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Evaluation of HCV core antigen ELISA test system in Korean blood donors
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《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第S1期404-,共1页
关键词 HCV elisa CORE Evaluation of HCV core antigen elisa test system in Korean blood donors
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Smearing the inner surface of the aphenesis plasma bags’ tubes with silicon influences the result of ELISA test
2
《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第S1期408-,共1页
关键词 elisa tubes with silicon influences the result of elisa test
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禽白血病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用 被引量:1
3
作者 苏晓月 吕转平 +2 位作者 沈亚安 赵明明 唐思静 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第1期64-69,共6页
为了建立一种禽白血病病毒(ALV)抗体检测方法,利用原核表达禽白血病病毒的p27蛋白建立一种检测ALV抗体的间接ELISA方法。结果显示,p27蛋白以包涵体形式表达,Western blot检测显示p27蛋白具有良好的反应活性,以p27蛋白为包被抗原建立的间... 为了建立一种禽白血病病毒(ALV)抗体检测方法,利用原核表达禽白血病病毒的p27蛋白建立一种检测ALV抗体的间接ELISA方法。结果显示,p27蛋白以包涵体形式表达,Western blot检测显示p27蛋白具有良好的反应活性,以p27蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法检测NDV、IBDV、IBV、AIV-H9、ILTV阳性血清均为阴性,最低抗体检出效价为1︰12800,与进口试剂盒的符合率为94.87%,检测临床血清样品的阳性率为14.02%。结果说明该研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、符合性好,可为ALV的检测和净化等提供一种简单快速的方法。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 间接elisa方法 抗体检测 净化
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猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒的制备
4
作者 冯平 符美静 +3 位作者 张磊 瞿军军 张艳 陈瑞 《现代畜牧科技》 2025年第9期29-32,共4页
为开发针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高效诊断试剂,该试验通过制备预包被微孔板和酶标抗体,研发出猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒,并开展特异性试验、中和活性试验和临床诊断试验,验证试剂盒性能。结果表明,该试剂盒制备的单... 为开发针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高效诊断试剂,该试验通过制备预包被微孔板和酶标抗体,研发出猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒,并开展特异性试验、中和活性试验和临床诊断试验,验证试剂盒性能。结果表明,该试剂盒制备的单克隆抗体特异性良好,仅与PEDV相关毒株反应呈阳性,与其他毒株及细胞无交叉反应;各单克隆抗体对不同PEDV毒株有较高中和活性,如PEDV-Mabs-2D5对PEDV-KB2013-4株中和效价达1∶2048;试剂盒最低检出量为1∶256,特异性符合率100%,临床检测结果与预期相符。该试验制备的猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒特异性强、灵敏度高,对于判断猪场PEDV感染情况和评估猪瘟疫苗免疫状况意义重大,为PEDV防控提供了有效检测手段。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 特异性试验 elisa抗体检测
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高效区分胸膜肺炎放线杆菌自然感染和疫苗免疫猪的ELISA检测方法构建
5
作者 李建铭 侯晋辉 +4 位作者 徐广鑫 高俊龙 史郑婷 赵睿 袁晋 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第6期1028-1036,共9页
