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高中生物学教学中开展EEFS教育对学生情感态度与价值观的影响 被引量:4
1
作者 蔡薇 李韶山 《生物学通报》 2006年第3期43-45,共3页
借鉴国外环境和可持续发展教育(EEFS)的成功的经验和教学方法,选取省一级中学高二学生作为研究对象,结合高中生物学教学,采用学科渗透、专题研究以及面向全体学生开展EEFS活动方式,在全面提高学生生物科学素养的同时,注意培养学生的可... 借鉴国外环境和可持续发展教育(EEFS)的成功的经验和教学方法,选取省一级中学高二学生作为研究对象,结合高中生物学教学,采用学科渗透、专题研究以及面向全体学生开展EEFS活动方式,在全面提高学生生物科学素养的同时,注意培养学生的可持续发展理念,提高环境素养,形成正确的情感态度与价值观。学生更加关注周围的环境问题,并尝试运用可持续发展观念分析和解决广州的环境与社会可持续发展问题。 展开更多
关键词 环境和可持续发展教育(eefs) 情感态度 价值观 可持续发展 批判性思维 高中 生物学教学
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The pseudogenes of eukaryotic translation elongation factors (EEFs): Role in cancer and other human diseases
2
作者 Luigi Cristiano 《Genes & Diseases》 SCIE 2022年第4期941-958,共18页
The eukaryotic translation elongation factors (EEFs), i.e. EEF1A1, EEF1A2, EEF1B2, EEF1D, EEF1G, EEF1E1 and EEF2, are coding-genes that play a central role in the elongation step of translation but are often altered i... The eukaryotic translation elongation factors (EEFs), i.e. EEF1A1, EEF1A2, EEF1B2, EEF1D, EEF1G, EEF1E1 and EEF2, are coding-genes that play a central role in the elongation step of translation but are often altered in cancer. Less investigated are their pseudogenes. Recently, it was demonstrated that pseudogenes have a key regulatory role in the cell, especially via non-coding RNAs, and that the aberrant expression of ncRNAs has an important role in cancer development and progression. The present review paper, for the first time, collects all that published about the EEFs pseudogenes to create a base for future investigations. For most of them, the studies are in their infancy, while for others the studies suggest their involvement in normal cell physiology but also in various human diseases. However, more investigations are needed to understand their functions in both normal and cancer cells and to define which can be useful biomarkers or therapeutic targets. 展开更多
关键词 CANCER eefs Non-coding RNA PSEUDOGENE TRANSLATION Translation elongation factor
原文传递
青鳉eef1a1l3基因的表达特征及抗体制备
3
作者 黄岩 林淑婷 +2 位作者 邓菊 梁晶婕 陈天圣 《淡水渔业》 北大核心 2025年第1期60-68,共9页
