPF级裸鼠（4~5周龄）18只,随机均分为A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组（n=6）,依次接种野生A549细胞（A549-WT）、转染了空载体的对照细胞株（Mock-A549）和... 目的探讨F10基因过表达对肺癌A549细胞裸鼠成瘤的影响及其机制。方法取SPF级裸鼠（4~5周龄）18只,随机均分为A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组（n=6）,依次接种野生A549细胞（A549-WT）、转染了空载体的对照细胞株（Mock-A549）和已构建的过表达F10基因的A549细胞（F10＋A549）5×106个于颈背部皮下。接种后每3～4d称体重并观察,记录肿瘤发生时间,绘制在体肿瘤生长曲线,计算各组裸鼠的成瘤率。各组裸鼠于接种5周后处死,进行大体观察后取瘤组织块制备石蜡切片,HE染色后行病理组织学观察,并采用免疫组化法检测Caspase-3、Bax和Bcl-2在瘤组织中的表达。结果 A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组裸鼠的成瘤时间分别为12.0±1.4、11.7±1.0、8.5±1.4d,组间比较差异有统计学意义（F=13.523,P=0.000）,A549-WT组和Mock-A549组裸鼠成瘤时间长于F10＋A549组（P〈0.05）,而前两组比较差异无统计学意义（P=0.660）。大体观察可见,F10＋A549组成瘤体积较A549-WT和Mock-A549组明显增大。F10＋A549组肿瘤的在体生长速度较A549-WT和Mock-A549组增快,差异有统计学意义（P〈0.05）,而后两组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。肿瘤组织HE切片显示,A549-WT和Mock-A549组成瘤组织中存在较多坏死细胞,HE染色表现为均质红染、无定形物质结构,而F10＋A549组成瘤组织边缘细胞坏死较少,细胞增生明显,且肿瘤组织局部可见微血管生成。免疫组化检测显示,Bcl-2蛋白在A549-WT和Mock-A549两组瘤组织中几乎无表达,而在F10＋A549组瘤组织中表达较多,阳性细胞呈弥漫性分布。Bax和Caspase-3蛋白在A549-WT和Mock-A549两组瘤组织中的表达均较强,尤以A549-WT组为显著,但在F10＋A549组瘤组织中表达均很弱。结论 F10基因可通过下调Caspase-3和Bax表达、上调Bcl-2表达而增强肺癌A549细胞株在裸鼠体内的致瘤性。 展开更多
关键词 肺肿瘤 f10基因 A549细胞 致癌性试验
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环保型绝缘介质C5F10O放电分解特性 被引量：20
7
作者 李祎 张晓星 +4 位作者 肖淞 黄立群 唐炬 邓载韬 田双双 《中国电机工程学报》 EI CSCD 北大核心 2018年第14期4298-4305,共8页
近期,CnF2nO类物质得到了替代气体研究领域的关注,尤其是C5F10O和C6F12O,两者均具有极低的温室效应潜能指数（global warming potential,GWP）且绝缘特性优异。由于其出色的绝缘表现,国内外科研机构和公司开始关注该物质及其混合气体,... 近期,CnF2nO类物质得到了替代气体研究领域的关注,尤其是C5F10O和C6F12O,两者均具有极低的温室效应潜能指数（global warming potential,GWP）且绝缘特性优异。由于其出色的绝缘表现,国内外科研机构和公司开始关注该物质及其混合气体,目前针对其放电分解特性的研究较少。该文基于密度泛函理论从微观层面对C5F10O的稳定性及可能的分解路径展开分析,首先计算得到C5F10O的电离能等参数,并基于前线分子轨道理论确定分子结构中可能发生反应的位置。其次,分析C5F10O可能的分解途径、分解产物的形成机制并计算得到相应的能量变化。最后,利用气体绝缘试验平台对C5F10O/N2混合气体进行击穿测试,基于气相色谱质谱联用仪对击穿前后气室内气体组分进行分析,探讨分解产物的绝缘性能及放电过程中各类粒子的动态平衡过程。研究结果表明,C5F10O放电分解形成CF3CO·、C3F7·或C3F7CO·、CF3·自由基的过程最容易发生,各类自由基进一步反应将生成CF4、C2F6、C3F8、C3F6、C4F10、C5F12、C6F14,上述产物均具有较强的绝缘性能,且C5F10O分子与自由基间存在动态平衡过程,两者共同保障了体系的绝缘性能。试验发现随着击穿次数的增加,C5F10O各分解产物含量增加,其中CF4、C2F6、C4F10的增长率高于C3F8、C6F14,自由基更易于复合形成小分子产物。相关结论对进一步探究C5F10O混合气体的绝缘特性及协同效应等课题提供一定理论依据,同时为CnF2nO类新型环保型介质研究提供一些借鉴。 展开更多
关键词 C5f10O分解特性 环保型绝缘介质 密度泛函理论 前线分子轨道理论 能量变化
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葡萄胎发病新基因F10在原发性肝癌中的表达分析 被引量：6
8
