期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到214篇文章
< 1 2 … 11 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
基于EXPRESS-G的BAS信息模型拓扑结构浅析 被引量：3
1
作者 张超 马小军 《科技通报》 北大核心 2016年第2期96-99,共4页
基于智能建筑中典型的BAS,在CAD设计的基础上,将EXPRESS-G图形语言运用在BAS设计过程中,以达到在设计与施工过程中减少重复劳动,简化设计过程,降低成本的目的。建立一个包含设备列表、网络拓扑结构、以及点表和操作序列的BAS信息模型,... 基于智能建筑中典型的BAS,在CAD设计的基础上,将EXPRESS-G图形语言运用在BAS设计过程中,以达到在设计与施工过程中减少重复劳动,简化设计过程,降低成本的目的。建立一个包含设备列表、网络拓扑结构、以及点表和操作序列的BAS信息模型,基于此模型可以在建筑的全生命周期中使BAS模型在符合IFC标准的前提下保持单向传递性,利用创建出的模型可以直接使用能耗仿真及维修管理系统等的应用程序,并且能在调试和使用过程中直接从中提取各自所需的数据信息。 展开更多
关键词 BAS express-g 信息模型 IFC 拓扑结构
在线阅读 下载PDF
一种产品数据的图形表达方法──EXPRESS-G 被引量：3
2
作者 王平 李嘉 《计算机辅助设计与制造》 1999年第9期56-58,共3页
关键词 产品数据 图形表达法 express-g
在线阅读 下载PDF
一种产品数据的图形表达方法──EXPRESS-G(下) 被引量：1
3
作者 王平 李嘉璠 《计算机辅助设计与制造》 1999年第10期40-42,50,共4页
关键词 CAD express-g 产品数据 图形表达
在线阅读 下载PDF
基于敏捷制造的产品检验信息数据描述方法研究 被引量：2
4
作者 王红军 韩秋实 Bengt-Gran Rosen 《现代制造工程》 CSCD 北大核心 2004年第6期49-50,37,共3页
论述了敏捷制造的产品检验信息的框架。分析了产品检验信息所涉及的范围和产品检验信息模型的IDEF0模型。在此基础上 ,开发出了基于STEP标准的用EXPRESS和EXPRESS G描述的产品检验信息模型 。
关键词 敏捷制造 检验信息建模 表面质量检验 EXPRESS express-g
在线阅读 下载PDF
靶向癌基因G-四链体的抗癌小分子研究进展
5
作者 何毅成 李茂林 +3 位作者 傅雯丽 陈硕斌 谭嘉恒 黄志纾 《药学进展》 2025年第8期621-629,共9页
癌基因的异常激活是驱动恶性肿瘤发生与发展的关键因素,针对其表达过程进行干预已成为重要的抗癌策略。G-四链体(G-quadruplex,G4)是一类非典型的核酸二级结构,广泛富集于多种癌基因的启动子区域和非编码调控元件中,在基因转录调控中发... 癌基因的异常激活是驱动恶性肿瘤发生与发展的关键因素,针对其表达过程进行干预已成为重要的抗癌策略。G-四链体(G-quadruplex,G4)是一类非典型的核酸二级结构,广泛富集于多种癌基因的启动子区域和非编码调控元件中,在基因转录调控中发挥重要作用。近年来,诸多靶向G4的小分子被发现能够干预“难靶”癌基因的表达。因此G4结构被认为是实现“难靶”癌基因化学干预的潜在突破口。综述靶向癌基因G4的小分子配体研究进展,系统总结相关配体的结构类型及其作用机制,旨在为以G4结构为靶点的潜在抗癌药物发现提供参考。 展开更多
关键词 G-四链体 癌基因 基因表达调控 药物发现
原文传递
传染性造血器官坏死病毒G蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备
6
作者 马淑兄 李长忠 +4 位作者 王璐 贾春艳 陈艳霞 马成林 金文杰 《青海大学学报》 2025年第4期52-58,64,共8页