青鳉(Oryzias latipes)是研究性别分化和生殖调控的重要模式鱼类,前期通过青鳉性腺转录组发现eef1a1l3 mRNA在卵巢中高表达,而在精巢几乎不表达,推测其参与性别分化和卵巢发育的调控。生物信息学分析显示,Eef1a1l3蛋白在硬骨鱼类中非常... 青鳉(Oryzias latipes)是研究性别分化和生殖调控的重要模式鱼类,前期通过青鳉性腺转录组发现eef1a1l3 mRNA在卵巢中高表达,而在精巢几乎不表达,推测其参与性别分化和卵巢发育的调控。生物信息学分析显示,Eef1a1l3蛋白在硬骨鱼类中非常保守。为探究eef1a1l3基因的功能,通过半定量PCR(SqRT-PCR)绘制了eef1a1l3基因在不同组织和早期不同发育时期的表达谱。通过抗原选取、原核表达、蛋白纯化以及动物免疫实验获取Eef1a1l3多克隆抗体,并对该抗体进行了特异性的检测以及效价的鉴定。结果显示,eef1a1l3 mRNA在成体组织中仅在卵巢特异表达,在早期胚胎发育阶段呈现母源性表达。制备的Eef1a1l3多克隆抗体与抗原结合的最大稀释倍数为1∶64000,显示出良好的免疫原性,并且Eef1a1l3蛋白在青鳉性腺中的卵巢而非精巢中有表达,这与mRNA表达模式一致。综上,eef1a1l3基因可能是早期胚胎发育和卵巢发育的重要调控因子,并且制备的Eef1a1l3多克隆抗体可以应用于青鳉及其他硬骨鱼类eef1a1l3基因功能的相关研究。 展开更多
关键词 青鳉(Oryzias latipes) eef1a1l3基因 多克隆抗体 表达模式 性别分化
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植物延伸因子eEF1A研究进展 被引量:16
4
作者 覃迎姿 黄先益 +2 位作者 叶兴枝 王爱勤 李杨瑞 《广西农业科学》 CAS CSCD 2009年第5期472-477,共6页
60年代初,首先从E.co1i细胞中分离获得延伸因子,延伸因子eEF1A广泛存在于真核细胞内,是在核糖体上催化氨基酸链的延伸而推动、控制蛋白质的合成等方面起到重要作用的蛋白质因子。在植物蛋白质合成延伸过程中,eEF1A是一个主要的翻译因子... 60年代初,首先从E.co1i细胞中分离获得延伸因子,延伸因子eEF1A广泛存在于真核细胞内,是在核糖体上催化氨基酸链的延伸而推动、控制蛋白质的合成等方面起到重要作用的蛋白质因子。在植物蛋白质合成延伸过程中,eEF1A是一个主要的翻译因子;在快速增殖的细胞中,eEF1A基因的表达调控十分保守,其表达水平同细胞生长及增殖速度有关。eEF1A除了参与同翻译控制有关的信号传导外,还参与细胞生长、应激反应及与运动性有关的信号传导,并且与细胞凋亡等有关。eEF1A在体内和体外均能同肌动蛋白纤维及微管蛋白结合,是细胞骨架运动性的调节蛋白。目前许多植物的eEF1A基因已被分离,植物种间的eEF1A氨基酸序列高度保守;植物eEF1A由多基因编码,它的表达受激素、环境胁迫和生长发育过程等因素诱导。文章通过总结植物延伸因子eEF1A的生理作用以及eEF1A基因的克隆、鉴定、诱导表达等分子生物学研究,以期为今后进一步深入研究eEF1A奠定基础。 展开更多
关键词 延伸因子 eEF1A 生理作用 克隆表达 展望
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植物蛋白质合成延伸因子 被引量:6
5
作者 陈建中 章镇 戴剑 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2002年第4期406-411,共6页
蛋白质的生物合成是一个需要许多大分子如起动因子、延伸因子、终止因子、核糖体、信使RNA、氨酰合成酶和tR NA协同作用的复杂的生理生化过程。植物蛋白质合成延伸因子eEF1和eEF2通过在核糖体上催化氨基酸链的延伸而推动、控制蛋白质的... 蛋白质的生物合成是一个需要许多大分子如起动因子、延伸因子、终止因子、核糖体、信使RNA、氨酰合成酶和tR NA协同作用的复杂的生理生化过程。植物蛋白质合成延伸因子eEF1和eEF2通过在核糖体上催化氨基酸链的延伸而推动、控制蛋白质的合成。 展开更多
关键词 eEF1A eEF2 分子机制 分子修饰 系统发育 生物合成 植物蛋白质 延伸因子
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中国荷斯坦奶牛EEF1D基因的SNPs检测及其与产奶性状的关联分析 被引量:4
6
作者 张娟 母童 +5 位作者 蔡正云 顾亚玲 刘丽元 杨雪瑶 温万 孙东晓 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第4期961-969,共9页