作者 周瑾 邢福祺 +2 位作者 余良宽 庞战军 冯桂萍 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期601-603,共3页
目的通过检测原发性肝细胞癌中F10基因的表达,探讨该基因对肝细胞癌发生和发展的可能作用。方法采用地高辛标记F10探针,原位杂交检测人肝细胞癌组织及癌旁组织F10基因的表达水平;通过实时荧光定量PCR方法,在PEABI7000型荧光定量PCR仪上... 目的通过检测原发性肝细胞癌中F10基因的表达,探讨该基因对肝细胞癌发生和发展的可能作用。方法采用地高辛标记F10探针,原位杂交检测人肝细胞癌组织及癌旁组织F10基因的表达水平;通过实时荧光定量PCR方法,在PEABI7000型荧光定量PCR仪上检测肝细胞癌患者手术切除的癌组织及癌旁组织F10基因拷贝数。结果原位杂交结果表明肝癌组织F10基因阳性表达,癌旁组织F10基因不表达;荧光定量PCR显示8例肝细胞癌标本中有6例肿瘤组织中F10基因表达明显高于癌旁组织,其中2例高出4倍以上。结论原发性肝癌组织中存在F10基因的高表达,相应的癌旁组织中未见其表达,提示F10基因在肝细胞癌的发生、发展中起一定的作用。 展开更多
关键词 基因 f10 原位杂交 实时荧光定量聚合酶链反应 癌 肝细胞
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乌贼墨多糖提取物的制备及其对B16F10细胞的影响 被引量：9
9
作者 曹少谦 刘亮 +3 位作者 朱孟飞 陈秋平 戚向阳 杨华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期906-912,共7页
为了探索乌贼墨多糖(SIP)对体外培养的B16F10细胞的生物学效应,以乌贼墨为原材料,对SIP进行提取分离,并研究SIP提取物对B16F10细胞活力、细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成等的影响。结果表明,SIP提取的最优条件为提取温度40℃,料液比1∶3... 为了探索乌贼墨多糖(SIP)对体外培养的B16F10细胞的生物学效应,以乌贼墨为原材料,对SIP进行提取分离,并研究SIP提取物对B16F10细胞活力、细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成等的影响。结果表明,SIP提取的最优条件为提取温度40℃,料液比1∶3,提取时间4h,提取次数3次,在此条件下SIP得率为14.12 mg·g^(-1)。SIP提取物对B16F10细胞形态有一定影响,对细胞活性、酪氨酸酶活性和黑色素合成均有一定抑制作用,且呈现一定剂量效应。综上可知,SIP提取物能抑制黑色素合成,具有作为美白剂的发展前景,这为乌贼墨合理利用提供了一定科学依据。 展开更多
关键词 乌贼墨 多糖 提取 B16f10细胞
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甘草查尔酮A抑制小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖机制研究 被引量：11
10
作者 王艳明 刘瑛 +4 位作者 阎新燕 司玲玲 高彩霞 于丽娜 郑秋生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期967-972,共6页
目的研究甘草查尔酮A抑制B16F10细胞增殖机制。方法 SRB法检测甘草查尔酮A对B16F10细胞增殖影响,Giemsa染色法观察细胞形态变化,比色法检测B16F10细胞内、外黑色素含量,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率,流式细胞术测定细胞周期分布... 目的研究甘草查尔酮A抑制B16F10细胞增殖机制。方法 SRB法检测甘草查尔酮A对B16F10细胞增殖影响,Giemsa染色法观察细胞形态变化,比色法检测B16F10细胞内、外黑色素含量,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率,流式细胞术测定细胞周期分布,Q-PCR法检测细胞凋亡相关基因B淋巴细胞-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞周期蛋白(Cyclin E2)和细胞周期蛋白依赖性激酶-2(CDK2)的mRNA表达。结果甘草查尔酮A能有效抑制B16F10细胞增殖,呈现浓度依赖性和时间依赖性;随药物浓度增加,细胞增殖速度降低,细胞形态由树突状变为固缩圆球状,并伴有黑色素颗粒物出现,且细胞内、外黑色素含量呈浓度依赖性增加趋势,甘草查尔酮A能使细胞阻滞在G1期,在低浓度时,诱导细胞分化,高浓度时,诱导细胞凋亡;同时,甘草查尔酮A下调凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比率,抑制周期相关蛋白Cyclin E2、CDK2的mRNA表达。结论甘草查尔酮A抑制B16F10细胞增殖机制可能是通过使B16F10细胞G1期阻滞,进而诱导细胞分化和凋亡。 展开更多
关键词 B16f10 甘草查尔酮A 增殖抑制率 黑色素含量 细胞分化 细胞凋亡 细胞周期阻滞
