EB1(the end-binding protein 1)蛋白家族是一群广泛存在且高度保守的微管相关蛋白,存在于从酵母到人类的广泛的生物体中.它与微管正极和中心体结合,参与了绝大部分基于微管的生理过程,包括:维持细胞极性,调节染色体稳定性,有丝分裂纺...EB1(the end-binding protein 1)蛋白家族是一群广泛存在且高度保守的微管相关蛋白,存在于从酵母到人类的广泛的生物体中.它与微管正极和中心体结合,参与了绝大部分基于微管的生理过程,包括:维持细胞极性,调节染色体稳定性,有丝分裂纺锤体的定位,将微管锚定到成核位点.自从1995年,Su等人在人细胞中发现了EB1基因,各种生物体中EB1的同源物质被相继报道.十年来,人们通过对不同生物体的研究,试图揭开EB1在细胞中的分布以及它的生理功能.然而到目前为止,对于EB1的了解还非常有限.本文结合国外的研究成果,对EB1蛋白在调节微管动态、纺锤体定位和染色体的稳定性方面以及它与APC(the adenomatous polyposis coli)之间的相互作用作以综述.展开更多
目的探讨末端结合蛋白1(end-binding protein 1,EB1)在宫颈组织中的表达及其对自噬标志蛋白LC3和p62/SQSTM1蛋白表达的影响。方法免疫组织化学检测EB1在宫颈癌、宫颈息肉和慢性宫颈炎组织中的表达;siRNA干扰方法抑制EB1基因表达,并采用...目的探讨末端结合蛋白1(end-binding protein 1,EB1)在宫颈组织中的表达及其对自噬标志蛋白LC3和p62/SQSTM1蛋白表达的影响。方法免疫组织化学检测EB1在宫颈癌、宫颈息肉和慢性宫颈炎组织中的表达;siRNA干扰方法抑制EB1基因表达,并采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测此时宫颈癌Siha细胞自噬标志蛋白LC3和p62/SQSTM1基因的表达。结果 EB1的表达部位主要集中在细胞核外周的胞质中。EB1在宫颈癌和宫颈息肉中的阳性表达率显著低于宫颈慢性炎性组织(P<0.05),但在阳性表达的宫颈癌组织中,绝大多数间质细胞表现为阴性;EB1在中、低分化宫颈鳞癌组织中的阳性表达率显著低于高分化宫颈鳞癌组织(P<0.05)。当EB1基因表达在宫颈癌Siha细胞中的表达被抑制时,无论是在mRNA还是在蛋白水平,自噬标志蛋白p62/SQSTM1和LC3的表达均显著增加(P<0.05)。结论 EB1在自噬发生较低的宫颈癌组织中阳性表达率低于自噬发生较高的宫颈慢性炎性组织;抑制EB1在宫颈癌Siha细胞中的表达,则自噬标志蛋白p62/SQSTM1和LC3表达改变,这一发现充分证明EB1在宫颈癌的自噬过程中发挥着一定的生物学效应。展开更多
目的探讨微管末端结合蛋白1(end-binding protein 1,EBl)在小鼠神经系统中表达分布以及在细胞自噬蛋白降解通路中的作用。方法以1.5月龄C57BL/6J野生型小鼠为材料,使用蛋白质印迹法检测EB1在小鼠眼、脑、脊髓和坐骨神经中的表达情况。...目的探讨微管末端结合蛋白1(end-binding protein 1,EBl)在小鼠神经系统中表达分布以及在细胞自噬蛋白降解通路中的作用。方法以1.5月龄C57BL/6J野生型小鼠为材料,使用蛋白质印迹法检测EB1在小鼠眼、脑、脊髓和坐骨神经中的表达情况。以小鼠成纤维细胞为材料,使用免疫荧光和激光共聚焦显微镜技术检测EB1在小鼠成纤维细胞中表达和定位。以HEK293细胞为材料,使用siRNA转染和Western blot法检测EB1缺失对于HEK293细胞自噬通路中关键蛋白的影响。结果微管正端示踪蛋白EB1在小鼠神经系统中表达广泛,且与脊髓比较,坐骨神经中含量显著下降。小鼠成纤维细胞中EB1定位于微管正端,呈彗星样分布。HEK293细胞中敲减EB1蛋白可引起自噬通路中p62和LC3B-Ⅱ蛋白表达水平显著提高(P<0.05),而LC3B-Ⅰ蛋白含量未发生明显变化(P>0.05)。结论EB1在神经系统广泛表达,但具有组织部位差异性。EB1聚集于微管正端,其含量下降可能通过破坏自噬小体的形成和运输引起自噬通路异常。展开更多
被人广为熟知的移民美国方式是EB5投资移民,但在美国移民的种类中,EB1人才移民才是最受美国政府欢迎的移民类型。美国EB1-C(Managers and Executive Transferees,简称EB1-C)企业高管移民属于美国职业移民第一优先类别,允许跨国公司将其...被人广为熟知的移民美国方式是EB5投资移民,但在美国移民的种类中,EB1人才移民才是最受美国政府欢迎的移民类型。美国EB1-C(Managers and Executive Transferees,简称EB1-C)企业高管移民属于美国职业移民第一优先类别,允许跨国公司将其在美国境外的高级管理人员派遣到美国的分支机构(或总部)继续从事高级管理工作。EB1-C移民要求在美国的公司与在美境外的外国公司存在一种被认可的跨国公司合作关系。中国母公司或美国以外任何国家的企业体(公司、合伙或独资企业均可),和美国的一个企业体已有或将要建立跨国企业关系,即可为其高级管理人员申请EB1-C移民。展开更多