针对由传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)引发的鱼类重大传染病,通过原核表达系统制备IHNV关键抗原G蛋白,可开发其特异性多克隆抗体。本文利用基因工程技术构建了重组质粒pET-28a-G,转化至大肠杆菌... 针对由传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)引发的鱼类重大传染病,通过原核表达系统制备IHNV关键抗原G蛋白,可开发其特异性多克隆抗体。本文利用基因工程技术构建了重组质粒pET-28a-G,转化至大肠杆菌Top10感受态细胞,经IPTG诱导后获得IHNV G蛋白;再对该蛋白用盐酸胍复性后采用镍柱亲和层析法进行纯化,纯化的蛋白与弗氏佐剂混合免疫小鼠;最后采用间接ELISA法检测抗体效价及Western blot验证抗体特异性。结果表明:通过基因工程可成功构建pET-28a-G原核表达质粒,获得的IHNV G蛋白在大肠杆菌中能成功表达,大小52.51 kDa;纯化的IHNV G蛋白与弗氏佐剂混合免疫小鼠4次后,可制备出多克隆抗体,抗体效价达到1∶128000,且能特异性识别IHNV G重组蛋白。研究结果表明,原核表达的IHNV G重组蛋白具有较强的免疫原性,可诱导小鼠产生较高效价的抗体,制备的多克隆抗体具有良好的反应性和特异性,为后续胶体金检测方法的开发、G单克隆抗体制备、疫苗研制等奠定基础。 展开更多
关键词 IHNV G蛋白 原核表达载体 多克隆抗体
在线阅读 下载PDF
脑胶质瘤患者血浆SIGLEC7、sHLA-G、sTREM2水平与临床特征及术后复发的关系
7
作者 檀雪文 王建村 +2 位作者 薛强 段丽霞 赵兵 《临床和实验医学杂志》 2025年第19期2020-2023,共4页
目的探究脑胶质瘤患者血浆唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7(SIGLEC7)、可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)、可溶性髓样细胞触发受体2(sTREM2)水平与临床特征及术后复发的关系。方法回顾性选取2019年10月至2022年1月于安徽医科大学第二附属... 目的探究脑胶质瘤患者血浆唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7(SIGLEC7)、可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)、可溶性髓样细胞触发受体2(sTREM2)水平与临床特征及术后复发的关系。方法回顾性选取2019年10月至2022年1月于安徽医科大学第二附属医院接受治疗的118例脑胶质瘤患者作为研究组,同期选取在本院体检的100名健康者作为对照组。出院后经3年随访,记录脑胶质瘤患者术后复发情况,共51例未复发作为未复发组,67例复发作为复发组。比较研究组和对照组血浆SIGLEC7、sHLA-G、sTREM2水平,并分析其与脑胶质瘤患者临床特征的关系;单因素、多因素Logistic回归分析脑胶质瘤患者术后复发的影响因素;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析SIGLEC7、sHLA-G、sTREM2表达对脑胶质瘤患者术后复发的预测价值。结果研究组患者血浆SIGLEC7、sHLA-G、sTREM2水平分别为(4.45±0.51)ng/mL、(30.89±5.28)ng/mL、(298.94±31.55)pg/mL,均显著高于对照组[(2.14±0.35)ng/mL、(12.65±2.19)ng/mL、(142.57±21.32)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。脑胶质瘤患者血浆SIGLEC7、sHLA-G、sTREM2水平均与术前卡诺夫斯基功能状态(KPS)评分、局部浸润、世界卫生组织(WHO)分级有关(P<0.05)。单因素、多因素Logistic回归分析结果显示,术前KPS评分、局部浸润、WHO分级、SIGLEC7、sHLA-G、sTREM2均是影响脑胶质瘤患者术后复发的重要因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血浆SIGLEC7、sHLA-G、sTREM23者联合预测脑胶质瘤患者术后复发的效能更高(P<0.05)。结论脑胶质瘤患者血浆SIGLEC7、sHLA-G、sTREM2水平均异常上调,3者与术前KPS评分、局部浸润、WHO分级密切相关,均可作为预测术后复发的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7 可溶性人类白细胞抗原-G 可溶性髓样细胞触发受体2