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F10基因对细胞中PCNA和Cyclin D1表达的影响 被引量：8
11
作者 曹晓敏 庞战军 +1 位作者 全松 邢福祺 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期6-9,14,共5页
【目的】确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。【方法】构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549,筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生... 【目的】确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。【方法】构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549,筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生长的影响;通过免疫组化检测细胞中增殖核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(cyclinD1)的表达。【结果】转基因的G418抗性克隆能够检测到F10表达。MTT和流式结果显示F10有促进细胞增殖的作用。阳性克隆的细胞株中PCNA和cyclinD1相对较高水平的表达。【结论】F10基因通过上调PCNA和cyclinD1的表达,促进细胞的生长增殖。 展开更多
关键词 f10基因 增殖细胞核抗原 细胞周期素D1
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葡萄胎发病相关新基因F10功能的初步研究 被引量：5
12
作者 曹晓敏 庞战军 +1 位作者 全松 邢福祺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期722-724,728,共4页
目的研究与葡萄胎发病相关的新基因F10的功能。方法培养A549细胞,实验分4组:正向F10基因、反向F10基因、空载体分别转染A549细胞组、空白细胞组。转染24h提取细胞mRNA,用差异显示(DDPCR)方法筛选4组之间差异表达的基因。结果获得差异表... 目的研究与葡萄胎发病相关的新基因F10的功能。方法培养A549细胞,实验分4组:正向F10基因、反向F10基因、空载体分别转染A549细胞组、空白细胞组。转染24h提取细胞mRNA,用差异显示(DDPCR)方法筛选4组之间差异表达的基因。结果获得差异表达的条带,二次PCR扩增后产物连接T载体并测序分析,结果与GenBank数据库中的序列进行同源比较,筛选出几个差异表达的基因,经荧光定量PCR证实annexin I(钙依赖、磷脂结合蛋白)、STAT1(信号转导子与转录激活子)、BASP1在正向F10基因转染组高表达。IPLA2、DATF1在正向F10基因转染组低表达。结论F10基因可能是与细胞增殖和凋亡相关的基因。 展开更多
关键词 葡萄胎 f10基因 差异显示PCR 实时定量PCR 细胞增殖 凋亡
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鸭坦布苏病毒AH-F10株全基因组的分子克隆与序列分析 被引量：8
13
作者 王楠楠 姜安安 +5 位作者 王蓓 王晓旭 毕庄莉 唐井玉 刘光清 王桂军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期50-54,共5页
为了解鸭坦布苏病毒安徽分离株AH-F10的分子特征，利用RT—PCR方法对其全基因组序列进行了克隆，并将全基因组及其推导的氨基酸序列与参考毒株进行序列比对及系统进化分析。结果显示，毒株AH—F10的全基因组序列长10990nt，含有1个大的... 为了解鸭坦布苏病毒安徽分离株AH-F10的分子特征，利用RT—PCR方法对其全基因组序列进行了克隆，并将全基因组及其推导的氨基酸序列与参考毒株进行序列比对及系统进化分析。结果显示，毒株AH—F10的全基因组序列长10990nt，含有1个大的阅读框架，两侧各有一个非编码区（Untranslationregion，UTR）。序列比对结果表明，AH—F10株与13株参考毒株的基因编码区具有较高的氨基酸序列同源性，其中与江苏JS20LO株的同源性最高，达98％。研究还发现，鸭坦布苏病毒各分离株的5IUTR的序列表现一定程度的变异，AH—F10株与参考株的核苷酸序列同源性在94％～97％之间。此研究结果为进一步了解鸭坦布苏病毒的遗传变异及构建该病毒的反向遗传学操作系统奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 AH—f10株 全基因组 序列分析
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葡萄胎发病新基因F10在子宫内膜癌的表达分析 被引量：7
14
作者 周瑾 余良宽 +2 位作者 冯桂萍 庞战军 邢福祺 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1042-1042,共1页