Angiogenesis,a process by which the preexisting blood vasculature gives rise to new capillary vessels,is associated with a variety of physiologic and pathologic conditions.However,the molecular mechanism underlying th...Angiogenesis,a process by which the preexisting blood vasculature gives rise to new capillary vessels,is associated with a variety of physiologic and pathologic conditions.However,the molecular mechanism underlying this important process remains poorly understood.Here we show that histone deacetylase 6(HDAC6),a microtubule-associated enzyme critical for cell motility,contributes to angiogenesis by regulating the polarization and migration of vascular endothelial cells.Inhibition of HDAC6 activity impairs the formation of new blood vessels in chick embryos and in angioreactors implanted in mice.The requirement for HDAC6 in angiogenesis is corroborated in vitro by analysis of endothelial tube formation and capillary sprouting.Our data further show that HDAC6 stimulates membrane ruffling at the leading edge to promote cell polarization.In addition,microtubule end binding protein 1(EB1)is important for HDAC6 to exert its activity towards the migration of endothelial cells and generation of capillary-like structures.These results thus identify HDAC6 as a novel player in the angiogenic process and offer novel insights into the molecular mechanism governing endothelial cell migration and angiogenesis.展开更多
目的:卵巢癌是导致全球女性死亡的第5大恶性肿瘤疾病,严重威胁女性健康与生命安全,因此筛选出有效的生物标志物及治疗靶点对卵巢癌的诊断与治疗具有重要的意义。本研究旨在探讨微管相关蛋白RP/EB家族成员1(microtubule-associated prote...目的:卵巢癌是导致全球女性死亡的第5大恶性肿瘤疾病,严重威胁女性健康与生命安全,因此筛选出有效的生物标志物及治疗靶点对卵巢癌的诊断与治疗具有重要的意义。本研究旨在探讨微管相关蛋白RP/EB家族成员1(microtubule-associated protein progesterone receptor/end binding family member 1,MAPRE1)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因型组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)数据库获取MAPRE1基因的测序数据及相关临床资料。采用实时定量PCR分析MAPRE1基因在12对卵巢癌及其癌旁组织中的mRNA表达水平与甲基化转移酶相关基因、错配修复相关基因表达的相关性。通过UALCAN(University of Alabama at Birmingham Cancer Data Analysis Portal)及人类蛋白质图谱(Human Protein Atlas,HPA)数据库分析MAPRE1蛋白在卵巢癌及其癌旁组织中的表达情况。利用Kaplan-Meier Plotter数据库评估MAPRE1在卵巢癌中的预后价值。利用肿瘤免疫评估资源(Tumor Immune Estimation Resource,TIMER)网站分析MAPRE1与卵巢癌患者免疫细胞浸润的相关性。利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)检测卵巢癌中MAPRE1阳性共表达基因的基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路。