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EML3与H3K4M融合蛋白表达质粒的构建及蛋白的表达与纯化
1
作者
王卓文
刘艳丽
《中国科技论文在线精品论文》
2024年第1期79-90,共12页
目的:研究获得N端/C端融合组蛋白H3K4M小肽的EML3融合蛋白的方法。方法:将组蛋白H3(aa1~15)小肽编码区融合进表达EML3 Agenet结构域重组质粒中,得到N端/C端融合表达H3K4M的质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。经扩大培养,加入IPTG后在15...
目的:研究获得N端/C端融合组蛋白H3K4M小肽的EML3融合蛋白的方法。方法:将组蛋白H3(aa1~15)小肽编码区融合进表达EML3 Agenet结构域重组质粒中,得到N端/C端融合表达H3K4M的质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。经扩大培养,加入IPTG后在15℃条件下诱导6×His标签EML3融合蛋白的表达。经镍柱亲和层析及凝胶过滤层析进行纯化后,通过SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色检测蛋白的纯度。结果:通过质粒单点突变、质粒酶切、PCR克隆以及同源重组连接,成功构建EML3 N/C端融合组蛋白H3K4M的重组质粒,测序证实序列正确,而且重组质粒可在大肠杆菌中成功诱导融合蛋白的表达。其中EML3C端融合组蛋白H3K4M可通过凝血酶酶切从而得到游离的H3K4M小肽以及EML3 Agenet结构域蛋白。结论:成功构建EML3融合组蛋白H3K4M重组质粒,并诱导表达及纯化得到高纯度的EML3融合蛋白。
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关键词
微生物药物学
组蛋白H3K4M小肽
eml3
Agenet结构域
融合蛋白
质粒构建
蛋白表达纯化
暂未订购
某难选铅锌矿石浮选分离试验研究
被引量:
9
2
作者
梁友伟
《矿产综合利用》
CAS
2008年第3期3-9,共7页
某铅锌矿石磁黄铁矿含量高,铅锌矿物嵌布细密,交代结构突出,采用常规选矿药剂难以产出合格的铅锌精矿产品。为此,试验针对该矿石特性,采用自行研制的EML3、EML6捕收剂,取得了铅精矿含铅59.38%、含锌3.45%,铅回收率77.07%;锌精矿含锌43....
某铅锌矿石磁黄铁矿含量高,铅锌矿物嵌布细密,交代结构突出,采用常规选矿药剂难以产出合格的铅锌精矿产品。为此,试验针对该矿石特性,采用自行研制的EML3、EML6捕收剂,取得了铅精矿含铅59.38%、含锌3.45%,铅回收率77.07%;锌精矿含锌43.20%、含铅2.43%、锌回收率74.61%的试验指标,为开发该铅锌矿及同类型复杂矿提供了可行的技术依据。
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关键词
铅锌矿
浮选分离
捕收剂
eml3
EML6
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职称材料
多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞因子的变化
被引量:
6
3
作者
李文桂
王鸿
朱佑明
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期911-913,共3页
目的:探讨多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫后再以Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠后8周,用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染。感染后18周杀鼠取脾,...
