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华南地区粉尘螨主要变应原Derf2的cDNA克隆及序列分析 被引量:22
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作者 郝敏麒 徐军 钟南山 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期160-163,共4页
目的 克隆并分析华南地区粉尘螨主要变应原Der f 2的cDNA片段。方法 广州地区收集、鉴定、培养的粉尘螨,提取总RNA,RT-PCR扩增其Der f 2片段,连接入T载体,测序和分析。结果 Der f 2片段长度为558bp,与GenBank公布的Der f 2(D10448)的核... 目的 克隆并分析华南地区粉尘螨主要变应原Der f 2的cDNA片段。方法 广州地区收集、鉴定、培养的粉尘螨,提取总RNA,RT-PCR扩增其Der f 2片段,连接入T载体,测序和分析。结果 Der f 2片段长度为558bp,与GenBank公布的Der f 2(D10448)的核酸序列比较,在62个核苷酸处插入了87个核苷酸,插入点前后的核酸序列没有差异,按原读码框进行读码显示插入了29个氨基酸,插入点前后的氨基酸序列没有改变。结论 获得华南地区粉尘螨的Der f 2 cDNA片段,和已公布的序列相比,有较大差异。 展开更多
关键词 华南地区 粉尘螨 变应原 derf2 CDNA 克隆 序列分析
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粉尘螨Derf2蛋白抑制Foxp3对小鼠弥漫大B细胞淋巴瘤的影响 被引量:1
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作者 章敬成 钟俊武 +1 位作者 贾永清 胡慧仙 《现代免疫学》 CSCD 北大核心 2017年第6期500-504,共5页
探讨粉尘螨重组Derf2蛋白对小鼠Treg及特异性标记Foxp3蛋白的干扰作用,从而为粉尘螨抗原治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)提供基础实验支持。通过免疫组化检测Foxp3蛋白在DLBCL患者淋巴结石蜡标本中的表达,... 探讨粉尘螨重组Derf2蛋白对小鼠Treg及特异性标记Foxp3蛋白的干扰作用,从而为粉尘螨抗原治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)提供基础实验支持。通过免疫组化检测Foxp3蛋白在DLBCL患者淋巴结石蜡标本中的表达,利用临床数据对Foxp3蛋白在DLBCL的表达与预后情况进行分析。提取粉尘螨重组Derf2蛋白对A20细胞进行干预,检测A20细胞内Foxp3蛋白表达及对细胞增殖能力的影响。建立小鼠DLBCL成瘤动物模型,对模型鼠注射粉尘螨相关抗原,对比各组动物模型的成瘤时间、成瘤速度及成瘤体积。结果显示,免疫组化检测Foxp3蛋白在DLBCL中的表达,发现瘤组织中Foxp3蛋白表达高于瘤旁组织(P<0.05),通过与DLBCL患者临床病理学特征之间关系的分析,得出瘤组织内Foxp3蛋白的高表达是患者预后不良的因素。注射了粉尘螨抗原的小鼠成瘤速度及体积明显下降(P<0.05),瘤内Foxp3蛋白表达较未注射Derf2减少(P<0.05)。这表明Foxp3蛋白在DLBCL患者体内高表达为预后不良因素之一,粉尘螨Derf2对肿瘤Foxp3蛋白的表达能起干扰作用,并抑制体内肿瘤的生长。 展开更多
关键词 粉尘螨 derf2蛋白 FOXP3 弥漫大B细胞淋巴瘤
原文传递
粉尘螨过敏患者Der f 1和Der f 2特异性IgE的检测分析 被引量:5
3
作者 董劲春 程浩 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期137-141,共5页