暂未订购
G蛋白偶联受体30在子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达及亚细胞定位 被引量：7
8
作者 叶佳 张沐 +2 位作者 马勤宜 徐云钊 张玉泉 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期977-981,共5页
目的:探讨G蛋白偶联受体30(Gprotein-coupled receptor 30,GPR30)在人子宫内膜癌细胞株Ishikawa中的表达及亚细胞定位。方法:应用RT-PCR、蛋白质印迹法和免疫荧光技术分析Ishikawa细胞中GPR30蛋白的表达,FCM检测GPR30蛋白在细胞膜和细... 目的:探讨G蛋白偶联受体30(Gprotein-coupled receptor 30,GPR30)在人子宫内膜癌细胞株Ishikawa中的表达及亚细胞定位。方法:应用RT-PCR、蛋白质印迹法和免疫荧光技术分析Ishikawa细胞中GPR30蛋白的表达,FCM检测GPR30蛋白在细胞膜和细胞质中的阳性表达率,胶体金标记GPR30后在透射电子显微镜下观察GPR30蛋白的亚细胞定位。结果:Ishikawa细胞中有GPR30 mRNA和蛋白的表达,主要位于细胞膜和细胞质;细胞质中GPR30蛋白的阳性表达率[(20.10±0.13)%]显著高于细胞膜[(8.54±0.17)%],差异有统计学意义(P<0.01);透射电子显微镜下可见GPR30蛋白的亚细胞定位主要在细胞质的管网状网络上,可能是粗面内质网。结论:Ishikawa细胞中GPR30蛋白在细胞质中的表达高于细胞膜,其亚细胞定位主要位于粗面内质网,提示GPR30可能在子宫内膜癌中发挥重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 雌激素受体 基因表达 G蛋白偶联受体30 细胞 Ishikawa
原文传递
国内外装备综合保障标准数据模型分析 被引量：4
9
作者 卿光辉 李文赞 马超 《中国民航大学学报》 CAS 2016年第5期35-39,50,共6页
装备综合保障标准在产品设计、制造和维护各阶段发挥着非常重要的作用,是推进各行业尤其是航空航天业发展的关键力量。采用对比分析法,从当前国内外装备综合保障标准入手,阐述了装备综合保障的发展过程,对MIL-STD-1388-2B、GJB 3837-99... 装备综合保障标准在产品设计、制造和维护各阶段发挥着非常重要的作用,是推进各行业尤其是航空航天业发展的关键力量。采用对比分析法,从当前国内外装备综合保障标准入手,阐述了装备综合保障的发展过程,对MIL-STD-1388-2B、GJB 3837-99、GEIA-STD-0007标准所采用的数据模型进行对比分析。研究表明,MIL-STD-1388-2B、GJB 3837-99采用树结构数据模型,GEIA-STD-0007采用EXPRESS语言与EXPRESS-G表达法建立数据模型。其中GEIA-STD-0007标准数据模型在数据库建立以及电子技术手册生成方面有较大优势。最后,针对中国装备综合保障研究现状,给出对国军标GJB3837-99改进的建议。 展开更多
关键词 标准 综合保障 数据模型 结构树 EXPRESS—G
在线阅读 下载PDF
呼吸道合胞病毒糖蛋白F和G在同一个重组痘苗病毒中的表达 被引量：15
10
作者 阮力 郑浩强 +4 位作者 徐水婵 王双平 曹旭 解燕乡 朱既明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期101-109,共9页