试验旨在研究中国荷斯坦奶牛真核生物翻译延伸因子1 D(eukaryotic translation elongation factor 1delta,EEF1D)基因的多态性及其与产奶性状的相关性。利用Sequenom MassARRAY SNP分型技术对宁夏地区1 252头中国荷斯坦奶牛EEF1 D基因... 试验旨在研究中国荷斯坦奶牛真核生物翻译延伸因子1 D(eukaryotic translation elongation factor 1delta,EEF1D)基因的多态性及其与产奶性状的相关性。利用Sequenom MassARRAY SNP分型技术对宁夏地区1 252头中国荷斯坦奶牛EEF1 D基因的多态性进行了检测,并对其多态位点不同基因型和组合基因型与产奶性状进行了关联分析。结果显示,EEF1 D基因的5′侧翼区存在2个SNPs位点,即EEF1D-1和EEF1D-3;经检测发现,EEF1D-1存在2种基因型,EEF1D-3存在3种基因型。χ2检验表明,中国荷斯坦奶牛在EEF1D-1位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05),在EEF1D-3位点未偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);EEF1D-1和EEF1D-3位点多态信息含量(PIC)分别为0.10和0.28,分别呈现低度多态和中度多态。在试验群体中,EEF1D-1位点对乳脂率和乳蛋白率性状的效应均达到极显著水平(P<0.01),对305d产奶量性状的效应达到显著水平(P<0.05);EEF1D-3位点对305d产奶量、乳脂率和乳蛋白率性状的效应均达到极显著水平(P<0.01);EEF1 D基因的优势基因型组合GG-AG和GG-GG个体乳脂率均显著高于GG-AA组合个体(P<0.05)。说明EEF1 D基因可以作为影响中国荷斯坦奶牛产奶性状的候选基因用于标记辅助选择。 展开更多
关键词 中国荷斯坦牛 EEF1D基因 产奶性状 SNP 基因型组合
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甘蔗eEF1A反义表达载体构建及其遗传转化研究 被引量:2
7
作者 覃迎姿 王爱勤 +2 位作者 黄文静 杨丽涛 李杨瑞 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期579-583,共5页
延伸因子eEF1A(Eukaryotic elongation factor 1A)是在核糖体催化氨基酸链延伸以及推动、控制蛋白质合成过程中起重要作用的蛋白质因子。利用RT-PCR技术扩增得到甘蔗eEF1A的编码区1420 bp的cDNA序列,反向连接到受体质粒pB I121载体中,... 延伸因子eEF1A(Eukaryotic elongation factor 1A)是在核糖体催化氨基酸链延伸以及推动、控制蛋白质合成过程中起重要作用的蛋白质因子。利用RT-PCR技术扩增得到甘蔗eEF1A的编码区1420 bp的cDNA序列,反向连接到受体质粒pB I121载体中,构建含GUS基因的甘蔗eEF1A基因反义植物表达载体pB IantiEF。用冻融法将pB IantiEF导入根癌农杆菌菌株EHA105中,通过农杆菌介导法,将eEF1A反义基因转化烟草K346。将获得的43株抗卡那霉素烟草经PCR筛选,得到38株呈阳性的反义转基因植株,阳性植株再经Dot-Southern杂交检测,证明eEF1A基因已整合进其中的34株烟草基因组中,平均转化率为79%。反义转基因烟草植株移栽后表型出现不同程度的变异,叶片变厚,卷曲不能平展,叶背出现明显皱折,并外突成芽,茎、叶的伸长明显受阻,顶芽出现双芽,开花延迟。推测甘蔗延伸因子eEF1A可能与甘蔗茎、叶伸长生长和发育有关。 展开更多
关键词 甘蔗 eEF1A 反义转基因 遗传转化
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EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定 被引量:2
8
作者 曹海霞 诸琦 +3 位作者 章永平 黄佳 张愫 姚玮艳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期174-176,共3页
目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长,构建其重组腺病毒载体。方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF1A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2。利用同源重组的方法将... 目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长,构建其重组腺病毒载体。方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF1A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2。利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-EEF1A2共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2,经过在293细胞中包装和扩增之后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2。PCR、WesternBlot检测EEF1A2基因的表达。结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1400bp的cDNA片段,经测序证实为人EEF1A2基因。构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-EEF1A2。结论:成功地克隆了人EEF1A2基因全长,并构建其表达的重组腺病毒载体,为进一步研究人EEF1A2基因在相关疾病中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 腺病毒科 EEF1A2 腺病毒载体 基因克隆
