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MicroRNA-184靶向作用EPB41L5抑制肾细胞癌存活与迁移研究 被引量：6
1
作者 赖永旭 李艳萍 《陕西医学杂志》 CAS 2017年第3期294-297,共4页
目的:研究MicroRNA-184(miR-184)对肾癌细胞存活与迁移的影响,并分析其靶基因及功能。方法:RT-PCR法检测肾细胞癌模型小鼠肿瘤组织及细胞系中miR-184的表达水平。脂质体法转染miR-184mimic至肾癌细胞A498、786-O,利用平板克隆及Transwel... 目的:研究MicroRNA-184(miR-184)对肾癌细胞存活与迁移的影响,并分析其靶基因及功能。方法:RT-PCR法检测肾细胞癌模型小鼠肿瘤组织及细胞系中miR-184的表达水平。脂质体法转染miR-184mimic至肾癌细胞A498、786-O,利用平板克隆及Transwell法测细胞克隆形成及迁移能力。生物信息学分析预测miR-184靶基因,荧光素酶报告基因法检测miR-184对靶基因的作用,Western blot法检测靶基因表达量。转染靶基因siRNA检测细胞克隆形成及迁移情况。结果:肾细胞癌小鼠肿瘤组织及肾癌细胞中miR-184表达水平显著降低(P<0.05)。转染miR-184mimic后,肾癌细胞的克隆形成能力及细胞迁移数目显著减少(P<0.05)。靶基因预测结果表明,EPB41L5的3’-UTR包含miR-184的潜在结合位点。miR-184mimic转染降低EPB41L5正常3’-UTR载体的荧光素酶活性,而对突变3’-UTR的荧光素酶活性则无影响。EPB41L5siRNA转染后,肾癌细胞中EPB41L5表达水平较对照组明显下降,同时,细胞体外克隆形成数目及迁移数目显著减少。结论:miR-184可通过作用靶基因EPB41L5而调控肾癌细胞的存活及迁移能力,影响肾细胞癌的发展。 展开更多
关键词 肾肿瘤/病理生理学 @miR-184 @epb41l5 细胞迁移测定 模型 动物 小鼠
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miR-184通过抑制EPB41L5调控大鼠肾癌细胞增殖及迁移
2
作者 李斌斌 唐兴国 刘宏伟 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3312-3316,共5页
为了探讨miR-184对肾癌细胞的影响及机制,本研究选取肾癌细胞株786-0细胞,随机分为对照组、空白转染组和miR-184转染组,其中miR-184转染组转染miR-184 mimic,空白转染组转染空白mimic,采用CCK-8细胞增殖实验检测各组细胞增殖,流式细胞... 为了探讨miR-184对肾癌细胞的影响及机制,本研究选取肾癌细胞株786-0细胞,随机分为对照组、空白转染组和miR-184转染组,其中miR-184转染组转染miR-184 mimic,空白转染组转染空白mimic,采用CCK-8细胞增殖实验检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,划痕实验检测各组细胞迁移,Western blotting检测各组EPB41L5蛋白表达。研究结果表明miR-184转染组培养48 h和培养72 h时OD值分别为(0.964±0.103)和(1.011±0.121),明显低于对照组和空白转染组(p<0.05);miR-184转染组培养72 h后细胞凋亡率为(18.22±2.26)%,明显高于对照组和空白转染组(p<0.05);miR-184转染组培养24 h后细胞迁移数为(17.21±3.06)个,明显低于对照组和空白转染组(p<0.05);miR-184转染组细胞EPB41L5蛋白相对表达量为(0.241±0.061),明显低于对照组和空白转染组(p<0.05)。本研究初步表明:miR-184可抑制肾癌786-0细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡,其可能与其抑制EPB41L5蛋白表达有关。 展开更多
关键词 肾癌 miR-184 epb41l5蛋白 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移
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miR-184在肾癌组织中的表达及其对癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：6
3
作者 冯强 刘涛 《肿瘤学杂志》 CAS 2019年第10期890-895,共6页
[目的]探讨microRNA-184(miR-184)在人肾组织细胞病变以及癌症发生发展中的生理功能。[方法]采用反转录-荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测肾癌组织细胞、癌旁组织细胞中miR-184相对表达;在体外进行细胞实验,向786-0肾癌细胞系转染miR-184 m... [目的]探讨microRNA-184(miR-184)在人肾组织细胞病变以及癌症发生发展中的生理功能。[方法]采用反转录-荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测肾癌组织细胞、癌旁组织细胞中miR-184相对表达;在体外进行细胞实验,向786-0肾癌细胞系转染miR-184 mimics,并运用MTT噻唑兰法对转染miR-184 mimics成功的肾癌细胞进行体外增殖活力检测,同时通过流式细胞仪来检测细胞凋亡发生的情况;Western-blot法检测目的蛋白的相对表达水平。[结果 ]荧光定量PCR检测结果表明,miR-184在肾癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.001);细胞体外转染实验结果表明,与阴性对照组相比,转染miR-184 mimics的786-0肾癌细胞株,其细胞增殖活力显著下降而凋亡率显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);Western-blot检测结果表明,在miR-184 mimics的786-0肾癌细胞株中,EPB41L5表达水平显著下降,相比于阴性对照组以及空白对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]肾癌患者的癌组织中miR-184的表达显著降低,其可能参与肾癌的发生发展;体外细胞学实验表明其在肾癌细胞的增殖和凋亡过程中起着重要作用,可能是通过调控细胞内源EPB41L5蛋白的表达来发挥其生理功能。 展开更多
关键词 miR-184 肾肿瘤 epb41l5
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