【目的】构建一种能够高效区分胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)自然感染和疫苗免疫猪的检测方法,以便准确评估APP自然感染流行情况。【方法】将以低温诱导表达的可溶性蛋白APP ApxⅣ作为包被抗原,采用方阵滴定... 【目的】构建一种能够高效区分胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)自然感染和疫苗免疫猪的检测方法,以便准确评估APP自然感染流行情况。【方法】将以低温诱导表达的可溶性蛋白APP ApxⅣ作为包被抗原,采用方阵滴定法优化各反应条件,初步建立针对APP ApxⅣ的间接ELISA抗体检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性及与商品化试剂盒的符合率进行评估。【结果】抗原最适包被质量浓度为0.75 mg·L^(-1),包被条件为37℃1 h+4℃14 h;最适封闭液为质量分数2%的海藻糖,封闭条件为37℃1.5 h;血清最适稀释倍数为50倍,孵育条件为37℃1 h;酶标二抗最适稀释倍数为10000倍,孵育条件为37℃30 min;最适显色条件为25℃10 min。该方法与猪链球菌、大肠杆菌和副猪嗜血杆菌等细菌的阳性血清无交叉反应,与猪圆环2型、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬等病毒的阳性血清无交叉反应,与APP灭活疫苗免疫猪的阳性血清无交叉反应。APP阳性血清稀释200倍后检测结果仍为阳性,批内及批间重复性试验的变异系数分别为1.31%~6.27%和0.73%~4.05%。随机选择200份临床血清进行检测,与商品化试剂盒的整体符合率达86.50%。【结论】基于APP ApxⅣ蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法特异灵敏,重复性好,符合率高,可以有效区分APP自然感染和疫苗免疫猪。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ蛋白 间接elisa 抗体检测 自然感染 疫苗免疫
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猪瘟病毒E2蛋白夹心ELISA抗原检测方法的建立及初步应用
6
作者 李建 孙文 +9 位作者 喻亚雄 张飞雁 张敏 周玉双 王璐瑶 王碧群 于义娟 牟林琳 张栋梁 刘项羽 《中国兽药杂志》 2025年第6期1-8,共8页
以纯化的兔多抗作为包被用抗体,辣根过氧化物酶标记鼠单抗作为检测用抗体,以大肠杆菌表达的猪瘟病毒E2蛋白作为标准品,建立了猪瘟病毒E2蛋白夹心ELISA抗原定量方法。结果表明,兔多抗最佳包被浓度为4μg/mL,最佳封闭液为含1%牛血清白蛋... 以纯化的兔多抗作为包被用抗体,辣根过氧化物酶标记鼠单抗作为检测用抗体,以大肠杆菌表达的猪瘟病毒E2蛋白作为标准品,建立了猪瘟病毒E2蛋白夹心ELISA抗原定量方法。结果表明,兔多抗最佳包被浓度为4μg/mL,最佳封闭液为含1%牛血清白蛋白的磷酸盐溶液,最佳反应时间为60 min,最佳二抗稀释度为1∶3200,最佳反应时间为60 min。研究建立的ELISA检测方法最低检出限为39 ng/mL,与猪其他病原无交叉反应,可用于猪瘟病毒相关产品的批量检测。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 elisa 检测
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不同品牌狂犬病病毒抗体ELISA试剂盒和胶体金试纸条检测效果评价
7
作者 陈裕 邓敏儿 +7 位作者 黄雪英 薛红 张海冰 林鸿 林皓 周明 钟卓玲 沈丹 《中国动物检疫》 2025年第11期102-107,共6页
为评价不同品牌狂犬病病毒抗体ELISA试剂盒和胶体金试纸条的检测性能,选择3种ELISA试剂盒和4种胶体金试纸条,对90份犬临床血清样品开展检测,以荧光抗体病毒中和试验结果为标准,分析不同产品检测敏感性、特异性、符合率和一致性等参数的... 为评价不同品牌狂犬病病毒抗体ELISA试剂盒和胶体金试纸条的检测性能,选择3种ELISA试剂盒和4种胶体金试纸条,对90份犬临床血清样品开展检测,以荧光抗体病毒中和试验结果为标准,分析不同产品检测敏感性、特异性、符合率和一致性等参数的差异。结果显示:ELISA试剂盒和胶体金试纸条的敏感性均较高,分别为88.0%~100%和78%~100%;不同品牌ELISA试剂盒的特异性为45.0%~87.5%,符合率为75.6%~87.8%,胶体金试纸条分别为15.0%~75.0%和62.2%~81.1%;7种产品在检测中和抗体含量高的样品时符合率均较高,对抗体含量≥1.00 IU/mL样品的检测符合率为93.1%~100%,对0.10~0.49 IU/mL样品的检测符合率差异较大,3种ELISA试剂盒分别为5.3%、15.8%和73.7%,4种胶体金试纸条分别为5.3%、36.8%、36.8%和63.2%;经Kappa检验,不同产品的检测一致性存在差异,最高的为ELISA试剂盒C(0.753),其次为胶体金试纸条E(0.607),最低的为胶体金试纸条G(0.164)。结果表明,不同品牌产品的检测性能存在一定差异,临床上应选择高效可靠的检测试剂开展犬只狂犬病免疫水平监测工作。 展开更多
关键词 狂犬病 狂犬病病毒抗体 elisa 胶体金试纸条 性能评价
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猪丁型冠状病毒截短S蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立与应用 被引量:1
8
作者 秦秋英 张政 +6 位作者 黄夏玲 洪大林 隆美金 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期48-55,共8页
