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中华绒螯蟹ELOVL7基因克隆及功能验证
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作者 杨志刚 叶晓龙 +3 位作者 陈阿琴 李腾 王爱民 耿明阳 《南方水产科学》 北大核心 2026年第1期199-208,共10页
长链脂肪酸延长酶(Elongation of long-chain fatty acids,ELOVL)在长链多不饱和脂肪酸(Long-chain polyunsaturated fatty acids,LC-PUFA)的生物合成中起关键作用。为探究中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)LC-PUFA的合成机制,采用cDNA末... 长链脂肪酸延长酶(Elongation of long-chain fatty acids,ELOVL)在长链多不饱和脂肪酸(Long-chain polyunsaturated fatty acids,LC-PUFA)的生物合成中起关键作用。为探究中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)LC-PUFA的合成机制,采用cDNA末端快速扩增(Rapidamplification of cDNA ends,RACE)技术克隆获得中华绒螯蟹ELOVL7基因。该基因cDNA全长序列为1600 bp,包含1个1200 bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),编码399个氨基酸,其5'非翻译区(5'-UTR)和3'-UTR长度分别为176和224 bp。ELOVL7具有典型的ELOVL结构,包括8个跨膜结构域、多个保守基序以及特征性的组氨酸盒(HXXHH)。氨基酸序列相似性比对分析显示,中华绒螯蟹ELOVL7与榄绿青蟹(Scylla olivacea)和三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)ELOVL7的氨基酸序列相似性较高,分别为73.82%和73.76%。系统进化树分析显示,中华绒螯蟹ELOVL7首先与榄绿青蟹和三疣梭子蟹ELOVL7聚为一支,进而与其他甲壳动物ELOVL7共同构成一个独立的甲壳类分支。基因组织表达分析显示,中华绒螯蟹ELOVL7基因在肠道组织中表达量最高,其次为鳃组织。为验证其功能,将中华绒螯蟹ELOVL7基因编码序列重组至pYES2载体,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)INVSc1菌株,成功构建了其酿酒酵母异源表达系统。酵母异源表达分析表明,ELOVL7能催化脂肪酸底物C18:1n-9延长为C20:1n-9。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 长链脂肪酸延长酶7 基因克隆 组织表达 酵母异源表达
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苏太猪ELOVL7基因的生物信息学分析 被引量：3
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作者 章峰 李景 +1 位作者 黄路生 张志燕 《生物信息学》 2014年第4期242-248,共7页
不同于人、鼠等物种ELOVL7基因的高相似度,不同品种的猪ELOVL7基因相似度较低。为了探究该基因的特性,本研究运用生物信息学的方法对苏太猪ELOVL7基因及其氨基酸序列的同源性、理化性质、保守结构域、亚细胞定位、信号肽、跨膜结构域、... 不同于人、鼠等物种ELOVL7基因的高相似度,不同品种的猪ELOVL7基因相似度较低。为了探究该基因的特性,本研究运用生物信息学的方法对苏太猪ELOVL7基因及其氨基酸序列的同源性、理化性质、保守结构域、亚细胞定位、信号肽、跨膜结构域、亲水性/疏水性、二级结构、功能预测以及磷酸化位点等进行预测分析。结果表明:在苏太猪中,ELOVL7全长2 324 bp,编码区为846 bp,共编码281个氨基酸。其结构稳定,分子量为33 387.4 Da,带正电荷,偏碱性。该基因所编码的蛋白质最可能位于细胞膜上,主要的功能是运输和结合,为跨膜、非分泌型疏水蛋白质,含有1个GNS1/SUR4家族的保守结构域,并有15个丝氨酸激酶、15个苏氨酸激酶和20个酪氨酸激酶潜在磷酸化位点。α螺旋是ELOVL7二级结构和三级结构中最主要的结构元件。另外ELOVL7与大部分物种的氨基酸序列相似性达90%以上,且亲缘关系较近。分析ELOVL7基因及其氨基酸序列的特征,能够为进一步挖掘该基因内的突变对长链脂肪酸表型的影响以及合成、代谢机理提供分子依据。 展开更多