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奶牛乳脂性状候选基因EEF1D突变位点功能分析 被引量:3
9
作者 蒋秋斐 蔡正云 +3 位作者 黄增文 冯小芳 张娟 顾亚玲 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第7期1155-1159,共5页
提高乳脂含量、提升奶质已成为当前奶牛业研究的重点方向之一。前期经GWAS方法研究发现,EEF1D基因5′非翻译区(5′-UTR)的G/A突变与乳脂率极显著相关,为了进一步对候选基因EEF1D的突变位点进行功能分析,首先通过人工合成获得了EEF1D基... 提高乳脂含量、提升奶质已成为当前奶牛业研究的重点方向之一。前期经GWAS方法研究发现,EEF1D基因5′非翻译区(5′-UTR)的G/A突变与乳脂率极显著相关,为了进一步对候选基因EEF1D的突变位点进行功能分析,首先通过人工合成获得了EEF1D基因突变型与野生型片段,并在细胞水平上对其开展了功能验证实验。研究发现,EEF1D基因5′-UTR的G/A突变引起Sp3转录起始位点后移33 bp,并且突变型的活性大约是野生型的3倍。研究结果表明,该突变可改变转录因子的转录起始位点,从而使EEF1D的表达上调。 展开更多
关键词 乳脂含量 EEF1D基因 5′非翻译区(5′-UTR) SP3 突变型
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TOR信号转导通路介导的翻译控制 被引量:2
10
作者 孙姝娟 王雷 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期1-5,共5页
TOR(target of rapamycin)是真核生物中高度保守的一种大分子的Ser/Thr激酶,是免疫抑制剂雷帕霉素的在体内的靶物质。TOR能够对营养状况和生长因子等因素的变化做出应答反应,通过介导磷酸化反应调节蛋白激酶4E-BP1,S6K, eEF2和磷酸酶等... TOR(target of rapamycin)是真核生物中高度保守的一种大分子的Ser/Thr激酶,是免疫抑制剂雷帕霉素的在体内的靶物质。TOR能够对营养状况和生长因子等因素的变化做出应答反应,通过介导磷酸化反应调节蛋白激酶4E-BP1,S6K, eEF2和磷酸酶等的活性,控制下游翻译因子的磷酸化水平,调节核糖体发生,蛋白质合成等生理过程,在细胞的生长,增殖的综合调控中起到中枢作用。 展开更多
关键词 TOR 4E-BP S6K eEF2 Sit4 信号转导 翻译控制
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加减薯蓣丸对APP/PS1小鼠海马区AMPK/eEF2K/eEF2信号通路的影响 被引量:2
11
作者 程宇航 邱静 +3 位作者 鄢文静 张雨婷 汪怡萍 谭子虎 《西部中医药》 2021年第3期30-34,共5页
目的:探讨加减薯蓣丸对APP/PS1小鼠海马区腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、真核细胞延伸因子2激酶(Eukaryotic elongation factor 2 kinase,eEF2K)、真核细胞延伸因子2(Eukaryotic elongation factor 2,eEF2)... 目的:探讨加减薯蓣丸对APP/PS1小鼠海马区腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、真核细胞延伸因子2激酶(Eukaryotic elongation factor 2 kinase,eEF2K)、真核细胞延伸因子2(Eukaryotic elongation factor 2,eEF2)蛋白水平的影响,探讨其参与改善AD病理的机制。方法:将5月龄雄性APP/PS1小鼠20只分为模型组和中药组,同窝野生型小鼠10只作为空白组,中药组每天予加减薯蓣丸14 g/kg,模型组及空白组予等体积生理盐水,灌胃28天。采用新物体识别实验测试小鼠学习记忆能力;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测小鼠海马区AMPKα1、eEF2K、eEF2对应磷酸化蛋白p-AMPKα1、p-eEF2K、p-eEF2、突触素(synapsin-1,SYN-1)以及突触后膜致密物95(postsynaptic density 95,PSD-95)的表达水平。