为建立快速、高效检测猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)的血清学方法,构建了pET-32a-S-S1b重组质粒,通过原核表达获得重组S1b蛋白,以此为包被抗原建立了检测血清中PDCoV IgA抗体的间接ELISA方法,对该检测方法的反应条件... 为建立快速、高效检测猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)的血清学方法,构建了pET-32a-S-S1b重组质粒,通过原核表达获得重组S1b蛋白,以此为包被抗原建立了检测血清中PDCoV IgA抗体的间接ELISA方法,对该检测方法的反应条件进行优化,验证了其特异性、敏感性和重复性等。结果显示:重组S1b蛋白呈包涵体表达,大小为34.7 ku,反应原性良好;建立的间接ELISA检测方法的最佳反应条件为:250 ng/孔抗原4℃过夜包被,10 g/L BSA 37℃封闭2 h,待检血清1∶200稀释37℃孵育45 min,二抗1∶10000稀释37℃孵育1 h,显色时间为10 min。测定24份阴性血清,确定临界值为0.388。检测阳性血清敏感度为1∶1600;批间和批内重复试验的变异系数均小于10%;本方法特异性高,与猪流行性腹泻病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、非洲猪瘟病毒、猪圆环病毒和猪肠病毒标准血清无交叉反应。选取30份血清,与Western-blot检测结果比较,该间接ELISA的符合率为96.66%。应用该方法对486份临床血清样品进行检测,阳性率为32.72%。本研究中建立的方法为PDCoV的防控提供了技术支持。 展开更多
关键词 猪丁型冠状病毒 S蛋白S1b 间接elisa 临床检测
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竞争ELISA和间接ELISA方法应用于牛布鲁氏菌病净化的研究 被引量:11
9
作者 赵灿奇 冯宇 +5 位作者 吕浪 李彦军 魏玉磊 丁家波 陈祥 蒋卉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2146-2153,共8页
旨在评价竞争ELISA方法和间接ELISA方法联合使用在布鲁氏菌病(以下简称“布病”)净化中的效果,为布病防控提供技术支撑。采用本实验室开发的动物布鲁氏菌病竞争ELSIA(cELISA)抗体检测试剂盒、牛布鲁氏菌病间接ELISA(iELISA)抗体检测试... 旨在评价竞争ELISA方法和间接ELISA方法联合使用在布鲁氏菌病(以下简称“布病”)净化中的效果,为布病防控提供技术支撑。采用本实验室开发的动物布鲁氏菌病竞争ELSIA(cELISA)抗体检测试剂盒、牛布鲁氏菌病间接ELISA(iELISA)抗体检测试剂盒及微量法补体结合试验(mCFT),对西北某牛场3 271份牛血清进行检测。本研究采用cELISA初筛、iELISA确诊的净化策略,对检测阳性牛进行淘汰,可疑牛和阴性牛在完全消毒后隔离饲养,并在前一次检测后每隔1个月重新对群体采样,进行多次连续的“检—淘”策略,在群体的个体阳性率低于2%或全部转阴后使用微量补体结合试验(mCFT)进行验证。并在群体全部转阴后继续检测2个月后确定净化结果。结果显示,首次检测阳性率35.36%的感染群体实施本净化策略后,在第1个月阳性率下降至25.41%,第2个月下降至7.16%,第3个月下降为1.86%,到第4个月则实现了布病阳性群体的全面转阴,mCFT验证个体阴性率100%。此后持续检测2个月,个体阳性率均为0,至此实现了感染群体的布病净化,使得群体内近一半的牛免于扑杀,大大减少了经济损失。综上发现,将cELISA用于布病初筛,iELISA用于布病确诊的联合使用,经多次连续检测并结合常规的隔离消毒措施,可以在短时间内实现对于布病感染群体的全面净化。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 竞争酶联免疫吸附试验 间接酶联吸附试验 微量补体结合试验 初筛 确诊
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鸡毒支原体抗体间接ELISA检测技术的应用
10
作者 果磊 关晓辉 《科技创新与应用》 2024年第13期64-67,共4页
该文主要探究ELISA检测试剂盒在鸡毒支原体检测中的应用。使用血清样品、鸡毒支原体菌株和SPF鸡等作为实验材料,分别进行灵敏性实验、重复性实验、抗体持续期检测、临床样品检测准确性检测和保存期实验。结果表明,ELISA试剂盒的灵敏性较... 该文主要探究ELISA检测试剂盒在鸡毒支原体检测中的应用。使用血清样品、鸡毒支原体菌株和SPF鸡等作为实验材料,分别进行灵敏性实验、重复性实验、抗体持续期检测、临床样品检测准确性检测和保存期实验。结果表明,ELISA试剂盒的灵敏性较好;重复性实验的稳定性达到预期;鸡在接种弱毒性疫苗后的35 d内,血清中抗体水平有明显上升;临床样品检测准确性较高;在保存期320 d内,ELISA试剂盒内试剂的敏感性和特异性良好。分析可得,使用ELISA试剂盒测试血清中的鸡毒支原体是可行的,并且具有操作简便、成本较低、效率较快的优势。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 elisa检测 灵敏性试验 重复性实验 抗体持续期监测
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酶联免疫ELISA实验室技术在细胞产品质量检验中的运用
11
作者 刘冬梅 王园园 《实验室检测》 2024年第12期18-21,共4页
随着生物技术的不断发展,促使细胞产品在医药和再生医学中得到广泛的应用,其中的质量控制至关重要。酶联免疫吸附测定法(ELISA)以高灵敏度和特异性著称的检测手段之一,它在细胞产品质量检验方面是必不可少的。鉴于此,本文以ELISA和其他... 随着生物技术的不断发展,促使细胞产品在医药和再生医学中得到广泛的应用,其中的质量控制至关重要。酶联免疫吸附测定法(ELISA)以高灵敏度和特异性著称的检测手段之一,它在细胞产品质量检验方面是必不可少的。鉴于此,本文以ELISA和其他实验室技术在细胞产品质量检验中的应用方面进行进一步的探究。 展开更多
关键词 酶联免疫elisa实验室技术 细胞产品 质量检验 质量提升
