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Effects of Different Enucleation Methods on Developmental Potency of Pig Handmade Clone Reconstructed Embryos
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作者 Lv Lingyan Lu Xingrong +5 位作者 Sun Junming Pan Cuiling Lan Haien Wang Yanling Cui Kuiqing Xie Bingkun 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2016年第3期134-138,共5页
Effects of different enucleation methods on developmental potency of pig handmade clone(HMC)reconstructed embryo was investigated in the paper.We compared enucleation efficiency of blind cut method,first polar body... Effects of different enucleation methods on developmental potency of pig handmade clone(HMC)reconstructed embryo was investigated in the paper.We compared enucleation efficiency of blind cut method,first polar body(Pb1)positioning method and demecolcine(DM)assisted enucleation,as well as their effects on development of HMC reconstructed embryos.The results showed that overall enucleation efficiency of Pb1 positioning method was significantly higher than that of blind cut method(P〈0.05).The protuberance rate and overall enucleation efficiency of 0.4μg/mL DM treated group for 60 min was significantly higher than that of other concentrations and time treatment groups(P〈0.05).For effects on development of HMC reconstructed embryos,there was no significant difference between DM-assisted enucleation and Pb1 positioning method.In conclusion,appropriate addition of DM could enhance enucleation efficiency of HMC,which had no significant influence on developmental potency of reconstructed embryos. 展开更多
关键词 enucleation methods pig handmade clone developmental potency
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5-Aza-CdR对德保黑猪手工克隆重构胚胎体外发育效果的影响 被引量:2
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作者 吕玲燕 陆杏蓉 +5 位作者 孙俊铭 陈宝剑 吴永绍 孙如玉 汪燕玲 崔奎青 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第11期3144-3152,共9页
为了探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对德保黑猪手工克隆(HMC)重构胚胎体外发育效果的影响,本研究分别从供体细胞和重构胚入手,比较了5个不同处理浓度(0、5、10、20和40nmol/L)5-Aza-CdR处理HMC重构胚的体外发育效果,筛选最佳处理浓... 为了探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对德保黑猪手工克隆(HMC)重构胚胎体外发育效果的影响,本研究分别从供体细胞和重构胚入手,比较了5个不同处理浓度(0、5、10、20和40nmol/L)5-Aza-CdR处理HMC重构胚的体外发育效果,筛选最佳处理浓度;在最佳浓度下比较5个不同处理时间(0、24、48、72和96h)对HMC重构胚的体外发育效果,筛选最佳处理时间;用4个不同浓度(0、0.25、0.5和1μmol/L)5-Aza-CdR结合最佳浓度和最佳时间处理供体和重构胚,比较其体外发育潜能。结果显示,与空白对照组相比,5、10、20和40nmol/L5-Aza-CdR处理72h对重构胚卵裂率均无显著差异(P>0.05),20nmol/L 5-Aza-CdR处理能显著提高重构胚的囊胚率(P<0.05),10和20nmol/L 5-Aza-CdR处理均能显著提高囊胚细胞数(P<0.05),其中以20nmol/L 5-AzaCdR效果最佳;与空白对照组相比,利用20nmol/L 5-Aza-CdR处理HMC重构胚72h能显著提高重构胚的囊胚率和囊胚细胞数(P<0.05),其余处理时间对重构胚卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数均无显著影响(P>0.05);在囊胚的最佳处理浓度(20nmol/L)和最佳处理时间(72h)下,结合供体的4个处理浓度(0、0.25、0.5和1μmol/L),同时处理重构胚和供体,各处理组HMC重构胚的发育潜能均有提高,但效果均不显著(P>0.05),其中0.25~0.5μmol/L 5-Aza-CdR处理效果较佳。综上表明,适宜浓度(0.25~0.5μmol/L)的DNA甲基化酶抑制剂5-AzaCdR处理供体细胞72h并结合20nmol/L 5-Aza-CdR处理重构胚72h均能有效提高德保黑猪HMC重构胚胎的体外发育潜能,该结果可为今后研究德保黑猪HMC胚胎DNA甲基化调控机制提供参考。 展开更多
关键词 5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR) 德保黑猪 手工克隆(HMC) 发育效果
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不同去核方法对猪手工克隆重构胚发育效果的影响
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作者 吕玲燕 陆杏蓉 +3 位作者 孙俊铭 潘翠玲 崔奎青 谢炳坤 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2015年第9期16-20,共5页
为探讨不同去核方法对猪手工克隆(HMC)重构胚发育效果的影响,本研究比较了盲切法,第一极体(Pb1)定位法及脱羰秋水仙碱(DM)辅助去核法3种不同的去核方法的去核效率及HMC胚胎发育的影响。结果表明:第一极体定位法和DM辅助去核法的整体去... 为探讨不同去核方法对猪手工克隆(HMC)重构胚发育效果的影响,本研究比较了盲切法,第一极体(Pb1)定位法及脱羰秋水仙碱(DM)辅助去核法3种不同的去核方法的去核效率及HMC胚胎发育的影响。结果表明:第一极体定位法和DM辅助去核法的整体去核效率显著高于盲切法去核法(P<0.05);应用0.4μg/m L DM处理卵母细胞60 min的突起率、整体去核效率显著高于其他浓度和时间处理组(P<0.05);DM辅助去核与pb1定位去核法2种不同去核方法对HMC重构胚的发育效果的影响差异不显著。本研究表明,添加适量的DM可以提高徒手克隆去核效率,且对后期重构胚发育没有显著影响。 展开更多
关键词 去核方法 手工克隆 发育效果
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