在使用痘苗病毒启动子P11k、P25k和P7.5k研究呼吸道合胞病毒(RSV)糖蛋白F和G表达效率的基础上,构建成功同时表达BSV F和G糖蛋白的重组痘苗病毒(VMS11G75F)。结果表明,11k和7.5k启动子可以象单独表达RSV F或G一样有效地同时表达RSVF和G... 在使用痘苗病毒启动子P11k、P25k和P7.5k研究呼吸道合胞病毒(RSV)糖蛋白F和G表达效率的基础上,构建成功同时表达BSV F和G糖蛋白的重组痘苗病毒(VMS11G75F)。结果表明,11k和7.5k启动子可以象单独表达RSV F或G一样有效地同时表达RSVF和G。荧光检测显示,RSV F和G主要分布于细胞膜表面,部分RSVF分布于胞浆近核膜处。这种荧光分布特征在RSV F和G单独表达和同时表达的重组痘苗病毒中无明显差别。Westernblot表明,痘苗病毒表达的RSV糖蛋白G具有一条分子量约为90kD的弥散带,与RSV感染细胞产生的RSV G相同;RSVF除具有与RSV感染细胞产生的F1(48kD)和F2(20kD)相同的两种形式外,尚有少量未被蛋白酶水解的F0(6skD)。RSVF和G同时表达的重组痘苗病毒VMS11G75F经传15代后,在表达水平和基因组水平上都具有良好的遗传稳定性。 展开更多
关键词 呼吸道 合胞病毒 重组痘苗病毒
暂未订购
重组人粒细胞集落刺激因子在Escherichia coli中的表达研究 被引量：5
11
作者 乌垠 杨红 +4 位作者 陆军 胡波 麻彤晖 李玉新 郝水 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第4期46-51,共6页
根据人天然粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)基因序列设计出引物 ,通过RT -PCR从人外周血单个核细胞mRNA获得G -CSFcDNA片段 .将该片段与原核表达载体 pT 7构建成重组体 ,导入大肠杆菌后发现天然G -CSFcD NA表达量并不理想 .这可能是由于天... 根据人天然粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)基因序列设计出引物 ,通过RT -PCR从人外周血单个核细胞mRNA获得G -CSFcDNA片段 .将该片段与原核表达载体 pT 7构建成重组体 ,导入大肠杆菌后发现天然G -CSFcD NA表达量并不理想 .这可能是由于天然hG -CSF 5’端G +C的比例过高 ,使转录后的mRNA很容易形成二级结构而影响翻译起始 ,因此在大肠杆菌中很难获得高效表达 .根据密码子简并性原则 ,在不改变编码氨基酸顺序的前提下 ,通过重新设计PCR引物 ,将hG -CSF的前 3个氨基酸密码子中的几个GC碱基作了改动 ,获得了新的cDNA突变体 ,将其与pT 7的重组体导入大肠杆菌 。 展开更多
关键词 粒细胞集落刺激因子 原核表达 G-CSFcDNA片段
在线阅读 下载PDF
开发EXPRESS数据模式的方法 被引量：1
12
作者 李小林 吴锡英 易红 《计算机集成制造系统-CIMS》 EI CSCD 1998年第5期32-36,共5页
随着ＳＴＥＰ标准应用的逐步广泛和深入，用ＥＸＰＲＥＳＳ语言描述的数据模式将广泛地应用在计算机集成制造系统（ＣＩＭＳ）中，因此，研究ＥＸＰＲＥＳＳ数据模式开发方法就具有十分重要的意义。本文提出了一种开发ＥＸＰＲＥＳＳ数... 随着ＳＴＥＰ标准应用的逐步广泛和深入，用ＥＸＰＲＥＳＳ语言描述的数据模式将广泛地应用在计算机集成制造系统（ＣＩＭＳ）中，因此，研究ＥＸＰＲＥＳＳ数据模式开发方法就具有十分重要的意义。本文提出了一种开发ＥＸＰＲＥＳＳ数据模式的具体方法。它综合了多种建立信息模型方法的特点，对ＩＤＥＦ１Ｘ的功能进行了扩充，增加了定义域约束（ＤｏｍａｉｎＣｏｎｓｔｒａｉｎｔ）的概念和实体关系断言的图形表示方法，有力地支持了ＥＸＰＲＥＳＳ数据模式的开发。 展开更多
关键词 EXPRESS STEP标准 CIMS 数据模式
在线阅读 下载PDF
小鼠Doc-1R基因的克隆及其表达 被引量：4
13