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鸡传染性法氏囊病间接ELISA诊断试剂盒的研制及初步应用 被引量:9
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作者 马秀丽 崔言顺 +2 位作者 张秀美 黄兵 崔治中 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期424-426,共3页
采用 vero细胞增殖的 IBDV抗原建立了间接 EL ISA,用于定量检测 IBDV抗体。对该方法进行了标准化研究 ,确立了该方法的最佳工作条件。在此基础上研制了相应的诊断试剂盒 ,并对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性... 采用 vero细胞增殖的 IBDV抗原建立了间接 EL ISA,用于定量检测 IBDV抗体。对该方法进行了标准化研究 ,确立了该方法的最佳工作条件。在此基础上研制了相应的诊断试剂盒 ,并对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性、可重复性、符合率、与国外同类产品的比较、保存期等进行了全面、详细的研究。结果表明 ,研制的试剂盒在 - 2 0℃保存至 6个月时各项性能都很好。该试剂盒与进口试剂盒对同样血清样品检测 ,符合率为86 .7%。间接 EL ISA试剂盒与琼扩试验的符合率为 92 .5 %。该试剂盒可对大量血清样品进行检测 ,操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、快速 ,更适合于大型鸡场 IBD免疫抗体水平的监测及现地疫病诊断等需要。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 间接elisa 诊断试剂盒 抗体检测 定量检测
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重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅳ.与IDEXXELISA试剂盒及Westernblot的比较 被引量:6
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作者 吴延功 徐天刚 +6 位作者 王志亮 张喜悦 王君玮 宋翠平 刘佩兰 徐培莲 宋芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期614-615,共2页
利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法并组装成试剂盒,将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的试剂盒及Western-blot进行了符合率试验。试验结果表明,所研制的试剂盒与Westernblot的符合率达97.67%以... 利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法并组装成试剂盒,将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的试剂盒及Western-blot进行了符合率试验。试验结果表明,所研制的试剂盒与Westernblot的符合率达97.67%以上。对460份临床血清分别用自制的试剂盒和IDEXX公司生产的试剂盒进行检测,其中有37份不相符合,用Westernblot对这37份血清进行验证,有35份血清检测结果与自制的试剂盒检测结果一致。由此表明,自行研制的试剂盒,其特异性和敏感性均能满足目前临床上该疫病的流行病学分析或免疫抗体检测。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 elisa 试剂盒 Western BLOT
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氯霉素残留检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定 被引量:13
14
作者 杨艳艳 张改平 +4 位作者 邓瑞广 王自良 王选年 柴书军 邢广旭 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期130-134,共5页
在建立氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上,研制出CAP残留快速检测试剂盒(CAP-kit),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP-kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.9953,检测范围为1.... 在建立氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上,研制出CAP残留快速检测试剂盒(CAP-kit),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP-kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.9953,检测范围为1.0μg/L~128.0μg/L,灵敏度为0.85μg/L,半数抑制浓度(IC50)为7.54μg/L,检测限为1.0μg/L;牛奶样、猪肉样的平均添加回收率为88.3%、82.5%,平均批内和批间变异系数均<15%;CAP-kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应;试剂盒在4℃可保存6个月。 展开更多
关键词 氯霉素 单克隆抗体 阻断elisa 快速检测试剂盒