结果:MAPRE1 mRNA及蛋白水平在卵巢癌中的表达水平明显高于癌旁组织(均P<0.01);与卵巢癌临床病理参数的相关分析显示MAPRE1表达水平与患者的年龄、肿瘤残余密切相关(分别P=0.009,P=0.011);KapLan-Meier Plotter数据库分析显示MAPRE1高表达与卵巢癌患者的不良预后存在相关性(P<0.001),在3种药物(单独紫杉醇、单独铂类用药、联合紫杉醇及铂类用药)治疗患者中,高表达MAPRE1患者亦预后不良(分别P=0.003,P=0.002,P=0.004)。MAPRE1表达与DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶[DNA(cytosine-5)-methyltransferase,DNMT]1、tRNA天冬氨酸甲基转移酶1(tRNA aspartic acid methyltransferase 1,TRDMT1)、DNMT3A、DNMT3B表达水平均呈正相关性(均P<0.05),与错配修复基因mutL同源物1(MutL homolog 1,MLH1)、mutS同源物(MutS homolog,MSH2)、MSH6和减数分裂后分离增加蛋白2(postmeiotic segregation increased 2,PMS2)的表达水平亦呈正相关(均P<0.05)。TIMER数据库分析显示MAPRE1与辅助T(T helper,Th)细胞、Th2细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞、滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell,TFH)、效应记忆型T细胞(effector memory T cells,Tem)均呈现显著的正相关(均P<0.05),而与细胞毒性细胞、激活的树突状细胞(activated dendritic cell,aDC)、Th17、CD56阳性自然杀伤细胞(natural killer CD56bright cells,NK CD56bright cells)、浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cells,pDC)等免疫细胞均呈现显著的负相关(均P<0.05)。GO分析表明MAPRE1共表达基因主要参与β-连环蛋白、核糖核苷酸结合相关的活动和调控。KEGG分析显示MAPRE1基因参与细胞周期、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)等信号通路的调控。结论:MAPRE1在卵巢癌中高表达,与卵巢癌患者的预后、免疫细胞浸润、甲基化及错配修复蛋白存在相关性,可能通过调控细胞周期及mTOR等信号通路参与卵巢癌的发生和发展。展开更多
文摘目的探讨微管末端结合蛋白1(end-binding protein 1,EBl)在小鼠神经系统中表达分布以及在细胞自噬蛋白降解通路中的作用。方法以1.5月龄C57BL/6J野生型小鼠为材料,使用蛋白质印迹法检测EB1在小鼠眼、脑、脊髓和坐骨神经中的表达情况。以小鼠成纤维细胞为材料,使用免疫荧光和激光共聚焦显微镜技术检测EB1在小鼠成纤维细胞中表达和定位。以HEK293细胞为材料,使用siRNA转染和Western blot法检测EB1缺失对于HEK293细胞自噬通路中关键蛋白的影响。结果微管正端示踪蛋白EB1在小鼠神经系统中表达广泛,且与脊髓比较,坐骨神经中含量显著下降。小鼠成纤维细胞中EB1定位于微管正端,呈彗星样分布。HEK293细胞中敲减EB1蛋白可引起自噬通路中p62和LC3B-Ⅱ蛋白表达水平显著提高(P<0.05),而LC3B-Ⅰ蛋白含量未发生明显变化(P>0.05)。结论EB1在神经系统广泛表达,但具有组织部位差异性。EB1聚集于微管正端,其含量下降可能通过破坏自噬小体的形成和运输引起自噬通路异常。
文摘被人广为熟知的移民美国方式是EB5投资移民,但在美国移民的种类中,EB1人才移民才是最受美国政府欢迎的移民类型。美国EB1-C(Managers and Executive Transferees,简称EB1-C)企业高管移民属于美国职业移民第一优先类别,允许跨国公司将其在美国境外的高级管理人员派遣到美国的分支机构(或总部)继续从事高级管理工作。EB1-C移民要求在美国的公司与在美境外的外国公司存在一种被认可的跨国公司合作关系。中国母公司或美国以外任何国家的企业体(公司、合伙或独资企业均可),和美国的一个企业体已有或将要建立跨国企业关系,即可为其高级管理人员申请EB1-C移民。
基金the National Natural Science Foundation of China(Grant Nos.30825022 and 90913021)the Fok Ying Tung Education Foundation(Grant No.111036)the National Basic Research Program of China(Grant No.2007CB914802).