作者 生秀杰 周伟强 +3 位作者 姜莉 张梅英 王太一 张学 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期122-122,共1页
背景与目的:Doc-1R基因是1999年克隆的一种新的基因,已有的研究表明Doc-1R基因可能是一种潜在的抑癌基因。为了进一步研究此基因的功能,我们首先克隆了小鼠的Doc-1R基因,并对此基因的表达进行了初步的研究。方法:根据小鼠的Doc-1R基因c... 背景与目的:Doc-1R基因是1999年克隆的一种新的基因,已有的研究表明Doc-1R基因可能是一种潜在的抑癌基因。为了进一步研究此基因的功能,我们首先克隆了小鼠的Doc-1R基因,并对此基因的表达进行了初步的研究。方法:根据小鼠的Doc-1R基因cDNA序列,设计合成基因组特异引物,应用巢式PCR对小鼠基因组步移文库进行扩增。对测序结果进行序列分析及剪接位点的鉴定。另外应用RT-PCR的方法研究了Doc-1R基因在小鼠肝、脾、胰、肾、肺、肠、心、脑、骨、肌肉、膀胱、卵巢、睾丸等13种组织的表达。结果:经二次基因组步移获得了小鼠Doc-1R基因组全长序列。基因组全长2787bp,含4个外显子和3个内含子,外显子与内含子接头符合GT/AG法则。RT-PCR结果表明,Doc-1R基因在小鼠13种组织和器官中均有表达。结论:成功克隆了小鼠Doc-1R基因,为进一步研究此基因的功能奠定了基础。RT-PCR表达结果提示此基因可能是对维持组织器官的功能具有重要的作用的管家基因。 展开更多
关键词 DOC-1R 基因克隆 DNA序列分析 基因表达 小鼠 癌变
暂未订购
水稻谷蛋白GluA-2基因5′上游序列控制下的UidA基因在转基因水稻胚乳中的表达模式(英文) 被引量：2
14
作者 陈豫 曲乐庆 贾旭 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第3期281-286,共6页
为了研究谷蛋白胚乳特异性表达启动子在我国栽培稻品种中的表达模式 ,将UidA基因分别置于水稻谷蛋白GluA 2基因 750bp和 2 3kb上游序列下游 ,利用农杆菌转化法导入栽培稻品种中花 8号并获得转基因植株。Southernblot检测表明 ,UidA基... 为了研究谷蛋白胚乳特异性表达启动子在我国栽培稻品种中的表达模式 ,将UidA基因分别置于水稻谷蛋白GluA 2基因 750bp和 2 3kb上游序列下游 ,利用农杆菌转化法导入栽培稻品种中花 8号并获得转基因植株。Southernblot检测表明 ,UidA基因已经整合到水稻基因组当中并以单拷贝存在。Northernblot检测表明 ,开花后 13～15d和 11～ 13d ,UidA基因和水稻内源的GluA 2基因的表达量分别达到最高 ,随后逐渐降低。对转基因植株种子的GUS染色表明 ,UidA基因仅在胚乳中表达 ,在糊粉层中GUS表达量最高。测定了 2 3kb和 750bp转基因植株种子的GUS活性 ,结果表明前者的GUS活性是后者的 2～ 3倍。序列分析表明 ,位于GluA 2基因转录启始位点上游 2170bp的G 展开更多
关键词 水稻谷蛋白GluA—2基因 表达模式 G—box
在线阅读 下载PDF
牛呼吸道合胞体病毒G蛋白的截短表达与鉴定 被引量：11
15
作者 冯军科 薛飞 +3 位作者 李娇 祖立闯 朱远茂 任宪刚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期24-29,共6页
将牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)G基因截短成2个片段G1和G2,然后以人工合成的牛呼吸道合胞体病毒G基因为模板,利用PCR分别扩增G1和G2基因片段,其大小分别为570 bp和308 bp。将目的片段定向克隆到pET30a... 将牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)G基因截短成2个片段G1和G2,然后以人工合成的牛呼吸道合胞体病毒G基因为模板,利用PCR分别扩增G1和G2基因片段,其大小分别为570 bp和308 bp。