关键词 elovl7 脂肪酸 生物信息学
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饲粮中添加叶酸和维生素B_(12)对五龙鹅生长性能、屠宰性能、脂肪沉积及极长链脂肪酸延长酶7基因表达量的影响 被引量：7
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作者 王宝维 程漫漫 +3 位作者 孔敏 张名爱 岳斌 葛文华 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期4433-4443,共11页
本试验旨在探究饲粮中添加不同水平叶酸和维生素B12(VB12)对五龙鹅生长性能、屠宰性能、脂肪沉积及极长链脂肪酸延长酶7(ELOVL7)基因表达量及其在不同组织器官中表达差异性的影响及相关性分析。试验选用5周龄五龙鹅420只,随机分为7组,每... 本试验旨在探究饲粮中添加不同水平叶酸和维生素B12(VB12)对五龙鹅生长性能、屠宰性能、脂肪沉积及极长链脂肪酸延长酶7(ELOVL7)基因表达量及其在不同组织器官中表达差异性的影响及相关性分析。试验选用5周龄五龙鹅420只,随机分为7组,每组6个重复,每个重复10只鹅,公母各占1/2,Ⅰ～Ⅵ组为试验组,Ⅶ组为对照组。试验采用2×3两因素交叉等重复的析因设计,饲粮中叶酸的添加水平分别为0.25、2.00 mg/kg,VB12的添加水平分别为0.003、0.009、0.018 mg/kg,试验期为4周。采用实时荧光定量PCR技术测定五龙鹅肝脏中ELOVL7基因的表达量,并选取对照组的五龙鹅,检测ELOVL7基因在心脏、肝脏、肾脏、腹脂、肺、肌胃、腺胃、胸肌、腿肌、脾脏、胰腺11个部位的表达分布情况。结果表明:1)饲粮中添加不同水平叶酸和VB12的交互作用对五龙鹅末重影响显著(P<0.05),Ⅴ组体重最大,对平均日增重、料重比影响不显著(P>0.05)。2)饲粮中添加不同水平叶酸和VB12的交互作用对血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量影响显著(P<0.05)。饲粮中添加不同水平叶酸对血清TG和LDL-C含量影响显著(P<0.05);不同水平VB12对血清葡萄糖(GLU)和LDL-C含量影响显著(P<0.05)。3)饲粮中添加不同水平叶酸和VB12交互作用对胸肌率影响显著(P<0.05),对屠宰率、半净膛率、全净膛率和腿肌率影响均不显著(P>0.05)。Ⅰ、Ⅴ组胸肌率显著高于对照组(P<0.05)。4)饲粮中添加不同水平叶酸和VB12交互作用对皮脂率、腹脂率、肌间脂带宽、胸肌肌内脂肪率和腿肌肌内脂肪率影响显著(P<0.05);Ⅴ组腹脂率显著低于其他各组(P<0.05)。5)饲粮中添加不同水平叶酸和VB12的交互作用对肝脏中ELOVL7基因的表达量影响显著(P<0.05);饲粮中添加不同水平叶酸和VB12均能使肝脏中ELOVL7基因的表达量高于对照组,Ⅴ组表达量最高,显著高于对照组(P<0.05)。6)肝脏中ELOVL7基因表达量与屠宰率呈显著负相关(P <0. 05),与血清TG、LDL-C含量呈显著负相关(P<0.05),与血清总胆固醇(TC)含量呈极显著负相关(P<0.01),与肌间脂带宽呈显著正相关(P<0.05),与皮脂率、腹脂率、腿肌肌内脂肪率呈显著负相关(P<0.05)。7) ELOVL7基因在腹脂中的表达量最高,其次是肺和胰腺,在胸肌、腿肌中的表达量较低。在本试验条件下:1)饲粮中添加适宜水平的叶酸和VB12对五龙鹅ELOVL7基因表达、脂类代谢生化指标和机体营养组成有显著干预作用; 2)叶酸0.25 mg/kg和VB120.009 mg/kg组合(Ⅴ组)最佳。 展开更多
关键词 叶酸 VB12 elovl7基因 脂肪沉积 鹅
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