结果:与空白组相比,模型组小鼠新物体识别能力下降;与模型组相比,中药组小鼠新物体识别能力上升。与空白组相比,模型组小鼠p-AMPKα1/AMPKα1、p-eEF2K/eEF2K、p-eEF2/eEF2不同程度上升,SYN-1、PSD-95表达下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中药组小鼠p-AMPKα1/AMPKα1、p-eEF2K/eEF2K、p-eEF2/eEF2均下降,SYN-1、PSD-95表达上升,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:加减薯蓣丸通过抑制APP/PS1小鼠海马区AMPKα1磷酸化水平,调节eEF2K/eEF2信号通路,影响AD的突触可塑性,以改善其病理状态,提高APP/PS1小鼠学习记忆能力。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 AMPK eEF2K/eEF2信号 突触可塑性 加减薯蓣丸 小鼠
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新型的eEF2K抑制剂BL-EKI03在乳腺癌中诱导自噬和凋亡作用机制研究 被引量:1
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作者 张岚 赵玉倩 刘博 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1063-1063,共1页
目的真核延伸因子-2激酶(e EF2K)可以使癌细胞适应代谢压力,在一些癌症类型中发现了e EF2K的高表达,e EF2K有助于癌症的发生,可作为一个潜在的治疗靶点,然而抑制e EF2K的抗肿瘤药物的开发依然停留在初期。方法通过同源建模,分子对接及... 目的真核延伸因子-2激酶(e EF2K)可以使癌细胞适应代谢压力,在一些癌症类型中发现了e EF2K的高表达,e EF2K有助于癌症的发生,可作为一个潜在的治疗靶点,然而抑制e EF2K的抗肿瘤药物的开发依然停留在初期。方法通过同源建模,分子对接及动力学模拟,等离子共振分析,化学合成,MTT细胞活性筛选候选药物;通过荧光染色,流式细胞术,免疫印迹及si RNA转染等验证相关机制。结果经过一系列靶向e EF2K的候选药物筛选,最终找到了一个新的与e EF2K有良好亲和力的e EF2K抑制剂(BL-EKI03)。在MCF-7,MDA-MB-436细胞中,我们发现BL-EKI03有显著的抗增殖活性,并且可以诱导细胞自噬和细胞凋亡。更重要的是,我们验证了BL-EKI03通过e EF2K介导的AMPKm TOR-ULK复合体通路来诱导死亡性自噬的机制。结论一个新型的e EF2K抑制剂(BL-EKI03)通过诱导自噬和凋亡发挥抗乳腺癌作用,为肿瘤治疗提供了新希望。 展开更多
关键词 真核延伸因子-2激酶 eEF2K抑制剂 自噬 细胞凋亡 乳腺癌
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基于EEF模型的港口生态评价方法研究 被引量:1
13
作者 郭子坚 崔维康 +1 位作者 彭云 张祺 《水道港口》 2017年第2期198-201,共4页
基于能值理论(emergy theory),在分析港口资源消费和污染等生态足迹的基础上,考虑船舶在港作业期间对生态环境的影响,提出基于EEF模型(emergy-ecological footprint)的港口生态评价方法,将港口生态承载力分析计算扩展为自然资源生态承... 基于能值理论(emergy theory),在分析港口资源消费和污染等生态足迹的基础上,考虑船舶在港作业期间对生态环境的影响,提出基于EEF模型(emergy-ecological footprint)的港口生态评价方法,将港口生态承载力分析计算扩展为自然资源生态承载力和社会经济虚拟承载力两类账户。以北方某港区为例计算了2009~2014年的生态足迹与生态承载力,结果表明港区历年生态承载力指数均大于1,处于生态不可持续状态,能源足迹与污染足迹是港口生态足迹的主要来源。港口经济虚拟生态承载力账户对港区生态承载力的贡献高于自然资源生态承载力账户,可有效控制生态赤字规模。 展开更多
关键词 EEF模型 能值理论 港口生态足迹 港口生态承载力
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MAPK1和eEF1B对奶牛乳腺上皮细胞泌乳调控的作用及机理研究报告 被引量:1
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作者 陆黎敏 黄建国 +1 位作者 李庆章 高学军 《科技创新导报》 2016年第8期170-170,共1页