将目的片段定向克隆到pET30a表达载体,酶切及测序鉴定均正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导后G1和G2基因片段均获得了表达,且为可溶性表达。利用Ni柱亲和层析法在非变性条件下纯化重组蛋白,经免疫印迹试验鉴定证明纯化的重组蛋白G1具有良好的抗原性和特异性,而重组蛋白G2无反应性。应用纯化的重组蛋白G1进行的间接ELISA与免疫印迹试验在国内牛血清中检测到了BRSV血清抗体。对建立BRSVG蛋白的血清学诊断方法和为开展BRSVG蛋白生物学功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 牛呼吸道合胞体病毒 G基因 克隆 表达
原文传递
马疱疹病毒糖蛋白G基因C-末端的原核表达 被引量：3
16
作者 田志革 郭巍 +1 位作者 相文华 曲娟娟 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期577-581,共5页
为获得马疱疹病毒1型(EHV1)和4型(EHV4)糖蛋白G(gG),对克隆载体pMD-1gG和pMD-4gG分别进行BamHⅠ+SalⅠ和EcoRⅠ+HindⅢ双酶切,将所得片段分别插入表达载体pGEX-6P-1和pET28a(+)中,构建了重组质粒pGEX-1gG和pET-4gG。经双酶切和序列鉴定... 为获得马疱疹病毒1型(EHV1)和4型(EHV4)糖蛋白G(gG),对克隆载体pMD-1gG和pMD-4gG分别进行BamHⅠ+SalⅠ和EcoRⅠ+HindⅢ双酶切,将所得片段分别插入表达载体pGEX-6P-1和pET28a(+)中,构建了重组质粒pGEX-1gG和pET-4gG。经双酶切和序列鉴定为阳性后,将重组质粒pGEX-1gG转化入大肠杆菌BL21(DE3)、重组质粒pET-4gG转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达后对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果显示,分别在35和17ku处出现与预期大小相符的目的条带。Western-blot结果证实,目的蛋白均具有良好的反应原性。表明,成功实现了EHV1gG和EHV4gG蛋白的正确表达,初步鉴定其具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 马疱疹病毒 糖蛋白G 原核表达
原文传递
表皮生长因子诱导人成纤维细胞基因表达谱的变化 被引量：3
17
作者 马宏 张宗玉 童坦君 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第5期313-316,共4页
深入研究EGF对靶细胞的作用有助于揭示细胞增殖、转化、凋亡以及胚胎发育的分子机理。本文采用cDNA微阵列技术,检测EGF持续作用48小时后人胚肺二倍体成纤维细胞基因表达谱的变化。结果显示:EGF长期作用诱导广泛的基因表达变化,在所检测... 深入研究EGF对靶细胞的作用有助于揭示细胞增殖、转化、凋亡以及胚胎发育的分子机理。本文采用cDNA微阵列技术,检测EGF持续作用48小时后人胚肺二倍体成纤维细胞基因表达谱的变化。结果显示:EGF长期作用诱导广泛的基因表达变化,在所检测的4096种人类基因中,有855种发生了变化,这些表达变化的基因参与细胞的能量代谢、生物合成、细胞周期调控及受体酪氨酸激酶和G蛋白耦连受体信号转导等细胞反应,其中最显著的变化趋势是GPCR及其相关蛋白基因表达的下调。 展开更多
关键词 表皮生长因子 诱导 人成纤维细胞 基因表达谱 信号传导
在线阅读 下载PDF
可溶型HLA-G5～-G7分子的克隆表达及对NK细胞杀伤功能的影响 被引量：2
18
作者 许惠惠 林爱芬 +1 位作者 徐丹萍 颜卫华 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期477-481,共5页
