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呼吸道合胞病毒重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法及免疫原性研究 被引量：2
1
作者 曾瑞红 龚伟 +2 位作者 梅兴国 刁志花 郝丽梅 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期90-93,共4页
目的建立呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,并研究其免疫原性。方法PCR扩增G1和F/M2基因片段,经酶切后插入原核表达载体pET-DsbA中,构建重组质粒pET-DsbA-G1F/M2,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),IPTG诱导表达... 目的建立呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,并研究其免疫原性。方法PCR扩增G1和F/M2基因片段,经酶切后插入原核表达载体pET-DsbA中,构建重组质粒pET-DsbA-G1F/M2,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和色谱法纯化尿素变性的包涵体溶液,梯度透析复性,Western-blot鉴定重组蛋白的RSV特异性,免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果构建的重组质粒在E.coli中表达了RSV特异性的重组蛋白,经变性、纯化并复性后获得了高纯度的DsbA-G1F/M2(>90%);该蛋白诱导了高滴度的RSV特异性抗体和CTL活性。结论建立了重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研究开发RSV重组亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 重组蛋白DsbA—G1f/m2 原核表达 纯化 免疫原性
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雷公藤内酯甲通过抑制巨噬细胞M2极化发挥抗肺癌作用 被引量：1
2
作者 白薇超 刘亚 +2 位作者 庞亚梅 李宏 宁谦 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第16期3013-3019,共7页
目的:探讨雷公藤内酯甲(Wilforlide A,WA)对肺癌细胞增殖和侵袭及巨噬细胞M2极化的影响。方法:(实验一):将肺癌细胞LLC按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10μg/L组。WA孵育48 h后,采用MTT法、Annexin V-FITC/PI染色法和Transwell法... 目的:探讨雷公藤内酯甲(Wilforlide A,WA)对肺癌细胞增殖和侵袭及巨噬细胞M2极化的影响。方法:(实验一):将肺癌细胞LLC按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10μg/L组。WA孵育48 h后,采用MTT法、Annexin V-FITC/PI染色法和Transwell法检测细胞增殖、凋亡和侵袭。采用Western blot检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。(实验二):将单核巨噬细胞RAW264.7按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10μg/L组。采用MTT法检测细胞增殖。然后再将RAW264.7细胞为Control组、IL-4组、WA组和IL-4+WA组。使用10 ng/mL的IL-4和1μg/L的WA培养细胞24 h。采用ELISA法检测细胞培养上清液中CD206、Arg-1和IL-10水平。(实验三):细胞分组如下:Blank组、RAW264.7组、IL-4 RAW264.7组、WA组和IL-4RAW264.7+WA组。按照分组方案,将LLC细胞分别与RAW264.7细胞、IL-4诱导RAW264.7细胞以及10μg/L的WA共培养24 h,然后检测细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞培养上清液中的M2型巨噬细胞标志物水平。流式细胞仪检测CD86和CD206阳性百分比。结果:(实验一):与0μg/L组比较,0.1、1和10μg/L组LLC细胞的相对细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白相对表达水平均升高(P<0.05),侵袭细胞数量以及Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达水平均降低(P<0.05)。(实验二):与0μg/L组比较,10μg/L组RAW264.7细胞的相对细胞活力降低(P<0.05)。与Control组比较,IL-4组RAW264.7细胞的CD206、Arg-1和IL-10水平升高(P<0.05),WA组RAW264.7细胞的CD206、Arg-1和IL-10水平降低(P<0.05)。与IL-4组比较,IL-4+WA组RAW264.7细胞的CD206、Arg-1和IL-10水平降低(P<0.05)。(实验三):与Blank组比较,RAW264.7组和IL-4 RAW264.7组的相对细胞活力和侵袭细胞数量均升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05)。与RAW264.7组比较,IL-4 RAW264.7组的相对细胞活力和侵袭细胞数量升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),CD206、Arg-1和IL-10水平升高(P<0.05),CD86百分比降低,CD206百分比升高(P<0.05)。与IL-4 RAW264.7比较,IL-4 RAW264.7+WA组的相对细胞活力和侵袭细胞数量降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),CD206、Arg-1和IL-10水平降低(P<0.05),CD86百分比升高,CD206百分比降低(P<0.05)。结论:本研究表明雷公藤内酯甲具有抗NSCLC作用,其机制与抑制巨噬细胞的M2型极化有关。 展开更多