关键词 基因 f10 原位杂交 子宫内膜肿瘤
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光甘草定诱导小鼠黑色素瘤B16F10细胞凋亡的机制研究 被引量：9
15
作者 高彩霞 王艳明 +2 位作者 李德芳 唐晓峰 郑秋生 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期836-842,共7页
通过体外和体内模型研究光甘草定对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖的抑制作用及其分子机制。B16F10细胞经光甘草定处理后可抑制其增殖,且具有浓度依赖性;诱导B16F10细胞凋亡,观察到明显的细胞凋亡状态,细胞内凋亡相关基因及蛋白Bax表达显... 通过体外和体内模型研究光甘草定对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖的抑制作用及其分子机制。B16F10细胞经光甘草定处理后可抑制其增殖,且具有浓度依赖性;诱导B16F10细胞凋亡,观察到明显的细胞凋亡状态,细胞内凋亡相关基因及蛋白Bax表达显著上升,Bcl-2则表达下调。进一步的研究发现,经光甘草定处理后的B16F10细胞中,培养基中葡萄糖含量升高,而ATP含量、乳酸生成均降低;细胞内糖酵解相关基因及蛋白HK2、Ldha表达下调。同时,经光甘草定处理后,移植瘤小鼠的肿瘤组织生长受到明显抑制,肿瘤组织内细胞凋亡率显著升高,Bax表达明显上升,而Bcl-2、HK2和Ldha则表达均下调。说明,光甘草定在一定浓度范围内抑制了小鼠黑色素瘤B16F10细胞的增殖,诱导细胞凋亡,而其诱导细胞凋亡的机制可能与调控糖酵解相关基因的表达相关。 展开更多
关键词 光甘草定 B16f10细胞 糖酵解 细胞凋亡
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Beclin-1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对B16F10细胞自噬及活力的影响 被引量：5
16
作者 贾艳艳 赵莹莹 +6 位作者 余祖华 何雷 廖成水 李静 郁川 张春杰 李银聚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2609-2616,共8页
利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感... 利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感染B16F10细胞,通过加压筛选、有限稀释、细胞驯化得到稳定转染m-Beclin-1-shRNA1的B16F10细胞系。采用RT-PCR和免疫荧光技术检测对Beclin-l的干扰效果,Western blot和透射电镜分析稳转细胞系中自噬标志物LC3蛋白表达及自噬小体形成情况,CCK-8法检测稳转细胞系的活力。结果表明,成功构建了靶向抑制Beclin-l基因表达的shRNA,纯化的慢病毒滴度为1×10^(8) TU·mL^(-1),建立的细胞系中Beclin-1 mRNA和蛋白表达都受到不同程度的抑制,mRNA的沉默效率约为75%(P<0.01),发现干预Beclin-1表达能够抑制LC3-Ⅱ蛋白的表达及自噬小体的形成数量,降低B16F10细胞活力。以上结果表明,干扰Beclin-1表达能够有效降低B16F10细胞自噬活性,促进B16F10细胞死亡,这为探讨Beclin-1基因功能及自噬在抗肿瘤中的作用奠定重要基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 B16f10细胞 Beclin-1基因 慢病毒载体 细胞自噬
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F10基因对转录因子NF-κB、AP1活性的影响 被引量：4
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作者 曹晓敏 庞战军 +1 位作者 全松 邢福祺 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期901-904,共4页
目的:研究F10基因对转录因子NF-κB、AP1活性的影响。方法:质脂体共转染F10基因和报道质粒NF-κB-Luc、AP1-Luc,通过测定荧光素酶的活性以确定F10基因对NF-κB和AP1转录活性的影响;提取各实验组不同时点细胞核蛋白,用电泳迁移率改变实验... 目的:研究F10基因对转录因子NF-κB、AP1活性的影响。方法:质脂体共转染F10基因和报道质粒NF-κB-Luc、AP1-Luc,通过测定荧光素酶的活性以确定F10基因对NF-κB和AP1转录活性的影响;提取各实验组不同时点细胞核蛋白,用电泳迁移率改变实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测AP1、NF-κB和DNA的结合活性。结果:F10基因瞬间转染A549细胞48h NF-κB-Luc和AP1-Luc荧光素酶的活性较其对照组分别下降0.3和上升2倍、AP1和NF-κB与DNA的结合活性分别上升23%和下降49%。结论:F10基因上调AP1活性、下调NF-κB的活性。 展开更多