该研究采用组织块儿培养法,成功构建了体外培养的奶牛乳腺上皮细胞模型,应用CASY细胞分析仪检测了不同浓度和作用时间下蛋氨酸和赖氨酸对奶牛乳腺上皮细胞活力的影响,利用高效液相色谱检测了β-casein的分泌情况,确定了蛋氨酸和赖氨酸... 该研究采用组织块儿培养法,成功构建了体外培养的奶牛乳腺上皮细胞模型,应用CASY细胞分析仪检测了不同浓度和作用时间下蛋氨酸和赖氨酸对奶牛乳腺上皮细胞活力的影响,利用高效液相色谱检测了β-casein的分泌情况,确定了蛋氨酸和赖氨酸最佳剂量分别为0.6 mmol/L和1.2 mmol/L,最佳作用时间为24 h。建立奶牛乳腺上皮细胞核磷酸化蛋白质组技术,应用双向电泳(2-DE)结合质谱技术(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋氨酸和赖氨酸对奶牛乳腺上皮细胞核磷酸化蛋白质的差异影响,发现蛋氨酸处理组,mitogen-activated protein kinase 1(MAPK1)和e EF1B蛋白质表达上调;并应用荧光定量PCR和Western blotting技术验证差异蛋白在转录水平和蛋白水平上的表达,与2-DE结果一致。实验过程中构建了真核表达载体p GCMVIRES-EGFP-MAPK1、e EF1B,转染至奶牛乳腺上皮细胞中,通过G418筛选获得稳定转染的细胞株;然后通过基因沉寂和过表达等技术,减少或增加MAPK1、e EF1B的表达水平后,检测泌乳信号转导通路中重要调控蛋白的表达情况,发现蛋氨酸和赖氨酸营养素可以通过调节MAPK1、e EF1B介导m TOR信号转导通路,影响Stat5的表达,进而调节乳蛋白的表达。以上实验结果为奶牛营养基因组学的研究提供了理论依据和技术方法。 展开更多
关键词 蛋氨酸 赖氨酸 细胞核磷酸化蛋白质组 MAPK1 eEF1B 奶牛乳腺上皮细胞
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Eef1a1及JUP蛋白在心肌梗死后左室重构大鼠心肌中的表达 被引量:3
15
作者 顾红娟 贡郡丽 《中国实验诊断学》 2012年第10期1780-1782,共3页
目的本研究对心肌梗死后左室重构大鼠心肌中Eef1a1和JUP蛋白的表达进行分析,探讨心肌梗死后心室重构的发生机制。方法将23只大鼠随机分为LVR组12只、Sham组11只。LVR组采用结扎冠状动脉前降支,并饲养4周,制成心肌梗死后左室重构模型。S... 目的本研究对心肌梗死后左室重构大鼠心肌中Eef1a1和JUP蛋白的表达进行分析,探讨心肌梗死后心室重构的发生机制。方法将23只大鼠随机分为LVR组12只、Sham组11只。LVR组采用结扎冠状动脉前降支,并饲养4周,制成心肌梗死后左室重构模型。Sham组只挂线不结扎。免疫组织化学方法检测两组心肌中Eef1a1和JUP蛋白表达变化。结果免疫组织化学法结果显示,EeF1α1的表达在LVR组较Sham组显著增加(P<0.01)。JUP的表达LVR组较Sham组也增加(P<0.05)。结论 EeF1α1和JUP蛋白的表达异常可能在心肌梗死后左室重构中发挥作用。 展开更多
关键词 左室重构 心肌梗死 EeF1α1 JUP
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橙皮素电场作用的分子结构和红外光谱理论研究
16
作者 王新强 葛浩然 +4 位作者 李桂琴 叶松 汪杰君 甘永莹 王方原 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期2395-2402,共8页
橙皮素(HES)是一种二氢黄酮药物,为研究在外电场(EEF)作用下, HES的分子结构和光谱的变化,利用密度泛函理论(DFT)以及6-311G(d,p)基组,在C2—C1方向施加EEF(-0.005~0.010 a.u.)并优化HES分子的基态几何构型,研究了分子总能量、键长、红... 橙皮素(HES)是一种二氢黄酮药物,为研究在外电场(EEF)作用下, HES的分子结构和光谱的变化,利用密度泛函理论(DFT)以及6-311G(d,p)基组,在C2—C1方向施加EEF(-0.005~0.010 a.u.)并优化HES分子的基态几何构型,研究了分子总能量、键长、红外光谱(IR)、偶极矩(DM)和HOMO-LUMO能隙。在优化结构的基础上,采用含时密度泛函理论(TDDFT),探究不同EEF对紫外可见吸收光谱(UV-Vis)、激发态(ES)的影响。结果显示,无EEF时, HES分子中C1—O18和C2—C26间的单键都优化成了双键,转变为烯醇式结构,这样分子中更多的基团构成一个共轭体系,形成最稳定的结构。随着EEF的增强,分子总能量先升后降, DM则先降后增,键长的变化复杂。当正向负向EEF都增强时,由于HES分子中不同化学键的振动产生的IR吸收峰(AP),相应地出现了不同的频谱移动,各个AP的强度也有不同的变化。无EEF时, UV-Vis在223.6和262 nm处有2个AP,分别处于E 2带、 K带。 223.6 nm处的AP随着EEF的增大出现了蓝移(BS),当EEF大于0.002 5 a.u.谱峰消失;262 nm处的AP在正向EEF下出现红移(RS),吸收强度随EEF的增强呈现衰弱趋势,当EEF为0.01 a.u.时,谱峰RS至283 nm,强度达到最小值5 889.64 L·mol^-1 ·cm^-1;在负向EEF下出现BS,且吸收强度均增强,在EEF为-0.002 5 a.u.时,谱峰BS至261 nm,强度增至最大值为12 500.36 L·mol^-1 ·cm^-1 。当正向负向EEF都增强时,分子的能隙和激发态能量(EE)均呈现减小趋势,说明HES分子易被激发而处于活跃状态。在无EEF时, OS均大于零,表明能够被激发。当不断加强正向EEF时, ES的OS均先升高再降低;在负向EEF下OS有复杂的变化。分析EEF下物质的分子结构和光谱,将为探究橙皮素的药效对其进行电场解离提供理论参考。 展开更多