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不同检测材料对ELISA检测禽白血病病毒-p27抗原结果的影响 被引量:7
15
作者 沈学怀 张丹俊 +5 位作者 潘孝成 赵瑞宏 胡晓苗 戴银 侯红艳 朱传民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第5期1294-1300,共7页
为探讨不同检测材料对ELISA检测禽白血病病毒(ALV)-p27抗原结果的影响,试验首先对180日龄地方品种母鸡的泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原进行ELISA检测,选取部分阳性鸡和阴性鸡进行分组试验,采用ELISA对试验鸡血清、蛋清和病毒分离的细胞培养... 为探讨不同检测材料对ELISA检测禽白血病病毒(ALV)-p27抗原结果的影响,试验首先对180日龄地方品种母鸡的泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原进行ELISA检测,选取部分阳性鸡和阴性鸡进行分组试验,采用ELISA对试验鸡血清、蛋清和病毒分离的细胞培养液进行ALV-p27抗原检测,采用RT-PCR方法检测血液ALV特异性基因。结果显示,阳性组中以血清、蛋清和细胞培养液作为ELISA ALV-p27抗原检测材料,其检测阳性率均低于泄殖腔棉拭子,血清检测的阳性个体包含全部蛋清和细胞培养液ELISA检测的阳性个体。ELISA检测数据的相关性分析显示,只有血清和细胞培养液检测数据间存在显著性相关,线性关系方程为Y(细胞上清)=1.8439X(血清)-0.1469,R2=0.937;阳性组中ALV-p27基因检测阳性率低于泄殖腔棉拭子,但高于血清、蛋清和细胞培养液,其包含所有血清ELISA检测的阳性样品;外源性ALV-J gp85基因阳性率仅为29.17%,且阳性样品均属于血清ELISA阳性样品。综上所述,成年鸡以泄殖腔棉拭子作为ELISA ALV-p27抗原检测材料存在假阳性结果,蛋清和细胞培养液作为检测材料存在漏检的可能,血清作为ELISA检测材能够更准确地反映成年鸡群ALV感染状态。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 ALV-p27抗原 elisa 检测材料
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链霉素残留检测ELISA试剂盒的研制及应用 被引量:14
16
作者 范国英 王顺岗 +3 位作者 王自良 张改平 邓润广 杨艳艳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期380-384,共5页
本研究采用EDC法人工合成链霉素抗原(SM—BSA),免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了分泌抗链霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了快速检测链霉素(SM)残留的酶联免疫方法,并成功研制了试剂盒。然后对其灵敏度、准确度、特异... 本研究采用EDC法人工合成链霉素抗原(SM—BSA),免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了分泌抗链霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了快速检测链霉素(SM)残留的酶联免疫方法,并成功研制了试剂盒。然后对其灵敏度、准确度、特异性、基质效应性等技术指标进行检测,同时应用该试剂盒对生长猪尿液中的残留情况进行检测。结果表明:除双氢链霉素外,该试剂盒与其它抗生素类药物均无交叉反应;线性检测范围为1~1289g/L,相关系数R^2=0.9251,灵敏度为0.45μg/L,半数抑制浓度(IC50)为7.769g/L,检测限为19g/L;猪尿样的平均添加回收率为84.1%;基质对该试剂盒的检测结果影响不大。该试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SM残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 展开更多
关键词 链霉素 单克隆抗体 细胞融合 竞争elisa 快速检测试剂盒
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牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立 被引量:20
17
作者 朱远茂 王海燕 +6 位作者 薛飞 辛九庆 赵立平 童光志 郭巍 李兆利 相文华 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期959-963,共5页
以牛肾细胞系(MDBK)培养牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验。该ELISA的判定标准为:血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小... 以牛肾细胞系(MDBK)培养牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验。该ELISA的判定标准为:血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小于0.295的判为阴性,在0.295与0.369之间的为可疑。特异性和重复性试验结果表明,该方法特异性高、重复性好。与法国进口ELISA抗体诊断试剂盒比较,其符合率为96.3%;与中和试验比较,符合率为95.8%,且敏感性更高。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染情况,结果显示,这些地区的IBRV感染率为67.1%。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 酶联免疫吸附试验 中和试验