关键词 葡萄胎 基因 f10 NF-ΚB 转录因子AP-1
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环保型C5F10O绝缘介质过热分解后的自还原特性 被引量：10
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作者 唐炬 代靓君 +3 位作者 李晨 苗玉龙 姚强 曾福平 《中国电机工程学报》 EI CSCD 北大核心 2020年第21期7123-7131,共9页
C5F10O因其优异的绝缘性能和极低的全球变暖潜能,在中低压气体绝缘封闭开关设备中具有替代SF6气体的潜力。在设备内部出现局部过热故障的情况下,C5F10O分解后是否能够自我复原是决定其应用前景的重要因素之一,而目前有关C5F10O气体故障... C5F10O因其优异的绝缘性能和极低的全球变暖潜能,在中低压气体绝缘封闭开关设备中具有替代SF6气体的潜力。在设备内部出现局部过热故障的情况下,C5F10O分解后是否能够自我复原是决定其应用前景的重要因素之一,而目前有关C5F10O气体故障分解后的复原情况的研究还较少。聚焦C5F10O气体过热分解后的复原特性,在已有的气体绝缘介质局部过热分解实验系统上初步进行C5F10O的复原实验,实验结果表明在400℃~475℃的温度范围内,C5F10O过热分解后具有一定的自还原能力;利用密度泛函理论中的Hybrid:B3LYP方法对C5F10O和主要分解产物进行了分子结构优化,详细研究了CF3CFCOCF3—、CF3—、(CF3)2CFCO—自由基以及C3F6生成C5F10O分子的反应路径,并分析了温度对复原反应发生概率的影响,与相同条件下的C5F10O主要分解反应进行对比,从分子层面上初步揭示了C5F10O的自还原特性,为C5F10O气体的工业化应用奠定了基础。 展开更多
关键词 过热分解 环保绝缘介质 绝缘气体 C5f10O
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利用F10.7和MgII构建太阳极紫外辐射长时间序列 被引量：5
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作者 黄富祥 江月 +1 位作者 黄光东 张效信 《地球物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期2912-2917,共6页
利用SOHO/SEM在1996—2008年的太阳EUV观测数据,比较和评估F10.7和MgII作为EUV代理参数的代表性,不能支持Viereck等关于Mg II是比F10.7更好的代理参数的结论.通过比较对两种参数的多种回归计算结果,确立双因子极大似然估计方法构建EUV... 利用SOHO/SEM在1996—2008年的太阳EUV观测数据,比较和评估F10.7和MgII作为EUV代理参数的代表性,不能支持Viereck等关于Mg II是比F10.7更好的代理参数的结论.通过比较对两种参数的多种回归计算结果,确立双因子极大似然估计方法构建EUV计算模式,通过模型计算结果与SEM观测数据比较,表明该模型能够很好地重建EUV数据系列.利用该模式,构建了1978年11月以来的太阳极紫外辐射数据序列. 展开更多
关键词 太阳EUV辐射 f10 7太阳指数 MgⅡ太阳指数 线性回归分析
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胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响 被引量：6
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作者 陈丽 张建 +2 位作者 汪思应 黄德武 顾为望 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第9期978-982,共5页
目的:研究胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响。方法:采用小鼠B16/F10黑色素瘤人工肺转移模型研究胡桃醌对肿瘤细胞血道转移的作用。结果:与溶剂对照组相比,4.5、3、1.5和0.75mg/kg胡桃醌组显著减少小鼠黑色素瘤B16F10血道转... 目的:研究胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响。方法:采用小鼠B16/F10黑色素瘤人工肺转移模型研究胡桃醌对肿瘤细胞血道转移的作用。结果:与溶剂对照组相比,4.5、3、1.5和0.75mg/kg胡桃醌组显著减少小鼠黑色素瘤B16F10血道转移(P<0.05),其抑制率分别为27.30%、55.35%、31.52%和25.34%;3mg/kg胡桃醌与阳性对照组相比,抑瘤率无统计学差异(P>0.05)。结论:胡桃醌可抑制小鼠黑色素瘤B16F10血道转移。 展开更多
关键词 胡桃醌 B16f10 血道转移
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