为了解粉尘螨(Dermatophagoides farinae)过敏患者对粉尘螨单组分过敏原Der f 1和Der f 2特异性IgE的水平情况,收集了80例疑似尘螨过敏患者样本,对ImmunoCAP过敏原检测系统和浙江大学迪迅粉尘螨检测试剂盒检测的粉尘螨特异性IgE阳性样本... 为了解粉尘螨(Dermatophagoides farinae)过敏患者对粉尘螨单组分过敏原Der f 1和Der f 2特异性IgE的水平情况,收集了80例疑似尘螨过敏患者样本,对ImmunoCAP过敏原检测系统和浙江大学迪迅粉尘螨检测试剂盒检测的粉尘螨特异性IgE阳性样本,进一步检测其粉尘螨单组分过敏原Der f 1和Der f 2特异性IgE水平.80例样本中2种方法检测粉尘螨均为阳性的有65例,阳性率为81.3%.65例阳性样本中,Der f 1阳性率为87.7%,Der f 2阳性率为90.8%,二者至少一个为阳性的达96.99%,Der f 2特异性IgE水平显著高于Der f 1.儿童的粉尘螨及其2种单组分过敏原Der f 1和Der f 2特异性IgE水平显著高于成人.综上,Der f 1和Der f 2这2种组分过敏原在我国粉尘螨患者中占据了主导地位,两者特异性IgE水平存在显著差异,后者高于前者,且儿童的敏感性显著高于成人. 展开更多
关键词 粉尘螨 过敏原 Derf1 derf2
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不同尘螨过敏原诱导组胺释放能力分析 被引量:2
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作者 刘婉莹 向军俭 刘志刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期461-463,共3页
目的:研究用肥大细胞组胺体外定向释放模型分析重组尘螨过敏原Derf1和Derf2的致敏差异性。方法:用重组尘螨致敏原Derf1、Derf2免疫C57/BL6小鼠,收集小鼠腹腔致敏肥大细胞(PMC),在96酶标板孔中分别按不同比例混合尘螨致敏组分诱导PMC定... 目的:研究用肥大细胞组胺体外定向释放模型分析重组尘螨过敏原Derf1和Derf2的致敏差异性。方法:用重组尘螨致敏原Derf1、Derf2免疫C57/BL6小鼠,收集小鼠腹腔致敏肥大细胞(PMC),在96酶标板孔中分别按不同比例混合尘螨致敏组分诱导PMC定向释放组胺,荧光法检测其释放水平。结果:Derf1、Derf2及两者的混合物都能引起PMC释放组胺,其致敏效果Derf2明显高于Derf1,Derf1、Derf2混合致敏组胺释放量未见高于单组分致敏者。牛奶和虾的粗提液与空白对照不能引起PMC组胺的明显释放。结论:尘螨混合组分未能引起比单独Derf1或Derf2强的组胺释放,两者间不存在协同效应。组胺释放量随Derf2比例升高而升高,推测在尘螨过敏中Derf2起主要作用。尘螨与牛奶、虾之间不存在交叉反应。 展开更多
关键词 重组尘螨Derf1 derf2 肥大细胞 组胺
原文传递
粉尘螨主要变应原基因Der f2和Der f3基因改组的优化
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作者 刘志明 姜玉新 李朝品 《热带病与寄生虫学》 2014年第1期3-6,共4页
目的优化粉尘螨变应原Derf2和Derf3基因改组条件,以期获得粉尘螨变应原融合突变基因。方法 RT-PCR方法扩增粉尘螨变应原Derf2和Derf3基因,用DnaseⅠ分别酶解Derf2和Derf3基因10、15、20、25、30min;酶解相同时间的Derf2和Derf3基因两两... 目的优化粉尘螨变应原Derf2和Derf3基因改组条件,以期获得粉尘螨变应原融合突变基因。方法 RT-PCR方法扩增粉尘螨变应原Derf2和Derf3基因,用DnaseⅠ分别酶解Derf2和Derf3基因10、15、20、25、30min;酶解相同时间的Derf2和Derf3基因两两混合,采用DNA shuffling技术对粉尘螨变应原Derf2和Derf3基因进行重组,电泳检测重组子。结果以Derf1F和Derf1 R、Derf2 F和Derf2 R为引物分别在酶切10min、15min、20min、25min均可扩增出清晰条带;以Derf2 F和Der f3 R为引物在酶切10min、15min和30min的模板中亦出现PCR片段。结论通过多种条件的组合,可获得多个粉尘螨变应原Derf2和Derf3基因间的融合基因,为大规模制备高效,低价的哮喘疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 DNA改组 derf2 Derf3 融合基因 优化
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