关键词 橙皮素(HES) 外电场(EEF) 分子结构 光谱
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真核翻译延伸因子1A蛋白家族功能位点的进化踪迹分析 被引量:6
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作者 周峰 刘燕 +1 位作者 马永贵 黄原 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期773-782,共10页
真核翻译延伸因子1A(eEF1A)是真核生物蛋白质翻译过程中能将氨酰tRNA运送到核糖体A位点参与多肽延伸反应的多功能蛋白质.本文主要利用多种生物信息学分析工具进行地中海涡虫翻译延伸因子1A(SmEF1A)蛋白序列的查找与eEF1A直系同源蛋白的... 真核翻译延伸因子1A(eEF1A)是真核生物蛋白质翻译过程中能将氨酰tRNA运送到核糖体A位点参与多肽延伸反应的多功能蛋白质.本文主要利用多种生物信息学分析工具进行地中海涡虫翻译延伸因子1A(SmEF1A)蛋白序列的查找与eEF1A直系同源蛋白的搜索,并基于90条直系同源蛋白进行eEF1A蛋白家族的进化踪迹分析和SmEF1A蛋白功能位点的比较研究.结果表明,在eEF1A蛋白家族中共识别到338个踪迹残基位点和20个踪迹残基富集区域,SmEF1A蛋白的功能位点与踪迹残基位点密切相关,与GTP/Mg2+结合相关的S21、T72、D91、G94等重要位点均为全家族保守的踪迹残基,N-糖基化、磷酸化等蛋白修饰位点中踪迹残基位点往往是被修饰的部位或修饰功能发挥的关键辅助位点,而位于分子表面的配基结合口袋则与20个踪迹残基富集区域在分子表面形成的踪迹残基簇关系密切.eEF1A蛋白家族的进化踪迹分析为eEF1A蛋白重要功能区域关键残基的确定和未知功能位点的预测提供了重要信息. 展开更多
关键词 真核翻译延伸因子1A(eEF1A) 地中海涡虫 进化踪迹分析 功能位点
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基于密度泛函的吲哚美辛外场下的解离特性 被引量:3
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作者 葛浩然 王方原 +4 位作者 李桂琴 叶松 汪杰君 李树 王新强 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2447-2452,共6页
废弃的药物化合物处理不当最终会进入环境成为污染物,存在于天然水饮用水和城市废水中。医院污水中含有低浓度的药物,当这些药物进入环境会成为污染物,进而严重污染自然生态系统。吲哚美辛一种广泛使用的非甾体抗炎药,其不易溶于水,使... 废弃的药物化合物处理不当最终会进入环境成为污染物,存在于天然水饮用水和城市废水中。医院污水中含有低浓度的药物,当这些药物进入环境会成为污染物,进而严重污染自然生态系统。吲哚美辛一种广泛使用的非甾体抗炎药,其不易溶于水,使得污水中的药物降解成为一项挑战。为研究在外电场(EEF)作用下,吲哚美辛分子结构和光谱的变化,选用密度泛函理论(DFT)以及6-31+G(d, p)基组,沿Y轴(N15-C16)方向施以EEF(0~0.025 a.u.)并优化吲哚美辛分子的基态几何构型,探究了分子总能量、键长、红外光谱(IR)、偶极矩(DM)和HOMO-LUMO能隙。结果显示,无EEF时,吲哚美辛分子中C2与C17间的单键优化成了苯环间的双键,就使得C16与C17的π电子还有N15的孤立电子与苯环形成牢固的共轭体系,使吲哚美辛分子能量降到最低,形成最稳定的构型。DM随着EEF的增强缓慢增加,当F≥0.015a.u.时增速变大,基态总能量的变化则与此相反。随着EEF的增强,各个键长的伸缩变化不同。C3-C4,C3-N15, C5-C6, O10-C11和N15-C16的键被拉长,尤其是O10-C11, C3-N15和N15-C16键长变化剧烈,最易断裂进而使吲哚美辛分解。当EEF变大,能隙不断降低,表明在EEF下吲哚美辛分子的电子易过渡到高能级,使分子处于激发态。吲哚美辛分子中不同化学键的振动产生的IR,相应地出现了不同的频谱移动,这主要与能级有关,能级差减小,频率减小,导致红移(RS),反之则产生蓝移(BS);C16-C18与N15-C40键长变化ΔR与频移变化Δf的对应关系表明频谱移动还与分子轨道配置和偶极矩的变化等因素有关。较强的4, 5, 6, 7吸收峰发生RS且振动强度增强,说明对应的化学键变得脆弱进而断裂。这些现象皆说明吲哚美辛分子随着EEF的增强,变得不稳定,易发生解离。分析EEF下物质的分子结构和IR,可以电场解离方法研究降解吲哚美辛,以便为污水中的顽固药物降解提供理论指导。 展开更多