关键词 雷公藤内酯甲 雷公藤 非小细胞肺癌 巨噬细胞m2极化 免疫微环境
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极区电离层N_(m)F_(2)观测与国际参考电离层对比研究
3
作者 徐盛 李培豪 +2 位作者 廖小倩 刘瑞源 陈相材 《极地研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期26-36,共11页
利用南北极极隙区与极光带纬度3个台站对电离层F2层峰值电子密度(N_(m)F_(2))长达1个太阳活动周的观测数据,对国际参考电离层IRI-2016模型在极区的适用性进行系统的定量研究。结果表明,在极光带纬度的北极Tromsø站,IRI预测与观测... 利用南北极极隙区与极光带纬度3个台站对电离层F2层峰值电子密度(N_(m)F_(2))长达1个太阳活动周的观测数据,对国际参考电离层IRI-2016模型在极区的适用性进行系统的定量研究。结果表明,在极光带纬度的北极Tromsø站,IRI预测与观测符合最好,大部分季节相对误差在40%以内,在太阳活动高年略好于太阳活动低年。在极隙区纬度的南极中山站和Longyearbyen站,IRI预测精度在太阳活动低年高于太阳活动高年。在中山站和北极Longyearbyen站仅个别月份相对误差在20%以内,大部分月份相对误差超过40%,冬季相对误差接近100%,特别是Longyearbyen站,在太阳活动高年冬季相对误差超过100%。从季节上看,3个台站都是冬季符合最差,夏季符合最好。IRI-2016模型对极区电离层进行预测时,难以如实反映极区等离子体对流和能量粒子沉降等极区特有的物理过程对极区电离层N_(m)F_(2)的影响。 展开更多
关键词 极区电离层 国际参考电离层 IRI-2016模型 f2层峰值电子密度(N_(m)f_(2))
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IL-23、IL-27对RSV重组蛋白疫苗免疫原性的影响 被引量：6
4
作者 杨晨涛 魏林 曾瑞红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期246-250,共5页
目的:以编码IL-23和IL-27的真核表达质粒pcDNA3.1-IL-23(以下简称IL-23)和pcDNA3.1-IL-27(以下简称IL-27)为佐剂,与呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白疫苗G1F/M2共免疫小鼠,观察IL-23和IL-27对疫苗的免疫原性的影响。方法:以IL-23、IL-27质粒... 目的:以编码IL-23和IL-27的真核表达质粒pcDNA3.1-IL-23(以下简称IL-23)和pcDNA3.1-IL-27(以下简称IL-27)为佐剂,与呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白疫苗G1F/M2共免疫小鼠,观察IL-23和IL-27对疫苗的免疫原性的影响。方法:以IL-23、IL-27质粒和Al(OH)3为免疫佐剂,与G1F/M2共免疫BALB/c小鼠,末次免疫后10天杀死小鼠,用ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a水平;流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4+、CD8+细胞的变化;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性小鼠脾细胞杀伤活性。结果:G1F/M2+Al(OH)3+IL-23和G1F/M2+Al(OH)3+IL-27可诱导高效价的IgG、IgG1、IgG2a抗体,且显著高于这三种佐剂单独使用诱导的抗体效价;流式细胞检测结果显示G1F/M2+IL-23和G1F/M2+Al(OH)3+IL-23刺激的CD4+T细胞和CD8+T细胞水平显著高于其他组;单独的IL-23或IL-27对G1F/M2诱导的脾细胞杀伤活性没有增强作用,而Al(OH)3+IL-23和Al(OH)3+IL-27佐剂组的杀伤率显著高于单独的IL-23、IL-27或Al(OH)3组。结论:这些结果表明:IL-23或IL-27质粒与传统铝盐佐剂Al(OH)3联合使用能显著增强RSV重组疫苗G1F/M2的免疫原性。 展开更多
关键词 IL-23 IL-27 呼吸道合胞病毒(RSV) G1f/m2 AL(OH)3 佐剂
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像散透镜对高斯光束的变换特性 被引量：9
5
作者 季小玲 吕百达 《强激光与粒子束》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期397-400,共4页
基于广义惠更斯－菲涅尔衍射积分，并考虑了像散的影响，对高斯光束通过像散透镜后的传输特性作了解析研究，以光束传输因子和桶中功率为参数分析了像散高斯光束的光束质量，并以数值计算例加以说明。
关键词 像散 变换特性 透镜 高斯光束 衍射
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小型药用内加热旋扭筒真空干燥机 被引量：1
6
作者 沈善明 朱丰金 《医药工程设计》 2013年第1期1-4,共4页
药品干燥大多是间歇生产,规模较小,可是现有小型动态真空干燥机无论是加热面积或F(m2)/V(m3)值都难以满足药品干燥的需要,现实需要开发高效率小型真空干燥机,以填补此方面的空白。
关键词 f(m2) V(m3)值 楔型内加热构件 旋扭筒
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