通过基因克隆及转染,建立分别稳定表达HLA-G5、-G6及HLA-G7抗原的人绒癌JAR细胞株,探讨可溶型HLA-G5^-G7异构体的表达及对NK细胞杀伤功能的影响。采用RT-PCR、流式细胞术、Western blot及免疫细胞化学法分析、鉴定转染细胞中HLA-G的mRN... 通过基因克隆及转染,建立分别稳定表达HLA-G5、-G6及HLA-G7抗原的人绒癌JAR细胞株,探讨可溶型HLA-G5^-G7异构体的表达及对NK细胞杀伤功能的影响。采用RT-PCR、流式细胞术、Western blot及免疫细胞化学法分析、鉴定转染细胞中HLA-G的mRNA及蛋白表达。LDH释放法检测HLA-G5、-G6及HLA-G7表达对NK细胞杀伤活性的影响。RT-PCR及免疫细胞化学结果显示,HLA-G5^-G7/pVITRO2-mcs重组质粒成功转染HLA-G表达阴性的人绒癌JAR细胞株。FACS分析显示HLA-G5、-G6抗原在JAR-HLA-G5、-G6细胞胞浆内表达。Western blot分析显示可溶性HLA-G5抗原能成功分泌至细胞外。体外杀伤实验发现可溶型HLA-G5抗原能抑制NK细胞的杀伤活性(P<0.05)。本研究结果提示,HLA-G5具有分泌到细胞外的特性,且能有效抑制NK细胞的杀伤活性,但HLA-G6、-G7主要在细胞内表达,其生物学功能有待进一步鉴定。 展开更多
关键词 HLA-G 异构体 真核表达 NK杀伤
原文传递
重组蛋白sHLA-G1的原核表达与纯化 被引量：4
19
作者 张劲 郭霭光 丰美福 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2007年第8期180-184,共5页
为了进一步在蛋白质水平对人白细胞抗原HLA-G进行分析,利用已经构建好的克隆质粒pGEM-T-HLA-G1,进一步构建了重组原核表达质粒pET28a-sHLA-G1。SDS-PAGE检测表明,重组蛋白sHLA-G1在大肠杆菌(E.coli)中得到稳定表达,原核表达的重组蛋白sH... 为了进一步在蛋白质水平对人白细胞抗原HLA-G进行分析,利用已经构建好的克隆质粒pGEM-T-HLA-G1,进一步构建了重组原核表达质粒pET28a-sHLA-G1。SDS-PAGE检测表明,重组蛋白sHLA-G1在大肠杆菌(E.coli)中得到稳定表达,原核表达的重组蛋白sHLA-G1主要以包涵体形式存在。包涵体蛋白经充分洗涤、尿素溶解后用钴离子树脂纯化,并用SDS-PAGE和Western印迹进行了分析,鉴定结果表明,该蛋白纯度达到90%以上,并能与HLA-G特异性抗体87G反应。该研究结果为进一步的复性工作奠定了基础。 展开更多
关键词 HLA-G 原核表达 重组蛋白 包涵体
在线阅读 下载PDF
逆转录病毒表达系统及其在外源蛋白高效表达中的应用 被引量：7
20
作者 许建 李世崇 陈昭烈 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期116-121,共6页
逆转录病毒表达系统是一种新的重组蛋白高效表达系统,它由逆转录病毒载体,包膜蛋白载体和包装细胞系构成,在基因治疗和生物制药领域有很大的应用潜力。逆转录病毒和宿主细胞基因组的重组倾向于发生在转录活性区;口炎疱疹病毒-G蛋白(vesi... 逆转录病毒表达系统是一种新的重组蛋白高效表达系统,它由逆转录病毒载体,包膜蛋白载体和包装细胞系构成,在基因治疗和生物制药领域有很大的应用潜力。逆转录病毒和宿主细胞基因组的重组倾向于发生在转录活性区;口炎疱疹病毒-G蛋白(vesicular stomatitis virus G,VSV-G)能有效扩大逆转录病毒感染宿主细胞的范围、提高逆转录病毒的感染效率;用高滴度的重组病毒感染细胞,经过简单的筛选即可获得高表达细胞株。就逆转录病毒表达系统的组成、感染的特点和机制及其应用前景作了概述。 展开更多
关键词 逆转录病毒表达系统 口炎疱疹病毒-G蛋白 病毒滴度重组蛋白 高效表达
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 11 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部