关键词 吲哚美辛 药物降解 外电场(EEF) 分子结构 红外光谱(IR)
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eEF1A1通过正向调控NOB1的表达促进肝癌细胞的侵袭和转移 被引量:11
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作者 张文明 项明峰 +4 位作者 郑楚骞 陈磊峰 戈进 晏琛 刘秀霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1195-1202,共8页
目的探讨真核翻译延长因子1A1(eEF1A1)对肝癌侵袭转移的影响机制。方法采用荧光定量PCR和Western blot法检测多种肝癌细胞系和正常肝脏细胞中eEF1A1和NI1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)的mRNA和蛋白表达。肝癌细胞中干扰和过表达eEF1A1后... 目的探讨真核翻译延长因子1A1(eEF1A1)对肝癌侵袭转移的影响机制。方法采用荧光定量PCR和Western blot法检测多种肝癌细胞系和正常肝脏细胞中eEF1A1和NI1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)的mRNA和蛋白表达。肝癌细胞中干扰和过表达eEF1A1后,通过Transwell侵袭实验和RTCA实验观察肝癌细胞侵袭迁移能力的变化,并观察肝癌细胞中NOB1mRNA及蛋白表达变化。在稳定干扰eEF1A1表达的HCCLM3细胞中过表达NOB1,或在过表达eEF1A1的MHCC97h细胞中干扰NOB1的表达,分析eEF1A1和NOB1蛋白表达水平和细胞侵袭迁移能力。结果肝癌细胞中eEF1A1和NOB1表达明显高于正常肝细胞,并呈正相关。肝癌细胞中干扰eEF1A1表达可明显降低肝癌细胞的侵袭迁移能力,同时NOB1的mRNA和蛋白表达也显著被降低(P均<0.01);过表达eEF1A1后明显增加肝癌细胞的侵袭迁移能力,同时也增加NOB1的mRNA和蛋白表达(P均<0.01)。在稳定干扰eEF1A1表达的HCCLM3细胞中过表达NOB1导致NOB1表达和肝癌细胞侵袭迁移能力的恢复(P均<0.01);然而在稳定过表达eEF1A1的肝癌细胞系中降低NOB1导致NOB1表达的下调和肝癌细胞侵袭迁移能力的抑制(P均<0.01)。结论肝癌细胞中eEF1A1正向调控NOB1表达,进而影响肝癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 肝细胞性肝癌 eEF1A1 NOB1 侵袭和迁移
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eEF1A1基因克隆、原核分泌表达及融合蛋白纯化 被引量:2
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作者 郭艳荣 常晓月 +2 位作者 崔晓君 魏勋斌 朱乃硕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期127-133,共7页
eEF1A1作为蛋白合成中的重要翻译延伸因子,可与多种功能性蛋白如F-actin、BPOZ-2结合,并在细胞凋亡、蛋白降解方面起重要作用。以往原核基因工程蛋白表达系统大多为包涵体表达的变性分子,需要复性。为了获得eEF1A1原核分泌性可溶性蛋白... eEF1A1作为蛋白合成中的重要翻译延伸因子,可与多种功能性蛋白如F-actin、BPOZ-2结合,并在细胞凋亡、蛋白降解方面起重要作用。以往原核基因工程蛋白表达系统大多为包涵体表达的变性分子,需要复性。为了获得eEF1A1原核分泌性可溶性蛋白分子,克隆了人eEF1A1蛋白编码序列(约1 300 bp),并成功构建pET22b-A原核分泌表达重组质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株,0.4 mmol/L终浓度IPTG诱导,经不同温度下包涵体与胞浆蛋白组分分析,快速明确蛋白表达情况,即诱导4 h后,37℃表达于包涵体组分,在30℃分泌表达至胞浆组分。通过His-Trap亲和层析纯化柱进行线性洗脱,Bradford法测定蛋白浓度高达620 mg/mL,SDS-PAGE分析纯度约为95%,蛋白大小符合50 kD,Western blotting显示目的蛋白能被eEF1A1抗体识别;质谱分析证实重组蛋白为人eEF1A1蛋白分子。为进一步研究其与重要功能性蛋白的相互作用及在细胞凋亡和蛋白降解中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 eEF1A1 基因克隆 分泌表达 融合蛋白 蛋白纯化
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