文摘Angiogenesis,a process by which the preexisting blood vasculature gives rise to new capillary vessels,is associated with a variety of physiologic and pathologic conditions.However,the molecular mechanism underlying this important process remains poorly understood.Here we show that histone deacetylase 6(HDAC6),a microtubule-associated enzyme critical for cell motility,contributes to angiogenesis by regulating the polarization and migration of vascular endothelial cells.Inhibition of HDAC6 activity impairs the formation of new blood vessels in chick embryos and in angioreactors implanted in mice.The requirement for HDAC6 in angiogenesis is corroborated in vitro by analysis of endothelial tube formation and capillary sprouting.Our data further show that HDAC6 stimulates membrane ruffling at the leading edge to promote cell polarization.In addition,microtubule end binding protein 1(EB1)is important for HDAC6 to exert its activity towards the migration of endothelial cells and generation of capillary-like structures.These results thus identify HDAC6 as a novel player in the angiogenic process and offer novel insights into the molecular mechanism governing endothelial cell migration and angiogenesis.
文摘目的:卵巢癌是导致全球女性死亡的第5大恶性肿瘤疾病,严重威胁女性健康与生命安全,因此筛选出有效的生物标志物及治疗靶点对卵巢癌的诊断与治疗具有重要的意义。本研究旨在探讨微管相关蛋白RP/EB家族成员1(microtubule-associated protein progesterone receptor/end binding family member 1,MAPRE1)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因型组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)数据库获取MAPRE1基因的测序数据及相关临床资料。采用实时定量PCR分析MAPRE1基因在12对卵巢癌及其癌旁组织中的mRNA表达水平与甲基化转移酶相关基因、错配修复相关基因表达的相关性。通过UALCAN(University of Alabama at Birmingham Cancer Data Analysis Portal)及人类蛋白质图谱(Human Protein Atlas,HPA)数据库分析MAPRE1蛋白在卵巢癌及其癌旁组织中的表达情况。利用Kaplan-Meier Plotter数据库评估MAPRE1在卵巢癌中的预后价值。利用肿瘤免疫评估资源(Tumor Immune Estimation Resource,TIMER)网站分析MAPRE1与卵巢癌患者免疫细胞浸润的相关性。利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)检测卵巢癌中MAPRE1阳性共表达基因的基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路。结果:MAPRE1 mRNA及蛋白水平在卵巢癌中的表达水平明显高于癌旁组织(均P<0.01);与卵巢癌临床病理参数的相关分析显示MAPRE1表达水平与患者的年龄、肿瘤残余密切相关(分别P=0.009,P=0.011);KapLan-Meier Plotter数据库分析显示MAPRE1高表达与卵巢癌患者的不良预后存在相关性(P<0.001),在3种药物(单独紫杉醇、单独铂类用药、联合紫杉醇及铂类用药)治疗患者中,高表达MAPRE1患者亦预后不良(分别P=0.003,P=0.002,P=0.004)。MAPRE1表达与DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶[DNA(cytosine-5)-methyltransferase,DNMT]1、tRNA天冬氨酸甲基转移酶1(tRNA aspartic acid methyltransferase 1,TRDMT1)、DNMT3A、DNMT3B表达水平均呈正相关性(均P<0.05),与错配修复基因mutL同源物1(MutL homolog 1,MLH1)、mutS同源物(MutS homolog,MSH2)、MSH6和减数分裂后分离增加蛋白2(postmeiotic segregation increased 2,PMS2)的表达水平亦呈正相关(均P<0.05)。TIMER数据库分析显示MAPRE1与辅助T(T helper,Th)细胞、Th2细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞、滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell,TFH)、效应记忆型T细胞(effector memory T cells,Tem)均呈现显著的正相关(均P<0.05),而与细胞毒性细胞、激活的树突状细胞(activated dendritic cell,aDC)、Th17、CD56阳性自然杀伤细胞(natural killer CD56bright cells,NK CD56bright cells)、浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cells,pDC)等免疫细胞均呈现显著的负相关(均P<0.05)。GO分析表明MAPRE1共表达基因主要参与β-连环蛋白、核糖核苷酸结合相关的活动和调控。KEGG分析显示MAPRE1基因参与细胞周期、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)等信号通路的调控。结论:MAPRE1在卵巢癌中高表达,与卵巢癌患者的预后、免疫细胞浸润、甲基化及错配修复蛋白存在相关性,可能通过调控细胞周期及mTOR等信号通路参与卵巢癌的发生和发展。
