EMS诱变育种是作物种质创新的重要手段,利用反向遗传学手段TILLING(targeting induced local lesions in genomes)筛选EMS突变体,是研究基因功能与获得优良种质的有效手段之一。本研究采用基于HRM,即高分辨率熔解曲线分析技术的TILLING...EMS诱变育种是作物种质创新的重要手段,利用反向遗传学手段TILLING(targeting induced local lesions in genomes)筛选EMS突变体,是研究基因功能与获得优良种质的有效手段之一。本研究采用基于HRM,即高分辨率熔解曲线分析技术的TILLING筛选方法(HRM-TILLING)进行突变体筛选技术体系的探索,通过设计不同大小扩增片段引物及Mg^(2+)浓度梯度,比较了不同条件下的HRM筛选效果,结果表明当扩增片段长度为150 bp,Mg^(2+)浓度为3.0 mmol/L时,可以有效区分DNA 16倍混合池中ARF7A基因存在碱基差异的两种茄子(Solanum melongena L.)材料,建立了一套基于HRM的茄子EMS突变体TILLING技术的筛选方法。以含有2000个M2株系的茄子(EP26)EMS突变体库为材料,筛选出1个ARF7A基因和2个Pad-1基因突变体株系。本研究建立的筛选技术体系可以快速、高效地筛选茄子EMS突变体,所筛选的突变体为进一步验证、获取茄子单性结实种质及功能基因组学的研究提供研究材料。展开更多
为创制更丰富的豌豆变异材料,获取优异突变体豌豆种质,该研究以‘青建1号’豌豆为试验材料,以甲基磺酸乙酯(EMS)作为诱变剂,以EMS浓度1%、诱变时间8 h为半致死诱变条件,分析该诱变条件下豌豆植株突变类型,获得突变体重要表型性状数据,...为创制更丰富的豌豆变异材料,获取优异突变体豌豆种质,该研究以‘青建1号’豌豆为试验材料,以甲基磺酸乙酯(EMS)作为诱变剂,以EMS浓度1%、诱变时间8 h为半致死诱变条件,分析该诱变条件下豌豆植株突变类型,获得突变体重要表型性状数据,建立豌豆表型突变体库,并结合田间表型数据,筛选优异突变体材料。结果表明:(1)通过1%、8 h EMS诱变10000粒豌豆种子,M_(1)群体有4682株成苗,M_(2)群体筛选到342份豌豆突变体。(2)突变体豌豆表型性状突变类型比较丰富,其中单株籽粒干重变异系数最大,达到0.965。(3)通过对田间表型数据进行综合分析,筛选到10份优异的豌豆突变体种质。该研究结果丰富了豌豆种质资源,可为豌豆相关功能基因挖掘和研究及优良品种选育提供参考依据。展开更多
文摘为创制更丰富的豌豆变异材料,获取优异突变体豌豆种质,该研究以‘青建1号’豌豆为试验材料,以甲基磺酸乙酯(EMS)作为诱变剂,以EMS浓度1%、诱变时间8 h为半致死诱变条件,分析该诱变条件下豌豆植株突变类型,获得突变体重要表型性状数据,建立豌豆表型突变体库,并结合田间表型数据,筛选优异突变体材料。结果表明:(1)通过1%、8 h EMS诱变10000粒豌豆种子,M_(1)群体有4682株成苗,M_(2)群体筛选到342份豌豆突变体。(2)突变体豌豆表型性状突变类型比较丰富,其中单株籽粒干重变异系数最大,达到0.965。(3)通过对田间表型数据进行综合分析,筛选到10份优异的豌豆突变体种质。该研究结果丰富了豌豆种质资源,可为豌豆相关功能基因挖掘和研究及优良品种选育提供参考依据。