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表达产肠毒素性大肠杆菌F41重组干酪乳杆菌免疫小鼠的保护性分析 被引量：1
1
作者 刘建奎 魏春华 +2 位作者 侯喜林 余丽芸 王桂华 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期4085-4092,共8页
【目的】利用干酪乳酸菌作为抗原传递系统来刺激机体产生黏膜免疫反应,从而研制有效的黏膜疫苗预防ETECF41的感染。【方法】重组菌在MRS培养基中进行表达,经SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白的表达,间接免疫荧光分析及流式细胞术检... 【目的】利用干酪乳酸菌作为抗原传递系统来刺激机体产生黏膜免疫反应,从而研制有效的黏膜疫苗预防ETECF41的感染。【方法】重组菌在MRS培养基中进行表达,经SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白的表达,间接免疫荧光分析及流式细胞术检测外源蛋白展示到菌体表面。将重组菌及空质粒菌株分别滴鼻接种SPF级Balb/c小鼠,采集血液样品测定小鼠产生抗F41的特异性IgG,收集小鼠肺部冲洗液、肠道冲洗液、阴道冲洗液及粪便样品测定小鼠产生抗F41的特异性sIgA,并对小鼠进行攻毒保护性试验。【结果】重组干酪乳杆菌pLA-F41/L.casei免疫小鼠能够产生明显的抗F41的sIgA和IgG抗体水平,主动免疫组保护率在85%以上,对照组则全部死亡,被动免疫组新生幼鼠的保护率达80%,对照组保护率仅为5%。【结论】细胞表面锚定ETECF41菌毛蛋白的重组干酪乳杆菌pLA-F41/L.casei通过滴鼻途径免疫能够有效预防F41型ETEC的感染。 展开更多
关键词 etecf41 干酪乳酸菌 滴鼻免疫 保护率
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表达ETEC F41重组干酪乳杆菌口服及滴鼻免疫效果的比较 被引量：5
2
作者 刘建奎 魏春华 +2 位作者 侯喜林 王桂华 余丽芸 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期524-530,共7页
【目的】比较小鼠滴鼻与口服接种ETEC F41重组干酪乳杆菌后,机体所产生的抗ETEC F41的黏膜免疫和系统免疫及免疫保护率的差异,为确定ETEC乳酸菌疫苗免疫程序奠定基础。【方法】将构建的重组质粒pLA-F41电转化入干酪乳杆菌,获得阳性重组... 【目的】比较小鼠滴鼻与口服接种ETEC F41重组干酪乳杆菌后,机体所产生的抗ETEC F41的黏膜免疫和系统免疫及免疫保护率的差异,为确定ETEC乳酸菌疫苗免疫程序奠定基础。【方法】将构建的重组质粒pLA-F41电转化入干酪乳杆菌,获得阳性重组菌。重组菌在MRS培养基中进行表达,经Western blot检测目的蛋白的表达,间接免疫荧光及流式细胞术检测外源蛋白展示到菌体表面。SPF级BALB/c小鼠随机分成4组,每组40只,将重组菌以滴鼻和口服途径分别接种2组小鼠,对照组分别接种同剂量的空质粒菌株,免疫4次,初免后不同时间采集血液样品,测定小鼠产生抗F41的特异性IgG,收集小鼠肺部冲洗液、肠道冲洗液、阴道冲洗液及粪便样品测定小鼠产生抗F41的特异性sIgA,并对主动免疫和被动免疫小鼠进行攻毒保护性试验。【结果】重组干酪乳杆菌pLA-F41/L.casei免疫小鼠能够产生明显的抗F41的IgG和sIgA抗体水平,口服主动免疫组保护率在90%以上,滴鼻主动免疫组保护率在85%以上,对照组均全部死亡。口服被动免疫组保护率达90%,滴鼻被动免疫组保护率达80%,对照组保护率均为5%。【结论】滴鼻免疫和口服免疫重组干酪乳杆菌后能产生相近的抗ETEC F41的黏膜免疫和系统免疫并能有效预防ETECF41的感染。 展开更多
关键词 etecf41 滴鼻免疫 口服免疫 干酪乳杆菌 保护率
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