目的:探讨多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫后再以Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠后8周,用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染。感染后18周杀鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,并收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液中IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4的水平,同时设有空载体、BCG和PBS对照。结果:疫苗接种组的IFN-γ和TNF-α水平升高,IL-4水平降低;皮下注射组的TNF-α水平高于鼻腔内接种组。结论:多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗可诱导小鼠产生Th1型细胞应答,抵抗Em原头节的攻击感染。疫苗皮下注射途径优于鼻腔内接种。
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关键词
多房棘球绦虫
重组BCG—Em
II/3疫苗
重组BCG.Eml4-3—3疫苗
细胞因子
原文传递
题名
EML3与H3K4M融合蛋白表达质粒的构建及蛋白的表达与纯化
1
作者
王卓文
刘艳丽
机构
苏州大学药学院
出处
《中国科技论文在线精品论文》
2024年第1期79-90,共12页
基金
国家自然科学基金(32271309)。
文摘
目的:研究获得N端/C端融合组蛋白H3K4M小肽的EML3融合蛋白的方法。方法:将组蛋白H3(aa1~15)小肽编码区融合进表达EML3 Agenet结构域重组质粒中,得到N端/C端融合表达H3K4M的质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。经扩大培养,加入IPTG后在15℃条件下诱导6×His标签EML3融合蛋白的表达。经镍柱亲和层析及凝胶过滤层析进行纯化后,通过SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色检测蛋白的纯度。结果:通过质粒单点突变、质粒酶切、PCR克隆以及同源重组连接,成功构建EML3 N/C端融合组蛋白H3K4M的重组质粒,测序证实序列正确,而且重组质粒可在大肠杆菌中成功诱导融合蛋白的表达。其中EML3C端融合组蛋白H3K4M可通过凝血酶酶切从而得到游离的H3K4M小肽以及EML3 Agenet结构域蛋白。结论:成功构建EML3融合组蛋白H3K4M重组质粒,并诱导表达及纯化得到高纯度的EML3融合蛋白。
关键词
微生物药物学
组蛋白H3K4M小肽
eml3
Agenet结构域
融合蛋白
质粒构建
蛋白表达纯化
Keywords
microbial pharmacology
histone H3K4M peptide
eml3
Agenet domain
fusion protein
plasmid construction
protein expresion and purification
分类号
R963 [医药卫生—微生物与生化药学]
暂未订购
题名
某难选铅锌矿石浮选分离试验研究
被引量:
9
2
作者
梁友伟
机构
中国地质科学院矿产综合利用研究所
出处
《矿产综合利用》
CAS
2008年第3期3-9,共7页
文摘
某铅锌矿石磁黄铁矿含量高,铅锌矿物嵌布细密,交代结构突出,采用常规选矿药剂难以产出合格的铅锌精矿产品。为此,试验针对该矿石特性,采用自行研制的EML3、EML6捕收剂,取得了铅精矿含铅59.38%、含锌3.45%,铅回收率77.07%;锌精矿含锌43.20%、含铅2.43%、锌回收率74.61%的试验指标,为开发该铅锌矿及同类型复杂矿提供了可行的技术依据。
关键词
铅锌矿
浮选分离
捕收剂
eml3
EML6
Keywords
Lead-zinc ore
Flotation separation
Collector
eml3
EML6
分类号
TD952 [矿业工程—选矿]
在线阅读
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职称材料
题名
多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞因子的变化
被引量:
6
3
作者
李文桂
王鸿
朱佑明
机构
重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期911-913,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30500423)
教育部重点项目(205131)
+2 种基金
重庆市教委科研基金(KJ050313)
重庆市科委科研基金(03-43-8)
重庆市卫生局科研基金资助项目(03-2-099)
文摘
目的:探讨多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫后再以Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠后8周,用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染。感染后18周杀鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,并收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液中IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4的水平,同时设有空载体、BCG和PBS对照。结果:疫苗接种组的IFN-γ和TNF-α水平升高,IL-4水平降低;皮下注射组的TNF-α水平高于鼻腔内接种组。结论:多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗可诱导小鼠产生Th1型细胞应答,抵抗Em原头节的攻击感染。疫苗皮下注射途径优于鼻腔内接种。
关键词
多房棘球绦虫
重组BCG—Em
II/3疫苗
重组BCG.Eml4-3—3疫苗
细胞因子
Keywords
echinococcus multilocularis
recombinant BCG-Emil/3 vaccine
recombinant BC, G-Em]4-3-3vaccine
cytokine
分类号
R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EML3与H3K4M融合蛋白表达质粒的构建及蛋白的表达与纯化
王卓文
刘艳丽
《中国科技论文在线精品论文》
2024
0
暂未订购
2
某难选铅锌矿石浮选分离试验研究
梁友伟
《矿产综合利用》
CAS
2008
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞因子的变化
李文桂
王鸿
朱佑明
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
6
原文传递
已选择
0
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