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猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用 被引量:18
18
作者 张朝霞 刘长明 +2 位作者 危艳武 袁婧 黄立平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期548-551,578,共5页
利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化,制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%... 利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化,制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%左右;Ni2+亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为90.1%;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性。用建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD405nm值为0.343;ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3%,特异性为91.2%,敏感性为96.5%;与其他几种常见猪病毒参考血清无交叉反应。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0%~4.8%和8.9%~9.9%;置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5周抗体阳转,第8周~9周抗体水平达到高峰;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测,阳性率为73.6%。研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 重组蛋白 间接elisa 抗体检测试剂盒
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三种伪狂犬病病毒gE抗体ELISA检测试剂盒的比较 被引量:7
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作者 董雅琴 刘爽 +3 位作者 郑辉 张志 吴发兴 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2017年第11期79-81,88,共4页
为比较3种品牌(A、B、C)伪狂犬病病毒(PRV)g E抗体ELISA检测试剂盒的临床使用效果,应用中和试验来标定伪狂犬病非免疫猪场的180份临床血清样品,同时用3种试剂盒进行检测,并对试剂盒的重复性、敏感性、特异性以及与中和试验结果的符合度... 为比较3种品牌(A、B、C)伪狂犬病病毒(PRV)g E抗体ELISA检测试剂盒的临床使用效果,应用中和试验来标定伪狂犬病非免疫猪场的180份临床血清样品,同时用3种试剂盒进行检测,并对试剂盒的重复性、敏感性、特异性以及与中和试验结果的符合度等指标进行测定与分析。结果显示:3种试剂盒的批内稳定性均较好,变异系数均小于10%;批间重复性差异较大,变异系数最小者为8.09%,最大者高达21.31%;3种试剂盒的诊断特性良好,敏感性为95.56%~97.78%,特异性为94.44%~100%;各试剂盒检测结果与中和试验结果均完全相符(Kappa值为0.91~0.96)。比较结果表明,3种试剂盒均适用于临床样品的PRV g E抗体检测,其中稳定性及敏感性俱佳的试剂盒C更适用于PRV的持续监测、早期发现、引种检疫及净化效果评估,而特异性与准确性最高的试剂盒B更适用于贵重病畜的诊断淘汰。因此,生产实践中应根据诊断目的合理选择最适试剂盒。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 g E抗体 elisa检测试剂盒 比较
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重组抗原rMIC3-ELISA检测猪弓形虫抗体的研究 被引量:8
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作者 江涛 姚宝安 赵俊龙 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第34期17286-17287,共2页
[目的]探讨检测猪弓形虫病的新方法。[方法]应用纯化的重组弓形虫微线体蛋白3(rMIC3)作为包被抗原建立间接ELISA方法,用于猪弓形虫抗体的检测。[结果]该法所用最佳抗原浓度为3.40μg/ml,最适宜的血清稀释倍数为1∶160,与猪瘟病毒等阳性... [目的]探讨检测猪弓形虫病的新方法。[方法]应用纯化的重组弓形虫微线体蛋白3(rMIC3)作为包被抗原建立间接ELISA方法,用于猪弓形虫抗体的检测。[结果]该法所用最佳抗原浓度为3.40μg/ml,最适宜的血清稀释倍数为1∶160,与猪瘟病毒等阳性血清不发生交叉反应,与LAT的符合率为92.56%。[结论]该方法快速、特异、重复性好,可用于猪弓形虫病的诊断和流行病学的调查。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 rMIC3 elisa 检测
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